COLPH3、PI3K/Akt/mTOR信号通路与胃癌发生、发展关系

胃癌的发生、发展过程较为复杂,在此过程中不但会涉及基因突变,还会涉及细胞中信传导通路改变。细胞中重要的一种信号传导通路为磷脂肌醇3-激酶(phosphoinositide-3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路,参与了胃癌侵袭与转移过程,可对多种刺激作用诱发的机体胃癌细胞凋亡进行有效抑制,对血管的形成与细胞的周期进展产生促进作用。高尔基磷酸化蛋白-3(Golgi phosphoprotein-3,GOLPH3)基因及其表达产物在胃癌的发生、发展过程中起着重要作用,可促进肿瘤细胞的生长与增殖。本文主要对COLPH3、PI3K/Akt/mTOR信号通路与胃癌发生、发展关系进行探究,旨在为临床治疗提供有效的参考价值。     

体外RNA干扰下调DEPTOR表达对人多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡能力的影响

目的:研究探讨应用RNA干扰技术构建人DEPTOR基因的shRNA慢病毒载体,鉴定在多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞上的沉默效果,并评价DEPTOR对人多发性骨髓瘤细胞增殖和凋亡能力的影响。方法:设计4个DEPTOR siRNA序列,化学合成后退火形成双链,克隆到酶切的hU6-MCS-CMV-EGFP(GV115)-shRNA慢病毒载体。重组质粒经PCR测序鉴定后,脂质体介导下转染293T细胞,Western blot检测DEPTOR的表达,筛选出干扰效果最佳的GV115-shRNA。将筛选的GV115-shRNA与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生成病毒,收集病毒上清并浓缩,测定浓度。将病毒颗粒感染多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞,应用Real-time PCR方法从mRNA水平及Western blot方法从蛋白水平检测DEPTOR的沉默效果。运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测骨髓瘤细胞增殖能力的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡;用Western blot分析cleaved caspase-3和cleaved PARP的变化。结果:构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,成功筛选出最有效抑制DEPTOR表达的shRNA2序列,包装病毒后滴度达到1×109TU/ml。慢病毒感染RPMI-8226细胞后可表达EGFP,Real-time PCR和Western blot检测DEPTOR的表达明显下降。下调DEPTOR基因可显著减慢骨髓瘤细胞的生长速度(P<0.05),肿瘤细胞的凋亡率上升(P<0.01)。DEPTOR shRNA上调cleaved caspase-3、cleaved PARP和Bax表达,下调Bcl-2及PI3K/Akt信号通路的表达(P<0.01)。结论:成功构建了DEPTOR shRNA重组慢病毒载体,其转染多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞后显著抑制了DEPTOR的表达。DEPTOR shRNA可以有效地诱导骨髓瘤细胞的凋亡,并抑制肿瘤细胞的增殖。PI3K/Akt信号通路可能参与了其凋亡过程。     

扶正消癌合剂对人肺腺癌A549细胞作用研究

目的:研究扶正消癌合剂对肺腺癌A549细胞增殖的影响及PI3K/Akt信号通路的作用机制。方法:制备大鼠含药血清,采用CCK8法对A549进行观察,了解其增殖抑制情况,了解其对细胞周期的影响,以及如何造成细胞凋亡。利用Western-Blot法检测含药血清对PI3K,Akt及P-Akt蛋白表达产生的作用。结果:扶正消癌合剂能抑制A549细胞增殖,呈现时间-浓度依赖关系,与顺铂呈正相关,48 h、72 h、96 h的抑制率分别是28.26%、39.62%和37.89%;扶正消癌合剂可以促进A549细胞发生变化,出现凋亡的情况,并且随着浓度的增高而有所增加,镜下观察G2/M期细胞明显增多,所占的比例也相应增加,相对于另一组来说差异有统计学意义(P<0.05)。其在诱导过程中,随着细胞逐渐凋亡,下调PI3K、P-Akt蛋白表达。结论:扶正消癌合剂可以抑制人肺腺癌细胞A549增殖,可能与抑制PI3K/Akt信号通路中PI3K、P-Akt蛋白表达有关。     

mTOR依赖的自噬通路与神经变性疾病

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是一种保守的蛋白激酶。当真核细胞缺乏营养时,可以通过抑制mTOR来诱导自噬。作为细胞生长的重要调节因素,当营养条件、生长环境和应激状况发生变化时,mTOR在协调细胞生长与自噬的平衡过程中发挥关键作用,是调节细胞自噬的一个关键因素,但是其潜在的机制尚不十分清楚。mTOR活性主要受PI3K/Akt和LKB1/AMPK信号通路支配,并且通过调节自噬相关基因来调控自噬。在神经变性疾病的不同发病阶段,mTOR活性的调节至关重要。本文综述了mTOR调控自噬的相关机制及其对帕金森氏病、阿尔茨海默病和亨廷顿病的重要影响。     

PI3K/Akt信号通路在骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化调控中的作用

目的研究PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖及分化的影响。方法采用贴壁法体外分离人骨髓间充质干细胞(hMSCs),加入PI3K抑制剂LY294002(1、10μmol/L),应用MTT法测定细胞增殖,常规成骨诱导分化培养3或7 d,采用碱性磷酸酶(ALP)染色观察成骨分化水平,化学比色法测定ALP活性,茜素红染色后观察矿化钙结节数量并定量分析,Western blot检测磷酸化Akt蛋白表达,应用Realtime-PCR检测各组细胞BMP2、Runx2、OPN及Osterix等成骨分化标记物的基因表达水平。结果从24至72 h,LY294002对hMSCs增殖均产生显著抑制,随时间推延,可见抑制增殖效果增强(P<0.05)。ALP染色和定量测定提示10μmol/L的ALP活性最强,在不同时间显著高于对照组和1μmol/L组(P<0.05)。成骨诱导培养3和7 d,1、10μmol/L组矿化量都显著高于对照组(P<0.05)。10μmol/L组矿化量在成骨诱导7 d也显著高于1μmol/L组(P<0.05)。Western blot检测结果证实成骨诱导可激活Akt磷酸化蛋白表达,但LY294002可抑制该蛋白磷酸化。成骨诱导分化7 d,1、10μmol/L均明显促进BMP2、Runx2、OPN、Osterix 4种基因mRNA表达(均P<0.05)。结论 PI3K/Akt信号通路参与hMSCs增殖和分化过程。成骨分化伴随下游Akt蛋白表达。PI3K抑制剂可抑制hMSCs增殖,但同时促进其向成骨分化和矿化。     

心肌细胞凋亡与PI3K/Akt信号途径表达及其调控机制的研究

磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B（phosphatidylinositol3-kinase／protein kinase B，PI3K／Akt）信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一，通过影响下游多种效应分子的活化状态，在细胞内发挥着抗凋亡、促细胞生存等功能。目前有关PI3K／Akt信号途径的功能与调控的研究大多以肿瘤细胞为对象，而对于以心肌细胞为研究对象的PI3K／Akt信号通路的相关报道尚不多见，且主要集中在体外培养的心肌细胞或在体成熟心肌在缺氧、缺血等诱导条件下该信号通路表达及调控方面的研究，本文就此做一综述，期待为探寻PI3K／Akt信号通路在在体未成熟心肌损害方面的作用及其分子机理提供参考，从而为临床小儿心脏疾病的有效防治提供新思路及理论依据。     

rhEPO通过调节PI3K/AKT信号通路改善大鼠脑出血后神经元损伤

目的研究重组人促红细胞生成素(rhEPO)是否可以通过调节PI3K/AKT信号通路来改善大鼠脑出血后的神经元损伤。方法 SD大鼠构建脑出血(ICH)模型,并给予rhEPO药物治疗,采用TUNEL法和试剂盒检测神经细胞凋亡及凋亡蛋白Caspase 9表达;采用Real-Time PCR法和Western blot法检测PI3K、AKT的基因和蛋白磷酸化水平的表达。结果与ICH非治疗组相比,rhEPO治疗组中神经元凋亡细胞数和Caspase 9活性表达明显降低(P<0.05);rhEPO治疗组PI3K和AKT的蛋白磷酸化水平表达和mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论重组人促红细胞生成素rhEPO具有神经保护作用,可以通过调节PI3K/AKT信号来改善大鼠脑出血后的神经元损伤。     

紫草素对离体子宫内膜癌细胞株增殖及凋亡信号通路PI3K/PKB的影响

目的:探讨紫草素对离体子宫内膜癌细胞株增殖及凋亡信号通路PI3K/PKB的影响。方法:将子宫内膜癌HEC-1B细胞置于培养液中培养,选用对数期生长细胞进行实验。分别加入浓度0.4 mg·L~(-1)、0.8 mg·L~(-1)、1.2 mg·L~(-1)的含紫草素的培养液,作为紫草素低剂量组、中剂量组、高剂量组,未加任何药为对照组,观察并比较各组细胞的增殖能力、Akt磷酸化水平、Bcl-2及Bax水平、细胞凋亡率。结果:与对照组比较,紫草素中剂量组以及紫草素高剂量组的OD值、Bax水平及细胞凋亡率较高,p-Akt、Bcl-2水平较低,差异均无统计学意义(P<0.05);紫草素中剂量组与紫草素高剂量组的OD值、p-Akt水平、Bax及Bcl-2水平、细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:紫草素能够通过调节凋亡信号通路PI3K/PKB,抑制离体子宫内膜癌细胞株的增殖,促进其凋亡。     

PEITC通过抑制结肠癌细胞PI3K/NF-κB活性而抑制MMP-9表达

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10、30、50μmol/L PEITC作用24 h,划痕愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响。RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测MMP-9蛋白表达和蛋白激酶B(Akt)磷酸化。荧光素酶报告基因分析核转录因子κB(NF-κB)和MMP-9的活性。结果划痕愈合实验和Transwell小室实验结果显示,PEITC能在不影响细胞活性的条件下对SW480细胞侵袭和迁移具有一定抑制作用。同时,Western blot和RT-PCR结果证实PEITC能抑制MMP-9蛋白及mRNA表达。PEITC能抑制Akt磷酸化以及NF-κB的转录活性。PI3K抑制剂LY294002处理后,NF-κB-luc活性以及MMP-9蛋白表达显著降低。此外,不同浓度PEITC处理能显著抑制MMP-9的启动子活性。结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/NF-κB通路抑制MMP-9表达而发挥作用。     

PTEN/NF-κB/Caspase信号通路对K562/ADM细胞阿霉素耐药逆转机制的研究

目的:探讨PTEN/Akt/NF-κB信号通路对阿霉素耐药慢性粒细胞白血病细胞系K562/ADM细胞耐药逆转的分子作用机制。方法:将携带有野生型PTEN基因及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)或空载体(Ad-GFP)腺病毒转染K562/ADM细胞,在转染3d内联合应用不同浓度阿霉素(ADM),观察PTEN基因对阿霉素的协同抑制作用,根据IC50计算药物逆转倍数。通过MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测转染效率、细胞凋亡率,荧光定量PCR(FQ-PCR)检测PTEN、NF-κB、I-κB、P53基因水平变化,Western blot检测PTEN、Akt、p-Akt、P65蛋白质水平变化。结果:Ad-PTEN-GFP转染与阿霉素联合作用后,K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性增加,细胞增殖明显受抑,凋亡率明显高于Ad-GFP与阿霉素联合作用组,耐药逆转倍数为3.8倍。与Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP转染K562/ADM细胞3d后PTEN蛋白表达明显增加,p-Akt与P65蛋白表达明显下调,NF-κB mRNA表达水平下调,I-κB mRNA无明显改变,P53 mRNA表达轻度升高、Caspase-3/7活性增强。PTEN mRNA表达水平与NF-κB mRNA表达水平负相关(r=-0.968,P<0.05),NF-κB蛋白活性与Caspase-3/7活性负相关(r=-0.986,P<0.05)。结论:野生型PTEN可能通过抑制PI3K/NF-κB/Caspase信号传导通路,逆转K562/ADM细胞的多药耐药。     

抗胶质瘤Ⅰ号方对脑胶质瘤细胞侵袭性的影响

目的:探讨抗胶质瘤Ⅰ号对胶质瘤细胞侵袭性降低的作用及其与PI3K/PKB信号传导通路之间的关系。方法:MTT法检测抗胶质瘤Ⅰ号处理培养的C6胶质瘤细胞的抑制率,免疫印迹法检测肿瘤细胞内PI3K和PKB表达水平,最后,利用结晶紫染色法检测Transwell下室面的胶质瘤细胞数。结果:抗胶质瘤Ⅰ号可以抑制PI3K和PKB蛋白表达水平,抗胶质瘤Ⅰ号作用0.5 h时PI3K蛋白表达水平最低为(25.1±3.1),作用1 h时PKB蛋白表达水平最低为(25.1±3.8),与对照组的(99.1±1.6)、(91.2±3.5)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。而抗胶质瘤Ⅰ号作用3 h时对胶质瘤细胞的抑制程度最大,抑制率为(91.2±5.7)%,与对照组的(68.0±5.2)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。且此时Transwell下室面的细胞数最少,为(1.4±0.4)×106个,与对照组的(35.6±2.7)×106个比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抗胶质瘤Ⅰ号可能是通过抑制PI3K/PKB而抑制胶质瘤细胞的增殖,从而引起胶质瘤细胞侵袭性的降低。     

同型半胱氨酸对乳鼠心肌细胞自噬水平及mTOR信号通路的影响

高同型半胱氨酸血症(HHcy)是心血管疾病的一个独立的危险因素,但其对心肌的损伤机制尚不清楚。细胞自噬是近几年研究比较热门的细胞自身保护机制,有研究发现同型半胱氨酸(Hcy)可抑制神经细胞的自噬水平,但其对心肌细胞自噬水平的作用尚不清楚。本研究利用体外细胞实验初步探讨Hcy对心肌细胞自噬水平及自噬调节信号通路mTOR通路的影响。通过原代乳鼠心肌细胞体外培养,给予Hcy共孵育刺激,利用western blot检测心肌细胞自噬相关蛋白LC3表达水平的改变以及mTOR信号通路蛋白磷酸化水平的改变;给予LC3双标签腺病毒Ad-GFP-RFP-LC3感染细胞24 h后,进行Hcy刺激,利用激光共聚焦显微镜观察自噬流的改变;对心肌细胞进行Annexin V/PI双标记染色,利用流式细胞仪计数检测细胞凋亡情况。结果发现,给予Hcy刺激后,乳鼠心肌细胞凋亡率升高,自噬水平降低,自噬调节信号通路mTOR及其下游p70 S6K磷酸化水平升高。这些结果提示Hcy可降低心肌细胞自噬水平,mTOR信号通路可能参与其中。     

病毒唑对白血病的治疗机制研究

为了探索治疗慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)的新方法,研究了病毒唑单药及与伊马替尼联合治疗CML的效果及机制。结果显示,病毒唑、伊马替尼单药均可以抑制K562细胞株增殖,2种药对K562细胞株的IC50值分别为92.2、0.145μmol/L,与20μmol/L的病毒唑联合使伊马替尼的IC50值下降至0.077μmol/L;病毒唑单药可以下调K562细胞株和CML患者原代细胞mTOR/4EBP1/eIF4E信号通路关键蛋白mTOR、4EBP1、eIF4E的磷酸化水平,与伊马替尼联合,上述信号通路关键蛋白的磷酸化水平下调更明显;病毒唑单药可增加K562细胞株中eIF4E与4EBP1的结合,减少与eIF4G的结合,抑制eIF4F翻译起始复合物的形成,与伊马替尼联合后上述作用更强,表现出协同抑制eIF4F组装的作用。这些体外实验提示病毒唑单药具有抗白血病作用,而且能增强伊马替尼的抗CML作用。     

山核桃叶总黄酮诱导人多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡作用研究

目的研究山核桃叶总黄酮诱导人多发性骨髓瘤(U266)细胞株凋亡的作用及其作用机制。方法体外培养U266细胞,CCK-8比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术定量分析细胞凋亡程度,Western Blot分析不同浓度总黄酮对U266细胞蛋白激酶B(Akt)和p-Akt蛋白表达的影响。结果山核桃叶总黄酮以浓度依赖性方式显著诱导U266细胞株凋亡并抑制p-Akt蛋白的表达。结论山核桃叶总黄酮诱导U266细胞凋亡的作用与其抑制Akt磷酸化相关。     

COX-2活化PI3K/Akt信号通路促结直肠癌肝转移的实验研究

目的:探讨COX-2促进结直肠癌肝转移效果及其机制,从而为结直肠癌肝转移防治提供依据。方法:建立COX-2低表达和高表达CT26结肠癌细胞株,通过注射0.2 m L的对数生长期细胞浓度为1×10~6个/mL的正常CT26结肠癌细胞悬液(A组,n=20)、COX-2高表达的CT26结肠癌细胞悬液(B组,n=20)以及COX-2低表达的结肠癌细胞悬液(C组,n=20)至脾脏制作小鼠结肠癌肝转移模型,检测比较三组小鼠移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt表达、移植瘤体积、肝脏肿瘤大小和数量以及生存期,并分析结直肠癌肝转移小鼠COX-2、PI3K、p-Akt表达的相互关系以及三者与其移植瘤体积、肝脏肿瘤大小和数量以及生存期的关系。结果:与A组比较,B组和C组移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt蛋白检测阳性率均升高,移植瘤体积降低,肝脏肿瘤大小和数量降低,生存期延长(P<0.05)。与B组比较,C组移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt蛋白检测阳性率均升高,移植瘤体积降低,肝脏肿瘤大小和数量降低,生存期延长(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,结直肠癌肝转移小鼠移植瘤COX-2蛋白表达与其PI3K、p-Akt蛋白表达呈正相关(P<0.05),且其移植瘤COX-2、PI3K、p-Akt与其移植瘤体积、肝脏肿瘤大小和数量均呈正相关(P<0.05),与其生存期均呈负相关(P<0.05)。结论:COX-2可促结直肠癌肝转移和影响其预后,在此过程中可能涉及其活化PI3K/Akt信号通路作用。     

磷酸腺苷依赖的蛋白激酶在自噬通路中作用的研究进展

近年来,磷酸腺苷依赖的蛋白激酶（AMPK、5′-AMP-activated protein kinase）在细胞自噬（autophagy）中的研究已成为热点之一。自噬是一个多步骤复杂的过程并对能量敏感,AMPK 作为能量感受器对营养敏感且在自噬的过程中发挥关键酶的作用。本文主要介绍了细胞自噬以及 AMPK 通过 mTOR（mammalian target of rapamycin）、p53、PI3K 3条通路影响自噬通路的过程。     

海藻多糖通过下调肝癌细胞Hep3B糖酵解途径抑制细胞增殖和迁移

目的:探讨海藻多糖(algal polysaccharides,AP)对肝癌细胞Hep3B的增殖和迁移的影响及其可能的作用机制,为治疗肝癌提供新的思路。方法:(1)比较正常细胞与癌细胞中糖酵解(embden-meyerhof-parnas,EMP)途径的表达差异,用紫外分光光度计比色法检测EMP限速酶酶活力:己糖激酶(hexokinase,HK)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK),用乳酸测定试剂盒测定EMP产物:乳酸。(2)AP处理Hep3B后,检测EMP表达水平变化。(3)AP处理细胞后,检测肝癌细胞Hep3B的增殖和迁移能力及对上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响,方法包括MTT、q PCR和Transwell小室实验。(4)MTT、Transwell和q PCR检测HK抑制剂3-溴丙酮酸(3-bromopyruvate,3-BrPA)对肝癌Hep3B细胞的活力和迁移能力及EMT的影响。(5)Western blot和相关试剂盒检测AP与3-BrPA分别处理细胞时,对EMP水平及Akt通路的影响。(6)AP联合3-BrPA处理Hep B3后,检测HK和Akt信号通路表达水平及细胞活力和迁移的变化。结果:(1)癌细胞(Hep3B、He La、SW480)EMP代谢水平均高于正常肝细胞(HL02),其中Hep3B差异最为显著。(2)AP能抑制Hep B细胞EMP代谢水平,且抑制程度随着AP浓度升高而升高,存在浓度依赖性。(3)AP可抑制肝癌细胞Hep3B的增殖和迁移,且抑制EMT的发生。AP浓度为200mg/ml,处理时间为48h时,生长抑制率达(55±2.8)%,细胞迁移数为对照组的(32±2.9)%;(4)3-BrPA可下调Hep3B细胞HK活性,并抑制细胞活力与迁移,且抑制EMT的发生。200μmol/L 3-BrPA作用细胞48h后,与对照组相比,细胞活性下降了(52±5.8)%(P<0.001),细胞迁移数下降了(48±6.1)%(P<0.01)。(5)AP和3-BrPA均下调EMP代谢水平,且抑制Akt信号通路。(6)AP与3-BrPA联合处理Hep3B后,HK表达下降,显著抑制Akt信号通路,细胞活性和迁移能力均较AP单用组显著下降(P<0.05)。结论:肝癌细胞Hep3B EMP代谢水平高于正常肝细胞,AP可下调Hep3B细胞EMP代谢水平,低EMP代谢水平可能通过下调EMT和Akt信号通路抑制Hep3B的增殖和迁移。当AP和3-BrPA联合应用时,抑制肝癌迁移和增殖效果更明显。     

姜黄素调节AKT/PI3K活性抑制人膀胱癌T24细胞的增殖和迁移

研究姜黄素对膀胱癌T24细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。培养膀胱癌T24细胞,然后采用不同浓度的姜黄素进行干预。使用CCK8法检测姜黄素处理后T24细胞的存活率,Transwell实验检测其侵袭力。采用western blot检测处理前后T24细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)和MMP9的表达水平以及蛋白激酶B(AKT)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)磷酸化。CCK8结果表明姜黄素能够以浓度和时间依懒性抑制T24细胞的增殖。Transwell结果显示姜黄素能降低膀胱癌T24细胞的迁移能力。姜黄素也能降低T24细胞p-AKT和p-PI3K磷酸化以及MMP2和MMP9蛋白的表达,并且呈浓度依赖性。以上结果表明姜黄素通过抑制AKT/PI3K信号通路降低MMP2和MMP9的表达,从而抑制膀胱癌T24细胞的增殖和迁移。     

有氧运动对慢性脑缺血小鼠的PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探讨有氧运动对慢性脑缺血小鼠干预效果及PI3K/Akt信号通路的影响。方法:参考Yoshizaki建立的小鼠慢性脑缺血模型,选择KM小鼠为实验动物,构建小鼠慢性脑缺血模型;应用神经行为学分析、尼氏染色、免疫组化实验技术,比较有氧运动对该模型的干预效果,探讨其神经保护作用的机制;建模成功后,将小鼠随机四组:SO组、M组、SW组、TM组。SW组:术后3~4天适应性游泳30分钟,继后每天递增10分钟,逐渐延长至60分钟,持续6周,每周休息1天。TM组:术后第1周进行3次适应性跑台训练,每次60分钟,每周6次,持续6周。结论:两种有氧运动均能对本模型的脑细胞发挥抗损伤作用,且其干预效果TM组优于SW组;两种有氧运动可能均通过调节PI3K/Akt信号通路的表达,达到抑制细胞凋亡,发挥其抗脑组织伤害的作用。     

基于PTEN-PI3K-AKT信号通路探讨非小细胞肺癌Treg细胞上调的分子机制

目的:通过观察肺癌患者Treg细胞PTEN-PI3K-AKT信号通路分子的表达变化,探讨肺癌患者Treg细胞上调的作用机制。方法:选择30例非小细胞肺癌为研究组,30例健康人作为对照组,采用流式细胞术检测各组人群外周血Treg细胞表达变化;运用免疫磁珠法分选外周血单个核细胞中Treg细胞,Western-blot、Real-time PCR技术检测Treg细胞PI3K、AKT、PTEN蛋白及PTEN mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA的表达情况。结果:研究组外周血Treg细胞占CD+4T细胞的比例(Treg/CD4=4.53%±1.85%)明显高于对照组(Treg/CD4=1.87%±0.93%),差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,研究组PI3K、AKT蛋白表达明显升高,PTEN表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,研究组PI3K mRNA、AKT mRNA表达明显升高,PTEN mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肺癌患者外周血Treg细胞水平明显升高,其机制可能与PTEN表达下调进而激活PI3K-AKT信号通路相关。