羊胎盘免疫活性肽的制备及其活性

利用枯草芽孢杆菌在发酵过程中产蛋白酶的特点,对羊胎盘下脚料发酵制备羊胎盘免疫活性肽。以产物对小鼠脾脏淋巴细胞的刺激指数为指标,通过响应面法对发酵过程中的重要参数进行优化,考察了不同质量浓度下的发酵液单独和与LPS、Con A共同作用对小鼠脾淋巴细胞的刺激作用。采用超滤技术对发酵产物进行分离,研究不同分子质量范围的组分的免疫与抗氧化活性。研究表明:枯草芽孢杆菌发酵羊胎盘下脚料制备免疫活性肽的最佳发酵条件是:料液p H 5.42、碳源含量1.73%、发酵时间43.45 h,在该条件下的发酵液对小鼠脾淋巴细胞的刺激效果显著,当发酵液蛋白质量浓度为100μg/m L时,小鼠脾淋巴细胞的刺激指数达到23.26%,与LPS、Con A共同作用免疫效果显著,最适质量浓度分别为100,50μg/m L。超滤试验表明,不同分子质量组分的免疫活性和抗氧化活性不同,3~10 ku组分的免疫活性最高;3~10 ku和3 ku组分的抗氧化活性最高。     

双酶水解法制备羊胎盘活性肽

采用现代生物酶解技术制备羊胎盘生物活性肽 ,以水解度 (DH)和酸溶性肽得率(YASP)为指标 ,在单酶水解的基础上探索更加有效的新工艺———双酶水解工艺。实验确定了木瓜蛋白酶 (Papain)与胰蛋白酶 (Trypsin)的等活力混合酶为水解羊胎盘的最佳双酶组合 ,其最佳酶解工艺条件为 :pH7 0、温度 5 2℃、酶活添加量 3 0 0 0u/ g(料 )、底物浓度 10 %、水解时间 3h ,酶解前最佳热处理条件为沸水浴 15min。     

采用不同蛋白酶制备羊胎盘抗氧化肽的研究

选取羊胎盘为实验材料,以水解度、多肽含量和DPPH自由基清除率为考察指标,采用生物酶法对羊胎盘酶解制备抗氧化肽进行了研究。采用8种蛋白酶,在最优的酶解条件下对羊胎盘进行酶解制备抗氧化活性肽。结果表明,风味蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶酶解产物对DPPH清除的IC50分别为0.6420、0.7120和0.6781mg/m L。说明该三种酶对羊胎盘酶解制备抗氧化肽的效果比较好。      

羊胎盘抗氧化肽制备工艺及其体外抗氧化活性研究

以羊胎盘为原料,采用中性蛋白酶与风味蛋白酶复合酶对其进行酶解,以酶解产物对DPPH·清除率作为评价指标,采用响应面分析法优化羊胎盘抗氧化肽制备工艺。试验结果表明,在酶添加量4 000 U/g蛋白,中性蛋白酶和风味蛋白酶复配比1∶1.7,酶解时间3.5 h的组合条件下,对DPPH·清除率最高达99.89%,与理论预测值基相符。体外抗氧化活性试验表明,酶解产物对超氧阴离子、羟自由基、DPPH·、ABTS+清除率的IC50分别为3.241,0.678 1,0.678 0和0.453 2 mg/m L。     

采用不同蛋白酶制备羊胎盘抗氧化肽的研究

选取羊胎盘为实验材料,以水解度、多肽含量和DPPH自由基清除率为考察指标,采用生物酶法对羊胎盘酶解制备抗氧化肽进行了研究。采用8种蛋白酶,在最优的酶解条件下对羊胎盘进行酶解制备抗氧化活性肽。结果表明,风味蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶酶解产物对DPPH清除的IC50分别为0.6420、0.7120和0.6781mg/m L。说明该三种酶对羊胎盘酶解制备抗氧化肽的效果比较好。     

不同菌种制备大豆多肽的抗氧化活性比较研究

分别采用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母菌以及黑曲霉菌发酵豆粕制备多肽,利用SephadexG-15凝胶过滤层析、SDS-PAGE电泳等方法进一步纯化,并对各组分进行抗氧化能力的研究。结果表明:采用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母菌以及黑曲霉菌发酵豆粕得到多肽分别为13.512、12.462、14.752mg/mL。通过SephadexG-15凝胶过滤层析分别得到的组分Ⅰ分子质量范围分布在1055.67、1374.16、675.58u,组分Ⅱ分子质量范围分布在2031.49、2283.46、1625.54u。黑曲霉菌制备多肽原液及各组分清除3种自由基的作用较强,且组分1的清除效果好于组分2,其中对脂质过氧化物清除能力大于TBHQ,并与VC相当。      

大豆抗氧化活性肽发酵菌种的筛选

筛选发酵大豆抗氧化活性肽的菌种。以透明圈法、酶活力方法为指标从12株枯草芽孢杆菌中筛选出四株产酶高、活力强的菌株。用总抗氧化性为指标进行复筛得到适宜发酵生产大豆抗氧化活性肽的菌种Jb009,菌液酶活力达到2.28U/ml,水解产物体系总抗氧化能力为869.62U/g豆粕,此时水解度为11.47%。利用该菌作液体和固体发酵,结果发现,液体体系中发酵产物总抗氧化能力为621.68U/g豆粕,水解度为14.85%;固体发酵产物体系中总抗氧化能力为462.81U/g豆粕,水解度为15.39%。     

不同菌种发酵制备蚕豆酱的研究

本试验研究米曲霉、黑曲霉、黑根霉、高大毛霉4种不同单一菌种分别发酵制得的蚕豆酱中蛋白酶、淀粉酶活力及主要成分、酱色OD420nm值等指标在不同发酵时期的变化,并对发酵42d的蚕豆酱进行感官评价。结果表明,米曲霉的中性及碱性蛋白酶活力较其他三种菌强,分别高达546.84U和188.79U。米曲霉发酵的蚕豆酱氨基酸态氮含量最高,可达1.381 g/100g,根霉、黑曲霉次之,毛霉最少。米曲霉和黑曲霉制得酱的颜色深,酱色OD420nm值高,另两种霉制得酱的颜色较浅。米曲霉发酵制得蚕豆酱在色泽、气味和口感上都达到一级标准,是制作蚕豆酱的良好发酵菌种。     

不同菌种发酵制备白芸豆多肽的研究

以白芸豆豆渣为原料,比较了米曲霉、酿酒酵母和黑根霉发酵法对白芸豆豆渣蛋白的水解度,从而探索几种微生物中能够最大程度的利用白芸豆豆渣蛋白制取白芸豆多肽的菌种及发酵条件的优化.实验结果表明,酿酒酵母对白芸豆蛋白质的水解度比较彻底;35%,72h的水解度为6.5%;温度为30℃、发酵时间为48h时的水解度可达6.8%.为进一步利用发酵法制取白芸豆多肽提供了依据.     

双菌种液体发酵法发酵豆粕制备大豆肽的研究

大豆中蛋白质含量高达40%,氨基酸组成比较合理,大豆蛋白的研究与利用已引起人们广泛的关注。大豆肽是大豆蛋白经酶解后产生的分子量较小的化合物,在营养价值与生理功能上均优于大豆蛋白。液态发酵法是微生物发酵生产大豆肽的主要研究方向,以豆粕为原料,采用双菌种混合液体发酵生产大豆肽,可以充分利用原料、降低生产成本、改善大豆肽的口感、有效的消除抗营养因子,同时制得的大豆肽具有较好的生理特性和加工特性,产品广泛用于食品、医药工业。     

羊胎盘肽研究与利用进展

我国是养羊大国,羊胎盘资源量丰富,且羊胎盘极具营养和药用价值。为实现羊胎盘的高值化利用,本文首先总结了羊胎盘的主要营养成分及其功能,并深入阐述了羊胎盘肽的制备工艺现状以及其抗氧化活性和提高免疫活性的生理功能,在此基础上进一步总结了羊胎盘肽在护肤品、中药制剂和功能食品等方面的实际应用,利用CiteSpace软件对近20年来羊胎盘研究动态进行聚类分析。在阐述国内外羊胎盘肽开发利用的基础上,讨论了目前存在的问题,为羊胎盘的资源化利用提供参考。     

羊胎盘提取残余物免疫肽制备工艺的优化

在羊胎盘提取功能活性物质后,测定残余物主要生化组分的基础上,以酶解免疫肽对小鼠脾细胞的单独刺激指数(SI)为评价指标,通过单因素优化、响应面法优化复合酶解羊胎盘提取残余物制备免疫活性肽的酶解工艺。结果显示:在酶添加量2 500 U/g蛋白,中性蛋白酶和风味蛋白酶复配比1.75∶1,酶解时间4 h,酶解温度45℃,p H 7.0和料液比1∶50(g∶m L)条件下,酶解产物的SI值达到0.261 2,较阳性对照增加494%。     

固态发酵核桃粕制备活性肽及其抗氧化活性的研究

为高效利用核桃粕,本研究以核桃粕为原料,采用黑曲霉固态发酵制备活性肽。考察接种量、发酵时间、发酵温度和培养基含水比例对多肽得率的影响,通过响应面实验确定最优发酵工艺条件为:接种量5.5%,发酵温度33.50℃,培养基含水比例1.00mL/g,发酵时间84h。经验证实验可知,在最优发酵条件下核桃活性肽得率可达35.68%,比优化前提高了26.7%。该活性肽具有较强的体外抗氧化活性,DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除率的IC50分别为0.15、1.75、2.4mg/mL。由此得出核桃粕是一种良好的活性肽生产原料,且该活性肽是理想的天然抗氧化产品。      

固态发酵制备辣木叶活性肽及其抗氧化活性

为高效利用辣木叶中蛋白资源,该研究采用固态发酵方式制备辣木叶活性肽。首先以酶活力和肽含量为指标从米曲霉、黑曲霉中筛选出最优菌种,随后研究发酵时间、含水量、起始pH和接种量对肽含量的影响,再结合响应面设计优化发酵工艺,并对发酵制备辣木叶活性肽的抗氧化活性和氨基酸组成进行研究。研究发现,最佳工艺条件为：米曲霉为最优菌种,发酵温度30 ℃,发酵时间72 h,培养基含水量52.39%,接种量14.71%,pH为5。在最优发酵条件下制备的辣木叶活性肽具有很好的DPPH自由基清除率（EC50=1.0927 mg/mL）、ABTS自由基清除率（EC50=0.059 mg/mL）和Fe2+螯合率（EC50=9.76 mg/mL）。辣木叶活性肽中共检测出17种氨基酸,谷氨酸（Glutamic acid,Glu）、天冬氨酸（Aspartic acid,Asp）、酪氨酸（Tyrosine,Tyr）、组氨酸（Histidine,His）等具有抗氧化潜力的氨基酸的含量丰富。该研究为辣木叶的高值化利用和天然抗氧化功能食品的研发提供基础研究数据。     

混菌固态发酵菜籽粕制备菜籽肽的菌种筛选

通过平板培养和混菌发酵相结合的方法筛选固态发酵菜籽粕制备菜籽肽的最佳菌种,以硫苷降解率为指标评价其硫苷降解效果。结果表明:枯草芽孢杆菌与雅致放射毛霉混菌发酵效果最好,发酵后所产生的低分子量菜籽肽含量高于其他混菌,适合混菌发酵生产菜籽蛋白肽;枯草芽孢杆菌与宇佐美曲霉混菌发酵的硫苷降解效果较好,可进行后续脱毒实验的研究。     

酶解制备羊胎盘抗氧化肽工艺条件的优化

对羊胎盘下脚料为原料制备羊胎盘抗氧化肽的工艺进行了研究。以DPPH自由基清除率和水解度为考察指标,分别采用4种蛋白酶酶解制备羊胎盘抗氧化多肽,结果表明木瓜蛋白酶酶解产物的自由基清除率最高且水解度适中,因此木瓜蛋白酶被确定为水解酶。通过单因素试验与二次响应面回归分析对酶解工艺参数进行了优化。最佳酶解条件为:底物质量浓度33 mg/m L、pH 6.4、酶解温度55℃、加酶量4 900 U/g、酶解时间120 min,此时羊胎盘蛋白水解度为7.92%,10 mg/m L酶解产物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基与羟基自由基的清除率分别可达92.15%、93.45%与46.88%,显示出较好的抗氧化活性。     

不同菌种发酵对巴戟天活性成分含量的影响

该研究以工厂巴戟天（Morinda officinalis How.）为对照,研究传统腌制炮制法与不同菌株发酵炮制法对巴戟天活性成分含量的影响。结果表明,传统腌制炮制法优于发酵法炮制法;发酵炮制法中,芽孢杆菌属（Bacillus sp.）DU-106、鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）及植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）发酵法炮制巴戟天均显著提高了工厂巴戟天中的水分含量、多糖含量、游离蒽醌总量、水晶兰苷、果糖、葡萄糖含量（P＜0.05）,而不同程度地消耗了工厂巴戟天中的水溶性浸出物、蔗糖、1-蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖,其中酵母菌几乎全部消耗了巴戟天寡糖;比较工厂巴戟天发酵前后各活性成分含量表明,芽孢杆菌DU-106优于鼠李糖乳杆菌及植物乳杆菌,更适合发酵炮制巴戟天,为进一步开发巴戟天炮制技术提供新的方向。     

酵母固态发酵制备花生蛋白肽及抗氧化活性研究

研究啤酒酵母固态发酵制备花生蛋白肽,为进一步研究发酵花生粕产品提供理论基础。本研究运用单因素和正交试验方法对固态发酵制备花生蛋白肽工艺条件进行优化,其最佳制备工艺条件为:营养盐溶液添加量15 mL,啤酒酵母液添加量4 mL,30℃下发酵72 h。此工艺下制备的花生蛋白肽的可溶性氮浓度达到10.74 mg/mL,发酵液对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)和羟自由基清除率分别为93.57%和98.40%。分子量小于5 kDa的花生蛋白肽具有较高的抗氧化活性。     

不同菌种发酵大蒜液的品质比较分析

为研究不同菌种对发酵大蒜液品质的影响,对大蒜发酵过程中总酚、可滴定酸、甲醇、乙醇等理化指标和羟基自由基清除能力进行监测,利用高效液相色谱法分析其有机酸种类及其含量,采用电子舌分析不同发酵时间发酵大蒜的味感变化.结果表明,不同菌种(酿酒酵母或植物乳杆菌)发酵制备的大蒜液,在其发酵过程中,总酚、可滴定酸均呈现上升的趋势,发...     

黑曲霉固态发酵制备花生蛋白肽及抗氧化活性研究

研究黑曲霉固态发酵制备花生蛋白肽,为进一步研究发酵花生粕的深加工产品提供理论基础。运用单因素和正交试验方法对固态发酵制备花生蛋白肽工艺条件进行优化,其最佳制备工艺条件为:营养盐溶液添加量15 mL,黑曲霉液添加量1 mL,30℃下发酵36 h。此工艺下制备的花生蛋白肽的可溶性氮浓度达到38.74 mg/mL,发酵液对1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除率为81.22%,羟自由基清除率为84.88%。分子量小于5 ku的花生蛋白肽具有较高的抗氧化活性。