高效液相色谱法同时测定榅桲籽中蔷薇酸和委陵菜酸的含量

目的 建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定榅桲籽中蔷薇酸和委陵菜酸含量的分析方法.方法 样品经石油醚脱脂后,用甲醇超声提取,采用Kromasil 100-5-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱分离,以甲醇-0.2％磷酸(70...     

齐墩果酸和熊果酸提取、分离与测定方法研究进展

齐墩果酸和熊果酸属五环三萜类化合物,在自然界广泛分布,具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化和保肝等多种生物活性,是多种植物的有效成分。该文对近年来齐墩果酸和熊果酸提取、分离及测定方法的最新研究进展和成果进行总结,为齐墩果酸和熊果酸的制备、检测及相关食品的开发提供更多的理论依据。     

HPLC检测白桦脂酸、齐墩果酸和熊果酸方法的建立

建立了一种简单、快速可同时检测白桦脂酸、齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱法,色谱条件为Kromasil C_(18)(5μm,4.6×250mm)色谱柱,流动相为甲醇∶水=91∶9(磷酸调pH为3.0),流速0.6mL/min,柱温为室温,检测波长为210nm,进样量20μL,紫外检测器;三种三萜酸线性关系良好,R~2均在0.9998以上,最低检出限为0.21~0.26μg/mL,定量限为0.71~0.87μg/mL,加标回收率在96.43%~101.33%之间且精密度、稳定性和重复性良好。     

HPLC法测定野蔷薇中齐墩果酸和熊果酸的含量

目的:采用HPLC法测定野蔷薇不同部位（根、茎、果实）中齐墩果酸和熊果酸的含量,比较不同产地野蔷薇果实中齐墩果酸和熊果酸含量的差异。方法:采用Zorbax ODS色谱柱（4.6 mm×250 mm×5μm）,以甲醇-水（88∶12）为流动相,流速为1.0 m L/min,检测波长为210 nm。结果:齐墩果酸和熊果酸在20 min内较好分离,其质量浓度分别为0.02468⁰.2468 mg/m L和0.02523⁰.2523 mg/m L时与峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.9994和0.9996;平均回收率为分别为99.96%（RSD为0.74%）和100.03%（RSD为0.95%）。结论:该方法操作简便、结果准确、重现性好,可同时测定野蔷薇中齐墩果酸和熊果酸的含量,均在果实中含量最高;库车县、阿图什市的野蔷薇果实中齐墩果酸和熊果酸的含量最多,可作为最适开发利用的固定来源。      

紫苏子和白苏子中熊果酸和齐墩果酸的分离与检测

采用反相高效液相色谱-光电二极管阵列检测器联用法（RP-HPLC-PAD）对紫苏子、白苏子中的熊果酸和齐墩果酸进行了分离和含量测定。色谱柱为Kromasil C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-水（87：13）,检测波长210nm,流速0．8mL／min,柱温28℃。熊果酸进样量在0．10～4．00μg之间呈良好的线性关系,平均加样回收率为100．6％,RSD为1．6％;齐墩果酸进样量在0．05～2．00μg之间呈良好的线性关系,平均加样回收率为98．7％,RSD为1．2％。6批样品测定结果表明,该方法灵敏、准确,重现性好,可用于紫苏子和白苏子中2种三萜酸的含量测定。     

木瓜中齐墩果酸和熊果酸提取工艺的研究

用正交试验法对木瓜中的齐墩果酸和熊果酸的提取工艺进行研究。在单因素实验基础上,采用L9(34)正交实验考察提取时间、提取温度、料液比、原料粒度对提取得率影响,用高效液相色谱法测定齐墩果酸和熊果酸含量,确定最优提取工艺。齐墩果酸最佳提取参数为95%的乙醇、温度为60℃、时间3h、料液比为1∶8、原料粒度40目、提取2次。熊果酸最佳提取参数为95%的乙醇、温度为60℃、时间3h、料液比为1∶6、原料粒度60目、提取2次。该工艺为齐墩果酸和熊果酸的工业化提取提供理论依据。     

RP-HPLC法测定新疆6种红枣中齐墩果酸和熊果酸的含量

采用反相高效液相色谱法测定新疆不同品种红枣中齐墩果酸和熊果酸的含量。采用Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.03 mol/L的磷酸二氢钠(磷酸调pH至3.0)(90:10),流速为0.8 mL/min,检测波长为210 nm,柱温25℃。上述色谱条件下红枣中齐墩果酸、熊果酸可完全分离,线性范围分别为齐墩果酸0.4～ 2.0μg(r=0.9998),熊果酸0.448～ 2.24μg(r=0.9999);平均回收率分别为齐墩果酸99.4%,RSD=1.33%,熊果酸99.6%,RSD=1.43%(n=6)。该方法快速、准确、可靠,可用于红枣中齐墩果酸和熊果酸含量的同时测定。     

高效液相色谱法测定巴旦木青皮提取物中齐墩果酸和熊果酸

采用质谱仪对巴旦木青皮提取物中齐墩果酸（oleanolic acid,OA）和熊果酸（ursolic acid,UA）进行鉴定,进一步用高效液相色谱法测定OA和UA含量,优化提取条件。高效液相色谱条件：利用Platisil ODS C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇-0.2%磷酸（85∶15,V/V）溶液为流动相,流速0.8 mL/min;柱温20 ℃;检测波长210 nm。结果表明：OA在0.005～0.5 mg/mL范围内线性关系良好（R2=0.999 9）,回收率在89.67%～94.85%之间,相对标准偏差在1.28%～3.16%之间（n=3）;UA在0.005～0.5 mg/mL范围内线性关系良好（R2=0.999 9）,回收率在88.67%～94.77%之间,相对标准偏差在1.07%～1.92%（n=3）之间。在不同提取条件下,提取剂为体积分数95%乙醇、料液比1∶40（g/mL）、提取时间40 min及提取3 次为最佳条件。     

山楂中齐墩果酸和熊果酸超声提取工艺研究

对山楂齐墩果酸和熊果酸超声波辅助提取工艺进行了优化,以齐墩果酸和熊果酸总含量为响应值,考查了液固比、超声波功率和提取时间对山楂总齐墩果酸和熊果酸含量的影响。结果表明,三个考查因素对山楂齐墩果酸和熊果酸含量影响的顺序为:液固比>提取时间>超声波功率;方差分析结果表明,液固比和提取时间对齐墩果酸和熊果酸含量有极显著影响(p<0.01),超声波功率对齐墩果酸和熊果酸含量有显著影响(p<0.05),提取时间的二次项对齐墩果酸和熊果酸含量有极显著影响(p<0.01),各因素之间交互作用不显著(p>0.05);确定超声波辅助提取山楂齐墩果酸和熊果酸的最佳工艺参数为:乙醇体积分数90%,液固比35∶1m L/g,超声波功率352W,提取时间为4.6min,在优化工艺条件下超声波辅助提取山楂齐墩果酸和熊果酸,其含量为2.87mg/g,与预测值相符。本实验中所用提取方法在显著节约了超声波处理的时间同时也获得了良好的提取效率。      

HPLC法测定山茱萸及其浸泡酒中熊果酸和齐墩果酸总量

建立了测定山茱萸及其浸泡酒中熊果酸和齐墩果酸总量的方法.样品使用无水乙醇超声提取,0.45 μm微孔滤膜过滤,滤液用高效液相法分析.色谱柱为Phenomsil C18 BDS柱(250 m×4.6 m,5μm),色谱柱温35℃,检测波长为215 nm,流动相为甲醇-水-冰乙酸(85:15:0.3);流速为0.6 mL/min.该法测得熊果酸的线性范围为0.52～5.20 μg,回归方程为A=381.63C-3.0644(R=0.9995),平均回收率为99.13%,RSD=1.98%(n=5);山茱萸及其浸泡酒中熊果酸和齐墩果酸总量分别为0.324%、0.147%.此法准确、快捷、重复性好,适合于山茱萸及其浸泡酒中熊果酸和齐墩果酸总量的测定.     

RP-HPLC法测定紫苏子、白苏子中乌索酸和齐墩果酸含量

采用反相高效液相色谱法测定紫苏子和白苏子中乌索酸和齐墩果酸含量,色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇—水(87:13),光电二极管阵列检测器,检测波长210 nm,流速0.8 ml/min,柱温28℃。乌索酸进样量在0.10～4.00μg,齐墩果酸进样量在0.05～2.00μg时呈现良好线性关系,平均加样回收率分别为100.6%和98.7%,RSD分别为1.6%和1.2%。方法灵敏、准确,重现性好,可用于乌索酸与齐墩果酸含量测定。     

Antioxidative and anti-inflammatory protection of oleanolic acid and ursolic acid in PC12 cells

PC12 cells were used to examine the in vitro antioxidative and anti-inflammatory effects of oleanolic acid (OA) and ursolic acid (UA). PC12 cells were pretreated with OA or UA at 20 and 40 microM and followed by exposure of hydrogen peroxide (H(2)O(2)) or 1-methyl-4-phenylpyridinium ion (MPP(+)) to induce cell injury. Results showed that H(2)O(2)- or MPP(+)-treatment significantly decreased cell viability and increased lactate dehydrogenase (LDH) release (P < 0.05). The pretreatment from OA or UA significantly and concentration-dependently reduced subsequent H(2)O(2)- or MPP(+)-induced cell death and LDH release (P < 0.05). Either H(2)O(2)- or MPP(+)-treatment significantly increased malonyldialdehyde (MDA) formation, decreased glutathione (GSH) content, and diminished glutathione peroxidase (GPX), catalase, and superoxide dismutase (SOD) activities (P < 0.05). The pretreatment from OA or UA significantly retained GSH, and reversed H(2)O(2)- and MPP(+)-induced impairment in catalase and SOD activities (P < 0.05), and decreased MDA formation (P < 0.05). Either H(2)O(2)- or MPP(+)-treatment significantly elevated interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor (TNF)-alpha levels (P < 0.05). The pretreatments from OA or UA significantly attenuated subsequent H(2)O(2)- or MPP(+)-induced release of IL-6 and TNF-alpha (P < 0.05). Based on the observed antioxidative and anti-inflammatory activities from OA and UA, these 2 compounds were potent agents against neurodegenerative disorder.     

微波辅助提取枇杷花中齐墩果酸和熊果酸的工艺优化

研究枇杷花中齐墩果酸和熊果酸的微波辅助提取最佳工艺条件,为合理利用枇杷花资源提供理论基础和技术依据。采用单因素及L9(34)正交实验筛选最佳提取条件,并对不同的提取方法进行比较;采用高效液相色谱法同时测定齐墩果酸和熊果酸的含量。结果:最佳提取工艺为乙醇体积分数80%、液固比40∶1mL/g、提取时间50min、微波功率300W、提取温度50℃,齐墩果酸和熊果酸提取量分别达到0.482、3.118mg/g,均显著高于超声波辅助提取和热回流提取的提取量(p<0.01)。      

RP-HPLC法测定石榴不同部位中熊果酸和齐墩果酸的含量

采用超声技术提取石榴不同部位中熊果酸和齐墩果酸,建立RP-HPLC法测定其含量。色谱柱为KromasilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(87∶13),光电二极管阵列检测器,检测波长210nm,流速0.8mL/min,柱温28℃。熊果酸进样量在0.443~7.088μg,齐墩果酸进样量在0.247~3.952μg时呈现良好的线性关系,相关系数均为0.9999,平均加样回收率分别为98.53%和98.36%,RSD分别为1.3%和1.5%。本方法灵敏、准确,重现性好,可用于石榴不同部位中熊果酸和齐墩果酸含量的测定。     

皱皮木瓜皮渣齐墩果酸和熊果酸提取工艺优化研究

优化利用皱皮木瓜鲜果皮渣进行齐墩果酸和熊果酸最佳提取工艺条件。在单因素实验基础上,通过正交实验设计优化皱皮木瓜鲜果皮渣齐墩果酸和熊果酸提取的最佳工艺条件,利用高效液相色谱法进行目标性成分指标检测。实验结果表明,皱皮木瓜鲜果皮渣齐墩果酸和熊果酸的最佳工艺为95%乙醇,料液比1∶15g/m L,提取时间50min,提取温度70℃,此条件下齐墩果酸和熊果酸的总提取率为1.607%。本实验所得工艺方法稳定可靠、操作简单,可以为皱皮木瓜皮渣进行齐墩果酸和熊果酸工业化生产提供参考数据。