黑曲霉果胶酯酶固定化前后酶学性质比较研究

采用明胶加戊二醛包埋法和蛋壳微粒吸附法分别对黑曲霉果胶酯酶进行了固定化,并研究了两种固定化方法制备得到的固定化黑曲霉果胶酯酶的酶学性质。结果表明,通过固定化,黑曲霉果胶酯酶的各项酶学性质指标都得到了改善,明胶固定化果胶酯酶和蛋壳固定化果胶酯酶的酶活回收率分别为46.3%和42.2%,而且与游离果胶酯酶相比,两种固定化酶的最适温度都由40℃上升到45℃,最适pH由4.4下降到4.0和4.2,Km值0.0113%由下降到0.0033%和0.0027%。      

黑曲霉果胶酯酶固定化前后酶学性质比较研究

采用明胶加戊二醛包埋法和蛋壳微粒吸附法分别对黑曲霉果胶酯酶进行了固定化,并研究了两种固定化方法制备得到的固定化黑曲霉果胶酯酶的酶学性质.结果表明,通过固定化,黑曲霉果胶酯酶的各项酶学性质指标都得到了改善,明胶固定化果胶酯酶和蛋壳固定化果胶酯酶的酶活回收率分别为46.3%和42.2%,而且与游离果胶酯酶相比,两种固定化酶的最适温度都由40℃上升到45℃,最适pH由4.4下降到4.0和4.2,Km值0.0113%由下降到0.0033%和0.0027%.     

黑曲霉SL2-111产果胶酯酶的纯化与性质

通过硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱层析、Sephacryl S-200分子筛柱层析3个步骤,从黑曲霉SL2-111发酵的果胶酶粗品中纯化出一种电泳纯的果胶酯酶。经SDS-PAGE测定其分子质量约为48.8ku。最适pH值和最适温度分别为5.8和60℃。在50℃以下,pH值5.8-6.2之间酶活力相对稳定。     

苹果渣中提取果胶工艺研究

以苹果渣为原料 ,采取酸液提取、酒精沉析的方法制取高甲氧基果胶。探讨了酸的种类对产品得率的影响 ,并以盐酸为代表研究了酸液浓度、料液比、加热温度和时间对产品得率的影响 ,确定了苹果渣中果胶的最佳提取条件。产品经有关部门检测 ,符合果胶质量标准 ,对生产成本也进行了估算。     

酸法提取苹果渣中的果胶及其性质分析

采用酸法提取苹果渣中的果胶,并以单因素试验为基础,通过响应面法优化其提取工艺条件。结果表明,酸法提取苹果渣果胶的最佳工艺条件为：盐酸调节pH值1.5,温度100 ℃,时间2 h,固液比1∶14（g∶mL）。在上述最佳条件下,苹果渣中粗果胶得率为33.12%,果胶提取率为19.65%。4个因素对粗果胶得率的影响顺序为：pH值＞温度＞时间＞固液比。酸法提取果胶的分子质量主要分布在165.92 kDa、5.83 kDa与0.45 kDa范围;酯化度为60.90%,属于高酯果胶;半乳糖醛酸含量为70.48%,所提取的果胶纯度相对较高。     

天然低共熔溶剂提取米糠酯酶工艺优化及其纯化与酶学性质研究

目的：采用天然低共熔溶剂（Natural deep eutectic solvents,NADES）提取米糠酯酶并优化提取工艺参数,纯化米糠酯酶获得高纯度米糠酯酶,并探究其酶学特性。方法：合成了10种不同的NADES、选用了水浴搅拌和超声两种处理方式进行筛选,然后对提取效果最佳的NADES和方法进行单因素和响应面优化,参数包括料液比、含水量、提取温度和提取时间;将最优提取工艺得到的粗酶液通过阴离子交换树脂DEAE纯化,然后进行酶学性质的探究。结果：最佳提取米糠酯酶的工艺为在含有5%水分的脯氨酸-甘油（摩尔比1:2）溶剂体系中,水浴搅拌3.0 h,温度74.0℃,米糠和溶剂料液比为9:30,此时米糠酯酶活力为2.96 U。通过阴离子交换树脂DEAE纯化,获得了纯度较高的米糠酯酶,纯化倍数为1.74倍,回收率为69.40%,分子量约为35 kDa,对硝基苯酚乙酯为最适底物,最适温度和pH分别是40.0℃、pH8.0,在30.0～40.0℃和pH7.0～9.0时米糠酯酶均保持良好的稳定性。氯化胆碱-甘油、脯氨酸-甘油两种NADES对米糠酯酶的活力有较好的维持作用。结论：天然低共熔溶剂提取方式...     

海参乙酰胆碱酯酶的酶学特性研究

对海参乙酰胆碱酯酶(AChE)粗酶的酶学性质进行研究.采用含0.1% Triton X-100 的PBS缓冲液(0.1 M,PH7.4)分别从海参肠和海参体壁中提取 AChE,配合Ellman法测定AChE酶活力.结果表明,海参肠与体壁 AChE 具有相似的酶学性质,其最适反应 pH 值为8.0,pH在6～8时稳定;最适反应温度为35℃左右,在25～45℃内热稳定性较好.海参乙酰胆碱酯酶粗酶液能有效水解碘化硫代乙酰胆碱(AcSChI),但对碘化硫代丁酰胆碱(BuSChI)的作用较弱.当底物AcSChI浓度大于50 mM时产生明显的底物过量抑制效应.金属离子 Sn<'2+>、Zn<'2+>、Hg<'2+>、Ag<'+>、Cr<'6+>、Cu<'2+>及毒扁豆碱和BW284c51均对海参肠和海参体壁乙酰胆碱酯酶有不同程度的抑制作用.     

改性苹果果胶性质及抗氧化活性

以苹果果胶为原料,采用酸碱修饰和高压蒸汽法2种方法分别制备酸碱改性和热改性苹果果胶,并在分析苹果果胶改性前后理化性质的基础上,进一步研究了其体外抗氧化活性。结果表明:酸碱改性和热改性后的苹果果胶与未改性果胶相比:半乳糖醛酸含量由(683.92±4.51)mg/g分别增加到(910.61±1.08)mg/g和(780.19±5.68)mg/g,酯化度由(77.26±1.20)%分别降低到(35.48±1.90)%和(33.67±1.28)%。改性后果胶分子质量降低,多酚和蛋白质含量均较低(分别小于3 mg/g和7 mg/g)。改性前后苹果果胶的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率、羟自由基清除率、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基清除率和超氧阴离子自由基清除率均随果胶质量浓度的增大而增强,而且酸碱改性更有助于其抗氧化活性的提高,这可能与其半乳糖醛酸含量增加有关。     

苹果渣果胶提取工艺条件的研究

以苹果渣为原料,分别采用盐析法和醇沉法研究提取果胶的最佳工艺.盐析法提取果胶的条件为:酸提液pH为2.0,酸提时间1.0h,以硫酸锌为盐析用盐,添加量2%,脱盐液(10%HCl,70%乙醇)用量100mL.醇沉法从苹果渣中提取果胶的条件为:酸提液pH为1.5,料液比为1∶15,酸提时间为1.5 h,乙醇用量150mL.从产品得率和质量比较均为醇沉法提取果胶较好.     

白鲢鱼肌肉脂肪氧合酶提取条件优化及酶学性质研究

本文以白鲢鱼肌肉为原料,通过单因素实验对白鲢鱼肌肉脂肪氧合酶(LOX)提取条件进行优化;用圆二色谱法和荧光光谱法对其贮藏稳定性、热稳定性、最适p H进行研究;探讨磷酸盐缓冲液p H、离子强度、二硫苏糖醇(DTT)和乙二胺四乙酸(EDTA)添加量对白鲢鱼肌肉LOX提取工艺的影响。结果表明,白鲢鱼肌肉LOX适宜提取条件为磷酸盐缓冲液p H7.8、离子强度50 mmol/L、EDTA和DTT添加量均为2 mmol/L,在此条件下提取白鲢鱼肌肉LOX的酶液浓度为(1.98±0.037)mg/m L,活力为(244.44±5.93)U。通过对LOX酶学性质研究可知,白鲢鱼肌肉LOX在常温条件下0~2 d内酶活性较为稳定,最适作用温度为40℃,最适p H为7.8。      

从苹果渣中提取果胶的工艺研究

探讨了以苹果渣为原料提取果胶的最佳工艺条件,实验结果表明萃取液的pH值为2.0、料液比为1∶13、温度为85℃、水解时间为1.5h为提取果胶的最佳工艺条件,产率达14.04%。     

蛋清溶菌酶的提取及其酶学性质探究

采用阳离子交换法-超滤法协同分离提取蛋清中溶菌酶,首先通过单因素试验和Box-Behnken试验,优化蛋清中溶菌酶的提取工艺,然后对其酶学性质进行探究.结果表明:在树脂用量为蛋清滤液的24.2％,NaCl浓度1.00 mol/L,蛋清滤液pH 9.10,洗脱时间62.61 min时,溶菌酶经超滤离心后测得纯度为96.3...     

考氏科萨克氏菌产阿魏酸酯酶条件优化、酶学性质及其初步应用

以考氏科萨克氏菌（Kosakonia cowanii）为试验菌株,对其产酶条件、酶活性质以及初步应用进行研究。结果表明,最佳产酶条件为装液量90 mL/250 mL、培养基初始pH值为5.5、接种量4%、温度34 ℃。在此优化条件下,酶活为28.27 U/L,比优化前提高了20.92%。该酶最适反应温度、pH值分别为 50 ℃、5.6,在30～40 ℃及pH 5.0～6.8范围内稳定性良好。将该菌株应用到麸皮、大曲和糟醅中,麸皮中发酵至第7天时阿魏酸含量比最初提高了22.42%,糟醅中阿魏酸含量呈先增后减趋势,大曲中阿魏酸含量呈递增趋势,表明添加菌株有利于释放麸皮、糟醅和大曲中的阿魏酸。     

橙皮果胶的提取及性质研究

以脐橙皮为原料,经酸洗法处理后,以酸法提取橙皮果胶。通过单因素及正交实验确定果胶提取的最佳工艺为：料液比1∶25（m∶V）,提取pH1.7,提取温度85℃,提取时间100min。最佳醇沉条件：果胶提取液与乙醇的体积比1∶2,提取pH3.5。提取的果胶,提取率为21.816%,半乳糖醛酸含量为70.66%,酯化度为72.49%。其他性质如水分（9.71%）、灰分（3.26%）和pH（2.93）等均满足国标要求,表明该方法适宜用于从橙皮中提取果胶。     

曲霉来源果胶裂解酶PnlF的克隆表达及酶学性质分析

果胶裂解酶是一类通过β-消除机制降解果胶的多糖裂解酶,对果胶的利用具有重要意义。该研究利用真核表达载体,克隆表达了来自曲霉属Aspergillus costaricensis的酸性果胶裂解酶PnlF,经过亲和层析和凝胶过滤层析对该酶的发酵液进行了分离纯化,并对其酶学性质和降解果胶的产物进行了系统性研究。该研究成功实现了PnlF在毕赤酵母中的分泌表达,粗酶活力达到526 U/mg。PnlF的最适反应温度为50℃,最适反应pH为5.0;其酶活力在20～30℃及pH 5～6内稳定。Ca²⁺和Mg²⁺可以大幅度提高PnlF的活力;而Ag⁺和Cu²⁺则会严重抑制其活力;此外SDS、TritonX-100、苯甲磺酰氟等化学试剂对该酶活性的抑制作用较强。     

复合酶法提取苹果渣中的果胶及产品性质分析

为了从苹果渣中高效提取果胶,采用复合酶法对苹果渣中果胶的提取进行了研究。首先筛选出果胶得率较高的3种酶:纤维素酶、木聚糖酶和酸性蛋白酶;其次确定了3种酶的复配方案为纤维素酶7%、木聚糖酶9%、酸性蛋白酶5%;并采用响应面优化设计方法,获得了最佳的复合酶酶解条件:pH值4.1,温度54℃,时间1.3 h,固液质量体积比比1 g∶16 mL。在此最佳条件下,苹果渣粗果胶得率为40.66%。与传统的酸提法粗果胶得率26.84%相比,提高了51.49%。最后测定了最佳工艺条件下所得果胶的产品性质,结果表明:半乳糖醛酸质量分数为57.39%;果胶酯化度为89.41%,相对分子质量主要分布在217 630、16 670与8 170范围内,可作为制备一系列低酯果胶的原料。     

苹果中果胶的提取及其应用研究

本文论述了苹果中果胶（可溶性纤维）功能用途及有效成分的提取方法,从苹果中提取果胶,为最大程度的利用苹果资源,获得最大的经济效益提供思路.     

内源果胶酯酶制备低甲氧基果胶的研究

以新鲜橙皮为原料，在盐酸水解乙醇沉淀提取果胶之前，激活并利用果皮中固有的果胶酯酶进行果胶的酶法脱酯，制备低甲氧基果胶，以产品的甲氧基含量和果胶得率为指标，确定最佳工艺条件。结果表明新鲜橙皮内源酶法制备低甲氧基果胶的最佳工艺条件为：加入果皮浆液量0．15％的内源性果胶酯酶激活剂碳酸钠，控制温度45℃，pH值8．0进行脱酯，时间60min；果胶提取温度90％，时间60min，pH值2．0；在此条件下制备的果胶甲氧基含量为5．93％，符合低甲氧基果胶标准，果胶得率为2．46％。     

盐析法从苹果渣中提取果胶的工艺条件研究

探讨了以苹果渣为原料用盐析法提取果胶的工艺条件。本实验首次系统地采用五种盐进行果胶沉淀析出的对比研究，通过筛选确定了硫酸铝作为果胶沉淀剂，同时对盐析时盐用量、pH值、温度、反应时间等影响因素进行实验，得到盐析法的最佳工艺条件，为批量生产提供了依据。     

草菇木聚糖酶的纯化提取和酶学性质

草菇产胞外木聚糖酶通过各级浓缩和纯化,获得接近电泳纯蛋白.通过SDS PAGE测得相对分子质量为24500.木聚糖酶为糖基化修饰的蛋白,含有质量分数20.24%的糖.O 糖基化能增加木聚糖酶的活性,O 和N 糖基化都能提高木聚糖酶的稳定性.5min反应,草菇木聚糖酶在60℃和pH值5.65时活性最高.在此条件下,该酶的Km值为3.87mg/mL,Vmax为1250IU/mg.纯酶的稳定pH值为6.54,57℃时半衰期为1h.