提取方法对黄秋葵花多糖的结构组成及抗氧化活性的影响

以黄秋葵花为原料,研究热水、酸法、酶法、超声辅助提取工艺对黄秋葵花多糖提取率和样品结构组成等 的影响,在此基础上对4 种多糖抗氧化活性进行了比较分析。结果表明：4 种提取方法所得多糖的提取率大小依次 为：酶法提取（（21.90±0.14）%）＞酸法提取（（15.15±0.07）%）＞热水提取（（12.60±0.28）%）＞超声辅 助提取（（12.02±0.37）%）。经酶法和热水提取的多糖样品分子质量较高且特性黏度较大,而超声提取则显著降 低了多糖的分子质量和特性黏度,同时使多糖分子质量的分布更加均一。4 种多糖的单糖组成成分相同,主要包括 鼠李糖、半乳糖醛酸和半乳糖,但单糖的物质的量之比有所不同。傅里叶变换红外光谱分析结果表明,得到的4 种 样品都具有多糖的典型傅里叶变换红外光谱特征。对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力等抗氧化活性的测定结果 表明,4 种多糖具有不同程度的抗氧化活性。其中,以超声辅助提取的多糖抗氧化活性最强。     

三种食用菌多糖的基本结构与抗氧化活性研究

通过水提醇沉法提取香菇、黑木耳和红托竹荪的边角废料菌托中的多糖,并用Sevag试剂和透析法分离纯化,得到三种食用菌多糖。采用紫外分光光度计、高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）、红外光谱法（infrared spectroscopy,IR）、核磁共振波谱法（nuclear magnetic resonance,NMR）和刚果红实验分析三种食用菌多糖的分子量、官能团、糖苷键和三螺旋结构。将清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine free radical,DPPH·）和羟基自由基（Hydroxyl free radicals,OH·）的能力及Fe3+总还原力来判断三种食用菌多糖抗氧化能力,比较分析三种食用菌的基本结构和抗氧化活性。结果显示,制备的三种食用菌多糖都具有较好的均一性,分子量分布在万级和百万级。三种食用菌多糖含有相似的官能团,是既具有α构型又具有β构型的酸性多糖,且均具有三螺旋结构。此外,三种食用菌多糖在实验浓度范围内,均具有良好的抗氧化活性。其中红托竹荪菌托多糖在1.0 mg/mL浓度时对DPPH和在3.0 mg/mL浓度时对OH自由基的清除能力优于香菇和黑木耳多糖,高达66.86%和35.69%,对DPPH和OH自由基的清除能力IC₅₀值分别为0.010和0.195 mg/mL。综上,三种食用菌多糖的基本结构无显著性差异,但抗氧化活性差异较大,为工业化生产利用红托竹荪边角废料提取食用菌多糖奠定基础。     

3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力比较分析

目的：研究玉木耳、黑木耳与毛木耳3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力。方法：利用水提醇沉法获得了3 种木耳的多糖,并测定了其多糖含量;采用分光光度法分别测定了3 种木耳多糖的总抗氧化能力,羟自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和亚硝酸根离子清除能力;同时进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌实验。结果：相同提取条件下,玉木耳、黑木耳与毛木耳的粗多糖提取率分别为13.87%、11.26%、7.91%,其中3 种木耳多糖质量分数分别为49.22%、41.50%和37.97%;总抗氧化活性检测结果显示毛木耳多糖的总抗氧化能力最高,黑木耳多糖与玉木耳多糖抗氧化能力相当;其中玉木耳多糖对羟自由基清除能力略强于黑木耳多糖,且二者的超氧阴离子自由基清除能力相当,均强于毛木耳多糖;3 种木耳多糖对DPPH自由基的清除作用较明显,其中玉木耳多糖相对较优,可达80%;此外,黑木耳多糖对亚硝酸根离子的清除能力最好,略优于其他两种木耳多糖。对常见细菌的抑制作用而言,3 种木耳多糖均对大肠杆菌有一定的抑制作用,但黑木耳多糖和毛木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制作用较弱;仅玉木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有较好的抑制作用。结论：3 种木耳多糖具备各自不同的抗氧化活性与抑菌能力,且差异较为明显。     

不同破壁方法对灵芝孢子粗多糖抗氧化活性的影响

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除法、羟自由基清除法、2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azinobis(3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid)diammonium salt,ABTS＋·）清除法和铁氰化钾法以及酵母细胞氧化损伤保护模型,分别对未破壁灵芝孢子（unbroken Ganoderma lucidum spore,UGS）、机械法破壁灵芝孢子（mechanically broken Ganoderma lucidum spore,MGS）、生物法与机械法复合破壁的灵芝孢子（biologically and mechanically broken Ganoderma lucidum spore,BGS）提取粗多糖进行体外抗氧化活性评价。结果表明,3 种处理方法的灵芝孢子粗多糖表现出不同的抗氧化活性,且抗氧化活性与多糖质量浓度呈一定效量关系,多糖质量浓度越高,抗氧化活性越强。BGS所得粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、ABTS＋?的清除能力以及还原力在3 种处理方法中均为最强。多糖质量浓度为5.0 mg/mL时,对3 种自由基的清除率分别为84.6%、91.0%、99.9%,还原力为1.09;BGS所得粗多糖对紫外损伤酵母细胞保护能力也相对较强。表明BGS粗多糖具有较高的抗氧化活性。     

超声波辅助提取人参花多糖工艺优化及其抗氧化活性

以干燥人参花为原料提取多糖,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法优化超声波辅助提取人参花多糖工艺,并建立回归模型;同时探究其体外抗氧化活性。结果表明：超声波辅助提取人参花多糖的最佳提取工艺为超声功率586 W、超声时间18.65 min、料液比1∶19.75（g/mL）,在此条件下多糖得率为（5.20±0.17）%（n=3）。超声提取的人参花多糖具有较高的抗氧化活性,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除作用明显,且其质量浓度与抗氧化活性呈现一定的量效关系,是一种良好的天然抗氧化剂。     

不同干燥方式对刺梨多糖多糖含量及抗氧化活性的影响

目的比较3种不同的干燥方式对刺梨多糖的多糖含量及抗氧化活性的影响。方法采用3种不同干燥方包括热风干燥、冷冻干燥和喷雾干燥法干燥刺梨多糖,通过多糖含量、蛋白质含量、红外光谱分析对刺梨多糖的理化性质进行评价,并研究了其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟基自由基和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid), ABTS]自由基的能力。结果热风干燥多糖,冷冻干燥多糖和喷雾干燥多糖具有不同多糖含量和抗氧化活性。与热风干燥和冷冻干燥相比,喷雾干燥多糖具有更强的抗氧化能力。结论考虑到多糖的理化性质和抗氧化活性,喷雾干燥法是制备刺梨多糖的一种较好的方法,建议在食品工业中应用。     

3 种方法提取的雨声红球藻多糖的理化性质及抗氧化活性比较

以雨声红球藻（Haematococcus pluvialis）为原料,研究超声辅助酸提取、超声辅助碱提取、超声辅助水提取3 种不同提取工艺对雨声红球藻多糖提取效率和产品理化特性的影响,在此基础上对3 种多糖抗氧化活性进行比较分析。结果表明,3 种提取方法所得多糖提取率大小依次为：超声辅助碱提法（9.52%）＞超声辅助酸提法（1.50%）＞超声辅助水提法（1.29%）。傅里叶红外变换光谱分析结果表明,3 种多糖的组成单糖中均包含吡喃糖,成苷的半缩醛羟基主要为α构型,其中以酸提多糖的吸收峰最强。扫描电子显微镜证实了超声辅助碱提法对雨声红球藻细胞壁的破坏程度最大,胞内多糖溶出最多。通过对还原力、1,1-二苯基-2-苦基肼自由基清除能力和·OH清除能力等抗氧化活性的测定,表明3 种多糖均具有一定的抗氧化能力,其中以碱提多糖的综合抗氧化能力最优。由此可见,超声辅助碱提法是一种提取藻多糖较好的方法。     

虫草花多糖提取工艺优化及其抗氧化特性

采用超声辅助法提取虫草花多糖,在单因素试验的基础上,通过L9（34）正交试验优化了虫草花多糖提取工艺;并就虫草花多糖对羟基自由基（·OH）、1,1-苯基-2-苦肼基（DPPH）自由基的清除作用和还原能力进行研究。结果表明：虫草花多糖最佳提取工艺条件为超声功率300 W,液料比30∶1（mL∶g）,超声时间30 min,超声温度45 ℃。在此优化条件下,多糖的平均提取率为3.88%。抗氧化活性试验结果表明,虫草花多糖质量浓度在2.9～14.7 mg/L范围内,随着虫草花多糖质量浓度的增加,其OH、DPPH自由基清除能力及还原能力均逐渐增强,虫草花多糖质量浓度为14.7 mg/L时,对·OH和DPPH·清除率分别达到44.39%和56.34%,说明虫草花多糖具有较强的抗氧化活性。     

不同提取方法对山药多糖含量及其体外抗氧化活性的影响

采用水提法、超声法、微波法和酶法分别提取制备山药多糖,苯酚硫酸法测定多糖含量,采用还原力、DPPH·清除能力、·OH清除能力、O-2·清除能力为体外抗氧化能力的评价指标,比较不同提取方法对多糖含量和抗氧化活性的影响。结果表明:相对于其他3种提取方法,酶法提取得率最高,可达9.65%,且耗时短,为120 min。就其还原力、DPPH·清除能力、·OH清除能力而言,酶法制备的多糖抗氧化能力最好,其余依次为微波法、水提法、超声法。而就其O-2·自由基清除能力而言,微波法酶法水提法超声法。因此,采用酶法提取工艺来制备山药多糖既有利于提高产量、维持多糖的功能活性,还缩短了提取时间,且安全、环保,便于进一步研究其抗氧化能力。     

山楂多糖的提取及其抗氧化性作用

为确定大别山产山楂多糖的最佳提取工艺条件和多糖的抗氧化活性,在单因素试验的基础上,通过Plackett Burman试验进行统计学筛选后,响应面法进行优化;通过对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟自由基和2,2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基清除试验测定山楂多糖抗氧化活性。结果表明,山楂多糖最佳提取条件为液料比28∶1（mL∶g）、浸提温度79 ℃,醇析乙醇体积分数71%。在此条件下,山楂多糖的提取率为7.97%。结果表明,山楂多糖具有清除DPPH自由基、羟基自由基和ABTS自由基的能力。     

马齿苋多糖提取工艺优选及活性初筛

以多糖提取得率为指标,采用正交试验对加酶超声辅助法提取马齿苋多糖的工艺条件进行了优化。方法:以未经酶解和未采用超声处理的传统水提醇沉法得到的多糖做对照,通过近红外光谱分析加酶超声处理对马齿苋多糖结构的影响并对马齿苋多糖的抗氧化活性进行分析。结果表明:在纤维素酶2.5%,超声温度60℃,超声功率70 W,超声时间20 min,多糖提取得率达到18.40%。结论:近红外光谱分析表明,加酶超声对多糖的结构没有显著影响,提高了多糖提取率。体外抗氧化性实验表明,所提取马齿苋多糖具有较强的总抗氧化能力,对.OH和DPPH均有较好的清除能力,活性大小与多糖的浓度呈明显的线性关系。     

不同提取方法对松茸多糖理化性质及抗氧化活性的影响

目的研究不同提取方法对松茸多糖(polysaccharide of Tricholoma matsutake,TMP)的理化性质及抗氧化活性的影响,并以提取得率和抗氧化活性为依据,筛选出最优方法。方法采用热水浸提、超声提取、酶提取和微波提取等4种提取方法,获得4种相应的多糖。利用高效阴离子交换色谱和傅里叶红外光谱对4种多糖的化学特性进行了结构表征。结果 4种多糖的提取得率顺序为热水浸提多糖超声提取多糖酶提取多糖微波提取多糖。在4种多糖中,超声辅助多糖含量最高(48.98%),蛋白含量最低(0.2%)。抗氧化试验结果表明,超声辅助多糖的还原力和·OH的清除力均高于其他3种多糖;从清除DPPH活性来看,超声辅助多糖和热水浸提多糖的EC_(50)分别为1.06和0.98 mg/mL,二者活性相当,均远高于其他2种多糖。结论综合考虑提取得率、多糖含量和抗氧化活性,超声提取为最优方法。4种多糖的单糖组分基本相同,但它们的摩尔比有明显不同。     

虾夷扇贝柱粗多糖不同提取工艺优化及其化学性质与抗氧化活性的比较

目的 优化虾夷扇贝柱粗多糖2种提取工艺,并对比分析2种提取方式对扇贝柱粗多糖的化学性质及抗氧化活性的影响。方法 以提取率为指标,在单因素实验基础上,通过响应面分析法对扇贝柱粗多糖热水浸提法及酶解提取法进行优化,并比较2种粗多糖红外光谱、单糖组成及抗氧化活性。结果 热水浸提法的最优工艺为:料液比1:3(g/mL)、浸提时间6h、浸提温度90℃;酶解法最优工艺为:木瓜蛋白酶添加量0.3%(鲜重)、pH 7.0、酶解温度55℃、酶解时间5 h、料液比1:3 (g/mL)。2种粗多糖组成单糖相同,但各单糖物质的量之比有所不同;红外光谱结果表明,2种粗多糖结构相似,主要由α-D型吡喃糖构成,且含有糖醛酸。抗氧化结果表明,不同提取方式得到的扇贝柱粗多糖具有不同的抗氧化活性,酶解法提取的粗多糖具有较高的抗氧化活性。结论 本研究确定了虾夷扇贝柱粗多糖2种提取方式的最优条件,酶解法粗多糖提取率较高且具有较好抗氧化活性,为后续研究提供了理论依据。     

响应面优化酶法提取虎斑乌贼肌肉多糖的工艺及抗氧化活性测定

研究胰蛋白酶提取虎斑乌贼肌肉多糖的工艺及体外抗氧化活性,并与水提法和碱提法的多糖进行比较。在单因素试验基础上以响应面法优化酶法提取多糖的工艺,结果显示最佳工艺条件为:酶解温度55℃、料液比1∶40(g/mL)、酶解时间4 h、加酶量2.5%,此时虎斑乌贼肌肉多糖得率为4.15%,优于水提法和碱提法的多糖得率。体外抗氧化活性研究表明酶法提取的多糖比碱提和水提的多糖具有更好的抗氧化活性,当多糖质量浓度为4 mg/mL时,水提、碱提和酶提虎斑乌贼肌肉多糖对·OH的清除率分别为50.15%、55.14%和89.47%,其IC50值分别为4.51、3.56 mg/mL和0.82 mg/mL;对DPPH自由基的清除率分别为28.89%、31.48%和40.80%,其IC50值分别为16.66、15.43 mg/mL和11.50 mg/mL;对O2-·的清除率分别为75.43%、81.63%和97.00%,其IC50值分别为1.15、0.69 mg/mL和0.29 mg/mL;还原力大小分别为0.134、0.156和0.193。综合分析表明,酶提法得到的多糖得率较高且具有较好的体外抗氧化活性。     

不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化性的影响

目的:研究不同提取方法对米邦塔仙人掌粗多糖体外抗氧化活性的影响。方法:采用热水提法、酶法和超声波法分别提取米邦塔仙人掌粗多糖,苯酚-硫酸法测定粗多糖纯度,以抗肝组织自发性脂质过氧化能力、清除羟基自由基能力、清除超氧阴离子能力、清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基能力、总还原能力、总抗氧化能力6种方法作为体外抗氧化能力评价指标。结果:酶法提取的粗多糖得率最高,为10.14%;超声波法提取的粗多糖纯度最高,为47.62%;酶法和超声波法提取的粗多糖各项体外抗氧化指标的活性均高于热水提法。结论:米邦塔仙人掌粗多糖的体外抗氧化活性强弱与粗多糖的提取方法有关,酶法和超声波法提取的粗多糖具有较好的抗氧化活性。     

复合酶法超声辅助提取高寒香菊花多糖

通过对复合酶超声辅助提取高寒香菊花多糖的工艺研究,以提取得率和纯度为指标,确定了适宜工艺条件。以未经酶解和未采用超声处理的多糖做对照,通过近红外光谱分析加酶及超声处理对高寒香菊花多糖结构的影响。结果表明:在复合酶2.5%(纤维素酶2.0%,酸性蛋白酶0.5%),酶解温度55℃,pH值4.5的条件下酶解2.0 h,多糖提取得率和纯度分别达到9.83%和28.58%,经聚酰胺柱纯化后纯度为64.57%。近红外光谱分析表明加酶和超声对多糖的结构没有显著影响,但提高了多糖提取得率。     

厚壳贻贝多糖的提取工艺优化及体外生物活性研究

以抗氧化和抗肿瘤活性为指导优化提取工艺,分别采用热水提取,两步联合酶解法（木瓜蛋白酶和胰蛋白酶）从厚壳贻贝中提取和分离纯化具有生物活性的贻贝多糖,对其进行基本理化性质分析和DEAE-Cellulose 52 柱层析分离纯化并进行体外抗氧化、抗肿瘤生物活性研究。通过对热水提取法,单一酶提法和联合酶提取法得到的贻贝多糖粗品进行理化性质分析和活性筛选,发现联合酶解提取得到的贻贝粗多糖在得率、纯度和生物活性上均优于其他方法提取得到的粗多糖,其提取粗多糖的得率为23.69%。联合酶提粗多糖体外抗氧化研究表明其对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和脂质过氧化物清除的半最大效应浓度（concentration for 50% of maximal effect,EC50）分别为3.75、5.01 mg/mL和2.41 mg/mL;对体外前列腺癌DU-145细胞48 h,IC50为2.93 mg/mL。通过分离纯化后对各组分的得率和组成分析表明：联合酶提可提高贻贝多糖类糖胺聚糖（MT3）的含量,并达到13.5%,单糖组成主要为Man、GlcN、GlcUA、Gal和Fuc,分子质量约为18 kD。和其他组分相比,MT3 组分表现出良好的体外抗肿瘤活性,对体外前列腺癌DU-145细胞48 h,IC50 为2.71 mg/mL。通过活性追踪和工艺优化结果表明,热水提取后酶解工艺不仅可以降解蛋白提高多糖的纯度,而且还可以显著提高贻贝多糖中类糖胺聚糖的含量,而贻贝类糖胺聚糖是贻贝多糖的主要活性组分,具有良好的抗肿瘤活性。     

海参多糖制备、化学分析及生物活性研究进展

海参是我国传统保健品,具有极高的保健及营养价值,也是海洋功能食品的重要研究对象。海参多糖作为海参的重要活性成分之一,具有抗高血脂症、抗氧化、抗凝血、抗肿瘤、提升免疫力等多种生物活性。海参多糖的研究主要集中在海参体壁,体壁多糖包括海参硫酸软骨素和海参盐藻聚糖硫酸脂2种组分。本文主要综述海参多糖的2种常用提取方法(化学水解法和酶解法)、3种分离纯化方法(沉淀法、色谱法和膜分离法)、化学组成分析及其检测方法、结构鉴定方法和4种主要的生物活性(抗高脂血症、抗氧化、抗凝血能力、抗肿瘤活性),为海参功能食品的开发提供参考。     

扇贝加工废液多糖提取优化及生物活性的研究

目的优化扇贝加工废液多糖的提取条件,并研究其生物活性。方法以多糖纯度为指标,对比胃蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶及碱性蛋白酶对扇贝加工废液中多糖酶解的效果。在单因素试验的基础上,采用正交试验法对扇贝加工废液多糖提取工艺进行优化。结果木瓜蛋白酶为最佳反应酶,最佳酶解条件为酶解时间4 h,酶解pH 6,酶解温度60℃,加酶量为2.5%,此条件下提取物多糖纯度为62.23%。采用膜分离技术,对所提取多糖进一步纯化,得到纯度为84.75%的扇贝废弃液多糖。在多糖浓度为8mg/mL时,废弃液多糖对-OH的清除能力达到87.53%,对DPPH自由基的清除能力达到53.36%;在废弃液多糖浓度为800μmol/L时,巨噬细胞NO生成量达到了13.05μmol/L。结论扇贝蒸煮液可提取得到较高纯度多糖,并具有较强的抗氧化作用及良好的免疫调节作用。     

Bioprocess production of sea cucumber rice wine and characterization of functional components and antioxidant activities

A new production bioprocess for sea cucumber rice wine (SCRW) was established. The traditional production technology of Chinese rice wine was combined with addition of sea cucumber hydrosylates. The optimal enzymatic conditions of sea cucumber and the fermentation process of SCRW were determined. The weight of sea cucumber enzymatic hydrolysates was 2.5% of millet while cooking the millet. SCRW contained abundant free amino acids (30 total at 1,681.216 mg/L), oligosaccharides (4 total at 10,999.380 mg/L), total phenols (658.850 mg/L), and mineral elements (9 total at 1,911.353 mg/kg), and an antioxidant activity, all of which were higher than for control rice wine (CRW). Galactosamine and glucuronic acid, both sea cucumber polysaccharides, were present in SCRW, but not in CRW.