归经组方对肾纤维化大鼠肾组织中Wnt信号表达的影响

目的:观察归肾经药物组方对肾纤维化大鼠疗效及肾组织Wnt信号表达的影响。方法:用5/6肾切除方法建立大鼠肾纤维化模型。经验方肾衰Ⅰ号为肾衰Ⅰ号组,以治则相同不归肾经药物组方为不归经组,以治则相同且归肾经的组方为归经组,同时设模型组,假手术组。连续治疗2月后,采血检测肾功能及血色素、取肾组织Masson染色、Western blot法检测肾组织Wnt2、GSK-3β、P-GSK-3β、β-catenin、α-SMA、β-actin蛋白表达,免疫组化法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在肾组织表达。结果:成功造模并治疗2个月后,与假手术组比较,模型组体质量、血浆总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(Albumin,Alb)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)含量显著降低(P<0.01),血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(creatinine,Cr)含量显著增高(P<0.01),Wnt2、P-GSK-3β、β-catenin、α-SMA及TGF-β1蛋白表达显著增高(P=0.000),GSK-3β活性显著降低(P=0.000),胶原含量显著增高(Masson染色)(P<0.05);与模型组比较,各治疗组体质量显著增高(P<0.01),BUN、Cr显著降低(P<0.01),Wnt2、P-GSK-3β、β-catenin、α-SMA、TGF-β1表达及胶原含量显著降低(P<0.05)。3个治疗组间相比较,归经组Hb、Tp含量及GSK-3β表达较肾衰Ⅰ号组及不归经组显著升高P<0.01),P-GSK-3β表达显著降低(P<0.01);不归经组α-SMA、β-catenin表达明显高于其他两组(P<0.05)。3个治疗组间体质量、ALB、BUN、Cr含量及Wnt2表达之间没有明显差异,归经组与肾衰Ⅰ号之间α-SMA、β-catenin表达亦没有明显差异。结论:三组方均能通过Wnt信号通路减轻模型动物肾纤维化程度,且经验方与归肾经处方优于不归肾经方。     

紫朱软膏对糖尿病足溃疡Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

目的:观察糖尿病足溃疡患者中Wnt/β-catenin信号通路基因表达的变化及紫朱软膏外用对此信号通路的影响。方法:观察糖尿病足溃疡患者60例外用紫朱软膏后创面愈合情况,治疗前后肝肾功能等安全性评价及创面组织中Wnt/β-catenin信号通路相关指标基因的表达变化。结果:紫朱软膏能促进糖尿病足溃疡的愈合,且未对患者肝、肾功能造成影响;与治疗前比较,紫朱软膏能上调糖尿病足溃疡患者创面组织中β-catenin、c-Myc、Rspo-3等基因表达,下调GSK-3β表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:紫朱软膏可能通过激活表达低下的Wnt/β-catenin信号通路促进糖尿病足溃疡愈合。     

阿仑膦酸钠干预膝关节炎大鼠Wnt通路及Ⅱ型胶原蛋白的实验机制研究

目的:观察阿仑膦酸钠(ALN)对IL-1β体外诱导培养的大鼠膝关节软骨细胞的影响,探讨ALN治疗膝关节炎的机制。方法:取4周龄SPF级SD大鼠15只关节软骨细胞原代培养并传至第3代,将第3代软骨细胞平均分为3组:空白对照组(SD CON)软骨细胞用常规DMEM完全培养液培养5 d;IL-1β诱导组(SD IL-1β)软骨细胞用10 ng/mL重组人IL-1β培养2 d后更换为常规DMEM完全培养液培养3 d;IL-1β+ALN组(SD IL-1β+ALN)软骨细胞用10 ng/mL重组人IL-1β培养2 d后更换为浓度为1×10-6mol/L的ALN培养3 d。培养后取细胞进行比较观察,检测各组中CollagenⅡ、Wnt3a、Wnt5a及Wnt16的变化。结果:CollagenⅡ、Wnt3a、Wnt5a和Wnt16在软骨细胞中均有表达,经ALN处理后软骨细胞中Ⅱ型胶原蛋白增加。Wnt3a在空白对照组和IL-1β诱导组表达比较,差异无统计学意义(P>0.05),在IL-1β+ALN组中表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);Wnt5a在IL-1β诱导组中的表达量明显高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ALN处理后,表达量降低,但仍高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Wnt16在IL-1β诱导组中表达量明显低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ALN处理后表达量升高,但仍低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ALN可能通过Wnt信号通路提高Wnt3a、Wnt16的表达与降低Wnt5a的表达,间接影响RANKL/RANK/OPG信号系统,并影响下游MMP-13、β-catenin及CollagenⅡ蛋白的表达来共同调节破骨细胞和成骨细胞的动态平衡,从而保护软骨和软骨下骨。     

经典Wnt信号途径在肺脏上皮细胞抗结核分枝杆菌感染中的作用

目的:肺脏上皮细胞在抵抗外源微生物入侵中发挥着重要保护作用,最近研究揭示,在器官组织发育中发挥调控作用的经典Wnt信号具有免疫调节功能。因此,有必要研究肺脏上皮细胞A549中Wnt信号经典途径在抗结核分枝杆菌(Mtb)感染中的免疫调节作用。方法:用牛结核分枝杆菌卡介苗(BCG)刺激转入Wnt信号报告基因质粒BATflash的A549细胞,利用双荧光素酶报告系统、Western blot和ELISA方法分析细胞中Wnt信号经典途径主要相关信号因子和免疫反应炎症因子的表达变化。结果:BCG感染A549细胞后抑制了Wnt信号报告荧光素酶的活性,Western blot结果表明,随着细胞浆内磷酸化β-catenin含量增加,Wnt信号的抑制基因GSK3β和Axin2表达上调,而细胞核中的效应子β-catenin基因活性组分和下游转录因子TCF4与Lef-1的表达下调;BCG感染过表达β-catenin的细胞时导致IL-6、NF-κB、MyD88和TRAF6蛋白表达下调,但不影响TNF-α的表达。结论:肺脏上皮细胞在抗结核分枝杆菌感染过程中通过下调Wnt信号活性而抑制细胞中的MyD88/TRAF6/NF-κB信号通路来降低免疫反应以保护宿主细胞免受感染造成的免疫损伤。     

长链非编码RNA PTV1通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制甲状腺癌细胞的增殖、侵袭及诱导凋亡

目的探究长链非编码RNA PTV1在甲状腺癌细胞株中的表达情况及其调控PTC细胞增殖、凋亡及侵袭过程中的作用机制。方法qRT-PCR检测细胞中PTV1的表达情况；将PTC细胞随机分为3组，分别转染PTV1-siRNA沉默载体（PTV1-siRNA组）、PTV1-siRNA空表达载体（siNC组）及空白对照PBS（Blank组）。采用CCK-8法、流式细胞术、Transwell法检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力；利用Western Blot法检测Wnt信号通路相关蛋白β-catenin、c-myc和cyclin D1的表达水平。结果与正常甲状腺细胞株HT-ori3相比，人甲状腺癌细胞株IHH-4（PTC）、FTC-133、8505C的PTV1表达水平明显增加（P<0.05）；沉默PTV1表达可明显抑制PTC细胞的增殖和侵袭能力，诱导细胞凋亡、降低β-catenin、c-myc和cyclin D1的蛋白表达水平（P<0.05）。结论LncRNA PTV1在甲状腺癌细胞中高表达；沉默LncRNA PTV1可抑制PTC细胞的增殖和侵袭，促进凋亡，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的表达有关。     

异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达

目的探讨异丙肾上腺素(ISO)所致小鼠心肌肥厚(hypertrophy)中核仁素的表达情况。方法采用体重18～22 g小鼠,随机分为3组(n=10):生理盐水组、小剂量异丙肾上腺素组(ISO每天100 mg/kg)、大剂量异丙肾上腺素组(ISO每天150 mg/kg),连续注药1周后,称体重(BW),从心脏取血测定MDA、LDH和CK含量,取全心称重(HW);光镜下观察心肌病理形态学改变;免疫组织化学法及Western-blot检测核仁素的表达情况。结果 (1)小剂量异丙肾上腺素组小鼠心肌纤维增粗,心肌细胞呈束状分布,排列较整齐,而大剂量异丙肾上腺素组心肌纤维增粗,排列紊乱,纤维组织增生,染色不均匀。与生理盐水组相比,小剂量异丙肾上腺素组、大剂量异丙肾上腺素组小鼠心脏重量参数HW/BW显著增加(P<0.05);(2)与生理盐水组相比,大、小剂量异丙肾上腺素组小鼠血清MDA、LDH、CK含量升高(P<0.05);(3)与生理盐水组相比,小剂量异丙肾上腺素组小鼠心肌核仁素蛋白表达上调(P<0.05),而大剂量异丙肾上腺素组小鼠心肌核仁素的表达无明显改变。结论小剂量异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达上调,而大剂量异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达改变不明显。     

经典Wnt信号通路与原发性肝癌的研究进展

自1982年Roel Nusse发现Wnt基因后,Wnt信号通路的相关蛋白及各分子间的相互作用机制逐渐被阐明。有研究[1]发现,Wnt信号通路主要包括3种：1）经典wnt通路,亦称Wnt/β-catenin通路;2）平面细胞极性通路（the planar cell polarity,PCP）,即Wnt/PCP通路;3）Wnt/钙离子（Wnt/Ca2＋）通路。     

出生前PM_(2.5)暴露对成年期小鼠肝脏纤维化发生的影响及机制研究

目的:探讨出生前PM_(2.5)暴露对成年小鼠肝脏纤维化的影响及其相关机制。方法:20只未经产的4周龄的SPF级C57BL/6J雌性小鼠随机分为对照组(n=10)和PM_(2.5)暴露组(n=10),暴露7周之后,按照雌雄2︰1的比例合笼并继续暴露至子鼠出生,出生后的雄性子鼠饲养至32周。处死后,观察出生前PM_(2.5)暴露对小鼠体重、生化指标(TC、TG、AST、ALT)、肝脏组织纤维化及相关基因表达(TGF-β1、α-SMA、CollagenⅢ)、氧化应激(SOD活性、MAD含量)和炎性指标(TLR4和TNF-α)基因表达的影响。结果:PM_(2.5)暴露组小鼠出生体重低于对照组,成年期体重、肝脏组织TG含量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组血清TC、TG、AST、ALT水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);PM_(2.5)暴露组小鼠肝脏组织中TGF-β1、α-SMA、CollagenⅢ的mRNA表达水平和蛋白表达灰度值均高于对照组(P<0.05);出生前PM_(2.5)暴露组小鼠肝脏SOD活性低于对照组,肝脏组织MAD含量、TLR4和TNF-α的mRNA表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:出生前PM_(2.5)暴露显著增加小鼠成年期肝脏脂肪酸和胶原蛋白的蓄积,降低肝组织中SOD活性、增加MAD含量及炎性基因的水平,并上调TGF-β1、α-SMA和CollagenⅢ基因的表达,可通过激活TGF-β1信号通路诱导肝纤维化的发生。     

Wnt/β-catenin信号通路介导糖基化终未产物对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的探讨糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增生及成骨分化的影响及可能机制。方法采用全骨髓法分离培养4周龄SD大鼠的BMSCs。将BMSCs随机分为成骨诱导液、BSA组、AGEs3组,Western blot法检测AGEs对BMSCs成骨分化过程中β-catenin、OSX、RUNX2、RAGE (AGE受体)蛋白表达量的影响,茜素红染色观察AGEs对BMSCs成骨分化过程中矿化的影响。抑制RAGE后实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western blot法再次测定上述指标水平。结果 0. 2 g/L AGEs作用于体外培养SD大鼠BMSCs,上调RAGE蛋白表达(0. 88±0. 04),β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达降低(分别为0. 21±0. 02,0. 25±0. 03和0. 21±0. 01,P<0. 05)。RAGE中和抗体阻断RAGE作用后,AGE+RAGE中和抗体组RAGE蛋白表达下调(0. 30±0. 03),β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达增高(0. 90±0. 02,0. 84±0. 03和0. 88±0. 02,P<0. 05)。结论 AGEs通过Wnt/β-catenin信号通路抑制BMSCs成骨分化。     

住宅楼安装中央空调的加固案例分析

文章通过两处住宅用房安装中央空调的事例,现场查勘、验算与鉴定,证实了在住宅用房的混凝土梁上钻孔洞安装中央空调管线的做法,影响了房屋结构的安全,同时给出了加固处理意见,提出了个人的几点看法.     

测量标志普查资料汇集技术处理

为了适应新的形势发展需要,安徽省国土资源厅已启动新一轮测量标志普查工作。与过去不同,此次普查在资料汇集、调查人员组织、调查资料归档与调用等方面做了较大变革,文章简明阐述了变革后的测量标志普查资料汇集技术处理的过程。     

Regularities of development of settling of models of deep footings

Conclusions 1. The effect of relative penetration on the change in magnitude of settlement is substantial. With the same specific pressure on the base the settlement of the model decreases as the relative penetration increases.2. Published data on values of unit friction forces along lateral surfaces of deep foundations were confirmed. The maximum value of resistance along the side surface was 2 tons/m².3. It was established that the realtionship between the settlement of the model and its diameter is nonlinear. This is of great importance in working out a method for calculating foundations of deep footings from deformations especially if one considers that in this case the foundation carries substantial pressures and deforms under conditions of strongly developed shear regions.Translated from Osnovaniya, Fundamenty i Mekhanika Gruntov, No. 6, pp. 11–12, November–December, 1971.     

自动扶梯逆行故障成因与分析

对自动扶梯突然反转而导致逆行故障的类别和成因进行了分析,讨论了逆行速度及症状,分析了逆行概率及风险,并针对逆行提出了一些对策。     

浅析步行街的建筑工效学——上海市吴江路步行街建筑工效学调研

从建筑工效学的角度对上海市吴江路休闲步行街进行了调查研究，根据调查结果，分析了其在建筑工效学上的一些特点与不足之处并进行了探讨，以期对步行街的建筑工效学设计提供准确的参考。     

环境的共鸣--大连水产学院图书馆的设计

本文通过对大连水产学院图书馆的介绍,向人们展示了建筑与环境之间相辅相成,共同作用,引起环境共鸣的原则方法.     

住宅的多样性——日本集合住宅的借鉴

以西安目前住宅市场发展的现状及其存在的弊端为例 ,说明我国目前住宅需求的多样化和设计手法的单一化之间的矛盾 ,论述了与我国有着相似文化背景的日本在解决不同住宅需求时采用形式多样、功能各异的集合住宅的理念 .试图以此借鉴 ,使我国建筑设计界了解日本集合住宅的发展演变过程 ,吸取他们的经验 ,为我们在住宅多样化研究和设计时提供一种不同的思路和方法 .     

混凝土碳化深度的灰色预测

混凝土碳化是导致钢筋混凝土结构耐久性损伤的主要原因之一。为了预测混凝土碳化深度,本文建议采用一种基于灰色系统理论的预测模型,该模型可以根据已知的混凝土碳化序列,较精确地预测未来时刻的碳化深度。文章最后以实例说明了该模型的应用。