响应面法优化黑果腺肋花楸酒酿造工艺及成分研究

以黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)为原料，通过单因素实验和响应面法优化提取工艺，确定黑果腺肋花楸酒最优工艺条件为：发酵液含糖量21%、发酵温度25.5℃、发酵时间7 d以及酵母接种量0.8 g/L，此时酒精度为8.5%vol，多酚类物质含量为3.580 mg/mL。MS/MS结果显示黑果腺肋花楸中多酚类物质主要有矢车菊-3-O-半乳糖苷、矢车菊-3-O-葡萄糖苷、矢车菊-3-O-阿拉伯糖苷、矢车菊-3-O-木糖苷、槲皮素-3-O-芸香糖苷、金丝桃苷、槲皮素-3-O-葡萄糖苷，其中矢车菊-3-O-半乳糖苷含量最高。气相色谱结果表明，该果酒主要包含12种香气成分,苯甲醇含量最高。     

酶对黑果腺肋花楸中花色苷提取率的影响

试验以黑果腺肋花楸为试验材料,研究不同pH条件下蜗牛酶、纤维素酶、果胶酶对黑果花楸果实花色苷提取率的影响。结果表明,蜗牛酶在pH 6.8条件下,对矢车菊素-3-半乳糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-阿拉伯糖苷3种单糖苷提取率显著高于其他酶处理对照。对总花色苷提取率影响最大的是pH 6.8蜗牛酶处理,含量达64.64 mg/g,比果胶酶处理组、纤维素酶处理和CK分别提高8.27%, 46.43%和56.29%。     

黑果腺肋花楸花色苷微波辅助提取工艺优化

该研究通过微波辅助提取法对黑果腺肋花楸果粉中的花色苷进行提取,采用响应面法优化试验条件,并通过pH值示差法测定黑果腺肋花楸果粉中花色苷的提取量,得到黑果腺肋花楸花色苷提取的最佳工艺条件为提取剂59%乙醇、液料比29∶1（mL/g）、提取温度48℃、提取时间11 min。在最佳工艺条件下,黑果腺肋花楸果粉中花色苷提取量为10.298 mg/g。     

黑果腺肋花楸花色苷提取工艺优化及其抗氧化活性和组成鉴定

目的：优化超声波辅助提取黑果腺肋花楸花色苷的条件,测定花色苷的抗氧化能力,鉴定黑果腺肋花楸花色苷提取物的组成成分。方法：采用响应面法优化花色苷提取条件,通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力、2,2’-联氨-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基清除能力及Fe3＋还原能力方法评价其抗氧化能力,高效液相色谱-质谱联用法进行成分分析。结果表明：提取温度60?℃、超声功率100?W、料液比1∶30（g/mL）、超声时间31?min、乙醇体积分数64%和pH?2.0时为最优提取条件,此时黑果腺肋花楸花色苷含量可达（3.61±0.01）mg/g。体外抗氧化实验表明,在相同质量浓度条件下,黑果腺肋花楸花色苷提取物的抗氧化活性明显高于VC。组分鉴定表明黑果腺肋花楸花色苷提取物中共有6?种花色苷,其中矢车菊-己糖苷二聚体和矢车菊-3,5-二己糖苷为新检测出的2?种花色苷。     

高效液相色谱法测定黑果腺肋花楸提取物中氯化矢车菊素的含量及抗氧化性研究

建立黑果腺肋花楸提取物中氯化矢车菊素的含量测定方法,并优化黑果腺肋花楸提取物供试品的制备方法。以氯化矢车菊素的含量为指标,采用高效液相色谱法测定黑果腺肋花楸提取物中氯化矢车菊素的含量,色谱柱:伊利特ODS2 C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相以甲醇-0.2%磷酸水溶液(v/v);进样量20μL;检测波长276 nm;柱温30℃。在建立含量测定方法的同时探索黑果腺肋花楸提取物水解提取氯化矢车菊素的工艺条件。试验结果表明氯化矢车菊素在3.6～36.0μg.mL~(-1)(r=0.9995)线性关系良好;氯化矢车菊素的最佳水解提取工艺为:水解温度100℃、水解时间2 h、溶剂酸浓度3%盐酸甲醇。在优化水解提取条件下,氯化矢车菊素的含量为1.8570 mg.g~(-1)。该含量测定方法具有良好的精密度,结果准确可靠;优化的提取方法快速、简单,为黑果腺肋花楸果的开发利用提供了依据。体外抗氧化活性的试验结果表明,黑果腺肋花楸提取物对DPPH自由基具有清除活性,且随着其质量浓度的增加,清除活性明显增强;利用FRAP法和钼酸铵法测得黑果腺肋花楸提取物具有一定的抗氧化活性。     

不同种植地区蓝莓果中花色苷的分布

目的:探究不同种植地区的蓝莓果实中花色苷含量与海拔高度、纬度等环境因素之间的关系。方法:选取不同海拔高度和纬度的10个种植地区“灿烂”品种的兔眼蓝莓果实为研究对象,采用高效液相色谱法(HPLC)和高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)定性和定量分析蓝莓果中花色苷的组成成分,比较不同种植地区的蓝莓果中花色苷苷元、糖基组成与含量的差异。结果:从蓝莓果中检测到5类花青素苷元,共13种花色苷,苷元含量组成由高到低为锦葵色素>矢车菊素>飞燕草素>矮牵牛素>芍药素;糖基组成由高到低为半乳糖苷>阿拉伯糖苷>葡萄糖苷,其中从芍药素中仅检测到半乳糖苷。蓝莓果中锦葵色素-3-O-半乳糖苷和矢车菊素-3-O-半乳糖苷的含量最高,而飞燕草素-3-O-葡萄糖苷和矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷含量低,在部分地区的蓝莓果中缺失或未检测到。不同种植地区蓝莓果中花色苷组成虽基本一致但含量存在差异。云南龙朋代表的低纬度、高海拔地区种植的蓝莓果中花色苷总含量最高,高纬度、低海拔地区的浙江草塔的蓝莓果中花色苷总含量最低。结论:不同种植地区的地理环境影响蓝莓果中花色苷的分布,高海拔地区的环境条件更利于蓝莓果实中花色苷的合成和积累。     

黑果腺肋花楸花色苷的提取工艺优化及其稳定性

以黑果腺肋花楸果实作为原料,采用单因素实验及正交法优化花色苷提取条件,并测定在不同条件下对花色苷稳定性的影响。结果表明:乙醇浓度50%,液料比25:1 g/mL,提取温度55 ℃,提取时间60 min为最佳提取条件,此时黑果腺肋花楸花色苷提取量可达到(4.32±0.18) mg/g。当pH≤3时,花色苷呈红色且稳定性较强;随着温度升高和光照时间增加,花色苷极其不稳定,溶液颜色逐渐变浅;随着H₂O₂和Na₂SO₃浓度逐渐增加,花色苷溶液逐渐褪色。黑果腺肋花楸花色苷在酸性条件下比较稳定,且在加工运输保存时应尽量避免接触氧化剂和还原剂。     

黑果腺肋花楸中花色苷超声辅助提取工艺优化研究

目的优化超声辅助提取黑果腺肋花楸中花色苷工艺的方法。方法在单因素的基础上,研究提取温度、液料比和提取时间对花色苷提取率的影响,并利用响应面法对花色苷的提取条件进行优化。结果黑果腺肋花楸中花色苷提取的最佳工艺条件为:乙醇溶液(含0.5%的乙酸)浓度为40%,提取温度为43℃,超声时间为23 min,料液比为89:1(V:m),此条件下,黑果腺肋花楸中花色苷提取得率为(0.79±0.010)g/100g。结论本方法可以快速有效地提取黑果腺肋花楸中的花色苷。     

响应面优化黑果腺肋花楸汁澄清工艺及其抗氧化活性评价

该研究以壳聚糖为澄清剂,采用响应面法优化黑果腺肋花楸汁的澄清条件,筛选出最佳澄清工艺,并对其总黄酮、总酚、花色苷等活性成分进行测定,且通过测定DPPH自由基、羟自由基清除能力,Fe 3+还原能力以及总抗氧化能力评价其体外抗氧化活性。结果表明,黑果腺肋花楸汁最佳澄清条件为壳聚糖添加量0.56 g/100mL,澄清温度49℃,澄清时间67 min,在此条件下其透光率可达到93.89%;黑果腺肋花楸清汁与原汁相比各成分含量发生显著降低(P<0.05),且原汁的抗氧化能力总体上强于清汁。相关性分析表明,黑果腺肋花楸清汁中的总酚和总黄酮含量与清汁DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、Fe 3+还原能力和总抗氧化能力呈现较好的相关性。研究结果显示,采用响应面法可优化黑果腺肋花楸汁的澄清工艺,提高汁液透光率,且黑果腺肋花楸汁具有较强的抗氧化活性,该研究为黑果腺肋花楸汁的实际开发利用提供数据支撑和理论基础。     

黑果腺肋花楸花色苷纳米微胶囊的制备及其表征

黑果腺肋花楸是目前含有花青素、多酚含量最高的植物,其活性物质具有多种保健功能。然而,其中的花色苷稳定性差,利用率低,在各行业的应用受到限制。本研究采用壳聚糖与聚谷氨酸经离子凝胶法对黑果腺肋花楸花色苷进行包埋,来提高其稳定性。通过单因素实验确定3个影响显著的因素。以花色苷纳米微胶囊包埋率为指标,响应面优化后的最佳条件为:花色苷添加量36 mg、壳聚糖质量浓度1.3 mg/mL、搅拌时间60 min、壳聚糖∶聚谷氨酸质量比2∶1、pH 4.5。在此条件下所得纳米微胶囊包埋率为59.54%,粒径317.5 nm,Zeta电位36.7 mV。通过扫描电镜观察,黑果腺肋花楸花色苷纳米微胶囊外表光滑,呈规则的球状,表明其具有良好的结构和稳定性,有利于其在食品工业中的应用。     

Evaluation of pH differential and HPLC methods expressed as cyanidin-3-glucoside equivalent for measuring the total anthocyanin contents of berries

The present study evaluated the accuracy of pH differential (PD) method and HPLC method expressed as cyanidin-3-glucoside equivalent (CGE) for measuring total anthocyanin (TA) contents of five berries. Major anthocyanins of blueberry, blackberry, black currant, raspberry, and cranberry were analyzed with quantitative HPLC (q-HPLC) method using individual anthocyanin standards and used as a standard reference of comparison. PD method and HPLC method showed similar trend, although absolute amounts of TA differed in blueberry and cranberry. However, data showed that the TA of black currant and raspberry expressed as CGE considerably deviated from those obtained by q-HPLC. This discrepancy was due to underestimating TA of these two berries which contain disaccharides as major glycones, when expressed as CGE. On the other hand, when expressed as their major anthocyanin equivalents, TA of these two berries showed better approximate values with those by q-HPLC method. In addition, this finding was confirmed by Bland–Altman analysis. Our findings demonstrated that the type of glycone in berries is a critical factor to cause discrepancy between TA as CGE and actual TA and should be considered for measuring TA contents.     

黑糯米酒中总花色苷测定方法的研究

以黑糯米酒为研究对象,对黑糯米酒花色苷的测定方法进行了研究。结果表明,pH示差法、单一pH法和差减法所测标准曲线的相关系数R2分别为0.997 7、0.998 5、0.999 4,线性关系均较好,均可用于测定黑糯米酒中总花色苷含量。3种方法测定黑糯米酒花色苷的平衡温度为30 ℃,平衡时间为40 min,测定波长为511 nm。单一pH法和差减法的最适pH值为0.8,pH示差法最适pH值为0.8和4.5。3种方法可直接测定黑糯米酒总花色苷含量,且精密度良好,其中pH示差法精密度最高,相对标准偏差（RSD）为0.83%。pH示差法加标回收率试验结果RSD为0.38%,表明该优化条件后的方法可靠、准确,适用于黑糯米酒中总花色苷测定。     

基于液相色谱-质谱联用技术定性定量分析黑豆种皮中可溶型和结合型花青素

以超声波辅助有机溶剂提取法获得黑豆种皮可溶型花青素提取物,再进一步对不含可溶型花青素的黑豆种皮残渣使用酸水解和碱水解以及酸碱/碱酸轮提水解,获得黑豆种皮结合型花青素提取物。采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间质谱联用仪分析鉴定各黑豆种皮提取物中所含有的共17 种花青素成分,包括11 种花青素糖苷类：飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-半乳糖苷、矮牵牛花素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛花素-3-O-半乳糖苷、天竺葵素-3-O-芸香糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-半乳糖苷、天竺葵素-3-O-己糖苷、芍药花素-3-O-己糖苷、天竺葵素-3-O-(6”-丙二酰葡萄糖苷)和芹菜定-3-O-(6”-丙二酰葡萄糖苷);6 种花青素苷元：飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛花素、天竺葵素、芹菜定和芍药花素。采用高效液相色谱-电喷雾-三重四极杆质谱联用仪精确定量各类黑豆种皮提取物中的花青素含量,结果表明,酸性结合型花青素提取物中结合型花青素的总含量最高。此外,在黑豆种皮的可溶型花青素提取物中,花青素主要以花青素糖苷类形式存在,苷元含量相对极少;而在结合型花青素提取物中,则主要以花青素苷元为主,糖苷类化合物相对少见。     

高效液相色谱法测定阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的含量

目的:建立以HPLC-紫外检测器测定阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量的方法。方法:分别采用水和1%盐酸水溶液为溶剂,使矢车菊素-3-O-葡萄糖苷分别呈中性醌式碱和烊阳离子构型,比较两种构型对测定波长、色谱峰分离度、供试品制备方法、响应因子和标准曲线,以及对含量测定结果的影响。结果:采用烊阳离子构型,即供试品和对照品用1%盐酸水溶液为溶剂,以DIKMA C₁₈(4.6 mm×250 mm×5 μm)柱为分析柱,乙腈-0.5%磷酸溶液(12:88,V/V)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为520 nm。矢车菊素-3-O-葡萄糖苷烊阳离子构型在0.002419~0.077412 mg/mL范围呈线性关系,y=37029.5438x-7.6051(R2=0.9999),回收率为98.31%(RSD%=1.44%),3批阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷的含量为0.1158~0.1663 mg/g。结论:采用矢车菊素-3-O-葡萄糖烊阳离子构型,以HPLC-紫外检测器测定阿萨伊冻干粉中矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量的方法操作简便、灵敏、结果准确、重复性好。     

Identification of anthocyanins isolated from black rice (Oryza sativa L.) and their degradation kinetics

Black rice is rich in anthocyanins-plant pigments. The aim of this work was to identify anthocyanins in black rice using high-performance liquid chromatography (HPLC)-electrospray ionization — mass spectrometry with diode array detection. Four different anthocyanins (cyanidin-3-glucoside, peonidin-3-glucoside, cyanidin-3,5-diglucoside, cyanidin-3-rutinoside) were identified in black rice. Thermal stability of the four anthocyanins in black rice extract was studied at selected temperatures (80 °C, 90 °C and 100 °C) in the range of pH 1.0–pH 6.0. The results indicated that the thermal degradation of anthocyanins followed the first-order reaction kinetics. The temperature-dependent degradation was adequately modeled on the Arrhenius equation. The calculated values of activation energies (Ea), t_1/2 and k were different for the four anthocyanins. The degradation rate of monomeric anthocyanin increased with increasing heating temperature and pH values. Especially, as heating temperature increasing to 100 °C and pH value to 5.0.     

高效液相色谱法与pH示差法测定紫荚豌豆花青素含量的比较

目的:采用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HLPC)测定不同豌豆品种的花青素单体及含量,并与pH示差法测定结果进行了比较,旨在研究紫英豌豆花青素定量分析方法的差异及其花青素的种类及功能.方法:紫荚豌豆以乙醇和盐酸作为萃取剂,采用安捷伦1260高效液相色谱仪进...     

Berry fruit teas: Phenolic composition and cytotoxic activity

A detailed phenolic composition analysis of dry chokeberry, bilberry and black currant fruit teas prepared on the most common ways — decoction and infusion, was performed, together with evaluation of cytotoxic activity. The most abundant in phenolics were chokeberry teas, followed by bilberry and black currant teas, while the highest anthocyanin amount was determined in bilberry samples. LC/DAD/MS method was used for identification of 17 anthocyanins, 11 flavonoids and 4 hydroxycinnamic acid derivatives. Quantitative analysis of investigated teas was carried out by HPLC analysis, and major phenolic compounds in berry fruit teas were chlorogenic acids, quercetin glycosides and anthocyanin glycosides. Berry teas were investigated for cytotoxic activity against cervix carcinoma, melanoma, colon, and chronic myelogenous leukemia cell lines, and chokeberry decoction was the most effective against all cell lines. According to the results obtained in this study, pure chokeberry, bilberry and black currant teas could be valuable sources of flavonoids and anthocyanins.     

黑果腺肋花楸中花青苷类化合物的超高效液相色谱-飞行时间-串联质谱分析鉴定

利用超高效液相色谱-飞行时间-串联质谱(UPLC-TOF-MS/MS)技术建立了黑果腺肋花楸花青苷类化合物分析方法。黑果腺肋花楸果实采用酸化甲醇(0.1%盐酸,v/v)提取,经UPLC BEH C18反相色谱柱分离,乙腈-水(均含0.1%甲酸,v/v)流动相系统梯度洗脱;在正离子模式下,采用飞行时间质谱全扫描-信息关联采集-子离子扫描(TOF-MS scan-IDA-Product ion scan)复合模式进行分析测定,一次进样分析可同时获得花青苷高分辨、高准确质量数的一级和二级质谱信息,提高花青苷结构鉴定的准确性。最终在黑果腺肋花楸中共鉴定12个花青苷类化合物,其中6种为黑果腺肋花楸果实中尚未报道的花青苷类化合物。研究为黑果腺肋花楸花青苷的生物活性研究及相关产品开发提供基础数据,所建立的方法适用于植物样品花青苷类化合物的分析。     

黑葵花籽壳中主要花色苷类物质的结构分析

为确定黑葵花籽壳中主要花色苷类物质的结构,采用高效液相色谱(HPLC)和高效液相色谱串联四极杆质谱研究黑葵花籽壳中的花色苷类物质,结果表明：纯化后的黑葵花籽壳花色苷主要有两种单体,之后采用纸层析对两种物质进行分离,再用红外光谱、紫外-可见光谱、Francis的研究结论等方法对两种单体结构初步推测。最后采用高效液相色谱串联四极杆质谱对两种花色苷结构确认为：花青素-3-O-单葡萄糖苷和甲基花青素-3-O-单葡萄糖苷两种单体。     

Correlation of two anthocyanin quantification methods: HPLC and spectrophotometric methods

The pH differential method and HPLC are commonly used methods by researchers and the food industry for quantifying anthocyanins in a sample. This study was conducted to establish a relationship between the two analytical methods. Seven juice samples containing an array of different individual anthocyanins were analyzed by pH differential and HPLC (two different columns and mobile phase conditions). In general, total anthocyanins were greater when expressed as malvidin-glucoside than as cyanidin-glucoside, despite the method used. This paper demonstrates the high correlation (R  0.925, p  0.05) between the pH differential method and HPLC (both systems) when determining the amount of anthocyanins found in samples. For laboratories that do not have the capability for HPLC analysis, the pH differential is a simple and economical method to determine total anthocyanins. This study also demonstrates the importance of reporting the standard used to express the values. There is still a need for both methods and certified anthocyanin standards.