间充质干细胞与肝星状细胞相互作用及其与抗肝纤维化

肝硬化是由于病毒感染、酒精、代谢性疾病等原因导致肝脏慢性损伤的结局。肝纤维化是慢性肝炎发展到肝硬化必然经过的中间阶段。肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）的活化、细胞外基质（ECM）合成和降解失衡导致ECM在细胞间质过量沉积是肝纤维化发生的基本机制。抑制HSCs活化、增殖和减少HSCs胶原合成,阻断相关信号通路转导、诱导HSCs凋亡成为防治和逆转肝纤维化的重要手段[1-3]。     

DMN诱发大鼠肝纤维化库普弗细胞与肝星状细胞的分布

目的:探讨二甲基亚硝胺(DMN)诱发大鼠肝纤维化库普弗细胞与肝星状细胞的分布及其意义。方法:选取40只Wistar雄性大鼠连续4周腹腔注射10 g/L DMN制备肝纤维化模型。采用随机数字表法分为模型组(n=20)与正常组(n=20),两组均应用DMN进行肝纤维化造模。采用Reiman法测定大鼠第4周和第7周ALT、AST水平,免疫组化法测定两组大鼠库普弗细胞与肝星状细胞标志物ED1与α-SMA分布情况,收集并分析两组肝/体质量比、肝组织病理变化、胶原纤维面密度。结果:模型组第4周和第7周ALT、AST、面密度水平均高于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组第4周和第7周总蛋白(TP)、肝/体质量比水平均低于正常组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组第4周与第7周肝/体质量组内比较,差异均无统计学意义(P=0.11);模型组第4周和第7周光镜下可见ED1、α-SMA阳性细胞数量较多,主要分布于增生的纤维组织及纤维间隔弥漫部位。结论:DMN可导致大鼠肝功能障碍及弥漫肝硬化。大鼠肝纤维化模型的库普弗细胞可激活、活化肝星状细胞。     

郁金含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制作用的影响

目的:观察郁金含药血清对肝星状细胞-T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞增殖抑制的研究。方法:25只SD大鼠随机分5组:郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组(16.2 g·kg-1、8.1 g·kg-1、4.0 g·kg-1),秋水仙碱组(5g·kg-1)以及空白组(给予等体积生理盐水),连续灌胃给药4 d后,于第4天一次性给药1 h后,乙醚麻醉腹主动脉取血制备含药血清;将HSC-T6细胞分为6组,郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组,空白组、秋水仙碱组、阴性对照组(加入等体积的PBS代替大鼠血清),分别取用体积分数5%、10%、20%的含药血清,同时作用于各组HSC-T6细胞24 h、48 h、72 h后,采用四氮噻唑蓝法在酶标仪(490 nm波长)上检测各组OD值,分别计算其增殖率和抑制率。结果:与阴性对照组比较,除作用24 h、体积分数5%组外,大鼠血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖速度,其增殖率与大鼠血清含量呈正相关。与空白组比较,除作用24 h、体积分数5%含药血清各剂量组、低剂量20%组以及秋水仙碱20%组没有明显抑制作用外,其余各郁金剂量组均有增殖抑制作用,其中体积分数10%组的抑制效果明显高于体积分数20%组(P<0.05)。作用48 h后,各干预含药血清的3个浓度组均有明显抑制作用,其中郁金体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P<0.05);作用72 h后,除秋水仙碱组外,各郁金剂量组均有明显抑制作用,其中含药血清体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P<0.01)。结论:大鼠郁金含药血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖;郁金含药血清在体外可以有效抑制HSC-T6细胞的增殖,但抑制率与含药血清体积分数、作用时间呈非线性关系,抑制率最为显著的是含药血清体积分数10%,作用时间48 h。     

三七总皂苷对酒精性肝硬变大鼠肝星状细胞蛋白组学的影响

目的:探讨三七总皂对实验性酒精性肝硬变大鼠肝纤维化治疗作用的分子机制。方法:选取健康成年雄性Wistar大鼠36只,使用体积分数50%酒精16 m L·(kg·d)~(-1)灌胃造模,9周后随机分成模型组、安珐特组、三七总皂苷组,每组12只。安珐特组给予西药安珐特21.6 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,三七总皂苷组给予三七总皂苷100 mg·(kg·d)~(-1)进行灌胃,模型组继续使用体积分数50%酒精灌胃。同时设置空白组。12周后处死大鼠,剪下肝右叶,提取肝星状细胞总蛋白,测定各组蛋白含量,继而进行等电聚焦双向电泳,比较组间的差异蛋白点。结果:通过组间两两比较发现,组间的蛋白表达均存在着差异,正常组与模型组比较,共有23个差异点;正常组与安珐特组比较,共有33个差异点;正常组与三七总皂苷组比较,共有30个差异点;模型组与安珐特组比较,共有30个差异点;模型组与三七总皂苷组比较,共有31个差异点;安珐特组与三七总皂苷组比较共有30个差异点。结论:三七总皂苷对实验性酒精性肝硬变大鼠具有保护作用,其机制可能与三七总皂苷引起肝星状细胞蛋白质表达差异有关。     

疏肝健脾活血方对肝星状细胞增殖的影响

目的:采用细胞培养的方法,体外观察疏肝健脾活血方药物血清对转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)诱导的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC-T6)增殖作用的影响。方法:将40只大鼠随机分成正常大鼠血清组,疏肝健脾活血方低剂量组,疏肝健脾活血方中剂量组,疏肝健脾活血方高剂量组。以疏肝健脾活血方给大鼠灌胃,腹主动脉采血并制备血清。采用TGFβ1诱导HSC-T6作为活化的肝星状细胞的研究模型,以不同浓度的疏肝健脾活血方药物血清作用于体外培养的HSC-T6,分别作用24 h、48 h后,采用CCK-8法检测不同浓度的疏肝健脾活血方药物血清对HSC-T6增殖的影响。结果:疏肝健脾活血方药物血清作用于TGFβ1诱导的HSC-T6,细胞增殖受到明显抑制。各组作用48 h后,空白对照组OD值为(0.617±0.061),疏肝健脾活血方低剂量组、中剂量组、高剂量组OD值分别为(0.446±0.091)、0.417±0.103)、(0.376±0.065),疏肝健脾活血方各剂量组与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。正常大鼠含药血清组OD值为(0.506±0.015),与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:疏肝健脾活血方药物血清对TGFβ1诱导的HSC-T6细胞活化作用增殖有抑制作用。     

血清肝纤维化标志物指标在肝纤维化病理分期诊断中的应用

目的:探讨血清肝纤维化标志物诊断肝纤维化病理分期的临床价值。方法:回顾47例慢性乙肝患者,通过对血清肝纤维化相关指标(HA、IV-C、PIIIP和LN)检测,分析各指标对诊断早期肝硬化的敏感度和特异性,探讨血清肝纤维化相关指标与肝纤维化病理分期相关性。结果:血清肝纤维化相关指标与肝纤维化病理分期相关性大小顺序为:r(IV-C=0.63)>r(PIIIP=0.40)>r(HA=0.28),而LN相关性检验无统计学意义(P>0.05)。各相关指标经ROC曲线分析,对肝硬化诊断敏感度大小顺序为IV-C(82.0%)>PIIIP(80.1%)>HA(49.2%),对肝硬化诊断特异度大小顺序为HA(74.1%)>IV-C(71.3%)>PIIIP(69.3%)。结论:血清肝纤维化指标能较好的反映肝纤维化病理分期情况。     

IL-10-HGF融合基因对肝星状细胞LX-2增殖的抑制作用

目的探讨人白介素-10(IL-10)与人肝细胞生长因子(HGF)融合基因对肝星状细胞LX-2增殖的抑制作用。方法采用PCR方法,分别构建pcDNA3.1-flag-IL-10、pcDNA3.1-flag-HGF与pcDNA3.1-flag-IL-10-HGF真核表达载体,瞬时转染肝星状细胞LX-2;利用RT-PCR和Western blot检测LX-2细胞中IL-10、HGF的表达;选用MTT法检测转染24、48和72 h后LX-2细胞的增殖情况。结果成功构建了IL-10-HGF融合基因真核表达载体pcDNA3.1-flag-IL-10-HGF。与pcDNA3.1-flag-IL-10和pcDNA3.1-flag-HGF组比较,pcDNA3.1-flag-IL-10-HGF融合组48 h和72 h LX-2细胞数减少(n=3,P<0.05)。结论 IL-10-HGF融合基因可有效抑制肝星状细胞LX-2的增殖。     

强肝软坚丸对肝纤维化大鼠肝组织中MMP、TIMP表达的影响

目的:观察强肝软坚丸对肝纤维化的干预和治疗作用,探讨其作用机理。方法:120只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法将其分为正常对照组、模型组、秋水仙碱治疗组、秋水仙碱干预组、强肝软坚丸治疗组、强肝软坚丸干预组6组。除正常对照组外,各组均采用未灭活猪血清腹腔注射造模,每只每次0.5 m L,每周两次,正常对照组给予同剂量生理盐水腹腔注射。各干预组造模同时每日1次灌胃给药:秋水仙碱溶液0.1 g·kg-1(秋水仙碱质量浓度为0.01 g·m L~(-1))、强肝软坚丸溶液2 g·kg-1(药物质量浓度为0.2 g·m L~(-1)),正常组、模型组和各治疗组每天同剂量灭菌水灌胃。于造模第5周末各组均随机抽取5%大鼠断头处死,肝组织病理提示造模成功,第6周初开始分别给予各治疗组药物灌胃,方法和剂量同各干预组。于造模10周结束后禁食12 h,各组均随机取10只大鼠断头处死,采集肝组织标本,通过常规HE染色和Masson染色观察各组大鼠肝组织病理学变化并进行Masson染色肝纤维化半定量分析;通过免疫组化染色,用图像分析法检测各组肝组织基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1、MMP-2和MMP抑制因子(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase,TIMP)-1、TIMP-2的表达。结果:与模型组比较,秋水仙碱组、强肝软坚丸组MMP-1表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05);提示强肝软坚丸可提高肝纤维化大鼠肝脏组织MMP-1的表达。与模型组比较,秋水仙碱干预组、强肝软坚丸治疗组和强肝软坚丸干预组MMP-2表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,秋水仙碱组、强肝软坚丸组TIMP-1表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05);提示强肝软坚丸可降低肝纤维化大鼠肝脏组织TIMP-1的表达。与正常对照组比较,其余各组TIMP-2表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,秋水仙碱组、强肝软坚丸组TIMP-2表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:强肝软坚丸不仅可改善免疫损伤性肝纤维化大鼠一般情况和肝纤维化程度,也可使免疫损伤性肝纤维化大鼠肝组织中MMP-1、MMP-2的表达升高,TIMP-1、TIMP-2的表达降低。     

基于“肝主疏泄”理论探讨四逆散加味治疗肝纤维化的思路和方法

通过对中医学"肝主疏泄"理论的内涵研究,论述其在肝纤维化发生发展中的重要性,提出了"肝郁脾虚络瘀"是肝纤维化的重要病机,"疏肝健脾活血"是肝纤维化的重要治法,并结合"肝郁脾虚络瘀"的病机,针对经方四逆散抗肝纤维的不足,提出了对其加味的理论依据和开展抗肝纤维化机制研究的思路和方法。     

吡喹酮治疗血吸虫病肝纤维化的临床研究

目的:探讨吡喹酮治疗血吸虫病肝纤维化的疗效。方法:选取本院2015年3月-2016年1月,确诊的120例血吸虫病肝纤维化患者,按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组60例,双盲法观察各组治疗前后的肝脏B超变化、血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CL-Ⅳ)、间质金属蛋白酶(MMPS)、间质金属蛋白酶抑制因子(TIMPS)及转化生长因子β1(TGF-β1)的变化。结果:治疗组治疗后HA、CL-Ⅳ、PC-Ⅲ、LN、TIMP1、TIMP2及TGF-β1明显降低,而MMP2和MMP9上升,比较差异均有统计学意义(P<0.05);对照组治疗前后比较,差异均无统计学意义(P>0.05);肝脏B超检查积分治疗组的下降率明显低于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:吡喹酮治疗血吸虫病肝纤维化疗效较好。     

补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察补中益气汤含药血清对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡的影响,探讨补中益气汤治疗肿瘤的机制。方法:以补中益气汤给大鼠灌胃,腹主动脉采血并制备血清。MTT法检测含药血清对肺癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定肺癌细胞细胞凋亡。结果:补中益气汤不同浓度含药血清组与空白对照组比较均可明显抑制肺癌细胞体外增殖,差异有统计学意义(P<0.05);补中益气汤不同浓度含药血清组Lewis肺癌细胞凋亡率与空白对照组比较,明显升高,且随着含药血清浓度的增加,细胞凋亡率明显上升,具有浓度依赖性。结论:补中益气汤含药血清对肺癌细胞体外增殖有明显的抑制作用,且可促进肿瘤细胞凋亡。     

铁包金的研究进展

综述了民族药——铁包金的化学成分、药理作用和繁殖等方面的研究进展。     

六月雪的研究进展

从质量分析研究、药理作用研究和临床应用等方面对六月雪进行的综述。六月雪主要分布在华东、中南、华南及贵州、云南等地区;化学成分主要有挥发油、萜类与甾体类、木脂素类、蒽醌类等;药理方面有促凝血作用、抑菌作用;临床上,主要应用治疗感冒、头痛、急性黄疸型肝炎、急性角膜炎、盛夏解暑等。六月雪具有进一步研究和开发的价值。     

不同表面改性剂对普通氢氧化镁改性效果研究

分别以油酸钠、硬脂酸钠、十二烷基苯磺酸钠为改性剂湿法改性普通氢氧化镁,研究了改性剂的种类、改性剂用量、改性温度及改性时间对氢氧化镁沉降体积的影响。结果表明:当所用改性剂为油酸钠、改性温度为80℃、改性时间为4 h、改性剂用量为氢氧化镁质量的3%时,改性效果较明显,沉降速度最慢。通过扫描电子显微镜表征改性后氢氧化镁,发现氢氧化镁的团聚现象明显减少,分散性得到很大改善。     

乡愁的影子

<正>一落笔,葳蕤的烟气便弥散开来。点,点,滴,滴……洇润在故乡这张素笺上,恣意浸渍痕迹里显现出来的,都是乡愁的影子。一晨起,对镜梳妆,梳头,瞧见两边分开一丝不苟的头发,不觉莞尔。你是无论如何也不知道缘由的。脚踩门框,膝抵门楣,手拉门栓,"咔——咔咔",然后是"叽——"的一声,接着,整个秋李郢是"叽"     

品种与种植地对麻疯树生长差异的影响

将麻疯树FD-8号和云热1号种植于菜地、坡耕地和坡荒地,研究不同品种与种植地麻疯树生长差异。结果表明,品种间或种植地间麻疯树生长均表现出较大差异。其中FD-8号苗木生长优势较云热1号的明显;种植于菜地的麻疯树植株生长优势较种植于坡耕地和坡荒地的明显;FD-8号种植于菜地表现出速生和挂果早的生长优势。可见,麻疯树生长性状与品种和种植地密切相关。     

The role of UV-B on the degradation of PCDD/Fs and PAHs sorbed on surfaces of spruce (Picea abies (L.) Karst.) needles

Photodegradation of polychlorinated dibenzo-p-dioxins and dibenzofurans (PCDD/Fs) and polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) sorbed on surfaces of spruce (Picea abies (L.) Karst.) needles was investigated. The role of sunlight and, in particular, the role of short wavelength UV-B radiation were studied in a sun simulator under controlled environmental conditions. The photodegradation of PCDD/Fs and PAHs follows first-order kinetics. Simulated sunlight containing UV-B induced two phases of photodegradation kinetics for PCDD/Fs, whereas no distinct phases of the kinetics were observed for PAHs. UV-B radiation plays a much more important role on the photodegradation for PCDD/Fs than that for PAHs. Direct photolysis dominates the photodegradation of PCDD/Fs and PAHs.     

两类幂图的强边染色

图的强边染色是在正常边染色的基础上,要求每个色类的导出图是一个匹配。本文通过构造法,研究了路的幂图的强边色数至多是9,圈的幂图的强边色数至多是14。     

精准扶贫法治化与贫困地区群众法治素养的提升——以四川省南充市嘉陵区为例

在全面建成小康社会和全面推进依法治国的背景之下,加强精准扶贫的法治化建设需要贫困地区群众具备良好的法治素养。但是,由于受到传统和现实等诸多因素的影响,目前我国贫困地区群众的法治素养仍有待提高,存在着法治认知水平不高、运用法治思维的能力不足、法治意识淡薄、法治信仰缺失等问题,极大地影响着精准扶贫的法治化进程,制约着精准扶贫的最终成效。鉴于此,当前必须通过加快贫困地区的经济发展、优化贫困地区的法治环境、发展贫困地区的教育事业、完善贫困地区的法治宣传教育等措施来提升贫困地区群众的法治素养,为贫困地区群众同步进入全面小康社会营造良好的法治氛围。