褪黑素采前喷施对采后番茄果实抗病性和贮藏品质的影响

为研究褪黑素采前喷施番茄植株对采后果实抗灰葡萄孢菌能力和品质的影响,本实验以'Ailsa Craig'番茄为材料,采用1、50、100、150 μmol/L褪黑素采前喷施番茄植株,测定采后番茄果实品质、相关酶活力及基因表达量。结果表明:与蒸馏水喷施对照组相比,100 μmol/L褪黑素采前喷施处理可以显著降低番茄果实接种灰葡萄孢菌后的发病率、病斑面积(P0.05),诱导提高果实中几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活力,增加抗病相关基因PR1、NPR1、PI Ⅱ和LoxD的相对表达量,提高VC、可滴定酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量。综上,100 μmol/L褪黑素采前处理对采后番茄果实抗灰葡萄孢菌的效果最佳,褪黑素可提高番茄果实的抗病相关酶活性和贮藏品质。     

肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其对品质的影响

为研究肉桂醛对番茄采后灰霉病的抑制作用及其对番茄果实品质的影响,在离体条件下分别研究肉桂醛对
灰葡萄孢菌菌丝生长、孢子萌发的抑制作用,采用人工活体接种法研究肉桂醛对番茄果实灰霉病斑的控制作用,及
其对番茄自然发病果实的品质的影响。结果表明,肉桂醛对灰葡萄孢菌的菌丝生长和孢子萌发均有较好的抑制作
用,对菌丝生长的EC50值为95.6 μg/mL,质量浓度为60 μg/mL时对孢子萌发抑制率为100%;活体条件下肉桂醛能够
有效地抑制番茄果实采后灰霉病病斑的扩展,以4 000 μg/mL效果最好,且在此质量浓度条件下,对于降低果实质
量损失率,维持番茄硬度、可溶性固形物、可滴定酸和VC含量均具有较好的效果。4 000 μg/mL肉桂醛处理能够有
效地控制番茄采后灰霉病的发生及延长其保鲜期。     

宁夏贺兰山东麓葡萄灰霉病菌类群分析

为明确宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄灰霉病菌的类群，从6个葡萄酒庄采集30份葡萄灰霉病果实样本，并对葡萄灰霉病原菌进行分离和纯化，通过形态学分析、致病性测定和分子生物学方法对其进行类群划分。结果表明，分离纯化所得到的13株葡萄灰霉病菌株，依据培养性状、产孢量、微菌核和致病性将其划分为8大类群，依据G3PDH、Bc729、Bchch和Rpb2基因对8株代表性菌株进行分子鉴定，表明均为灰葡萄孢（Botrytis cinerea），但基因碱基序列略有差异，与形态学类群划分结果基本一致。本研究综合调查了贺兰山东麓酿酒葡萄灰霉病菌的类群，为贺兰山东麓酿酒葡萄产区葡萄灰霉病的有效防治提供理论依据。     

采前水杨酸处理对红地球葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的防控效果

为明确采前水杨酸处理对葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的影响,本研究首先分离并鉴定红地球葡萄生长过程中的主要潜伏侵染真菌,并研究水杨酸（salicylic acid,SA）对灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）的抑菌效果及对果实抗性基因的诱导作用。本文以新疆红地球葡萄为试材,选取0（对照）、0.5、1.0、2.0 mmol/L水杨酸（SA）在膨大期、转色期和采收前2 d （预收期）喷施处理葡萄果穗,采用组织分离法分离不同时期潜伏侵染果实的病原真菌,通过形态学和分子生物学方法,对病原菌进行分类鉴定,明确主要潜伏侵染真菌的种类,统计果实采后损伤接种Botrytis cinerea后病斑直径和发病率的变化,并分析果实相关抗性基因的表达情况。结果表明:采前SA处理可以显著降低果实生长期间潜伏真菌率,对葡萄果实不同部位的潜伏侵染控制效果显著,1.0 mmol/L SA处理组优于其它组,其中对果实底部和果蒂潜伏侵染的控制效果优于顶部和果梗。此外,生长期果实共鉴定出4种主要潜伏病原真菌,分别为灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、互隔交链孢霉（Alternaria alternate）、变色青霉（Penicillium discolor）和黑曲霉（Aspergillus niger）。1.0 mmol/L SA处理能显著抑制B.cinerea侵染造成灰霉病发病率上升和病斑直径的扩大,SA处理可在贮藏前期诱导采后葡萄果实VvPAL1、VvChi4D和VvGlu1基因的表达,中期后期诱导VvPAL2、VvPAL7和VvPAL15的基因表达,起到提高果实抗病性。因此,SA采前处理能提高红地球葡萄对潜伏侵染病害的抗性,对采后灰霉病也有较显著的抑制效果。     

常温条件下拮抗酵母菌对葡萄果实的抗性诱导研究

以从草莓果实上筛选的、对由灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的灰霉病具有较好抑制作用的葡萄有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)菌株为供试拮抗酵母菌,研究其对"巨峰"葡萄果实抗性的诱导。将葡萄果实分组,并分别进行喷洒和人工接入浓度为1×108cfu/mL的拮抗酵母菌悬液,常温条件下贮藏,观察果实感官品质变化,并测定抗性相关酶酶活变化。结果表明,拮抗酵母菌处理不影响果实感官品质,甚至可以较好地维持果实的感官品质;人工接入的拮抗酵母菌可以较好的诱导果实的POD、PAL、CAT、PPO及APX的酶活,而对喷洒拮抗酵母菌的整个果实可以较好的诱导POD、SOD、PAL及APX的酶活。整体而言,拮抗酵母菌可引起果实的应激反应,诱导寄主产生抗性。     

膜醭毕赤酵母挥发性物质对灰葡萄孢菌的抑菌活性及组分分析

为探究膜醭毕赤酵母(Pichia membranaefaciens)对采后灰葡萄孢菌的抑菌机制，该研究对其挥发性物质进行了抑菌活性与抑菌机制分析。结果表明，灰葡萄孢菌被挥发性物质熏蒸48 h时，菌丝长势明显受阻，抑制率高达72.41%,其产孢量始终低于空白组(P<0.05)。经熏蒸后72 h,菌丝体细胞膜内核酸、蛋白质的大量外泄(P<0.05)改变了细胞膜的通透性，同时，通过扫描电镜观察到处理过的菌丝表面出现干瘪、皱缩甚至部分菌丝胞内的内容物渗漏。有伤接种实验证明熏蒸处理的番茄果实病斑直径仅为(1.47±0.16) cm,显著低于空白对照组。利用顶空固相微萃取-气质联用法(headspace solid-phase microextraction gas chromatography-mass spectrometry, HS-SPME-GC-MS)分离鉴定到20种挥发性物质，主要组分为醇类(39.26%)、酮类(24.72%)和有机酸类物质(8.51%)。上述结果为研究酵母菌防控采后果蔬腐烂提供了理论依据，为生防菌的安全防腐策略提供新思路。     

荧光假单胞菌ZX对葡萄采后灰霉病的防治

研究荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）ZX对葡萄采后灰霉病的防治效果。以“巨峰”葡萄为试材，测定P. fluorescens ZX的控病效果和生长动态，在离体条件下通过孢子萌发观察、挥发性物质抑菌测试、扫描电镜探究其对灰葡萄孢霉（Botrytis cinerea）的防治。结果表明，使用P. fluorescens ZX处理，葡萄果实的发病率仅为24.8%，明显低于对照组（发病率64.67%），病斑直径最小，可以明显抑制B. cinerea孢子萌发、芽管伸长。P. fluorescens ZX产生的挥发性物质具有较强的抑菌效果，并且能对B. cinerea有重寄生作用，破坏菌丝的正常形态。另外，无论是浸泡还是接种处理，P. fluorescens ZX都能在葡萄果实上快速地定殖生长。由此表明，P. fluorescens ZX通过抑制B. cinerea生长来控制葡萄采后灰霉病，为果实采后防腐保鲜提供一种新的选择。     

2,4-表油菜素内酯对葡萄果实采后灰霉病的抑制作用机理

为研究2,4-表油菜素内酯（2,4-epibrassionolide,EBR）处理对‘巨峰’葡萄果实采后灰霉病的抑制效果及作用机制,将葡萄果实经5 μmol/L EBR溶液处理12 h后刺伤接种灰葡萄孢（Botrytis cinerea）病原菌,然后置于25 ℃下贮藏60 h。结果显示：EBR处理有效抑制了葡萄采后灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与单一接种病原菌和EBR处理相比,先用EBR处理后接种B. cinerea葡萄果实展现出更强、更快的抗病反应,表现为几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和苯丙氨酸解氨酶等抗病相关酶活力及总酚含量显著提高（P＜0.05）,H2O2积累及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶活力提高,同时VvCHI、VvGNS和VvPAL-like抗病基因表达显著增加（P＜0.05）;体外实验发现,EBR处理可显著抑制B. cinerea孢子的萌发,但对芽管伸长长度没有显著影响。结论：EBR处理主要是通过敏化反应机制诱导提高葡萄果实的抗病性,从而减轻灰霉病的发生。     

克伦生葡萄内生菌Acremonium sclerotigenum的分离鉴定及致腐能力研究

为明确储藏期克伦生葡萄果实内生真菌和致病菌主要类群,通过形态学、分子生物学方法确定菌株分类地位,并探讨了内生菌对不同果实的致腐能力。研究结果表明,健康克伦生葡萄果实内生菌株K1～13在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养性状一致,菌落白色,表面平展,呈绒状,其形态与枝顶孢属(Acremonium)形态特征吻合;转录间隔区ITS和核糖体28S rDNA序列构建进化树分析,其与Acremonium sclerotigenum聚为一簇,因此将其确定为菌核枝顶孢(A.sclerotigenum)。将A.sclerotigenum接种健康葡萄、番茄和苹果均能引起果实腐烂,证明了其致腐特性。同时从腐烂克伦生葡萄果实上分离纯化到灰葡萄孢(Botrytis cinerea)和链格孢(Alternaria sp.)菌株。内生菌A.sclerotigenum对灰葡萄孢、链格孢均无拮抗作用。该研究首次报道了具有致腐特性的葡萄内生菌,丰富了葡萄内生菌种的资源,为葡萄采后病害防治提供了技术和理论支持。     

茉莉酸甲酯对脆红李采后病原菌的抑制作用

为确定脆红李果实采后主要病原菌的种类及茉莉酸甲酯对其抑制效果,从脆红李贮藏期病果中分离纯化病原菌,通过致病性检测、形态学鉴定和rDNA-ITS序列分析对病原菌进行鉴定;并采用体外实验研究不同浓度的茉莉酸甲酯（0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mmol/L）对脆红李采后主要致病菌的抑制效果及室内毒力测定。结果表明,引起脆红李采后腐烂的病原菌主要为灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）和链格孢菌（Alternaria alternata）;经体外实验得出,不同浓度的茉莉酸甲酯能抑制两株病原菌菌丝的生长,其中,0.4 mmol/L及0.5 mmol/L的茉莉酸甲酯能够有效抑制脆红李采后病原菌的生长,但其对病原菌的抑制作用无显著差异（P>0.05）;在体外培养5 d时,0.4 mmol/L的茉莉酸甲酯对灰葡萄孢菌和链格孢菌的抑制率分别为89.3%、86.3%;在培养2 d时,茉莉酸甲酯对灰葡萄孢菌和链格孢菌的EC50分别为0.154、0.228 mmol/L,而在5 d时为0.193、0.348 mmol/L。由此得出适宜浓度的茉莉酸甲酯能够有效抑制脆红李贮藏期病原菌的生长,后期可将其用于脆红李采后病害的防治及贮藏保鲜的研究。     

生防菌KD-16J的鉴定及其对番茄灰霉病的抑制作用

通过离体和活体筛选,确定一株生防菌KD-16J对果实灰霉病的抑制效果.经形态学鉴定、生理生化试验和内源转录间隔区序列分析鉴定,确定其为膜醭毕赤酵母菌(Pichia membranifaciens)属.在平板抑菌试验中发现,在105 CFU/mL～108 CFU/mL之间,酵母菌的应用浓度越高,对灰葡萄孢菌的抑制效果越好...     

茉莉酸甲酯诱导采后番茄果实抗病的作用

为寻找安全无毒的采后保鲜防病途径,探讨茉莉酸甲酯(MeJA)在采后番茄果实诱导抗病性中的作用和机制。以绿熟期“丽春”番茄为材料,接种灰霉菌,并观察该菌对诱导抗病性的作用,研究MeJA对采后抗病的反应及其诱导作用,并对不同处理中番茄果实抵抗病原菌侵染能力、茉莉酸类物质含量、植物抗菌物质含量的诱导差异进行检测。结果表明：外源MeJA处理能够有效抑制番茄果实采后病害的发生,提高果实对琏格孢霉(Alternaria solani)、灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)、扩展青霉(Penicillium expansum)、匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)病原菌侵染的广谱抗性,并通过诱导包括病程相关蛋白、酚类、番茄红素在内的抗菌物质积累,达到诱导抗病效果。     

β-氨基丁酸抑制草莓低温贮藏过程中灰霉病的效果及其机理

以‘红颜’草莓为实验材料,研究β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对草莓果实采后贮藏在低温((5±1)℃)条件下灰霉病的抑制效果及相关机理。草莓果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)孢子,然后在(5±1)℃的条件下贮藏12 d,结果发现BABA显著抑制了灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与对照组相比,处理组几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活力分别提高了9.2%和54.9%,多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和纤维素酶(cellulose,Cel)的活力分别降低了29.3%和24.4%,同时,BABA提高了FaCHI和FaGLU基因的表达,抑制了FaPG和FaCel基因的表达;此外,体外实验的结果发现,BABA能够破坏灰葡萄孢霉孢子的质膜完整性,导致了孢子内部可溶性蛋白质和可溶性糖的泄漏。结果表明,BABA通过诱导抗病相关酶活力来提高抗病性、延缓果实软化并通过对病原菌的直接抑制作用减轻草莓果实采后灰霉病的发生。     

Biocontrol of Alternaria alternata on cherry tomato fruit by use of marine yeast Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman

The basidiomycetous yeast Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman isolated from the south of East China Sea was evaluated for its activity in reducing postharvest decay of cherry tomatoes caused by Alternaria alternata in vitro and in vivo tests. The results showed that washed cell suspension of R. paludigenum provided better control of A. alternata than any other treatment, while the autoclaved cell culture failed to provide protection against the pathogen. The concentration of antagonist had significant effect on biocontrol effectiveness in vivo: when the concentration of the washed yeast cell suspension was used at 1 x 10(9)cells/ml, the percentage rate of black rot of cherry tomato fruit was only 37%, which was remarkably lower than that treated with water (the control) after 5days of incubation at 25 degrees C. Furthermore, a great biocontrol efficacy of R. paludigenum was observed when it was applied prior to inoculation with A. alternata: the longer the incubation time of R. paludigenum, the lower disease incidence would be. However, there was little efficacy when R. paludigenum was applied after A. alternata inoculation. In addition, on the wounds of cherry tomato, it was observed that R. paludigenum grew rapidly increasing 50-fold during the first 12h at 25 degrees C. To the best of our knowledge, this is a first report concerning that the marine yeast R. paludigenum could be used as a biocontrol agent of postharvest fungal disease.     

采后一氧化氮处理调控番茄果实茉莉酸类物质合成并提高灰霉病抗性

探讨在番茄果实抗病性诱导过程中一氧化氮对茉莉酸类物质的调节作用。以中蔬4 号绿熟期番茄果实为材料,对其进行不同浓度一氧化氮处理,检测不同处理对番茄果实抵抗病原菌侵染能力、一氧化氮水平、茉莉酸类物质含量及其关键合成酶活性以及抗病酶苯丙氨酸解氨酶活性的影响。结果表明：不同浓度一氧化氮处理均能提高采后番茄果实抵抗病原菌侵染的能力,低浓度一氧化氮供体硝普钠(0.02mmol/L)表现得更为明显;低浓度硝普钠能够促进JAs 含量及脂氧合酶活性的增加,高浓度处理则表现出抑制作用。     

采后热处理对红富士苹果青霉病和灰霉病的控制

热空气处理能有效抑制灰葡萄孢(Botrytiscinerea)和扩展青霉(Penicilliumexpansum)的毒性。灰葡萄孢比扩展青霉的热敏感度高,Bcinerea孢子38℃热处理48h即能完全抑制孢子萌发。热处理72h的Bcinerea平板均无菌丝生长。Pexpansum的孢子活性和菌丝生长随热处理时间的延长而明显减缓。热处理后的霉菌孢子在苹果果实内生长缓慢,Bcinerea孢子在热处理72h后在苹果中的生长完全受抑制,腐烂发生率为零。Pexpansum热处理72h后才能显著抑制苹果的腐烂发生。苹果接种霉菌后再进行热处理(38℃,96h),无论是0℃还是20℃下放置,均未发现腐烂,大大减少贮期灰霉病、青霉病的发生。研究还发现,经过2个月冷藏后,与对照组相比,热处理过的红富士苹果果皮色泽更黄,糖酸比上升,呼吸强度较低,硬度保持较好,说明热处理能够正面影响苹果的贮藏品质。     

Secretome of Aspergillus oryzae in Shaoxing rice wine koji

Shaoxing rice wine is the most famous and representative Chinese rice wine. Aspergillus oryzae SU16 is used in the manufacture of koji, the Shaoxing rice wine starter culture. In the current study, a comprehensive analysis of the secretome profile of A. oryzae SU16 in Shaoxing rice wine koji was performed for the first time. The proteomic analysis for the identification of the secretory proteins was done using two-dimensional electrophoresis combined with matrix-assisted laser desorption/ionization-tandem time of flight mass spectrometry based on the annotated A. oryzae genome sequence. A total of 41 unique proteins were identified from the secretome. These proteins included 17 extracellular proteins following the classical secretory pathway, and 10 extracellular proteins putatively secreted by the non-classical secretory pathway. The present secretome profile greatly differed from previous reports on A. oryzae growing in other solid-state nutrient sources. Several new secretory or putative secretory proteins were also found. These proteomic data will significantly aid the advancement of research on the secretome of A. oryzae, especially in solid-state cultures, and in elucidating the production process mechanism of Shaoxing rice wine koji. The findings may promote the technological development and innovation of the Shaoxing rice wine industry.     

葡萄灰霉病生防菌株的筛选及其拮抗机理初探

以新疆哈密瓜、蟠桃及红枣中分离出的59株内生细菌为出发菌株,采用离体实验和活体实验,从中筛选出11株对葡萄灰霉菌具有较好抑制作用的菌株;经低温作用、农药耐受性及致病菌广谱性等复筛实验,从红枣中获得1株性能优良的目标菌株T2,该菌在0 ℃条件下对葡萄灰霉菌的抑菌率可达58.43%,农药耐受性达68.2%～98.4%,对致病菌具有广谱抗性,其中桃褐腐病菌和草莓灰霉菌的病原菌菌落直径均小于30 mm,葡萄炭疽菌病原菌菌落直径小于50 mm。经过形态、生理生化和16S rDNA同源性分析,确定菌株T2为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）,该菌主要依靠菌体本身和重寄生作用对葡萄灰霉菌发挥拮抗作用。     

Thermal inactivation of Botrytis cinerea conidia in synthetic medium and strawberry puree

Botrytis cinerea is one of the most important post-harvest molds that cause quality deterioration of strawberries and other fruits even during refrigeration storage. This research studied the effects of thermal inactivation of B. cinerea in synthetic medium and strawberry puree using hot water baths at different temperatures. These media were studied in order to determine if results obtained in a solution with the major components of the fruit (synthetic media), are comparable to the ones obtained in fruit purees. The results demonstrated that B. cinerea spores can be inactivated by heat treatments using relatively low temperatures (42-46 °C). Inactivation curves were well described by first order kinetics (R2 0.91-0.99). B. cinerea conidia inoculated in synthetic medium required less time to achieve one log reduction in population than those inoculated in the fruit puree. D values were 22, 8.5, 4 and 1.4 min at 42, 44, 46 and 48 °C, respectively, in synthetic medium; while D values in strawberry puree were 44.9, 13.8, 4.7 and 1.4 min at 42, 44, 46 and 48 °C, respectively. The z values obtained were 4.15 and 5.08 °C for the strawberry puree and synthetic medium respectively, showing higher sensitivity of B. cinerea in fruit purees than in the synthetic medium. Thus, a change in the medium composition had a marked difference in the heat inactivation of B. cinerea conidia, and the results obtained in synthetic medium are not accurate to describe the behavior of the microorganism in the fruit.