Re/99Tcm(CO)3-EPBI与Aβ(1～40)结合能力的测定及生物分布

为发展锝-99m标记的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)早期诊断显像药物,在荧光测定法基础上,建立了体外荧光法测定羰基铼配合物与Aβ_(1～40)淀粉样纤维结合的解离常数K_d的方法.同时,合成了配体2-(1-乙基苯并咪唑)吡啶(EPBI)及其铼的配合物Re(CO)_3Cl(EPBI),测定后者与体外缠结Aβ_(1～40)结合的解离常数Kd;采用直接标记法制备EPBI的[~(99)Tc~m(CO)_3]~+配合物,并研究配合物[~(99)Tc~m (CO)_3]~+-EPBI的理化性质及生物分布.结果表明,Re(CO)_3Cl(EPBI)与Aβ_(1～40)结合的解离常数K_d=13.3 μmol/L;正常小鼠体内生物分布研究表明,化合物[~(99)Tc~m (CO)_3]~+-EPBI的脑初始(2 min内)摄取值为(0.63±0.17)%ID/g(n=3),在脑内清除较快,120 min时,摄取值为(0.27±0.03)%ID/g(n=3).     

水溶液中新核心[99Tcm(CO)2(NO)]2+和[99Tcm(CO)2(NO)-L] (L=DTPA,EDTA,EHIDA)的制备

研究了水溶液中制备[99Tcm(CO)2(NO)-L](L=DTPA,EDTA,EHIDA)配合物的2种方法:(1) 由前体[99Tcm(CO)3-L]制备[99Tcm(CO)2(NO)-L];(2)由[99Tcm(CO)2(NO)(H2O)3]2+中间体制备[99Tcm(CO)2(NO)-L];并确定了最佳标记条件.TLC和HPLC结果表明,2种方法得到的配合物放化产率均在90%以上.初步建立了1套在水溶液中简单、高效制备新的[99Tcm(CO)2(NO)]2+类配合物的方法.+基团取代原三羰基锝配合物得到的[99Tcm (CO)2(NO)-L]配合物具有良好的体外稳定性,取代后的配合物脂溶性和电荷性质都发生了改变,为99Tcm放射性药物的研制开辟了新思路.     

99Tcm(CO)3-CNRGD的制备及生物学评价

合成了含异腈基团的多肽偶联物（CNRGD）,并用［⁹⁹Tc^m(CO)₃(H₂O)₃］⁺标记,得到具有与整合素α_vβ₃受体多结合位点的⁹⁹Tc^m(CO)₃-CNRGD,并对其进行了体内外生物学评价。结果表明,在优化的标记条件下,⁹⁹Tc^m(CO)₃-CNRGD的标记率达到77%,纯化后,标记物放射化学纯度大于96%。体外稳定性实验显示其具有很高的稳定性;脂水分配系数显示其具有较好的脂溶性。正常小鼠体内分布显示,⁹⁹Tc^m(CO)₃-CNRGD在血液中清除较快,主要通过肝肾代谢。荷MCF-7人乳腺癌裸鼠体内分布显示,注射1、4h后,标记物在肿瘤部位的摄取值达(2.38±0.37)%ID/g和(1.57±0.21)%ID/g,瘤/血比分别达0.71±0.09、1.15±0.15,表明该标记物在肿瘤细胞中有一定的摄取和较长的滞留时间。     

99Tcm标记右旋糖苷衍生物的制备及其生物分布

采用Isolink药盒制备了羰基锝[⁹⁹Tc^m(CO)₃（H₂O）₃]⁺,用制备的羰基锝标记右旋糖苷衍生物;将标记物由小鼠的后足脚垫皮下注射,分别于给药后1、4 h处死（处死前10 min注入专利蓝溶液）,取前哨淋巴结（Sentinel Lymph Node,SLN）、次级淋巴结（2LN）、注射点、肝、脾、血,分别测量其放射性计数,计算组织或器官的放射性摄取率,研究甘露糖基和右旋糖苷衍生物相对分子质量对小鼠淋巴结摄取及体内分布的影响。结果显示：当分子中不含甘露糖基时,SLN的摄取率很低,在注射点的摄取也相对较少,并且体内清除较快;而当分子中含有甘露糖基时,SLN的摄取率大幅提高,但在注射点的滞留也显著提高。以上结果表明,分子中的甘露糖基对淋巴结巨噬细胞表面受体具有亲和作用。另外,右旋糖苷衍生物相对分子质量的不同,也会造成不同的生物分布,相对分子质量较大的标记化合物,SLN提取更高,差异显著（P<0.005）;此外,标记物的注射剂量和注射体积也会对SLN的摄取产生较大影响。⁹⁹Tc^m标记的甘露糖基化右旋糖苷衍生物具有优良的淋巴结摄取及体内分布性质,作为潜在的SLN显像剂,值得进一步研究。     

99Tcm标记NGR及其在荷人HePG2肝癌裸鼠体内的生物分布及SPECT显像

用⁹⁹Tc^m标记了含有天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸（Asn-Gly-Arg）序列的血管靶向性短肽NGR,评价了标记物⁹⁹Tc^m-NGR的放化性质以及在荷HePG2肝癌模型裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。标记结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR的标记率>90%,放化纯度>95%。荷瘤裸鼠体内生物分布结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR在肾脏和肝脏的摄取率较高,注射后1 h肿瘤摄取达（2.52±0.62）%ID/g,最高达（7.26±2.71）%ID/g,12 h仍然达（3.93±1.93）%ID/g,但在竞争性抑制组中摄取率为（1.29±0.85）%ID/g。荷瘤裸鼠的SPECT显像结果显示,除肿瘤外,其他组织器官的放射性摄取随时间延长逐渐降低,肿瘤与肌肉组织的放射性攝取比（T/NT）4 h时最高,可达3.25。注射后1 h肿瘤可见,12 h时最为清晰。以上结果提示,⁹⁹Tc^m-NGR易于制备,具有良好的靶向性, 在肿瘤的诊疗中具有良好的研究前景。     

[99TcmN(PNP)]2+标记葡萄糖硫酮类衍生物混配配合物的研究

为研究新的99TcmN核心标记的心肌和肿瘤显像药物,选用自行合成的二硫化碳-葡萄糖(硫酮类)衍生物Ln(L1～L5)制备一系列带有葡萄糖衍生物基团的新型[99Tcm (DTC)(PNP)]+类配合物,经TLC和HPLC检测,配合物的放射化学纯度均大于90%.小鼠生物分布实验表明,99TcmN(PNP)Ln(L1～L5)系列配合物在正常小鼠体内初始的放射性摄取主要分布于心肌、肝、肺、肾等脏器,并且30 min内各脏器均可迅速清除.初步的荷EMT-6鼠生物分布实验显示,99TcmN(PNP)L2在肿瘤中放射性摄取不高,30 min时为(0.39±0.03)%ID/g,其它组织的放射性摄取与正常小鼠类似.     

123I和99Tcm标记的吲哚类σ2受体放射性示踪剂的设计、稳定化合物的合成及体外生物评价

设计了~(123)I和~(99)Tc~m标记的吲哚类σ_2受体肿瘤放射性示踪剂,合成了其稳定化合物 (Indole-I和Indole-MAMA-Re) 和标记前体(Indole-MAMA).体外受体结合分析结果表明,化合物Indole-I对σ1和σ_2受体的抑制常数K_i值分别为(0.574±0.355) μmol/L和(0.162±0.030) μmol/L(n=3),Indole-MAMA-Re对σ1和σ_2受体的抑制常数K_i值分别为(3.75±2.22) μmol/L和(7.83±4.87) μmol/L(n=3).成功制备了~(99)Tc~m-Indole-MAMA,纯化后经高效液相色谱法(HPLC)分析其放化纯大于90%.今后可在本文化合物的基础上通过结构优化,设计合成对σ_2受体具有高亲和力和选择性的吲哚类SPECT肿瘤显像剂.     

99Tcm-BnAO-乙二醇独甲醚的合成及其生物分布

⁹⁹Tc^m-BnAO(HL91)是一种非硝基咪唑类乏氧显像剂,为了提高其乏氧显像性能,合成了BnAO-乙二醇独甲醚,并对其进行了⁹⁹Tc^m标记。结果表明,⁹⁹Tc^m-BnAO及⁹⁹Tc^m-BnAO-乙二醇独甲醚均为电中性,⁹⁹Tc^m-BnAO-乙二醇独甲醚脂溶性有所提高。其荷S180瘤小鼠体内生物分布结果表明,随着时间的延长,⁹⁹Tc^m-BnAO及⁹⁹Tc^m-BnAO-乙二醇独甲醚在肿瘤组织的相对摄取率逐渐增加。但⁹⁹Tc^m-BnAO-乙二醇独甲醚的肿瘤与血和肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T/NT）较⁹⁹Tc^m-BnAO略有降低。     

99Tcm标记小干扰RNA探针的干扰活性及其在荷瘤鼠体内的生物分布

使用双功能螯合剂NHS MAG3和氯化亚锡还原法构建99Tcm标记的小干扰RNA（Small Interference RNA,siRNA）探针。将标记和未标记的端粒逆转录酶（Human Telomerase Reverse Trancriptase,hTERT）靶向siRNA转染至肝癌HepG2细胞,72 h后,蛋白印迹法显示两者具有相近的蛋白抑制率（约76.7%）。标记物在荷HepG肿瘤裸鼠体内的生物分布显示,肾脏分布最高,其次为肝脏。注射hTERT靶向探针后 1～6 h内,肿瘤分布由（0.82 ± 0.16）%ID/g增加至（0.97 ± 0.15）%ID/g,肿瘤与血液和肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T/NT）分别为2.62 ± 0.70和6.02 ± 0.52,显著高于对照组（P< 0.05）。以上结果提示,⁹⁹Tc^m-siRNA探针对活体肿瘤示踪具有良好的研究前景和潜在的应用价值。     

99Tcm标记HYNIC-Anx13用于细胞凋亡显像的研究

为探讨⁹⁹Tc^m标记的HYNIC-Anx13用于细胞凋亡显像的可能性，分别以N-［三（羟甲基）甲基］甘氨酸（Tricine）, 乙二胺-N,N'-二乙酸（EDDA）和EDDA/Tricine为协同配体，对经6-肼基烟酰基（HYNIC）修饰的膜联蛋白V（Annexin V）片段（HYNIC-Anx13）的⁹⁹Tc^m 标记条件和主要影响因素进行了研究，并完成了HYNIC-Anx13的⁹⁹Tc^m标记物在正常小鼠体内的生物分布和大鼠细胞凋亡模型的显像实验。实验结果表明，标记物在反应溶液和小牛血清中较稳定，但在与半胱氨酸的竞争反应中及在生物体内的稳定性较差。生物分布实验及体内显像结果表明，⁹⁹Tc^m标记HYNIC-Anx13的血液清除较快，在体内主要经肾脏排泄；在模型组的靶器官中的放射性摄取明显高于对照组（p<0.05），但靶与非靶组织的放射性比值较低，细胞凋亡组织的显像图像不够理想。     

整合素素αⅤβ3受体显像剂18F标记RGD肽的研究进展

血管新生是肿瘤生长、转移过程中不可缺少的生物过程。整合素α_Ⅴβ₃受体在新生血管内皮细胞和多种肿瘤细胞表面高表达,在肿瘤血管新生中起着关键作用,目前已成为肿瘤诊断与治疗的一个重要靶点。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp, RGD）肽可特异性地与整合素α_Ⅴβ₃受体结合,¹⁸F标记的RGD肽类化合物PET显像可无创、动态地定量监测整合素α_Ⅴβ₃受体表达,在肿瘤早期诊断、疗效监测及抗血管新生评价上发挥着重要作用。本文就近年来国内外¹⁸F标记RGD 肽在肿瘤α_Ⅴβ₃受体显像中的研究进展作简要综述。     

99Tcm硫化铼胶体用于前哨淋巴结检测的生物实验——注射剂量与明胶浓度的影响

采用NANOCIS药盒制备了⁹⁹Tc^m-硫化铼胶体。对标记溶液进行10、100、500及715倍稀释,将原液及稀释液由小鼠脚掌皮内注射给药,于给药后1、4 h处死小鼠,取腘窝淋巴结（SLN）、腰淋巴结（次级淋巴结,2LN）、注射点（Injection Site）、肝、脾、血,测量放射性计数,计算放射性摄取率,研究注射剂量及明胶浓度对⁹⁹Tc^m-硫化铼胶体在小鼠前哨淋巴结（SLN）的放射性摄取及体内分布的影响。结果表明,随着注射剂量的降低,前哨淋巴结的放射性摄取相应减少,而注射点的摄取和前哨淋巴结提取率（在此指腘窝淋巴结提取率,PE%）相应增加;注射体积增加时,在注射点的放射性浓集增加,而前哨淋巴结提取率降低;当稀释液中明胶的浓度由0.03 g/L增加至3 g/L时,给药后可见前哨淋巴结的放射性摄取增加,而注射点的放射性摄取和PE%则有所降低。以上结果提示,NANOCIS药盒中明胶发挥了稳定剂的作用,而注射剂量和注射体积是影响该类药物淋巴结摄取及体内分布的关键因素。     

~(99)Tc~m标记的PEG_4/2PEG_4修饰的环状RGD二聚体体内外性质的对比

采用2种方法修饰RGD环肽二聚体,在2个RGD模序之间引入2个PEG4分子,以及在RGD二聚体与双功能螯合剂HYNIC之间引入1个PEG4分子,比较在不同部位引入PEG4分子对99Tcm标记的RGD环肽二聚体体内外性质的影响。研究结果表明,在2个RGD模序之间引入2个PEG4分子能显著提高RGD环肽二聚体与整合素αvβ3的亲和力;PEG4的引入能够增强标记物的水溶性9。9Tcm-HYNIC-2PEG4-RGD dimer具有更好的体内外性质,作为一种潜在的肿瘤显像剂,具有进一步研究开发的价值。     

99Tcm-EGF的直接法合成及其在荷C6动物体内生物学分布

探索用⁹⁹Tc^m直接标记表皮生长因子（EGF）的方法并研究其在荷C6动物体内的生物学分布特点。巯基乙醇（20 mL/L）10 μL还原EGF（2.5 μg）;含0.5 μg SnCl2的亚甲基二膦酸盐（MDP）溶液将还原高价锝使之与还原EGF的巯基结合,放化纯度大于95%,标记物稳定性较好,在6 h内放化纯度大于95%。通过内皮细胞培养进行⁹⁹Tc^m-EGF的生物活性鉴定,显示EGF在锝标记前后生物学活性未见明显改变（P＞0.05）。⁹⁹Tc^m -EGF在荷瘤鼠体内生物学分布显示肝、脾、肾等组织放射性分布较高,瘤区放射性较高,而脑组织最低,4 h瘤与正常组织放射性摄取比值(Tumor/Normal Tissue)为2.25, SPECT全身显像显示瘤组织放射性核素浓聚。因此直接合成的⁹⁹Tc^m-EGF可望成为特异性诊断高表达EGFR肿瘤的SPECT分子显像剂。     

117Snm(113Sn)(Ⅳ)-四（4-磺酸苯基）卟啉的制备

为了研制对辐射增敏的、肿瘤治疗用的117Snm放射性药物，研究了117Snm(113Sn)(Ⅳ)与四（4 磺酸苯基）卟啉（TPPS4）的反应条件和该配合物的体外稳定性及其化学计量组成。研究结果表明，用天然丰度的金属锡粒作靶料，在中子注量率为4×1013cm-2·s-1的条件下，照射90h，可以获得比活度为013GBq/g的117Snm和616MBq/g的113Sn；在pH为2~4、沸水浴中反应30min时，117Snm(113Sn)(Ⅳ) TPPS4标记率大于95%。该放射性配合物有良好的稳定性和抗生理盐水稀释性能，室温下放置48h或用生理盐水稀释5~15倍，其放化纯度基本不变；该配合物中Sn(117Snm(113Sn))与TPPS4的配位比为1∶1。     

αvβ3受体显像剂99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)的制备及动物实验

目的 探讨99Tcm标记的小分子环形Cys-RGD肽用于αvβ3受体阳性肿瘤显像的可行性。方法 以99Tcm(N)核通过二膦基胺类化合物PNP6（PNP6＝二[二(乙氧基丙基膦)-乙基]-乙氧基乙基胺）标记环形Cys-RGD肽（c(Arg-Gly-Asp-D-Tyr-Lys)-Cys）；采用HPLC法测定标记物的放化纯，并考察标记物的体外稳定性；进行正常小鼠和荷FWK-1胰腺癌裸鼠模型的体内生物分布试验及平面显像。结果 在优化的标记条件下，标记率大于92%，且具有良好的体外稳定性；生物分布实验表明标记物在血液中清除较快，主要通过肾脏排泄，99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)在肿瘤中的摄取值为2.92±0.71% ID/g (注药后1h)，肿瘤/血和肿瘤/肉的比值分别为11.0和3.1（注药后4h）；注药后1h，肿瘤显像清晰。结论 99Tcm(N)(PNP6)(Cys-RGD)具有成为αvβ3受体阳性肿瘤显像剂的潜在应用价值。     

一种潜在5-HT1A脑受体显像剂99Tcm-Bicine/HYNIC-MPP2的制备及其生物性能

优化合成了含有1-(2-甲氧基苯基)哌嗪(MPP)结构的配体2-(4-(2-甲氧基苯基)哌嗪基)乙胺-6-叔丁基氧羰基肼基吡啶-3-甲酸(HYNIC-MPP2).在室温下以N,N-二(2-羟基乙基)氨基乙酸(Bicine)为共配体制备得到配合物~(99)Tc~m-Bicine/HYNIC-MPP2,其放射化学纯度大于95%,并且在6 h内保持稳定.脂水分配系数和电泳实验结果表明,该放射性标记配合物是水溶性和电中性的.正常小鼠体内生物分布实验结果表明,~(99)Tc~m-Bicine/HYNIC-MPP2有一定的脑摄取(注射后2 min时为0.31%ID/g).脑区域分布及抑制实验显示,该配合物在5-HT_(1A)受体含量丰富的海马组织有较高摄取(注射后2 min时为1.00%ID/g),而在受体含量低的小脑组织中摄取也低(注射后2 min时为0.63%ID/g).抑制后,海马摄取降低较多(注射后2 min时为0.42%ID/g),而小脑摄取则无明显变化.抑制前后海马/小脑比值分别为1.59和0.89.由此可见该标记配合物与5-HT_(1A)受体具有一定特异性结合,是一种新的潜在5-HT_(1A)受体显像剂.     

fac-[Μ(CO)_3]~+(Μ=~(188/186)Re,~(99)Tc~m)化合物的生物标记及应用

fac-[Μ(CO)_3]~+(Μ=~(188/186)Re,~(99)Tc~m)具有良好的放射生物学特性,是一种很有发展前途的标99记前体。本文综述了fac-[Μ(CO)3]+(Μ=188/186Re,Tcm)核标记生物小分子(生物素、雌激素……)、大分子蛋99白及多肽的研究进展,并探讨了其今后发展的方向。     

fac-[M(CO)3]+(M=188/186Re,99Tcm)化合物的生物标记及应用

fac-[M(CO)3L3]^ (M=^188/186Re,^99Tc^m,L=H2O)具有良好的放射生物学特性,是一种很有发展前途的标记前体。本文综述了fac-[M(CO)3]^ (M=^188/186Re,^99Tc^m)核标记生物小分子(生物素、雌激素……)、大分子蛋白及多肽的研究进展,并探讨了其今后发展的方向。