甘肃肃南牧区传统发酵乳中乳酸菌的分离鉴定

以5份甘肃肃南牧区传统发酵乳制品为原料进行乳酸菌的分离和鉴定,共分离出25株乳酸菌.对其中23株产乳酸的菌株利用形态、生理生化分析和碳水化合物发酵产酸实验进行鉴定.经鉴定得出23株分属为4个属,11个种.其中乳杆菌属[Lactobacillus(L.)]11株,乳球菌属(Lactococcus)6株,明串珠菌属(Leuconostoc)3株,肠球菌属(Enterococcus)3株.具体来说,L.plantarum 6株、L.fermentum 2株、L.brevis 1株、L.minor 2株、L.lactis subsp.lactis 3株、L.lactis subsp.cermoris 3株、L.mesenteroides 1株、L.lactis 2株、E.faecium 1株、E.faecalis 1株、E.durans 1株.L.plantarum占分离菌株的26.1%,是优势菌株.     

不同地区酸马奶中乳杆菌的分离及其生物学特性的研究

从内蒙古锡林浩特市(16份样品)和蒙古国(5份样品)以传统方法制作酸马奶的牧民家庭中共采集到21份酸马奶样品；从蒙古国样品采集的样品中共分离到30株乳杆菌、分别鉴定为Lb．casei(1株)、Lb．plantarum(9株)和Lb．acidophilus Group(20株)的菌株；从内蒙古采集的样品中的共分离到50株乳杆菌，分别为Lb．casei(16株)、Lb．plantarum(6株)和Lb．acidophilus Group(10株)、Lb．paracasei subsp．paracase(3株)、Lb．coryniformis subsp．coryniformis(5株)、Lb．curvatus(1株)、Lb．kefiranofaciens(2株)和异型乳酸发酵的Lb．fermentum(1株)、Weissella kandleri(1株)、Weissella paramesenteroides(1株)以及未明确的Lactobacillus sp．(2株)等。结果表明，蒙古国酸马奶样品中以高温性Lb．ncidophilus Group的菌株分离率较高，而内蒙古酸马奶样品中以中温性Lb．casei菌株最多，其次为Lb.acidophilus Group的菌株。     

新疆酸马奶中乳酸菌的多态性分析及发酵性能研究

以新疆牧民传统家庭自制酸马奶样品为研究对象,考察乳酸菌的多态性及筛选优良性状的乳酸菌菌株。通过16S r RNA基因序列分析和生理生化试验等方法对分离出的菌株进行鉴定,并进行发酵性能测试。结果表明,本实验共分离出19株菌株,包括乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)(8株)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)(2株)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)(2株)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)(1株)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)(3株)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)(2株)和徳氏乳杆菌乳酸亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.Lactis)(1株)。其中,干酪乳杆菌JDB1.1505是一株产酸和产黏性能都比较突出的乳酸菌,发酵脱脂乳的滴定酸度达到了130.1°T,黏度为1420.1m Pa·s,具有良好的乳品发酵应用潜能。     

傣家酸鱼中乳酸菌的分离鉴定及乳酸发酵的初步研究

为获得新来源的乳酸发酵菌株,以采自云南省德宏州的3份传统傣家酸鱼为供试样品,分离纯化菌株。通过Ca CO3-溴甲酚紫产酸平板、摇瓶发酵、色谱分析等手段筛选出产乳酸菌株。采用传统分类方法结合16S r DNA序列分析方法,对产乳酸菌株进行鉴定并保藏,并用EDTA定钙法研究了菌株的乳酸产量。结果表明,从3份传统傣家酸鱼中分离到10个菌株,筛选出乳酸发酵菌株sy1、sy3、sy4,色谱分析表明,3株菌的发酵产物均为乳酸。采用传统分类方法结合16S r DNA序列分析方法,确定3株菌均为植物乳杆菌。3株菌均能迅速产酸,能在p H 3.5以下生长;在初始葡萄糖浓度为100 g/L的培养基中发酵72 h,测得菌株sy1、sy3、sy4乳酸产量分别为66、76和69 g/L,表明3株菌均有较好的乳酸发酵能力,可作为乳酸发酵的出发菌株进行进一步研究。     

新疆伊犁地区乳制品中乳酸菌发酵和益生特性及其复合发酵方案优化

对7株实验室保存的优良乳酸菌在酸乳发酵过程中的酸化能力、产香能力以及酸乳质构进行测定,并通过抑菌、胃肠液耐受性以及抗生素敏感性等实验探究菌株的益生特性,筛选其中性能较优良的菌株进行组合复配,以获得最优的复合发酵菌株组合方案。单菌株发酵实验结果表明乳明串珠菌Leuconostoc lactis XKN1-5、乳杆菌属Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus BSTS6-4凝乳时间短(7 h左右),酸乳酸度可达96°T,酸化能力较其他菌株好;L. delbrueckii subsp. bulgaricus BSTS6-3、Streptococcus thermophilus XSXN1-2发酵制得的酸奶质构特性较好;L. delbrueckii subsp. bulgaricus BSTS6-1、S. thermophilus XSXN1-1产香性能最优,其中菌株XSXN1-1双乙酰质量浓度达到2.02 mg/L,乙醛质量浓度可达16 mg/L,能够明显改善酸奶的风味。益生实验结果表明,乳杆菌菌株Lactobacillus fermentum BST2-3、L. delbrueckii subsp. bulgaricus(BSTS6-1、BSTS6-3、BSTS6-4)能够抑制肠道致病菌的生长;L. fermentum BST2-3、L. delbrueckii subsp. bulgaricus(BSTS6-1、BSTS6-4)的黏附性较好;L. fermentum BST2-3在模拟胃肠液处理9 h后活菌数仍可达10~6 CFU/mL;且7株乳酸菌对大部分所试抗生素表现出敏感,安全性较高。最后按照产酸、产香、质构以及益生特性将菌株分类并进行酸乳复合发酵,获得复合发酵的最优菌株组合为菌株L. delbrueckii subsp. bulgaricus(BSTS6-4、BSTS6-3)、S. thermophilus XSXN1-1、L. fermentum BST2-3。     

内蒙古腌制沙葱中乳酸菌分离鉴定

以采集自内蒙古腌制沙葱为研究对象,通过微生物纯培养方法分离培养其中乳酸菌。应用16S r RNA基因序列分析和系统发育关系研究手段,对分离菌株进行鉴定,并与其他地区不同种类发酵蔬菜中分离得到的乳酸菌进行比较。结果表明:共分离得到6株乳酸菌,包括2株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei),2株乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp lactis)、1株肠膜明串珠肠膜亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides)和1株Lactobacillus diolivorans。相比于其他地区发酵蔬菜中分离所得的乳酸菌,内蒙古腌制沙葱样品分离得到的乳酸菌数量虽少,但也具有特有菌种。     

离子注入诱变筛选高产L-乳酸菌及其发酵条件的初步研究

研究了不同于常见的以根霉为菌株发酵生产L－乳酸的乳酸细菌发酵模式。采用新的物理诱变源－－N^ 离子注入诱变菌株LB1，最终筛选出一株L－乳酸产量比出发菌株高2倍多的突变株LB1－1。通过对LB1－1的培养条件进行了初步研究，确定了突变株LB1－1合成L－乳酸的最优碳氮源及其浓度等培养条件，并对发酵过程的pH值调控、供氧对发酵的影响等主要影响细菌L－乳酸发酵的因素进行了较细致的研究，为下一步原位分离技术的研究提供了依据。     

泡菜中优良乳酸菌的分离鉴定及其发酵性能的研究

从多种泡菜中分离出92株菌，对其在低温下发酵能力进行测试，筛选出了四株产酸较快、发酵风味较好的菌株Leu．1、Leu．2、Lact．1和Lact．2。经API系统鉴定，Leu．1和Leu．2为肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides)，Lact．1为干酪乳杆菌干酪亚种(Lactobacillus casei subsp.casei)，Lact.2为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。在10℃发酵白菜中，接种发酵的产酸速度和风味明显优于自然发酵，其中Leu．1和Leu．2发酵前期产酸较快，发酵11d白菜汁pH值达3．67，而Lact．1和Lact．2发酵11d pH值达3．30左右。另外还对四株菌的相关发酵性能进行了测试。     

高产L-乳酸酸菜菌种筛选及发酵条件优化

为提高酸菜的品质,从自然发酵酸菜中分离得到1株高产L-乳酸的乳酸菌,编号为LZH-3.响应面法对其液体发酵条件进行优化,通过回归分析得出最佳发酵条件:发酵温度为33℃、接种量为3％,初始pH值为6.2,发酵时间为20 h.在此优化条件下L-乳酸产量为28.17 g/L,是优化前的1.25倍.     

伊犁地区乳品中乳酸菌的分离及鉴定

从伊犁地区牧民家庭采集的乳品中分离得到10株乳酸菌,经过对其生物学特性的鉴定,有干酪乳杆菌假植物亚种(L.casei subsp.Plantaman)4株、鸡肠球菌(E.gallins.rum)1株、屎肠球菌(E.faecium)1株、乳酸乳球菌乳酸亚种(L.lactis subsp.cremoris)2株、肠膜明串珠菌肠膜亚种(Lc.Mesenteroides subsp.Mesenteroides)2株。通过研究发现,该鉴定菌株的生物学特性基本符合各属和种的鉴定标准,均属于中温性乳酸菌。     

开菲尔粒中乳酸菌的分离与鉴定

从4个不同来源的开菲尔粒中分离得到40株乳酸菌，并对这40株乳酸菌进行了鉴定．结果为德氏乳杆菌8株，德氏乳杆菌保加力亚种6株，高加索奶乳杆菌2株，嗜酸乳杆菌1株，粪肠球菌7株，屎肠球菌2株，嗜热链球菌1株，乳脂链球菌3株。     

中式发酵干香肠中乳酸菌的分离筛选、鉴定和培养

从烟台喜旺中式发酵干香肠中分离筛选出适合当地特色的、具有自然发酵香肠风味的微生物菌株,采用系统分类鉴定方法对筛选出的乳酸菌进行初步鉴定,鉴定出5种乳酸杆菌:L1为德氏乳杆菌德氏亚种,L2为德氏乳杆菌保加利亚亚种,L3为米酒乳杆菌,L4为食品乳杆菌,L5为戊糖乳杆菌。此外,采用均匀设计确定了这5种乳酸杆菌的增殖培养基的组成和最佳配比,并通过混合培养得出混合培养的最佳配比。     

利用16S rDNA序列及tuf-RFLP鉴定蒙古国发酵乳中的乳酸菌

运用16S rDNA序列分析和tuf-RFLP技术对采于蒙古国扎布汗省的25份发酵乳样中分离出的110株乳酸菌进行鉴定。首先将分离的110株乳酸菌的16S rRNA基因进行扩增,测序并构建系统发育树,初步鉴定为41株嗜热链球菌,40株瑞士乳杆菌,11株德氏乳杆菌保加利亚亚种,2株发酵乳杆菌,1株乳明串珠菌,2株肠膜明串肠膜亚种,1株乳酸乳球乳酸亚种和12株属于干酪族的菌株。由于干酪乳杆菌族的16S rDNA序列差异很小,故采用tuf-RFLP技术对这12株进行了进一步的验证,通过分离菌株与模式菌株tuf-RFLP图谱的比较分析,结果表明这12株菌均为干酪乳杆菌。     

酸乳用乳酸菌抗生素耐药性研究

旨在通过纸片扩散法对乳酸菌菌株耐药情况进行研究。对48份酸乳发酵剂中的乳酸菌进行分离鉴定,共分离出63株乳酸菌,其中嗜热链球菌43株、德氏乳杆菌保加利亚亚种20株。结果表明:63株乳酸菌对临床使用率较高的12种抗生素呈现不同程度的耐药性,其中,青霉素(36.51%)、复方新诺明(33.33%)、链霉素(28.57%)、氨苄西林(26.98%)、环丙沙星(20.63%),同时52.38%(33/63)的菌株具有多重耐药性,其中嗜热链球菌对12种抗生素的多重耐药性(30.23%)显著低于德氏乳杆菌保加利亚亚种(100%)。     

DNA fingerprinting of thermophilic lactic acid bacteria using repetitive sequence-based polymerase chain reaction

DNA fingerprints of lactic acid bacteria were generated by polymerase chain reaction using a primer based on the repetitive elements found in the genome of Streptococcus pneumoniae (BOX-PCR). The method made it possible to identify 37 isolates from raw milk. industrial starters and yogurt. Differentiation at species, subspecies and strain level was possible for Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Lb. delbrueckii subsp bulgaricus and Str. thermophilus. BOX-PCR was also applied to studying the strain composition of a starter culture and the direct detection of strains in commercial fermented milk.     

乳酸菌发酵大豆糖蜜生产乳酸及糖代谢变化

选用德氏乳杆菌保加利亚亚种KLDS1.8501、嗜酸乳杆菌KLDS1.0327、嗜酸乳杆菌ATCC11975、植物乳杆菌植物亚种CICC23168、干酪乳杆菌ATCC393、植物乳杆菌NAU322分别接种于大豆糖蜜,用高效液相色谱法测定乳酸的产生以及碳水化合物的利用情况,分析不同乳酸菌发酵大豆糖蜜生产乳酸能力及糖代谢能力。结果表明,在15 °Brix大豆糖蜜中,37?℃、pH?6.0条件下发酵24?h,植物乳杆菌植物亚种CICC23168的活细胞数达到6.66×109?CFU/mL,乳酸产生量为12.18?g/L,总糖消耗量为22.48?g/L,与其他菌株相比有明显优势。因此,植物乳杆菌植物亚种CICC23168是能利用大豆糖蜜发酵产乳酸的潜力菌株。     

Factors influencing autoaggregation and aggregation of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus isolated from handmade yogurt

Of 26 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus strains isolated from yogurt, strains B2 and 22, which produce low levels (28 and 21 mg liter(-1), respectively) of extracellular polysaccharides (EPSs), and strains B3 and G12, which produce high EPS levels (211 and 175 mg liter(-1), respectively), were selected for further study. The two high EPS-producing strains showed a significant autoaggregation and coaggregation ability with Escherichia coli ATCC 11230 (P < 0.05). Moreover, the effect of bile was evaluated on autoaggregation and hydrophobicity. Autoaggregation and hydrophobicity of these L. delbrueckii subsp. bulgaricus strains decreased after treatment with bile. Only the high EPS-producing L. delbrueckii subsp. bulgaricus strain B3 showed greater autoaggregation (80%) and hydrophobicity (86%) than the other strains after bile treatment. When these strains were assessed for the inhibition of E. coli ATCC 11230 in coculture, L. delbrueckii subsp. bulgaricus B3 completely inhibited E. coli during 24 and 48 h of incubation. This investigation showed that a high EPS production and coaggregation ability may be important in the selection of probiotic strains.     

基于高通量测序技术鉴定酸浆水中的微生物

利用高通量测序技术和传统的分离纯化相结合的方法,以及API 50CHL乳杆菌鉴定试剂盒对酸浆水中的微生物群落组成进行分析,结果表明:酸浆水中的优势菌群为乳酸杆菌;从酸浆水中分离出66株乳酸菌,其中好氧菌36株,厌氧或兼性厌氧菌30株;经试剂盒生化鉴定,得到3种乳酸杆菌L1、L2、L3,其中L1为乳明串珠菌(Leuconostoc lactis),有27株;L2为德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii subsp.lactis),有13株;L3为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),有26株。     

Production of pyroglutamic acid by thermophilic lactic acid bacteria in hard-cooked mini-cheeses

Pyroglutamic acid is present in high amounts (0.5g/ 100g) in many cheese varieties-and particularly in extensively ripened Italian cheeses such as Grana Padano and Parmigiano Reggiano. An in vivo model system for cooked mini-cheese production and ripening acceleration was set up to demonstrate the ability of thermophilic lactic acid bacteria, used as a starter, to produce pyroglutamic acid (pGlu). In mini-cheeses stored at 38 and 30 degrees C for up to 45 d, all starters tested produced different amounts of pGlu. In descending order of pGlu production, the bacteria analyzed were: Lactobacillus helveticus, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Streptococcus thermophilus, and Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis. Evidence for the presence of glutamine to pGlu cyclase activity in lactic acid bacteria was provided. Cell lysates obtained from cultures of L. helveticus, L. delbrueckii subsp. bulgaricus, L. delbrueckii subsp. lactis, and S. thermophilus showed the ability to cyclize glutamine to pGlu, resulting in processing yields from 1.4 to 30.3%, depending on the subspecies. Formation of pGlu from free glutamine appeared to be similar to that observed using a glutamine-glutamine dipeptide substrate. Under the experimental conditions applied, pGlu aminopeptidase activity was only detected in L. helveticus. Thus, pGlu formation in long-ripened cooked cheese may depend on the activity of thermophilic lactic acid bacteria.