紫外-硫酸二乙酯复合诱变选育酒精高产菌株

用紫外线-硫酸二乙酯复合诱变K氏酿酒酵母,正交实验确定最佳诱变参数为紫外照射80 s、5?S、35℃水浴振荡处理60min.最终选出1株酒精高产菌株K-80-60,其发酵最终酒精含量为14.6%.     

硫酸二乙酯、紫外及~γCO_(60)辐射诱变筛选高产丁二酮菌株

以干酪乳杆菌亚种(Lactobacillus casei subsp.casei)ATCC393为出发菌株,其产丁二酮能力为57.31mg/L。分别采用硫酸二乙酯、紫外及γCO60辐射诱变育种,发酵,测丁二酮产量。γCO60辐射诱变后获得2株高产菌株,丁二酮产量分别为79.73mg/L和73.06mg/L,各为出发菌株的1.39倍和1.27倍。γCO60辐射诱变的最佳条件:50Gy/min剂量率,菌液浓度108个/mL,750Gy剂量照射处理。此时致死率为99.36%。     

硫酸二乙酯与紫外线复合诱变选育糖化酶高产菌株的研究

目的通过诱变育种,提高糖化酶生产菌株黑曲霉WT(Aspergillus niger WT)的产酶能力。方法用硫酸二乙酯(DES)和紫外线(UV)进行复合诱变,通过淀粉透明圈法筛选优势菌株,并通过摇瓶发酵对优势菌株的产酶能力进行验证。结果通过DES诱变,得到一株产酶能力为11 737 U/ml的突变株DES3,较原始菌株黑曲霉WT产酶能力提高30%;将DES3进行紫外诱变,得到一株产酶能力为13 858 U/ml的突变株DUV1,产酶能力较DES3提高18%,较原始菌株黑曲霉WT提高53%。结论本论文采用DES和UV复合诱变的方法,有效提高了糖化酶生产菌株黑曲霉WT的产酶能力,对糖化酶产业的发展具有重要意义。     

紫外线与硫酸二乙酯复合诱变选育酸性蛋白酶高产菌株

采用紫外线与硫酸二乙酯复合诱变处理黑曲霉菌株Aspergillus niger UV-D-8,提高其产酸性蛋白酶能力。结果表明,诱变后菌株的酶活为459.8 U/mL,相对于出发菌株提高了52.7%。对UV-D-8进行10次传代实验,其相对酶活稳定在95%以上,菌株具有良好的遗传稳定性能。     

硫酸二乙酯诱变选育乳酸菌菌株的研究

为改进酸奶的储藏质量,延长货架期,从酸奶发酵剂八手研究了硫酸二乙酯(DES)诱变乳酸菌的参数,以期选育出抗酸奶后酸化的菌株,从而延长酸奶的保质期.在前期预试验的基础上采用均匀设计试验方案,确DES浓度、诱变时间、诱变温度的最佳工艺参数.结果表明:影响致死率的因素大小顺序:DES浓度＞诱变温度＞诱变时间;DES诱变的最佳条件:DES质量分数0.7%,诱变时间为30 min.诱变温度为37℃.筛选得到的突变菌株N01#,在37℃贮藏时产乳酸量与出发菌株一样,而在10℃贮藏时,产乳酸量明显减少;贮藏期与对照相比延长了3 d.物性指标(硬度、弹性、黏附性)测定显示良好.     

复合诱变选育表面活性素(surfactin)高产菌株

为筛选抗菌脂肽表面活性素高产菌株,以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis fmbJ224为出发菌株,先后采用氯化锂(LiCl)、亚硝基胍(NTG)、甲基磺酸乙酯(EMS)和链霉素(streptomycin)进行复合诱变。结果表明：经初筛、复筛选育得到1株高产抗菌脂肽菌株LN2-3,其Surfactin产量达到239.2mg/L,比出发菌株Bacillus subtilis fmbJ224(5.25mg/L)提高了44.56倍,且该菌株具有良好的遗传稳定性。提示采用LiCl-NTG复合诱变能较大幅度的提高诱变率,可以获得抗菌脂肽高产菌株。     

60Co-γ射线-离子束复合诱变法选育高产糖化酶菌株的研究

以黑曲霉UV-4为出发菌株,利用60Co-γ射线与离子束进行复合诱变。试验表明:经复合诱变,可以获得高产糖化酶的菌株AnUVγN+7,酶活达到1 100.9U/mL,是原始菌株UV-4(156.1U/mL)的7倍,菌株经过7次传代,结果显示酶活较稳定,以此可选育高产糖化酶菌株。     

复合诱变选育细菌纤维素耐酸性高产菌株的研究

首先用紫外线对出发菌株的菌体进行诱变,然后再用硫酸二乙酯对突变株进行诱变,最后经筛选获得耐酸突变株。该突变株在pH值为3.1以下生长时,产纤维素水平为9.2 g/L,比突变株U31提高了12.2%,比出发菌株提高了31.43%。对突变株UE26进行传代和稳定性试验,结果表明该菌株具有遗传稳定性,适宜作为研究细菌纤维素的高产菌株。     

应用~(60)Coγ射线消毒原毛

不少毛纺织工厂,以选毛工为生的职业人员中,布鲁氏菌(下称布菌)感染率很高,证实了原毛中布菌的存在。研究原毛消毒,以期在选毛前杀灭这种细菌,对于保护毛纺工人的健康,是一项意义重大的工作。本文对原毛消毒方法作了讨论,指出了化学法的缺点,介绍了辐射灭菌的原理,依据试验和资料,证明用~(60)Coγ射线消毒原毛是可行的,求出了消毒剂量,并指出了这种方法的特点和优越性。 对原毛消毒的基本要求是能杀灭原毛中的布菌,不损伤毛纤维的性能。此外还要求经济、安全。 随着我国羊毛生产的发展,国家每年收购的原毛已很可观,其中半数以上用于毛纺织…     

γ-聚谷氨酸高产菌株的诱变选育研究

本文对一株产γ-聚谷氨酸的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)进行了紫外照射、紫外-硫酸二乙酯、紫外-亚硝基胍复合诱变筛选研究以及诱变株的摇瓶筛选研究,建立了聚谷氨酸产生菌地衣芽孢杆菌最佳诱变方法:紫外诱变8min,致死率为90.6%;紫外-硫酸二乙酯复合诱变致死率94%;紫外-亚硝基胍复合诱变致死率89.8%诱变效果最好。诱变株γ-聚谷氨酸产率最高达到了3.55%,比出发菌株1.48%提高了140%。     

L—谷氨酰胺高产菌株的硫酸二乙酯诱变育种

采用谷氨酸棒杆菌S9114为出发菌株,经硫酸二乙酯诱变处理,定向选育出一株生产菌SWW43,在适宜的条件下积累谷氨酰胺（Gln),Gln的平均质量浓度为28．8mg/mL,最大时可达31．9mg/mL。     

紫外-硫酸二乙酯复合诱变高通量筛选虫草素高产蛹虫草突变株

为了进一步提高虫草素的产量,本研究以蛹虫草(Cordyceps militaris)CICC 14014菌株为出发菌株,利用紫外-硫酸二乙酯(UV-DES)进行原生质体复合诱变,结合96孔板高通量筛选方法筛选虫草素高产且性状稳定的菌株。通过96孔板初筛获得54株虫草素产量大于6 g/L的突变株;再经三角瓶复筛,最终筛选出了一株虫草素高产突变菌株UD10-2,在液体表面培养条件下虫草素产量达到11.32 g/L,比发菌株CICC 14014(产量为5.43 g/L)提高了108.47%,经过20次传代后性状稳定。     

复合诱变选育新霉素高产菌株的研究

为了获得优良的新霉素高产菌株,以弗氏链霉菌（Streptomyces fradiae）AS4．576为出发菌株,经4次紫外线诱变,紫外线-LiCl处理,随机挑选平板菌落214株,初筛得到13株抑菌圈较出发菌株〉90％的菌株,经复筛获得1株效价提高178倍的菌株UV40s-9（2）,再经微波复合诱变,以链霉素作为筛选因子得到菌株WB40s-6,其效价较UV40s-9（2）菌株提高了15．2％。     

高产γ-氨基丁酸乳酸菌菌株的诱变选育与鉴定

本文以从内蒙古传统发酵食品中分离的80株乳酸菌为研究对象,在GYP培养基中进行高产γ-氨基丁酸（GABA）菌株的筛选后,利用紫外线进行诱变处理,得到GABA突变菌株,并对其进行了菌种鉴定。结果表明,从80株供试乳酸菌中筛选出4株高产γ-氨基丁酸的菌株,再经紫外诱变后得到1株高产突变菌株US3-3。该菌株紫外诱变后,其γ-氨基丁酸含量为2.482 g/L,是诱变前提高1.9倍,并对其多次传代稳定性较好,经16S r DNA序列分析,鉴定为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）。      

高产γ-氨基丁酸乳酸菌菌株的诱变选育与鉴定

本文以从内蒙古传统发酵食品中分离的80株乳酸菌为研究对象,在GYP培养基中进行高产γ-氨基丁酸(GABA)菌株的筛选后,利用紫外线进行诱变处理,得到GABA突变菌株,并对其进行了菌种鉴定。结果表明,从80株供试乳酸菌中筛选出4株高产γ-氨基丁酸的菌株,再经紫外诱变后得到1株高产突变菌株US3-3。该菌株紫外诱变后,其γ-氨基丁酸含量为2.482 g/L,是诱变前提高1.9倍,并对其多次传代稳定性较好,经16S r DNA序列分析,鉴定为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)。     

^60Coγ—DES复合诱变选育高产中性蛋白酶枯草杆菌及其发酵工艺研究

由一株枯草芽孢杆菌作为出发菌株,通过^60Coγ—DES（^60Coγ-硫酸二乙酯）进行物理化学复合诱变,采用平板酪蛋白水解圈法初筛,摇瓶复筛后,得到一株活力较出发菌株产酶活力增大44．5％的突变株。研究了发酵工艺参数对该突变菌体生长及产酶的影响,并确定了接种量1％,最佳初始pH为7．0,发酵温度为30℃的发酵工艺条件,结果证实,经过优化,可以获得较好的酶活,平均产酶能力可达到2135．43U,较原始菌株提高了59．60％。     

利用多功能等离子体诱变系统快速诱变选育γ-氨基丁酸高产菌株

为建立一种快速便捷的产γ-氨基丁酸(GABA)高产菌株的诱变选育方法,以产GABA的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)TCCC 13007为出发菌株,采用多功能等离子体诱变系统(MPMS)对其进行诱变育种。最佳诱变条件为氮气流量10 L/min、照射间距3 mm、120 W功率条件下处理90 s,致死率90%。将诱变后的菌悬液涂布到CaCO_3筛选平板上,以CaCO_3透明圈与菌落直径比值为依据,建立了平板-96深孔板-摇瓶的快速筛选体系。最终通过摇瓶复筛,选育得到了一株GABA产量明显提高的突变株L8,GABA产量达到(66.59±0.58)g/L,较出发菌株提高了11.41%。10次连续传代与摇瓶发酵实验表明,突变株L8的发酵性能和遗传稳定性良好。     

紫外-硫酸二乙酯复合诱变选育耐高渗（高糖）酵母菌

从内蒙古锡林郭勒酸马奶中分离筛选出一株酵母菌A9,通过A9的紫外（UV）诱变、硫酸二乙酯（DES）单因素实验,确定最佳诱变参数。结果表明,最佳紫外诱变参数为于30 W紫外灯下、距灯30 cm处、紫外照射75 s时,紫外诱变的致死率为78.9%;最佳的硫酸二乙酯诱变参数为将加入1%DES的菌悬液、在35℃的水浴恒温振荡箱中、振荡15 min,硫酸二乙酯诱变的致死率为76.1%。经过3轮连续复合诱变,筛选出4株突变菌株,与出发菌株A9共同进行耐高渗（高糖）实验,当耐高渗（高糖）培养基中的葡萄糖浓度为65%时,出发菌株A9的生长完全被抑制,而突变菌株A9-2在此条件下依旧生长,A9-2的耐高渗（高糖）性能明显高于A9,最终筛选出A9-2为最佳耐高渗（高糖）菌株。通过酒精发酵实验,突变菌株A9-2的10代发酵液,其CO2的总失重量为13.20 g,残糖量为13.9°Bé,酒精度5.1%（v/v）,与3代发酵液各项指标相似,确定遗传性能稳定,且菌株发酵力、酒精度明显高于出发菌株A9。      

氨肽酶产生菌60Coγ射线诱变育种的研究

采用呻^60Coγ射线对氨肽酶产生菌米曲霉U42进行照射诱变，获得4株高产菌株，经多次摇瓶发酵实验表明，其中菌株UCo42-3发酵酶活为6210U／mL，其平均产氨肽酶比出发菌株提高了约150％，连续传6代，产酶能力稳定。