实时荧光PCR检测鸭血中的动物源性成分

目的建立实时荧光PCR检测鸭血中鸭、猪、牛等动物源性成分的方法。方法对重庆市火锅店销售的鸭血进行采样检测。提取鸭血样品DNA,进行实时荧光PCR检测,确定循环阈值,分析样品中鸭、猪、牛源性成分。结果 DNA提取液OD_(260 nm)/OD_(280 nm)值为1.8～2.0,纯度较高; 8个市售鸭血样品中2个样品只检出猪源性成分, 1个样品同时检出鸭源性成分和猪源性成分,研究发现所采集的鸭血存在猪血掺假的可能。结论该方法快捷、可操作性强,适用于鸭血中动物源性成分的测定。     

实时荧光PCR法检测肉制品中猪源性成分

目的S建立一个高特异性和高灵敏度的有效检测猪源性成分的检测方法。方法S以猪雌激素受体基因设计合成一对特异性引物,采用液氮研磨结合试剂盒抽提的方法提取猪肉中的DNA,分别以300S,30S,3S,0.3S和0.03Sng为模板量进行梯度反应,基于荧光定量PCR技术(SYBR法)建立检测方法。结果S以Ct值作为纵坐标,以lgXS(X为DNA的量,ng)的值作为横坐标,得到标准曲线方法Ct=30.473-3.542lgX,SR2=0.9997;该方法的检测灵敏度达到2 Spg。结论S该猪源性成分检测方法简单快捷,特异性和重复性好,灵敏度高,可作为市场监督和检测鉴定的可行性方法。     

实时荧光PCR法检测明胶的牛、猪源性成分

为了快速准确鉴别明胶的动物源性,根据线粒体DNA基因COX I(cytochrome coxidase subunit I)的种间多态性差异合成特异性引物及探针,通过实时荧光PCR技术扩增与识别特异性基因片段.运用明胶牛、猪源性成分的荧光PCR检测方法并进行特异性、检出限、重复性实验.结果显示:该方法能够快速准确检测明...     

实时荧光PCR定量检测肉制品中猪源性成分

为了准确可靠地对肉制品中猪源性成分进行定量检测,通过生物信息学方法筛选到猪细胞核单拷贝基因(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 2-like,CACA).以CACA基因为扩增靶标,设计了特异性引物、TaqMan探针,建立了基于实时荧光定量PCR...     

食品中鸡源性成分标准检测方法的比较性研究

为比较食品中鸡源性成分的标准检测方法,本试验对3种标准检验的引物计、方法及灵敏度进行比较.结果 显示,实时荧光PCR法引物特异性好、方法简便、灵敏度高.因此得出结论,两种实时荧光PCR法均可作为鸡源性成分检测的补充方法.     

保健品中牛羊源性成分的PCR检测

本文根据牛、羊线粒体mtDNA中的保守序列，设计了针对牛羊源性成分检测的特异性扩增引物，通过聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction，PCR)建立了保健品中牛羊源性成分的快速检测方法。通过内切酶DpnⅡ和SspⅠ可分别对牛羊成分的扩增结果进行进一步验证，该方法对牛源性成分的检测低限为0．05％，对山羊和绵羊源性成分的检测低限分别为0．005％和和0．5％，可作为保健品中牛羊源性成分检测有效方法，也可作为保健品及动物源性产品中成分真伪鉴别的准确、可靠方法。     

鱼翅制品中鲨鱼源性成分的实时荧光PCR检测方法 Key words:

本研究通过鲨鱼线粒体基因组的部分序列,设计了鲨鱼的特异性引物和探针,建立了鱼翅制品中鲨鱼源性成分检测的一种新方法,据此可鉴别鱼翅制品的品质。通过物种特异性实验和灵敏度测试,表明所设计的引物和探针具有较好的物种特异性,所建立的方法具有较高的灵敏度：DNA浓度的检测灵敏度可达0.01 ng/?L,重量检测灵敏度可达0.1%（m/m）。采用该方法并结合植物源性基因检测方法对市场上随机抽取的25份鱼翅制品进行检测,其中18份样品检出鲨鱼源性成分而未检出植物源性成分,7份样品未检出鲨鱼源性成分而检出植物源性成分,表明这7份样品不是真鱼翅制品,而是采用了植物成分仿制而成。本研究所建立的方法快速、灵敏、简单,适用于市场上鱼翅制品中鲨鱼源性成分的快速检测。     

食品中动物源性成分的多重PCR快速检测

目的利用多重PCR技术对市售的多种食品进行检测,确定动物源性成分的种类,进行掺假及真伪鉴别。方法对鸡、猪、牛、兔、绵羊、山羊、马、鹿8种动物源性产品进行DNA提取,根据不同动物线粒体DNA设计特异性引物,根据脊椎动物细胞色素b基因mt DNA序列设计通用引物作为内源参照,对8种动物源性产品的DNA进行多重PCR扩增,同时对多种成分进行鉴定。结果琼脂糖凝胶电泳表明,此方法能同时扩增出8种动物的特异性条带,检测灵敏度达到0.01%。结论所建立的鉴定多种动物源性成分的新方法,操作简便、快速准确,可为各检验机构对食品进行检测提供方法指导。     

茶籽油DNA提取方法的比较

针对食用油脂中DNA含量极低、DNA序列片段短、破坏严重的特点,通过实时荧光PCR法检测植物的通用tRNALeu,对茶籽油DNA几种提取方法进行比较,建立了食用油脂中DNA提取新方法。结果证明:较之于文献中常见植物油DNA几种提取方法,用改进方法提取的DNA含量高、纯度高,可以作为PCR反应的模板,为食用油脂进行核酸类生物性检测提供了一种简捷有效的方法。     

大豆卵磷脂DNA的提取方法及应用

以大豆卵磷脂为研究对象,比较了CTAB法、磁珠试剂盒法以及硅胶膜试剂盒法等3种DNA提取纯化方法。通过大豆内源基因Lectin实时荧光PCR检测,发现CTAB法提取的大豆卵磷脂DNA质量优于其它两种方法,并以CTAB法为基础进行条件优化,进一步提高DNA纯度。采用该方法对6个不同品牌的市售大豆卵磷脂产品进行转基因成分(CAMV35S启动子及NOS终止子)检测,结果证实均不含转基因成分。     

猪皮胶原多肽的体外抗氧化特性研究

以猪皮胶原多肽为原料,研究其羟自由基清除能力、还原能力、对Fe2+诱导的脂质过氧化抑制能力以及对猪油氧化的抑制效果,考察其体外抗氧化特性.结果表明:在10mg/mL～50mg/mL浓度范围内,猪皮胶原多肽具有一定的羟自由基清除能力、还原能力和对Fe2+诱导的脂质过氧化抑制能力,且随着浓度的增加抗氧化作用也增强,当浓度为50mg/mL时,对羟自由基的清除率为56.38％,还原力为0.909,对Fe2+诱导的脂质过氧化抑制率为43.34％;不同添加量的猪皮胶原多肽对猪油氧化均有明显的抑制作用,当添加量为2％时,抗氧化效果优于0.02％的叔丁基羟基茴香醚(BHA).猪皮胶原多肽具有一定的体外抗氧化作用.     

骨胶原蛋白的制备及性能表征研究进展

胶原蛋白具有良好的功能特性和生物相容性,在食品、医药和化工等领域显示出极大的应用前景。对动物骨胶原蛋白的提取、分离纯化及主要性能研究现状进行了综述。     

鮟鱇鱼骨胶原蛋白提取工艺

为了解鮟鱇鱼骨的基本组成和氨基酸成分,提高其胶原蛋白提取率,研究采用酶解法制备低分子量的胶原蛋白。在单因素的基础上,应用正交实验对鮟鱇鱼骨胶原蛋白的提取工艺进行优化。结果表明,鮟鱇鱼骨水分、蛋白质、脂肪、灰分及钙含量依次为76.26%、13.28%、0.0025%、12.32%、6.22%;鮟鱇鱼骨总氨基酸含量76.57%,其中,必需氨基酸31.28%,鲜味氨基酸16.94%,羟脯氨酸含量3.68%;优化胶原蛋白的提取条件如下:提取时间4 h,加酶量6%,温度40 ℃,pH1。在此条件下提取胶原蛋白的含量为43.06%,水解度为27.08%,分子量低于30 kDa的胶原蛋白占总含量的20.65%。实验为深入研究和开发鮟鱇鱼骨胶原蛋白及其相关产品提供了理论和技术基础。     

风味蛋白酶水解羊骨粉制备胶原多肽的工艺研究

利用风味蛋白酶水解羊骨粉,并对4个水解指标做相关性分析。各指标之间均显著相关,与水解度的相关性依次为短肽得率(0.926)>多肽生成量(0.805)>氨基酸态氮(0.680)。响应面优化羊骨粉水解工艺时,以水解度为指标,得出最优水解条件,即料水比为3∶25(W/V)、水解温度为55℃、水解时间为315 min、加酶量为3.48%(E/S)、p H为7.5,在此条件下水解度为20.38%,与预测值(20.72%)相比,相对误差较小,响应面法所得的优化工艺参数准确可靠,具有实用价值。      

利用皮边角料提取食品级胶原蛋白/多肽(Ⅱ)重要物理性质和微生物指标分析

研究利用皮边角料提取食品级胶原蛋白 ,不仅能解决制革固体废弃物污染 ,而且可为皮胶原生物质的非制革利用 ,提供一些研究思路。着重介绍从皮边角料中提取的胶原蛋白/多肽 ,作为食用蛋白源时所必需分析的物理性质和微生物指标 ,及一些通用的标准测定方法     

Qualitative and quantitative identification of adulteration of milk powder using DNA extracted with a novel method

The extraction of high-quality DNA from processed dairy products is often the crucial step in an authentication process by PCR-based methods. In this study, we optimized a novel DNA extraction method for milk powder and used the extracted DNA for identification of milk powder based on PCR analysis. The DNA quality was assessed by amplifying target sequences from mitochondrial genes, as well as by monitoring the yield, purity, and integrity of the extracted DNA. In addition, a laboratory adulteration model of milk powder was detected by PCR-based methods (PCR and real-time PCR) using primers targeting the mitochondrial 12S rRNA gene. Results showed that a sufficient amount and quality of DNA could be isolated from milk powder with this method. Both PCR and real-time PCR detection of cow milk compositions in goat milk powder further confirmed the DNA extracted with this extraction method could be widely used in addressing milk powder adulterant by a PCR-based method.     

食用精炼大豆油DNA提取及单管巢式PCR检测

设计了针对转基因Roundup Ready大豆外源基因扩增的内外2对引物,分别位于CaMV35s启动子,CTP基因,CP4EPSPS基因区域,并成功对精炼大豆油中的外源基因进行单管巢式PCR检测。结果表明,用改良试剂盒法和冷冻干燥法提取大豆油中的DNA均可以满足单管巢式PCR检测要求;单管巢式PCR扩增对内外引物的Tm值有特殊要求,外引物的退火温度高于内引物。本实验建立的精炼大豆油转基因成分的单管巢式PCR检测方法特异性强,灵敏度高且快速方便。      

猪皮胶原的提取及其结构表征

分别以鲜猪皮和经过自制CO2 超临界处理器处理过的猪皮为原料 ,以醋酸钠 -盐酸为缓冲液 ( pH =2 .0 ) ,利用国产胃蛋白酶提取猪皮胶原。通过测定分子量、等电点以及利用DSC、IR等方法 ,对所提取的猪皮胶原结构进行了表征。结果表明 :从经过自制CO2 超临界处理器处理过的猪皮中提取的猪皮胶原的纯度 ,要比从未经自制CO2 超临界处理器处理过的猪皮中提取的猪皮胶原的纯度高很多 ,其它性质基本不变 ;同时两者都最大程度地保持了猪皮胶原的三股螺旋结构 ,因而适合用作生物医用材料及原料。     

牛骨股原蛋百肽体外清除自由基活性的研究

对经碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解的牛骨胶原蛋白肽清除自由基活性进行了研究。根据对羟基自由基、超氧阴离子自由基、二苯代苦味酰基自由清除能力的测定,以及还原能力、脂质抗氧化能力等抗氧化活性指标的测定,确定了水解度为7.9%左右的胶原蛋白肽清除自由基的综合效果最好,此时酶解产物的平均分子量为2025Da,含15个左右的氨基酸。在此条件下,超氧阴离子(O2-·)的清除率为63.86%,羟基自由基(·OH)的清除率为99.55%,二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)的清除率为27.03%,对大豆卵磷脂过氧化作用的抑制率为74.78%。