面包酵母中谷胱甘肽抽提方法的研究

对从面包酵母中抽提还原型谷胱甘肽(GSH)的四种方法进行了研究.发现沸水浴抽提、微波辅助提取、超声波破碎和高压均质破碎方法均能有效地抽提胞内GSH.高压均质破碎法在最佳操作条件下GSH抽提量最高为3.975 mg/g, 抽提率达到99.87%;沸水浴抽提法GSH抽提量为3.830 mg/g,抽提率为96.23%;超声波破碎法和微波辅助提取GSH抽提量分别为3.823 mg/g和3.593mg/g,抽提率分别为96.12%和90.28%.高压均质破碎法是一种绿色加工过程,更适合于工业化应用.     

高效毛细管电泳检测啤酒酵母中谷胱甘肽

为建立简单、快速的谷胱甘肽检测方法,采用Beckman毛细管电泳仪对啤酒酵母中谷胱甘肽进行检测,选用石英毛细管柱(60cm×75μm,有效柱长36cm)、1/15mmol/L、pH7.4的磷酸缓冲液、分离电压25kV、紫外检测波长为200nm,进样5s。结果表明:谷胱甘肽在5～100mg/L内呈现良好的线性关系(R2=0.9996),平均回收率为97.2%,平均相对标准偏差RSD为3.2%。该法结果准确,操作简单,重现性好,可应用于谷胱甘肽的测定。      

高效毛细管电泳检测啤酒酵母中谷胱甘肽

为建立简单、快速的谷胱甘肽检测方法,采用Beckman毛细管电泳仪对啤酒酵母中谷胱甘肽进行检测,选用石英毛细管柱（60cm×75μm,有效柱长36cm）、1/15mmol/L、pH7.4的磷酸缓冲液、分离电压25kV、紫外检测波长为200nm,进样5s。结果表明：谷胱甘肽在5～100mg/L内呈现良好的线性关系（R2=0.9996）,平均回收率为97.2%,平均相对标准偏差RSD为3.2%。该法结果准确,操作简单,重现性好,可应用于谷胱甘肽的测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测器定量分析谷胱甘肽含量

为了快速定量检测溶液中的谷胱甘肽(GSH)含量,建立了应用C18反相柱,HPLC-ELSD测定GSH含量的方法,确定了高效液相色谱分离条件。色谱条件为:色谱柱(Kromasil C18,250×4.6mm,5μm);流动相:V(H2O)∶V(CH3CN)∶V(TFA)=96.2∶3.7∶0.1;柱温:室温;流速:1.0mL/min;进样量:20μL;漂移管温度90℃;氮气流速:1.5L/min;i mpactor on模式;增益(Gain):1。结果表明,在此条件下,GSH浓度的自然对数与峰面积的自然对数成很好的线性关系(R2=0.9995);精密度2.15%;最低检测限30.73mg/L;加标回收率99.78%。该方法快速、简便、准确,适合从复杂体系中快速检测谷胱甘肽的含量。     

外源刺激物对酵母谷胱甘肽代谢的调控作用研究

外源刺激物能够调节谷胱甘肽的代谢,分别考察了2种刺激物(过氧化氢、亚硫酸钠)对酿酒酵母KH37合成谷胱甘肽的影响。结果表明,过氧化氢和亚硫酸钠都对细胞生长有一定的抑制但能促进谷胱甘肽的合成,胞内谷胱甘肽含量较之对照分别提高了16.88%和19.84%。     

响应面法优化酿酒酵母谷胱甘肽的提取条件

利用Box-Benhnken 中心组合设计和响应面法优化乙醇提取酿酒酵母胞内谷胱甘肽的条件。结果表明,谷胱甘肽最佳提取条件为乙醇体积分数43.7%、乙醇添加量7.03mL/0.1g 干酵母粉、抽提时间80min、谷胱甘肽提取率达最大为9.54mg/g。     

不同发酵时期添加金属离子对酿酒酵母合成谷胱甘肽的影响

通过摇瓶发酵培养,研究了Cu2+,Mg2+,K+,Fe2+,Mn2+5种金属离子在不同发酵时间添加对酿酒酵母CS10515-1生产谷胱甘肽的影响。实验结果表明:在发酵初期(0 h),当K+、Mg2+、Fe2+添加量分别为0.15、0.12、0.09 g/L时,GSH的产量分别为88.53、52.73、41.42 mg/L,相比空白对照分别提高了63.50%、36.58%和44.25%。在15 h时,当Mg2+添加量为0.09 g/L时,GSH产量为61.75 mg/L,比对照组提高82.01%。当发酵至24 h时,金属离子的添加对GSH的产量无明显促进作用。     

酿酒酵母发酵生产谷胱甘肽的研究

以诱变获得的酿酒酵母突变株YF(ZnCl2r,Ethr)为试验菌株,通过摇瓶发酵、发酵罐补料分批发酵,对突变株发酵生产谷胱甘肽进行研究.确定发酵罐分批发酵的最佳培养条件为:温度30℃,pH 6.0,接种量为20%,搅拌转速为150 r/min,通气量为250 L/h.在补料分批操作方式下,分别考察了摇瓶培养、发酵罐培养...     

高产谷胱甘肽酵母菌株的选育

以BY-14面包酵母（Saccharomyces cerevisiae）为出发菌株,通过紫外线和氮离子注入复合诱变,氯化锌、乙硫氨酸耐性平板筛选,获得一株高产谷胱甘肽的面包酵母优良菌株（S．cerevisiae）BL-23。该菌株经摇瓶发酵谷胱甘肽产量为113．46mg／L,较出发菌株提高62％,每1g干细胞含谷胱甘肽20．86mg,较出发菌株提高56％。传代培养结果表明,该菌株具有稳定的遗传性能。     

酵母线粒体ATP合酶活性对谷胱甘肽合成的影响

以酿酒酵母为菌种,采用PDA基本培养基,研究在不同的培养温度、时间和初始pH值条件下线粒体ATP合酶活性对谷胱甘肽(GSH)合成的影响.结果表明:①初始pH6.0时,30℃培养24 h,线粒体ATP合酶活性和GSH含量均达到了最高,分别为15.73 μmol/mg·protein·h和1.27 μmol/g·FW;②在最适温度30℃、pH6.0条件下培养,线粒体ATP合酶活性在培养48 h达到最大,GSH含量在培养60 h达到最大;③初始pH 6.0时,在24℃条件下,线粒体ATP合酶活性保持稳定,GSH含量随时间增加而增加.在34℃时,线粒体ATP合酶活性在24 h最大,GSH含量在36 h达到最高;④初始pH 6.0时线粒体ATP合酶活性达到最大,GSH含量最高.实验结果表明,酵母线粒体ATP合酶在不同培养条件下活性是不同的,同时也说明了ATP合酶活性与GSH的合成有密切的关系.     

酵母细胞中谷胱甘肽的微波辅助提取

采用微波辅助方法提取了酵母细胞中的谷胱甘肽。研究表明 ,在 65 0W功率下对酵母泥直接微波处理 1 2s ,再以 2 0mL/g的物料比提取 1 0min ,或者物料比为 1 5mL/g的酵母悬浮液在 65 0W下处理 60s,都能有效地提取谷胱甘肽 ,提取率分别达到 2 0 89mg/g和 2 1 1 7mg/g。和其他提取方法比较 ,微波辅助提取是一种节省能源、快速、简便、有效的方法。     

海参营养液DNA高效快速提取及种类鉴定方法

本实验以海参口服液为原料,采用异丙醇和乙酸钠沉淀的改良方法提取DNA,通过A 260/A280、琼脂糖凝胶电泳和PCR检测,对DNA溶液进行定性分析和综合比较.结果表明,本方法是一种新型的海参营养液DNA 高效快速提取及种类鉴定的方法,可用于对海参营养液进行定性检测.     

一种提取肉类总DNA的方法——改良CTAB法

为了能够更加准确的进行动物源性成分定量检测,打击市场上的"掺杂使假"行为,本实验从初始取样量、裂解时间、沉淀时间和RNA酶作用四方面对CTAB法提取肉类DNA进行研究。综合考虑方法的快速、高效性,最终确定初始取样量应该小于0.05g,裂解时间和沉淀时间均为0.5h,不需添加RNA酶。本方法具有良好的线性关系(R2=0.9972)和稳定性(标准差为0.18),是一种快速、准确、规范的肉类总DNA提取方法。     

从活性干酵母中提取海藻糖的工艺

提出了一条活性干酵母中提取海藻糖的工艺路线。通过控制抽提温度、乙醇浓度以及抽提时间，得出较佳的提取工艺条件。用阴阳离子交换柱去除杂质，同时起到一定的脱色作用，进而运用超滤进行澄清。最后经浓缩、结晶以及干燥，制成海藻糖产品。其得率可达：每１００ｇ活性干酵母产１４．５ｇ海藻糖。     

提取鼠肠道内微生物基因组DNA的方法研究

通过改进鼠肠道微生物基因组DNA提取方法以期更全面地反映鼠肠道茵群的真实情况.采用CTAB和SDS结合的方法裂解细胞,同时改进了传统的酚/氯仿抽提方法,提取全过程控制在2 h以内.通过紫外分光光度计,细菌通用引物PCR,总菌群实时定量PCR,变性梯度凝胶电泳(DGGE)对改进方法及两种试剂盒法提取DNA的结果进行比较,评价了所建立的高效提取方法.与试剂盒相比,改进的方法DNA得率较高,简便快速,成本低廉.同时后续的PCR鉴定及DGGE菌群多样性分析显示,改进的方法可以更好地揭示鼠肠道菌群分布和特性.     

银耳芽孢总蛋白提取方法的建立

采用超声波与高压均质破碎细胞,通过显微观察细胞破碎效果、Bradford法测定蛋白含量并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,比较了三羟甲基氨基甲烷（tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane,Tris）-饱和酚法、三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）-丙酮沉淀法及Tris-饱和酚结合TCA-丙酮沉淀法提取银耳芽孢总蛋白的效果。结果表明：高压均质的细胞破碎效果优于超声波,3 种方法所得到的银耳芽孢总蛋白质量浓度分别为2.33、1.26、1.02 mg/mL,且Tris-饱和酚法经传统考马斯亮蓝染色法染色所得电泳条带亮度及清晰度均优于其他两种方法。因此,Tris-饱和酚法是进行银耳芽孢总蛋白提取的一种有效方法。     

酿酒酵母生产谷胱甘肽的培养条件的研究

本实验对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CS10515产谷胱甘肽的培养条件进行了初步研究,确定了其最佳培养基组成为:葡萄糖为5%、酵母膏1.2%、硫酸铵0.6%、硫酸镁0.02%、磷酸二氢钾0.1%;当发酵液初始pH为6.0、装液量50%～60%、振荡速度300r/min时,经过24h振荡培养后,谷胱甘肽的产量为90.20mg/L。     

酿酒酵母生产谷胱甘肽分批发酵动力学研究

以麦芽汁为发酵培养基,对7.5L 自动发酵罐中酿酒酵母Y518 分批发酵生产谷胱甘肽的实验数据进行分析,建立谷胱甘肽分批发酵动力学模型。通过对符合菌体生长的Logistic 方程、产物生成的Luedeking-Piret 方程和基质消耗的物料衡算方程进行最优参数估计和非线性拟合,分别得到了相应的动力学模型和最佳模型参数值。对动力学模型的拟合曲线进行分析,发现模型的计算值与实验值能较好地拟合,表明本实验建立的分批发酵动力学模型能较好地反映谷胱甘肽分批发酵过程。     

柑橘皮中GSH的复合酶法提取及荧光检测

研究复合酶法提取柑橘皮中还原型谷胱甘肽(GSH)的工艺条件,以邻苯二甲醛(OPA)与GSH反应形成荧光体系,荧光光度法测定GSH含量。结果表明:柑橘皮中GSH的最佳提取工艺为:料液比1∶40(g/m L)、温度50℃,时间90 min,p H 5.0,柑橘样品GSH提取量为9.06 mg/kg。在最佳提取条件下,分别提取了日南1号、兴津、沙田柚、山下红、金桔、朱红橘、宫川、泛亚皇后、泛亚冰糖和城固冰糖中的GSH,荧光光度法测定GSH的提取量为7.81 mg/kg~13.39 mg/kg。荧光光度法的回收率达96.7%~99.3%,满足测定准确度的要求。