石斛属植物DNA条形码鉴定及铁皮石斛产地分析

为建立石斛属植物适合的DNA条形码以及利用条形码鉴定铁皮石斛产地,对鼓槌石斛、报春石斛、金钗石斛、铁皮石斛4种石斛以及杭州、霍山、云南和温州4个产地的铁皮石斛的66份样品的ITS2和psbA-trnH序列进行扩增、测序及序列分析。比较石斛属植物种内、种间的变异,基于K2P距离分析Barcoding Gap,构建NJ系统发育树。结果表明,ITS2序列种内遗传变异(0～0.005)小于种间遗传变异(0.070～0.228),NJ进化树也能准确区分4种石斛;而psbA-trnH序列未形成Barcoding Gap,NJ进化树未能区分报春石斛和金钗石斛,psbA-trnH序列在鉴定石斛属植物时可作为补充序列。ITS2序列和psbA-trnH序列在4种产地铁皮石斛中存在多个变异位点,可鉴别铁皮石斛产地。     

DNA条形码技术在石斛分类鉴定中的应用进展

由于石斛属植物种间、种内形态相似,地域分布范围广泛、杂交种众多,市场上混乱,现亟需一种简单、高效的鉴定方法对其进行准确地鉴定。DNA条形码技术利用标准的一个或多个DNA片段对物种进行鉴定,是近年来生物学研究的热点领域,也是生物学发展最迅速的方向之一。DNA条形码技术可以从分子水平弥补传统鉴定方法的一些不足。该技术具有良好的通用性,使得物种鉴定过程更加快速,已经广泛应用于石斛的鉴定研究中。本文综述了DNA条形码技术及其原理,同时讨论了基于核基因片段(ITS、ITS2)以及叶绿体基因片段(matK、rbcL、psbA-trnH)在石斛分类鉴定中的应用,以期为加大石斛分类鉴定的力度和精度,以及为DNA条形码技术在石斛分类鉴定领域拓展和应用提供一定的理论指导依据。     

DNA条形码技术对鱼子酱物种溯源及鉴定

为探讨DNA条形码技术在鱼子酱物种鉴定中的适用性,利用细胞色素b（Cytochrome b,Cyt b）和细胞色素氧化酶I亚单位I（Cytochrome Oxidase I,COI）作为DNA条形码对鱼子酱样品进行DNA提取、聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）、测序、利用NCBI网站和BOLD鉴定系统进行基因比较分析,构建系统发育树,鉴定鱼子酱物种,对我国鱼子酱产品物种标签符合性情况进行检查。购买的40份样品,一致性鲟鱼物种基因序列相似性均在99%以上,涉及5个鲟鱼种,其中杂交种占比75%、西伯利亚鲟、施氏鲟、欧鳇、俄罗斯鲟占25%。说明Cyt b、COI作为DNA条形码可以对鱼子酱进行物种鉴定,检测的鱼子酱产品均为鲟鱼子酱,无造假,但是45%产品标签物种替代或物种标识不清。加强对产品物种标识重视及鉴定技术的开发,有助于我国鱼子酱对外贸易发展,保障我国鲟鱼产业可持续性健康发展。     

基于DNA条形码的食用菌与其易混有毒真菌的鉴定

目的 利用DNA条形码技术对常见可食用真菌与其易混的野生有毒真菌进行分子鉴定。方法 使用MEGA7.0软件对GenBank中获得菌类的ITS2、nrLSU及EF1-α基因序列进行分析和序列比对,计算各分类群种内与种间的kimura 2-parameter (K2P)遗传距离、构建相邻结合法(neighbor joining, NJ)系统聚类树,利用ITS2数据库预测各物种的ITS2二级结构。利用4Sale软件进行ITS2二级结构比对,运用ProfDistS软件构建剖面邻接(profile neighbor joining,PNJ)进化树。结果 遗传距离结果表明各分类群存在明显的条形码间隔(barcoding gap);NJ树结果显示各物种均可独立分支,具有良好的单系性;PNJ树同样可以区分食用菌与易混有毒真菌;各物种的ITS2二级结构均存在明显差异。结论 ITS2、nrLSU和EF1-α可作为DNA条形码用于可食用真菌与其易混的野生有毒真菌的鉴定,为推动真菌的分子鉴别在食品安全管理中广泛应用,保障食品安全与公众健康提供了新的技术手段。     

DNA条形码技术在食品鉴定中的应用

近年来,国内外不断出现有关食品掺假造假等食品安全问题的报道。产品与标签不符,肉类掺假,以次充好等商业欺诈问题影响着人们的利益与健康。食品掺假造假问题越来越受到重视,而传统的检测方法已不能满足食品鉴定的需要。DNA条形码技术是从分子水平上对食品进行鉴定,弥补了传统鉴定方法的不足,其准确、高效、简单的特点为食品鉴定领域带来了新的革命。本文在简要介绍DNA条形码研究现状的基础上,主要总结目前国内外关于DNA条形码技术在食品鉴定中的应用情况,包括在渔类产品、肉类产品、可食用植物、加工食品鉴定中的应用,最后讨论DNA条形码技术在食品鉴定中的优缺点以及发展趋势。     

基于微型DNA条形码的多种动物源性成分的鉴定

通过分析51?种动物的DNA条形码序列,新设计一对微型DNA条形码的通用引物,建立一种联合微型DNA条形码和克隆测序法对动物源性多组分样品进行准确、高效鉴定的方法。用微型DNA条形码分别鉴定11?种常见食用肉类,判断其对物种鉴定的准确性,并比较其与标准DNA条形码对物种的鉴定效果,然后将11?种常见商品肉类等比例混合,探究克隆测序法对混合肉样品的鉴定效果。结果表明：引物有较好的通用性,能对具有不同的引物同源性水平的11?个物种进行有效扩增并获单一条带。微型条形码能准确鉴定11?个肉类物种,与常规DNA条形码鉴定效果一致。经克隆测序法,把混合样品的9?个物种一并检出,总体上达到了较高的检出效率,同时深入讨论了未能检出全部物种的原因。微型条形码良好的物种鉴定能力的研究结果为联合微型DNA条形码与二代测序技术进行混合样品中物种的高效鉴定提供参考依据。     

基于DNA条形码技术的储粮害虫碎片鉴定研究

储粮害虫(螨)个体微小,种类繁多,与人类生活紧密相关,具有重要经济意义,储粮害虫快速鉴定是进行储粮害虫综合防治的前提和基础。传统的形态鉴定技术难以实现粮食及食品中害虫的非成虫态和碎片的准确鉴定,DNA条形码是近年来出现的物种分子鉴定技术,能够实现对昆虫非成熟虫态及碎片的快速鉴定。本研究利用DNA条形码技术和联合开发的中国储粮害虫DNA条形码鉴定系统(GPDBIS),针对某食品有限公司送检的储粮害虫碎片样品进行了序列测定、比对和分析,最终实现碎片的快速准确鉴定。结果显示,在所检测的7个害虫碎片样品中,有4头为锈赤扁谷盗Cryptolestes ferrugineus Stephens,3头为赤拟谷盗Tribolium castaneum Herbst,DNA条形码技术是储粮害虫快速准确鉴定的有效手段。     

鹿茸物种来源DNA条形码鉴定技术研究

目的 受经济利益驱动,鹿茸标签不符情况时有发生,损害消费者利益的同时,也给产业的发展带来了负面影响,探究鹿茸的鹿种鉴定方法为鹿茸市场监管提供技术支持。方法 本研究以线粒体细胞色素氧化酶I基因（Cytochrome oxidase I gene, COI）和线粒体细胞色素b基因（Cytochrome b gene , Cytb）为靶基因对鹿茸样品进行鉴定,并对两种基因的鉴别能力进行了比较。结果 发现COI存在无法鉴别梅花鹿和马鹿的情况,而Cytb可以将所有鹿茸鉴定至种水平。并将Cytb作为目标片段,建立了鹿茸中物种来源鉴定的DNA条形码方法。并利用该方法对市场上销售的53份鹿茸样品进行标签符合性鉴定。结论 进一步证实了使用Cytb的DNA条形码方法可以有效鉴定出市售鹿茸样品的物种来源。收集到的53份市售鹿茸样品中,仅有21份样品与标签标识物种相符;25份样品存在将低价鹿茸标为高价鹿茸的现象;7份样品缺少明确的物种信息。本研究结果可以为监管部门规范鹿茸产品标签标识提供技术支撑。     

铁皮石斛活性成分及其功能研究进展

铁皮石斛为我国传统滋阴名贵中药,其保健价值为人们所共识。本文综述近30年来国内外有关铁皮石斛的种质鉴定方法,着重论述铁皮石斛中的多糖、石斛碱、芪类及其衍生物、挥发性成分等天然活性物质及其功能,为合理的开发应用铁皮石斛资源提供科学依据。     

铁皮石斛的功能活性研究及产业化现状

铁皮石斛为兰科石斛属多年附生草本植物,在我国民间享有“救命仙草”的美誉,含有多糖、石斛碱、黄酮等多种生物活性成分,具有增强免疫力,调节炎症,调节糖脂代谢,促进胃肠道健康等功能特性。2023年11月9日,铁皮石斛被国家卫生健康委员会和国家市场监督管理总局正式列为“食药同源”物质,在健康食品领域具有的广阔应用前景。本文综述铁皮石斛从“栽培种植-功能成分挖掘-加工特性”的研究历程,全面总结其主要功能物质——铁皮石斛多糖的研究进展;同时,阐述铁皮石斛精深加工现状,剖析其产业化痛点和前景方向,以期为铁皮石斛在大健康产业的创新发展提供参考。     

不同生长年限铁皮石斛多糖含量与特性分析

采用凝胶渗透色谱方法测定多糖分子质量,柱前衍生化高效液相色谱法测定多糖的单糖组成,研究不同种植年限铁皮石斛多糖结构组成的差异及抗氧化能力。结果表明,5?a生铁皮石斛多糖含量最高,为238.60?mg/g,3?a生次之,为232.74?mg/g;4?a生铁皮石斛主要多糖分子质量高达1?383?kDa,3?a生次之,为1?046?kDa;1?a生铁皮石斛多糖的甘露糖比例最大,3?a生次之;3?a生铁皮石斛多糖的Fe3＋还原能力、羟自由基清除能力和总抗氧化能力最高。综合多糖含量和抗氧化活性测定结果得出,3?a生铁皮石斛品质最佳。     

铁皮石斛快繁技术研究进展

铁皮石斛具有极高的经济价值和保健价值,但其野生资源的短缺制约了日益增长的市场需求。目前对铁皮石斛组织培养和人工快繁技术的研究已经有了一定的进展,本文就外植体、生长培养基和添加物等方面对组培过程中不同生长阶段进行了综述,总结了近年来的研究成果,并展望今后组培的发展方向,以期为实现铁皮石斛的扩大化生产提供理论依据。     

铁皮石斛低温干燥抑制其水溶性多糖的聚合反应

本研究旨在探明干燥温度对铁皮石斛中多糖分子结构和抗氧化活性的影响。分别以新鲜铁皮石斛、以及60、100和140℃热风干燥铁皮石斛为实验材料,通过提取和纯化制备水溶性石斛多糖FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP,然后对石斛多糖进行分子结构分析和抗氧化活性测定。FDOP和60 DOP的还原端含量分别为1.82%、1.70%。然而,100 DOP和140 DOP的还原端含量分别降低至1.42%、1.10%。各铁皮石斛多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成,单糖摩尔比与干燥温度之间无明显的关联。随着干燥温度的升高,石斛多糖的分子量分布曲线向大分子量方向偏移。FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP中分子量103～106 u的多糖组分质量比分别为70.68%、67.70%、62.24%和58.11%。在UV光谱的280 nm处,FDOP、60 DOP、100 DOP没有吸收峰,而140 DOP有吸收峰。分子量103～106 u的多糖组分、还原端较多的铁皮石斛多糖具有较大的自由基清除能力和还原力。在铁皮石斛干燥中,60℃的温度有利于抑制多糖的聚合反应,保持多糖的抗氧化活性。本研究为石斛功能食品的生产及利用提供了技术数据和理论依据。     

三个不同种源的铁皮石斛多糖比较及其初步的药理活性评价

本文通过对云南、丹霞、浙江三个不同种源的铁皮石斛多糖进行了同样的提取、分离、纯化,分别对其分子量、单糖组成、红外光谱进行比较,以及初步的药理活性评价,来讨论不同产地的铁皮石斛差异.采用高效凝胶渗透色谱法(High Performance Gel Permeation Chromatography,HPGPC)对纯化的多...     

铁皮石斛膨化提取物的抗氧化和抗疲劳活性的评价

摘要：目的 探究膨化对铁皮石斛提取物抗氧化和抗疲劳活性的影响。方法 测定了铁皮石斛膨化前后提取物黄酮、多酚等活性成分含量以及提取物自由基清除能力,通过灌胃给予健康雄性小鼠低、高剂量膨化及未膨化铁皮石斛提取物,测定小鼠的最大游泳时间、血糖、血尿素氨（Blood urea ammonia ,BUN）、血乳酸（Lactic acid,LD）含量,肝脏及骨骼肌糖原水平、骨骼肌ATP含量以及谷胱甘肽（Glutathione,GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione?peroxidase ,GSH-px）、丙二醛（malondialdehyde ,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide?dismutase ,SOD）活性的变化。结果 膨化后,铁皮石斛活性成分提取率显著提高(P<0.05),自由基清除能力显著增强(P<0.05),总抗氧化值下降,表明膨化能够提高铁皮石斛膨化提取物的体外抗氧化能力。小鼠最大游泳时间延长(P<0.05),糖原在肝脏和肌肉的积累量增加(P<0.05),降低了疲劳相关标记物如BUN、LD含量,提高血糖、GSH含量以及GSH-px、SOD活性,降低MDA含量(P<0.05)。表明膨化能够提高铁皮石斛提取物的体内抗氧化及抗疲劳能力。结论 采用膨化方法能够有效增强铁皮石斛提取物抗氧化能力,缓解小鼠疲劳。     

干燥方式对铁皮石斛品质的影响

本实验研究了铁皮石斛热风干燥、微波间歇干燥和真空冷冻干燥3?种干燥方式及其工艺参数对铁皮石斛色差及主要活性成分含量的影响。结果表明：铁皮石斛热风干燥的最佳条件为90?℃干燥4?h,微波间歇干燥的最佳条件为550?W、间隔时间30?s、干燥48 min,在这两种干燥条件下,微波间歇干燥后的铁皮石斛总酚及多糖的含量明显高于热风干燥,但二者黄酮含量无明显差异,说明微波间歇干燥可以有效保留总酚及多糖类物质;真空冷冻干燥所需时间为11?h,干燥后所得铁皮石斛多糖含量较高;在最佳工艺条件下,铁皮石斛平均干燥速率和最大干燥速率均为：微波间歇干燥＞热风干燥＞真空冷冻干燥,成品色泽以真空冷冻干燥更佳。微波间歇干燥具有速率快、活性成分破坏小的优势,具有更好的推广意义。     

铁皮石斛对孕鼠及仔鼠胚胎发育的影响

目的观察铁皮石斛对妊娠大鼠及胚胎发育的影响。方法将妊娠SD大鼠分为溶剂对照组及625、1250、2500 mg/kg铁皮石斛组。于妊娠的第7～16 d经口给予孕鼠不同剂量的铁皮石斛。妊娠第20 d颈椎脱臼法处死孕鼠并解剖,取出子宫称重,检查活胎、吸收胎和死胎数,逐个记录活胎鼠的体重、身长、胎盘重量。每窝检查约一半存活胎鼠的内脏,其余存活胎鼠检查骨骼。结果 3种剂量对妊娠大鼠无明显毒性。其中2500 mg/kg组胎鼠体重与对照组比较有统计学差异(P0.05),胎鼠其余各项指标与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论铁皮石斛对妊娠母鼠无明显影响,未见致胎鼠畸形作用,可引起胎鼠体重增加。     

铁皮石斛叶多糖对秀丽隐杆线虫体内抗衰老作用

目的：基于模式生物秀丽隐杆线虫（以下简称线虫）探究铁皮石斛叶多糖的抗衰老能力。方法：采用含不同质量浓度（0.5、1.0、2.0 mg/mL）铁皮石斛叶多糖的大肠埃希氏菌OP50菌液每天饲喂线虫,以饲喂大肠埃希氏菌OP50菌液组作为空白对照,观察铁皮石斛叶多糖对线虫寿命、生殖能力、运动能力和应激能力的影响,同时测定线虫体内活性氧水平及抗氧化酶的酶活力,分析铁皮石斛叶多糖对线虫体内抗氧化能力的影响。结果：与空白对照组线虫相比,在本实验考察的质量浓度范围内,铁皮石斛叶多糖均可延长线虫的寿命,提高其运动、应激能力,同时不会损害线虫的生殖能力,并且能有效提高过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的活力,显著降低线虫体内丙二醛含量（P＜0.05）。结论：铁皮石斛叶多糖可能通过提高线虫抗氧化酶活力及提高线虫抗应激能力,降低线虫体内活性氧水平并减缓细胞氧化损伤,进而发挥延长线虫寿命的功效。