酶解条件对核桃多肽抗氧化活性的影响

以核桃蛋白粉为原料制备核桃蛋白抗氧化活性肽,分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对核桃蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的核桃多肽抗氧化活性,确定碱性蛋白酶是酶解核桃蛋白的最适蛋白酶。研究了酶解温度、酶解时间、酶解pH、底物浓度、酶添加量等酶解条件对酶解产物抗氧化活性的影响。结果表明:不同的酶解条件对酶解产物核桃多肽的抗氧化活性有显著影响,最佳酶解条件为:温度50℃,时间120 min,pH8,底物浓度3%,酶添加量3%,在此酶解条件下制得的核桃多肽对羟基自由基和超氧阴离子的清除率分别为53.8%和50.0%,还原能力为51.7%。     

苦杏仁醇溶蛋白酶解抗氧化肽的制备工艺优化

以苦杏仁醇溶蛋白为原料,采用甲醛电位滴定法以水解度和自由基清除率为评价指标对风味蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶五种生物酶在最适条件下对苦杏仁醇溶蛋白的酶解效果进行酶的优选。在单因素实验的基础上,以酶添加量、底物浓度、p H、时间为自变量,通过四因素三水平Box-Bohnken响应面分析法对生物酶解工艺进行优化。结果表明碱性蛋白酶为酶解苦杏仁醇溶蛋白的最优选择,预测最优工艺条件为时间:4.12 h、酶添加量5208.93 U/g、底物浓度3.21%、p H 9.22,根据最终试验目的,选取条件为:时间:4.0 h、酶添加量5000.0 U/g、底物浓度3.0%、p H 9.0。通过验证试验得出响应值DH%为26.74%±0.54%,DPPH自由基清除率为97.86%±0.58%,与预测值相差较小,故此条件下酶解苦杏仁醇溶蛋白抗氧化肽为最优工艺。     

核桃多肽的制备及其体外抗氧化性研究

以核桃蛋白为原料,以水解度为指标,通过单因素和正交试验优化了碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺参数。得到碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量5%,底物浓度3%,酶解温度55℃,酶解p H为9.0,酶解时间6 h;在各酶最佳条件下获得的核桃多肽具有一定的抗氧化性。     

Alcalase蛋白酶酶解大黄鱼内脏制备抗氧化肽

通过Alcalase蛋白酶酶解大黄鱼内脏蛋白制备抗氧化肽,以酶解液的水解度(DH)、DPPH·和羟自由基清除率为指标,比较不同酶添加量、p H值、温度、料液比以及酶解时间对酶解效果的影响,并用响应面法优化Alcalase蛋白酶酶解反应的工艺条件。结果:Alcalase蛋白酶酶解大黄鱼内脏蛋白的最优工艺条件为:酶解p H9.0、底物质量浓度8 g/100 m L、温度62℃、加酶量4.26%、酶解时间3.7 h。在此条件下,蛋白质水解度为30.66%,DPPH自由基清除率为85.97%,羟自由基清除率为75.79%。对优化的酶解液进行氨基酸成分分析表明:大黄鱼内脏多肽含有丰富的组氨酸(His)、天冬氨酸(Asp)、酪氨酸(Tyr)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro),具有较高的抗氧化活性。     

酶解鹰嘴豆制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺研究

以鹰嘴豆为原料,以其酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率和水解度为指标,比较中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对鹰嘴豆的酶解效果,并进一步对碱性蛋白酶的酶解工艺参数进行响应面法优化。结果表明碱性蛋白酶的酶解效果最好,响应面法优化得到碱性蛋白酶酶解鹰嘴豆制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的最佳工艺条件为:酶解时间5.1 h,酶解温度57℃,底物浓度5.2%,p H 10.0,加酶量4 000 U/g。在该工艺条件下,鹰嘴豆蛋白水解度为14.51%,酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率可达32.79%。     

葡萄籽多肽的制备及其抗氧化活性

以葡萄籽蛋白粉为原料,经碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解,通过单因素试验和正交试验优化提取葡萄籽多肽的工艺条件,并研究葡萄籽多肽的抗氧化活性。结果显示,葡萄籽多肽的最佳酶解条件:酶解时间5 h, pH 7.5,酶的添加量为底物质量的2.5%,酶解温度50℃,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶质量比3︰2,在该条件下脱脂葡萄籽多肽得率达78.64%,对其清除DPPH自由基的能力和对铁离子还原能力进行检测,研究表明葡萄籽多肽具有一定的抗氧化功能。此次试验为葡萄籽蛋白活性肽的高效制备及抗菌肽等高附加值产品的研发提供理论依据。     

发芽鹰嘴豆多肽/沙棘复合饮料配方优化

以发芽鹰嘴豆蛋白为原料制备发芽鹰嘴豆多肽,通过单因素和响应面试验,优化酶解发芽鹰嘴豆蛋白制备发芽鹰嘴豆多肽的最佳工艺、发芽鹰嘴豆多肽复合饮料的配方并分析发芽鹰嘴豆多肽/沙棘复合饮料的抗氧化活性。结果表明,酶解发芽鹰嘴豆蛋白制备发芽鹰嘴豆多肽的最佳工艺条件为底物浓度1%,加酶量12 000 U/g,酶解时间1.5 h。响应面法优化分析该饮料的最佳配方参数为可溶性固形物含量9.0%,多肽添加量25.0%,沙棘浓缩汁添加量2.0%,饮料对DPPH自由基和羟基自由基的清除率分别为95.31%、94.53%。     

黄鳝鱼骨多肽制备及其抗氧化活性

以黄鳝鱼骨为原料,选用不同蛋白酶对其进行酶解,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,得到了具有较高抗氧化活性的黄鳝鱼骨多肽。通过单因素试验和响应面分析优化得到酶解黄鳝鱼骨制备多肽的最佳工艺条件为：选用木瓜蛋白酶,底物质量浓度40 mg/mL、酶添加量8 000 U/g、酶解温度59.2 ℃、pH 5.8、酶解时间4.1 h,在此条件下得到的黄鳝鱼骨多肽DPPH自由基清除率为90.85%。通过不同的体外抗氧化指标对黄鳝鱼骨多肽的抗氧化活性进行测定,结果发现黄鳝鱼骨多肽具有良好的抗氧化活性,随着多肽质量浓度的升高,其抗氧化活性不断增强,表现出良好的量效关系。     

大米蛋白抗氧化肽的酶法制备工艺研究及其优化

以大米蛋白粉为反应底物,采用酶解法制备大米蛋白抗氧化肽。以酶解液的水解度与对DPPH自由基的清除率为指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶中筛选出木瓜蛋白酶为最佳用酶。通过BoxBehnken响应面设计法优化木瓜蛋白酶酶解大米蛋白抗氧化肽的工艺条件为p H值5.25、酶解温度61.4℃、加酶量5.6 U/m L、底物质量浓度5.3 g/100 m L。其酶解液稀释5倍后对DPPH自由基的清除率为94.8%。     

鹰嘴豆蛋白水解物类蛋白反应修饰与抗氧化活性研究

以碱性蛋白酶水解鹰嘴豆蛋白,制备水解度为20.03%的蛋白水解物,以该蛋白水解物为底物进行类蛋白反应修饰,制备抗氧化活性肽。以游离氨基减少量为试验指标,在分析反应温度、加酶量、底物质量分数对类蛋白反应影响的基础上,采用中心组合设计建立酶添加量、底物质量分数和p H值与游离氨基减少量的回归模型,优化类蛋白反应条件。试验结果表明,所建回归模型具有统计学意义,可以预测类蛋白反应规律。p H值对游离氨基减少量影响最大,其次是加酶量,底物质量分数影响较小。类蛋白反应的优化条件是:酶添加量417.4 U/g,底物质量分数49.8%和p H 3.48。抗氧化活性分析表明,类蛋白反应修饰产物的还原力和·OH清除率显著提高。     

二次旋转正交设计优化鹰嘴豆蛋白酶解工艺的研究

实验选用碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavourzyme)分步依次酶解鹰嘴豆蛋白,采用二次旋转正交组合实验设计对其酶解工艺进行优化。结果显示,在初始p H8.5,初始温度55℃,鹰嘴豆蛋白酶解的最佳工艺条件为:底物浓度1%,碱性蛋白酶的添加量为2000U/g,作用时间为2.5h,风味蛋白酶的添加量为4000U/g,作用时间为3h。在此条件下,其最大水解度可达29.17%。     

二次旋转正交设计优化鹰嘴豆蛋白酶解工艺的研究

实验选用碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavourzyme)分步依次酶解鹰嘴豆蛋白,采用二次旋转正交组合实验设计对其酶解工艺进行优化。结果显示,在初始p H8.5,初始温度55℃,鹰嘴豆蛋白酶解的最佳工艺条件为:底物浓度1%,碱性蛋白酶的添加量为2000U/g,作用时间为2.5h,风味蛋白酶的添加量为4000U/g,作用时间为3h。在此条件下,其最大水解度可达29.17%。      

蛋清粉酶解制备蛋清肽工艺优化研究

筛选了用于酶解蛋清粉的蛋白酶,并对碱性蛋白酶酶解蛋清制备活性肽的最佳工艺条件进行了优化。单因素试验结果表明酶解温度50℃、酶解p H值9.5和10%的底物浓度可以获得较佳的酶解产物抗氧化活性,正交试验表明,p H值9.5,底物浓度10%和反应温度50℃,酶解产物清除DPPH自由基能力最强;在p H值10.5,底物浓度5%和反应温度50℃时,酶解产物具有最佳的还原力0.514。基质辅助激光解析串联飞行时间质谱对酶解产物多肽分析结果表明,蛋清肽的分子量集中在2100-5000。     

双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化多肽的研究

本文以葵花籽粕蛋白粉为原料,获取双酶酶解葵花籽粕蛋白制备抗氧化活性多肽的最优工艺。分别采用碱性蛋白酶等七种蛋白酶对葵花籽粕蛋白进行酶解,以抗氧化性及水解度为指标对酶制剂进行筛选。以抗氧化性为指标,通过单因素及响应面法对酶解条件进行优化,获取最佳酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶为最适酶制剂且最佳酶解工艺为:p H7.6、复合酶比例为2.5∶1、底物浓度2%、[E]/[S]为2%、酶解温度50℃、酶解时间200min,在此条件下,葵花籽粕多肽对O-2·和·OH清除能力分别为68.06%和50.12%。      

响应面优化酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺

为优化碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化活性肽的工艺条件,考察酶解条件对酶解产物的抗氧化活性的影响。以羟基自由基的清除率、超氧阴离子自由基的清除率、还原能力为考察指标,使用响应面分析法,研究温度、pH值、底物浓度和酶添加量对制备抗氧化活性肽工艺的影响。经过优化得出最优酶解条件为:温度51℃、pH值8.13、底物浓度3.16%、酶添加量3.30%,在此最优条件下核桃多肽对羟基自由基的清除率为55.93%、对超氧阴离子自由基的清除率为47.85%、还原能力为55.34%。在10mg/mL的浓度下,核桃多肽的还原能力是VC的55.3%,对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别是VC的93.8%和52.2%。     

中性蛋白酶酶解核桃饼粕制备抑菌多肽的研究

以核桃饼粕为材料,研究中性蛋白酶的酶解条件对核桃饼粕蛋白多肽液抑菌性的影响。通过单因素试验及正交试验,研究了酶的添加量、p H、时间、温度及底物浓度对多肽液抑菌性的影响,并用葡聚糖凝胶层析柱对多肽液进行分离,测定其抑菌性。结果表明:当中性蛋白酶酶解核桃饼粕制备抑菌性多肽的酶解条件为酶添加量16 000 U/g,酶解p H 8.0,酶解温度45℃,酶解时间5 h时,多肽液具有较好的抑菌活性,且对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为20.55,19.85和20.05 mm;经葡聚糖凝胶层析分离,其多肽分子量越小,抑菌性越强。     

葡萄籽多肽制备及其自由基清除能力的研究

用复合酶(碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶)水解方法制备葡萄籽多肽,通过单因素试验考察酶添加量、酶解时间、酶解温度和酶解p H值对脱脂葡萄籽蛋白水解度的影响。在基于单因素试验的条件下,选用三因素三水平试验确定复合酶分析3个因素对响应值的影响。结果表明最佳酶解工艺参数为:复合蛋白酶质量比例为7∶3,酶添加量为2%、酶解时间3 h、酶解温度50℃、pH 7.4,在该条件下脱脂葡萄籽蛋白的水解度达24.33%,葡萄籽蛋白复合蛋白酶酶解物在质量浓度为120μg/mL～600μg/mL的范围内,其对DPPH自由基的清除能力为19.25%～41.03%,且存在明显的量效关系,与VC、VE相比,葡萄籽多肽用量为0.15%时抗氧化效果较好。     

复合酶解牦牛乳酪蛋白工艺优化及抗氧化性的研究

为了优化牦牛乳酪蛋白酶解工艺,研究其产物抗氧化活性,选用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶,在其最适条件下酶解牦牛乳酪蛋白,以水解度(DH)、DPPH·自由基清除率和超氧阴离子清除率为评价指标,筛选出2种效果最优的单酶进行复配,采用单因素试验及L9(34)正交试验确定最优酶解工艺。结果表明:中性蛋白酶和胰蛋白酶比例为1:2效果最佳,最佳酶解工艺条件为底物浓度5%(w/v),温度42.5℃,p H值7.5,复合酶添加量3%,作用时间150 min,酶解产物抗氧化活性最高,DPPH·自由基清除率达到了64.26%±0.18%,超氧阴离子清除率达到40.34%±0.92%。     

河蚬多肽的制备工艺

以酸溶性多肽得率(TCA-SN)为指标,研究河蚬多肽的制备工艺.比较了中性蛋白酶Neutrase、复合蛋白酶Protamex、碱性蛋白酶Alcalase和木瓜蛋白酶Papain对河蚬蛋白的水解效果,考察了加酶量、p H、温度、时间、底物浓度五种因素对Alcalase碱性蛋白酶酶解过程的影响,采用正交实验优化法确定碱性蛋白酶Alcalase最佳酶解工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量3%,底物浓度2%,起始p H8.5,酶解时间为3 h;在此条件下酸溶多肽的得率为29.65%。再利用大孔树脂吸附法对河蚬多肽进行分离,比较SQD-67、DA201-A、DA201-DⅡ、DA201-M和DA201-H几种树脂对河蚬多肽的吸附性能,最终确定大孔吸附树脂DA201-C的最佳吸附条件为:上样流速1 BV/h,上样浓度30 mg/m L,乙醇洗脱浓度为75%,洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥得到河蚬多肽,其纯度为82.19%。     

核桃多肽的制备工艺优化及抗氧化活性研究

试验以核桃蛋白粉为原料,分别采用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶以及碱性蛋白酶进行酶解。对影响酶解的主要因子pH、酶解温度、加酶量以及底物浓度进行单因素试验,采用响应面法优化核桃多肽的水解工艺。结果表明:在pH 9.0,温度53℃,加酶量7 430 U/g底物以及底物浓度为2.2%时达到最佳。在此条件下,三次重复验证性试验测得核桃蛋白水解度为14.54%±0.32%。该工艺制备的核桃多肽抗氧化试验表明,其清除·OH和DPPH自由基的IC_(50)值分别为15.43和18.38 mg/m L,是一种优良的抗氧化多肽,具有广阔的市场前景。