过氧化物酶在丝素膜中的固定化及其活性研究

家蚕Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ丝素蛋白经中性盐溴化锂处理后成为水溶性丝素，然后制成固定化过氧化物酶（ＰＯＤ）的丝素膜。经分光光度法分析表明这种固定化ＰＯＤ丝素膜的最适ｐＨ值范围较游离酶宽，为ｐＨ７．０～８．０；酶促反应温度在５０℃其活性最大。而且，此固定化酶膜的热稳定性良好，在６０℃保温１５分钟，其活性几乎未受影响，而游离酶失活４０％。因此，ＰＯＤ对ｐＨ和热的稳定性在丝素蛋白中固定后得到了改善，蚕丝丝素是一种良好的固定化酶的生物材料。     

突变株U—616葡萄糖异构酶及其固定化研究

树状黄杆菌ＮＲＲＬ１１０２２的诱变株Ｕ－６１６所产葡萄糖异构酶在６０℃～８０℃范围有较高活性，最适ｐＨ为７．５～８．５。对其固定化异构酶的理化性质进行了实验性探索。实验结果表明：固定化酶保留了８３％的游离酶的活力，在５５℃～８５℃范围有较高活性，最适ｐＨ为７．０～８．０；在６０℃，底物ｐＨ值为８．０及含有１．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ钴、镁离子时，固定化异构酶的酶活达到最高。此异构酶及其固定化酶均对金属离子耐受性较强，Ｃｏ２＋和Ｍｇ２＋有激活作用，对Ｃａ２＋不敏感，热稳定性较好。树状黄杆菌变株Ｕ－６１６所产葡萄糖异构酶及其固定化异构酶具有较大的工业应用价值。     

固定化黑曲霉增殖细胞生产低聚果糖的研究

黑曲霉孢子经海藻酸钙包埋３３ｈ后得到的固定化增殖细胞其酶活性达到最高，机械强度仍保持较高水平（为起始时８０％）最适ｐＨ为５．０，与游离酶相同，最适温度为５５℃，比游离酶高５℃；有害离子对其影响较小，其Ｋｍ（以蔗糖为底物）为８２ｍｍｏｌ。将固定化增殖细胞装入填充式反应注，产品中低聚果糖含量在５０％￣５５％，操作一个月活性保持不变。     

填充床式生化反应器连续生产L—丙氨酸

在酶法合成Ｌ－丙氨酸过程中，产物Ｌ－丙氨酸对酶有抑制作用。本文选用ＰＦＲ型填充床式反应器，中ｋ－卡拉胶为包埋材料，包埋Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｄａｃｕｎｈａｅ ＤＱ－ｐ１，在低物中ｌｏｎｌ／Ｌ Ｌ－天冬氨酸，反应条件３７℃、ｐＨ６．０时，连续生产Ｌ－丙氨酸。在转化率达到９５％时，计算出固定化细胞和反应器的效率分别为０．０１５ｇ Ｌ－丙氨酸／ｇ固定化细胞·ｈ、０．０１３ｇＬ－丙氨酸／ｍｌ反应器·ｈ。     

PEI对固定化增殖细胞性质的影响

以海藻酸钙为载体包埋黑曲霉ＡＳ００２３孢子,培养后得到的固定化增殖细胞用于生产低聚果糖。利用材料试验仪研究了聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）对固定化增殖细胞强度的影响,并研究了ＰＥＩ对固定化增殖细胞酶活及最适ｐＨ值的影响。结果表明,经ＰＥＩ处理后,尽管固定化增殖细胞酶活略有降低,最适ｐＨ值由５．５降至４．０,但凝胶强度有明显起始机械强度由０．０６Ｎ／粒增加到０．０２７９Ｎ／粒,而机械强度衰减率仅为未处理组的９     

固定化谷氨酸脱羧酶的稳定性研究

用羧甲基化的以Ｎ,Ｎ’－甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡聚糖（简称ＣＭ－ＣＡＤＢ）凝胶酶载体用树脂为新型载体,将谷氨酸脱羧酶固定在ＣＭ－ＣＡＤＢ树脂上。研究了固定化谷氨酸脱羧酶和自由酶与ｐＨ、温度的依存性,使用热稳定性和寿命。经测定谷氨酸脱羧酶经过固定化后,最适ｐＨ向碱性方向偏移０２个单位,ｐＨ为５２,最适温度为４８℃。固定化酶使用热稳定性比自由酶下降了５℃,但固定化酶的使用寿命得到显著改善,经测定固定化谷氨酸脱羧酶在４℃保存时,半衰期为１２７天。     

聚乙烯醇固定化反硝化菌的脱氮试验研究

探讨了聚乙烯醇（ＰＶＡ）包埋反硝化菌的包埋条件以及固定化反硝化菌废水脱氮的特性。结果表明：ＰＶＡ包埋的适宜条件是ＰＶＡ浓度为１０％（Ｗ／Ｖ），包菌量为１∶１，交联剂是ｐＨ为６．７的饱和硼酸溶液，交联时间为３０ｈ；减小包埋小球粒径并添加０．１％的活性炭粉末有助于提高包埋小球脱氮活性；经包埋后反硝化菌在低温（１１℃）、低浓度氧（０．５～１．０ｍｇ／Ｌ）以及有ＮＨ＋４（２００ｍｇ／Ｌ）时，其脱氮活性明显高于未包埋菌。     

A3钢表面有机磷合钼聚多酸盐转化膜的研究

由Ｎａ２ＭｏＯ４·２Ｈ２Ｏ和Ｎａ２ＨＥＤＰ·５Ｈ２Ｏ合成了有机膦合钼聚多酸盐Ｎａ８［（ＨＥＤＰ）２Ｍｏ５Ｏ２１］·５Ｈ２Ｏ。用Ｎａ８［（ＨＥＤＰ）２Ｍｏ５Ｏ２１］·５Ｈ２Ｏ的溶液处理Ａ３钢，获得了具有一定耐蚀性的黄色转化膜，适宜的工艺条件为：浓度１６ｇ·Ｌ＾－１，ｐＨ３．５，温度５０℃，时间８０ｓ。本文还报告了膜层的ＸＰＳ和ＡＥＳ分析结果。     

脂肪酶固定化工艺

研究了以纸纤维素为载体,对－β－硫酸酯乙砜基苯胺为活化剂共价联法固定化脂肪酶的最适条件及固定化酶的稳定性。结果表明;醚化反应最适ｐＨ为１０．０,偶联最适条件为ｐＨ８．０,酶量控制在８００μｍｏｌ（ｍｉｎ．ｇ）,所获得固定化脂肪酶具有较高的酶活和酶回收率,且有较好的稳定性,其半衰期为３７５ｈ。     

对几种相关酶联合固定化初探

用聚丙烯酰胺包埋,再以戊二醛交联联合固定了α淀粉酶、糖化酶和葡萄糖异构酶,对联合固定化的最适条件和联合固定化酶的性质进行了初步研究．结果表明联合固定化酶较固定化单酶更能发挥协同效应,能够将底物一步水解并转化为产物．文中所用的固定化方法与其他方法相比,固定化酶的稳定性、半衰期及酶固定化后活力均较高．在６０℃、ｐＨ５５时,α淀粉酶和糖化酶二酶的联合固定化酶的活力最高,其操作半衰期达到７９ｈ;在６０℃、ｐＨ７５时,α淀粉酶、糖化酶和葡萄糖异构酶三酶的联合固定化酶的活力最高,其操作半衰期达到９０ｈ．     

磁性壳聚糖微球固定化漆酶催化肾上腺素

用交联法制备磁性壳聚糖微球，对微球的形貌和结构进行表征和分析，结果表明：微球呈规则的球形，分散比较均匀，粒径在3μm左右。磁性粒子矫顽力为210．6A／m，接近超顺磁性。以戊二醛为交联剂，将漆酶固定在此磁性壳聚糖微球表面，分别研究了该固定化漆酶和游离漆酶催化肾上腺素的性质。结果表明：固定化漆酶催化肾上腺素的最适温度为55℃，比游离酶升高了10℃，最佳pH值为5．2，游离酶为5．0。在60℃下保温300min后，固定化酶的催化活性仍保持为原来的75％以上，而在相同条件下游离酶仅保持为原来的10％。固定化酶连续催化肾上腺素10次以后．催化活性仍保持为原来的85％。     

草酸盐共沉淀法制备施主掺杂的SrTiO3微粉

通过化学分析，ＩＣＰ－ＡＥＳ，ＸＲＤ，ＳＥＭ，平均粒度测定等手段研究了草酸盐共沉淀法制备掺杂ＳｒＴｉＯ３微粉的工艺参数对微粉粒度的影响，在混合盐浓度为０．９￣１．０ｍｏｌ／Ｌ，反尖时间４５ｍｉｎ左右，ｐＨ值１．５￣３．５，添加适量活性剂制得的沉淀物于９００℃热分解１．５ｈｒ所得超细粉粒度为０．３５￣０．５０μｍ，Ｙ的掺入量为０．３０￣０．５０％（ｍｏｌ）。     

酶活性变化在萝卜抗TuMV分析鉴定中的应用

不同萝卜品种接种抗感芜菁花叶病（ＴｕＭＶ）后,测定不同时期叶片中的过氧化物酶（ＰＯＤ）、多酚氧化酶（ＰＰＯ）、苯丙氨酸裂解酶（ＰＡＬ）的活性。结果表明,抗病品种ＰＯＤ活性的略低于感病品种,接种后ＰＯＤ活性升高;抗病品种ＰＰＯ活性比感病品种高,接种后抗病品种ＰＰＯ活性迅速升高,与抗性呈正相关,可以作为抗性大小的衡量指标,抗病品种ＰＡＬ活性比感病品种高,接种后变化无规律。     

荧光猝灭法测定硅酸盐矿物中的微量钛

用荧光猝灭法研究了二溴羟基苯荧光酮－ＤＢＨ－ＰＦ－Ｔｒｉｔｏｎｘ－１００体系的测定方法与条件。在ｐＨ在１．５－２．１的Ｈ２ＳＯ４介质中ＴＹｒｉｔｏｎｘ－１００存在下，Ｔｉ与ＤＢＨ－ＰＦ形成１：２的桔红色络合物。钛浓度在０．０１－４μｇ／２５ｍＬ范围内ΔＦ与钛浓度呈良好的线性关系，相关系数ｒ＝０．９９８８，检量限为０．４ｎｇ／ｍＬ。     

漆酶催化转化溴酚类化合物的动力学研究

研究了漆酶催化转化４－溴酚（４－ＢＰ）,２,４－二溴酚（２,４－ＤＢＰ）,２,４,６－三溴酚（２,４,６－ＴＢＰ）的反应 动力学,考察了温度、ｐＨ因素对反应速率的影响．结果表明：漆酶催化转化三种溴酚的反应总体遵循 假一级反应动力学;在ｐＨ　５～８范围内,ｐＨ越低,溴酚转化速率越快,２,４,６－ＴＢＰ的转化速率随ｐＨ 变化最明显;在中性溶液和１５～４５℃条件下,２,４－ＤＢＰ反应速率最快,２,４,６－ＴＢＰ次之,４－ＢＰ最慢．漆 酶催化转化４－ＢＰ,２,４－ＤＢＰ和２,４,６－ＤＢＰ的反应活化能分别为３７．０７,１９．１８,２４．００ｋＪ／ｍｏｌ．     

壳聚糖固定胃蛋白酶的研究

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂将胃蛋白酶固定化．戊二醛质量分数为5％，载体处理温度为30℃，胃蛋白酶与壳聚糖用量比为O．Ol，pH=4．O，固定12h以上，酶活性回收率达65％～70％。固定化酶最适温度为70℃，比游离酶提高了20℃；固定化酶最适pH值为3．O，而游离酶为2．O；固定化酶的表观米氏常数Km=3．32g／L，而游离酶Km=1．5lg／L。固定化酶重复使用3次时的酶活性回收率分别为73．9％，58．4％。42．6％。2个多月重复使用，活力未见明显下降。     

非离子型微乳液的增敏作用研究──铜-5-Br-PADAP分光光度测定

以含水量９０％的乳化剂ＯＰ／正丁醇／正庚烷／水非离子型微乳液为介质，以５－Ｂｒ－ＰＡＤＡＰ为显色剂，分光光度法测定铜．结果表明，络合物的最大吸收波长为５６５ｎｍ，表观摩尔吸光系数为１．２４×１０５Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１．与相同含水量的乳化剂ＯＰ胶束体系比较，测定的灵敏度明显提高（后者ε＝１．０４×１０５），且测定时的ｐＨ条件较为宽松，铜浓度在０～７．０μｇ／１０ｍｌ范围内，符合比尔定律．     

新型载体 PEI/SiO2 固定化青霉素酰化酶的酶学性质

以 PEI/SiO2 为复合载体, 制备了固定化青霉素酰化酶. 考察了游离酶与固定化酶催化反应的最适宜 pH 值, 最适宜温度, 固定化酶的连续操作稳定性, 以及二者对金属离子的耐受性能及米氏常数. 实验结果表明: 游离酶和固定化酶催化反应的最适宜 pH 值分别为 9.32 和 7.34, 即固定化酶的最适宜 pH 值向酸性方向发生了移动, 且适宜的 pH 值范围变大. 游离酶催化反应的最适宜温度为 50 ℃, 在较低或较高的温度, 其活性都低;而固定化酶的最适宜温度为 40 ℃, 且温度范围显著变宽, 在 (20～60) ℃范围内, 固定化酶都能保持较高的活性. 固定化酶具有良好的连续操作稳定性, 且比游离酶具有较好的抗金属离子性能;二者的米氏常数分别为 2.38×10-1 mol/L 和 5.44×10-2 mol/L.     

丝素膜对氨基酸的选择渗透

蚕丝丝素膜是弱两性天然同分子荷电膜，本文研究了在不同的ｐＨ条件下的氨基酸在丝素膜上的渗透情况，实验结果表明：当溶液的ｐＨ值处于丝素膜和氨基酸的等电点之同时，氨基酸通过丝素膜的量较大，而当ｐＨ值处于丝素膜和氨基酸两者的等电点之外时，氨基酸的透过量较小。     

酶解反应与超滤膜分离一体化的必要条件（一）

通过对α－淀粉酶催化活力和活力稳定性的研究，寻找使酶解反应与超滤膜分离一体化得以实现的反应条件，通过研究不同ｐＨ值，不同温度下α－淀粉酶活力的变化情况，发现本研究中的α－淀粉酶的活力在ｐＨ５．５左右，温度５０～６０℃最大，并且在稳定剂０．０２ｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２和０．０２ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ存在下，α－淀粉酶的热稳定性大大提高，６０℃下保温３ｈ酶活几乎不变，符合酶膜反应的要求，研究表明能在一定的ｐＨ