4种蛋白质分析方法在液态乳中的适用性研究

分别利用凯氏定氮法、三氯乙酸-双缩脲比色法、考马斯亮蓝法和福林-酚法等4种方法,对液态乳中添加尿素、甘氨酸、硝酸铵、亚硝酸钠、水解蛋白、三聚氰胺等非蛋白含氮物后的蛋白质量浓度进行了测定,并与其理论值进行了比较.结果表明:凯氏定氮法和福林-酚法测定的液态乳蛋白质量浓度与其理论值存在显著差异,而考马斯亮蓝法和三氯乙酸-双缩脲比色法则能较好地反映其真实的蛋白含量.考马斯亮蓝法灵敏度高,适合测定蛋白含量较低的样品;而三氯乙酸-双缩脲比色法的测定结果与液态乳中真实蛋白质量浓度更加接近.     

浅谈蛋白质含量的定量检测方法

综述了凯氏定氮法、紫外吸收法、双缩脲比色法、Folin-酚法、考马斯亮蓝法、BCA法、磺基水杨酸沉淀法、滴定法及电泳法等主要的蛋白质的定量检测方法。同时,分别介绍了各方法的原理和特点,以及评价了各种方法的特点和适用条件。它为对实际测定中如何适宜的检测方法提供指导方向。     

蛋白质定量检测方法的探讨

综述了凯氏定氮法、考马斯亮蓝法、双缩脲法、Folin-酚法、紫外吸收法、BCA法、近红外光谱技术、电泳法及数字图像法等主要的蛋白质定量检测方法,分别介绍了各方法的原理、特点及应用,说明了其优缺点和适用范围,并通过实例对各种蛋白质的检测方法进行了探讨。     

胶原多肽浓度测试方法的比较与分析

通过考查茚三酮法、双缩脲法、福林酚法、BCA法、考马斯亮蓝法、凯氏定氮法和TON法测试胶原多肽质量浓度的准确性、稳定性和易操作性,进而评价这些方法用于多肽浓度测试的适用性。实验结果表明,茚三酮法、双缩脲法、福林酚法、BCA法和TON法可以较准确地测定胶原多肽的质量浓度,其中茚三酮法、BCA法和TON法的检测限值低,分别为0.004、0.02、0.02 mg/mL;双缩脲和福林酚法的检测限值较高,为0.3 mg/mL和0.2 mg/mL。茚三酮法、双缩脲法、福林酚法和BCA法的相对标准偏差较低(6%),表现出较凯氏定氮法和TON法更优的稳定性。此外,茚三酮法和双缩脲法在测试成本和耗时方面具有更强的可操作性。     

不同沉淀方法对牛乳中蛋白质质量分数测定的影响

通过单因素试验和正交试验优化硫酸铜、饱和食盐水、乙醇、乙酸铅、三氯乙酸沉淀牛乳中蛋白氮的最佳沉淀条件,并对分别添加了尿素、硝酸铵、亚硝酸钠、三聚氰胺、三种水解蛋白的牛乳样品进行前处理,采用凯氏定氮法测定各样品蛋白质质量分数,研究不同沉淀剂对含非蛋白氮牛乳中蛋白质质量分数测定的影响。结果表明,三氯乙酸为沉淀牛乳中蛋白质的最佳沉淀剂,沉淀效果优劣顺序为三氯乙酸乙醇饱和食盐水硫酸铜乙酸铅,本研究旨在为进一步提高凯氏定氮法测定牛乳中蛋白质质量分数的准确性提供理论依据。     

双缩脲法检测奶粉中总蛋白质快速检测试纸的研制

研制了能够快速测定奶粉中总蛋白质含量的双缩脲检测试纸。将试纸于1.5倍标准双缩脲试剂浓度的溶液中浸泡10min,60℃干燥15min,滴加样品反应10min,放入光电检测仪,在波长560nm下检测。结果表明,本法线性范围为0～20.0mg/mL,检出限为0.85mg/mL,加标回收率为96.84%～99.23%,测定相对误差为1.01%～1.91%。用本法和凯氏定氮法同时对奶粉样品进行检测,经检验二者测定结果之间差异无统计学意义。该法操作简单、检测迅速、准确度和灵敏度高,适合奶粉中总蛋白质的现场快速检测。     

一种快速鉴别三聚氰胺毒奶粉蛋白质含量的检测方法

为了建立一种快速检测含三聚氰胺奶粉蛋白质含量的简便方法,本研究分别用考马斯亮蓝法、双缩脲法以及纳氏法测定了三聚氰胺毒奶粉中蛋白质的含量,并对测定结果进行了比较。通过高温变性法、改良三氯乙酸法、Sevage法和透析法考察了去除蛋白氮和非蛋白氮-三聚氰胺的效果。结果表明,考马斯亮蓝和双缩脲不与非蛋白氮三聚氰胺发生反应,采用改良三氯乙酸法可以较好的实现蛋白氮与非蛋白氮三聚氰胺的分离。因此,用考马斯亮蓝法或者双缩脲法可以准确测出含毒奶粉中蛋白氮的含量,通过改良三氯乙酸法配合纳氏法可以检测奶粉中的非蛋白氮-三聚氰胺。     

双缩脲比色法分析三氯乙酸沉淀乳蛋白效果探讨

通过对双缩脲比色法分析加热条件、不同浓度的三氯乙酸(TCA)沉淀牛乳蛋白的效果,以及pH影响双缩脲比色法分析TCA沉淀牛乳蛋白的效果进行分析。结果表明,采用双缩脲比色法分析TCA沉淀乳蛋白的效果:当使用标准双缩脲试剂时,受TCA浓度的影响较大,需TCA浓度≤15%;当TCA浓度>15%时,需调整pH至11以上;pH≥11时,碱性强度微弱的变化对OD值结果无明显影响;加热煮沸与未加热煮沸对TCA沉淀牛乳蛋白的效果差别无明显规律。     

试论人为添加非蛋白质氮乳与乳制品中蛋白质含量的测定方法

在测定乳制品蛋白质含量的方法中,传统的凯氏定氮法无法甄别人为添加非蛋白氮的劣质乳制品,给一些不法生产者提供了可乘之机,让劣质乳制品流入市场。文章对乳和乳制品蛋白质含量的检测方法进行研究,分别采用凯氏定氮法和双缩脲比色法两种方法检测乳制品中蛋白质含量,对比分析其具体测定过程及结果,为相关食品检验工作提供参考。     

真蛋白率在液态奶质量鉴别中的应用

将不同水解度的猪皮水解蛋白添加到液态奶中,通过三氯乙酸-双缩脲法和凯氏定氮法分别测得其真蛋白质量分数和粗蛋白质量分数显著高于空白样品,表明单独的真蛋白质量分数或粗蛋白质量分数难以作为鉴别乳及乳制品中掺假水解蛋白的可靠指标。同时测得其真蛋白率范围在47.98%～59.36%之间,远远低于液态乳的合理真蛋白率范围,表明真蛋白率法可作为鉴别液态乳中是否存在水解蛋白更为有效的一种方法。     

乳品真蛋白率的提出及测定

利用三氯乙酸-双缩脲比色法对添加乳清蛋白乳粉的蛋白质量分数进行测定.结果表明,乳清蛋白的加标回收率在89.2%～09%之间,重现性在0.26%～0.98%之间,表明三氯乙酸-双缩脲比色法可以较好地检测出乳中的真蛋白.提出了真蛋白率的概念,并测定出乳粉的真蛋白率范围在78.06%～89.90%之间;液态乳的真蛋白率范围在90.03%～96.25%之间.     

基于电子舌的掺假牛乳的快速检测

以掺假牛乳样品为检测对象,利用电子舌结合主成分分析法进行研究,旨在寻求一种能有效监控牛乳品质的快速检测方法.对几种常见的掺假(掺入水、食盐、蔗糖、尿素、大豆油)牛乳样品、复原乳以及纯牛乳样品进行检测和评价.试验结果表明:电子舌可以很好地区分纯牛乳和掺入不同物质的牛乳样品,纯牛乳、纯鲜牛乳、复原乳及其混合乳样品得到有效辨识,同时各种掺假牛乳样品随掺入物质的比例在主成分得分图中呈规律性分布.电子舌可用于掺假牛乳的快速检测.在建立典型标准样品数据库的前提下电子舌可有效监控牛乳品质,其在乳制品的质量控制及评价中具有较大的应用潜力.     

稻米蛋白质测定方法的比较与分析

分别利用凯氏定氮法和双缩脲法对10个稻米样品的蛋白质含量进行测定。比较发现,两种方法的测定结果并不相同,并表现出双缩脲法的测定结果较凯氏定氮法小约10%～20%的规律。提出利用已标定蛋白质含量的稻米为标样,基于双缩脲反应原理,进行蛋白质测定的分析方法,结果表明,该法可获得较高的检测精度。     

关于GB/T 21704-2008方法改进和适用范围的研究

目的 对GB/T 21704-2008《乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定》中前处理部分提出方法改进,明确方法的适用范围。方法 用不同剂量的三氯乙酸溶液沉淀样品中蛋白质,过滤后测定滤液中非蛋白氮含量；加水完全溶解三组不同质量的三聚氰胺,加入不同体积的三氯乙酸溶液,观察三聚氰胺在不同浓度三氯乙酸溶液中的析出情况；加标不同量的三聚氰胺,测定计算回收率确定仪器的检测限。结果 样品中蛋白质含量低于20 g/ 100 g 时,20 mL 15%三氯乙酸溶液可完全沉淀样品中蛋白质；三氯乙酸浓度越高,三聚氰胺溶解度越小,越容易析出；本实验用的全自动凯氏定氮仪最低可准确稳定检测2 mg三聚氰胺/10g样品。结论 国标方法改进后可以节约试剂,在消化环节缩短加热时间,提高实验效率；三聚氰胺在三氯乙酸溶液中的溶解度情况和仪器检测限的限制框定方法的适用范围是2 mg -20 mg三聚氰胺/10g样品。     

人为添加非蛋白质氮乳与乳制品中蛋白质含量测定方法的研究

本研究分别用GB/T5009.5《食品中蛋白质的测定》和NY/T1678《乳与乳制品中蛋白质的测定——双缩脲比色法》,测定了添加非蛋白氮物质的乳及乳制品中的蛋白质含量。结果表明GB/T5009.5方法不能区分样品中的蛋白氮与非蛋白氮;采用NY/T1678-2008方法可以较好的实现蛋白氮和非蛋白氮物质的分离,有效地排除三聚氰胺、尿素、甘氨酸和水解蛋白等多种非蛋白氮对乳及乳制品中蛋白质含量检测的影响,该方法前处理方法快速、简单,检测结果准确。 更多还原     

双缩脲法测定乳中酪蛋白含量

双缩脲法测定乳中酪蛋白是作为一种判定牛乳质量的指标.酪蛋白含有肽键,肽键在碱性溶液中可与双缩脲试剂中的铜离子形成紫红色化合物,用光谱测定法,可求得酪蛋白含量.     

生鲜牛乳真蛋白快速检测方法

建立生鲜牛乳中真蛋白快速检测方法,运用于牛乳中蛋白质掺假检测.采用紫外分光光度计,在280 nm波长处,通过吸光度值来测定真蛋白质量浓度:采用FT-120、甲醛滴定法、凯氏定氮法进行对比验证;考察人为添加非蛋白类含氮物质氯化铵、硫酸胺、尿素对真蛋白含量检测结果的影响.结果表明,紫外分光光度法检测真蛋白质量浓度与其他3种检测方法差异不显著;且检测结果不受人为添加非蛋白类舍氮物质的影响.紫外分光光度法检测生鲜牛乳真蛋白质量浓度,方法快速、可行,适用于生鲜牛乳中蛋白质掺假检测.     

国内外乳品真蛋白检测方法的进展

介绍了乳品真蛋白的定义,比较了国内外牛乳蛋白质检测的标准方法,简述了乳品真蛋白的快速检测方法,提出了我国国家标准需要改进的方向,即在样品处理前先用150g/L的三氯乙酸溶液使乳中的蛋白质沉淀,用滤纸分离,再用凯氏定氮法分别测定沉淀和滤液中的蛋白态氮含量和非蛋白态氮含量,计算蛋白质含量。如果改用pH4.6来沉淀酪蛋白,同样的方法还可以用于测定乳品中酪蛋白。     

双缩脲法测定饲料中蛋白质含量

双缩脲法测定饲料中蛋白质的含量相对于传统的凯氏定氮法具有快速，简单，准确等优点。该法主要是利用蛋白质与双缩脲试剂发生反应，产生一种含铜的环状复合物，该复合物呈紫红色，且在540nm处有吸收峰，其颜色深浅与蛋白质的浓度成正比。     

双缩脲法检测大豆分离蛋白中蛋白质的研究

采用双缩脲法检测大豆分离蛋白中蛋白质的含量,当蛋白质含量在0～12.0mg范围内时,线性关系比较好,变异系数小,重复性好.与凯氏定氮法比较,二者差异不显著.双缩脲法操作简单,对环境无污染,是一种非常有前途的测定大豆蛋白质的方法.