抗白细胞介素-13疫苗治疗哮喘的研究进展

哮喘是仅次于癌症的世界第二大致死、致残疾病,造成的经济负担超过结核病和艾滋病的总和。严重的哮喘目前尚不能治愈,迫切需要新的有效的疾病干预手段。临床研究显示,白细胞介素-13(interfeukin-13,IL-13)与哮喘密切相关,动物模型研究也表明,IL-13在哮喘病理机制中处于核心位置。目前,IL-13单克隆抗体治疗哮喘在国外已处于Ⅱ期临床试验,以疫苗形式诱导持续的IL-13中和抗体,对哮喘这样的慢性疾病而言较之单抗更具应用潜能。本文对抗IL-13疫苗治疗哮喘的研究进展作一综述。     

重组人白细胞介素-12(CHO细胞)的纯化及其活性

目的建立CHO细胞表达的重组人白细胞介素-12(rhIL-12)的纯化工艺,并检测纯化的rhIL-12的生物活性。方法取高效表达rhIL-12的CHO工程细胞培养上清液,采用层析结合硫酸铵沉淀的方法进行分离纯化,ELISA法测定目的蛋白的含量,并计算回收率;SDS-PAGE、SEC-HPLC和Westernblot对纯化样品进行鉴定;以PBMCIFNγ诱生法检测纯化rhIL-12的生物活性。结果纯化的rhIL-12的总回收率为56.4%;经SEC-HPLC检测,其纯度达99.2%;SDS-PAGE分析显示,两个亚基的相对分子质量分别与理论值(40000和35000)相符;Westernblot分析显示,rhIL-12可与相应抗体发生特异性结合;rhIL-12诱生IFNγ量与rhIL-12浓度呈典型的S型曲线关系,具有剂量依赖性,其效价为8.3×106IU/mg。结论已建立了CHO细胞表达的rhIL-12纯化工艺,该工艺成本低,操作简便,纯化产物回收率和纯度高,适于工业化生产。     

白细胞介素-18在DNA疫苗免疫中的佐剂效应

白细胞介素-18(IL-18)作为分子佐剂,可促进DNA疫苗的免疫效应。本文就近年来IL-18作为分子佐剂,应用于多种感染性疾病和肿瘤DNA疫苗的免疫研究进展作一综述。     

白细胞介素-15在感染性疾病中作用的研究进展

白细胞介素-15(interleukin,IL-15)是一种具有多种生物学活性的细胞因子,可活化NK、CD8+T淋巴细胞等免疫细胞,参与机体的先天性免疫和适应性免疫;还可作为佐剂,提高免疫细胞对抗原性物质的应答能力。因此,IL-15在细菌、病毒、寄生虫等微生物感染性疾病的致病及预后过程中发挥重要作用。     

白细胞介素-10在感染性疾病中的作用

白细胞介素-10是一种具有多种生物学功能的细胞因子,在疾病的治疗及诊断中具有重要的作用。本文对白细胞介素-10的分子结构特点、在感染性疾病中的作用及其临床应用作一综述。     

白细胞介素-2基因佐剂对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响

目的研究白细胞介素-2基因佐剂对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响。方法利用分子生物学技术构建含IL-2基因的重组质粒pcDNA3.1/IL-2,经测序鉴定、碱裂解法大量提取及Sepharose4FF柱层析纯化,得到重组质粒pcDNA3.1/IL-2和pcDNA3.1/S,免疫豚鼠后,经ELISA检测豚鼠血清中抗HBsAg滴度,CTLL-2细胞株/MTT法检测IL-2活性。结果序列测定和分析结果表明重组质粒pcDNA3.1/IL-2构建正确。血清中抗HBsAg抗体滴度:铝佐剂+HBsAg组为2116mIU;IL-2+HBsAg组为1987mIU;质粒pcDNA3.1/IL-2+HBsAg组为2252mIU;质粒pcDNA3.1+IL-2+pcDNA3.1/S组为67·19mIU;质粒pcDNA3.1/S组为50·88mIU。重组质粒pcDNA3.1/IL-2免疫1周后,IL-2表达水平达高峰,以后逐渐降低,但1个月后IL-2水平仍高于空白对照组。对抗HBsAg抗体滴度和IL-2活性的检测结果进行统计学分析表明,各组间差异有显著意义(P<0·05)。结论IL-2基因佐剂可以增强乙肝重组疫苗和乙肝DNA疫苗的免疫效果。     

家禽类白细胞介素-2的研究进展及其应用前景

白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)是一种由T淋巴细胞分泌的T细胞生长因子,具有多种免疫调节功能和生物学活性。随着分子生物学、免疫学理论和技术的发展,应用重组表达技术生产IL-2已成为目前研究的热点。本文主要对家禽类IL-2基因的克隆、重组表达、纯化及其免疫活性等方面的研究进展作一综述,并对其应用前景进行展望。     

人颗粒溶素活性肽与小鼠白细胞介素-12共表达质粒的构建与真核表达

目的构建能分泌表达相对分子质量为9000的人颗粒溶素活性肽与小鼠白细胞介素-12(mIL-12)的真核共表达质粒,并检测其蛋白表达。方法以含有颗粒溶素cDNA序列的质粒为模板,通过PCR扩增获得相对分子质量为9000的颗粒溶素活性肽基因片段后,定向插入真核表达载体pBudCE4.1中,获得重组表达质粒pBudCE4.1-S9K,经双酶切及插入片段序列测定对质粒进行鉴定。同时,将小鼠IL-12亚克隆入pBudCE4.1另一多克隆位点,构建真核共表达质粒pBudCE4.1-S9K/mIL-12。采用RT-PCR、免疫细胞化学与Dot-ELISA法,检测颗粒溶素活性肽在RAW264.7细胞的瞬时表达与分泌。ELISA检测mIL-12的表达。结果酶切、PCR及测序鉴定证实,颗粒溶素活性肽基因插入片段正确;RT-PCR和免疫细胞化学检测表明其可以在细胞中瞬时表达;Dot-ELISA检测表明颗粒溶素可分泌到细胞外。ELISA检测细胞培养上清有mIL-12表达。结论已成功构建真核表达质粒pBudCE4.1-S9K/mIL-12,并能体外表达,为下一步利用颗粒溶素与mIL-12基因治疗肿瘤奠定了基础。     

白细胞介素分子改造的研究进展

目的白细胞介素(interleukin,IL)是一类由多种细胞产生的具有重要免疫调节作用的细胞因子,在临床应用中发现,IL类药物的副作用大,半衰期短,清除率高,使其在临床的广泛应用受限。因此,对IL的分子结构进行改造,改善其理化性质和药代动力学性质,以获得生物学活性和稳定性更高而副作用更低的IL,是该类药物研发的重要发展方向。本文就近年对IL-2、IL-18、IL-28及IL-29分子改造的研究进展作一综述。     

抗重组人白细胞介素-12单克隆抗体的制备及初步应用

目的制备抗重组人白细胞介素-12(rhIL-12)单克隆抗体(McAb),并建立检测IL-12的双抗体夹心ELISA方法。方法以纯化的rhIL-12(p70)免疫BALB/c小鼠,制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法,检测胃癌患者术前、术后血清IL-12水平的变化。结果筛选出3株稳定分泌抗rhIL-12的单抗杂交瘤细胞株,纯化后单抗纯度达95%以上。免疫球蛋白亚类2株为IgG1,1株为IgG2a,轻链属!型,相对亲和力依次为EM5>EM6>EV9。Western blot及ELISA交叉试验表明,单抗具有良好的特异性。建立的双抗体夹心ELISA方法检测rhIL-12的最低检出限为20pg/ml,线性范围为25～3200pg/ml。应用此法检测胃癌患者术前血清IL-12水平较正常对照组明显降低,术后10d明显升高。术后给予免疫增强型NE组IL-12水平较未给予组明显升高。结论制备的抗rhIL-12单克隆抗体,能够用于IL-12的体内外免疫学检测,为IL-12的研究、检测及临床应用奠定了基础。     

生物消油剂的研发及应用进展

经过大量文献调研,总结了目前生物消油剂的产品发展现状,主要包括生物消油剂种类、固定化方式以及市面上现有生物消油剂产品介绍,综述了目前生物消油剂的主要研究方向,提出现有研究主要集中于高效石油降解菌的筛选研发、极端环境下的生物消油剂开发以及复合菌群的构建。最后对生物消油剂的发展难点以及下一步研究重点进行了阐述,并提出了展望。     

生物消油剂的研发及应用进展

经过大量文献调研,总结了目前生物消油剂的产品发展现状,主要包括生物消油剂种类、固定化方式以及市面上现有生物消油剂产品介绍,综述了目前生物消油剂的主要研究方向,提出现有研究主要集中于高效石油降解菌的筛选研发、极端环境下的生物消油剂开发以及复合菌群的构建。最后对生物消油剂的发展难点以及下一步研究重点进行了阐述,并提出了展望。     

lncRNA生物学功能研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是缺乏开放阅读框架,长度约为200 nt～100 000 bp,且不编码蛋白质的转录本。lncRNA的表达受到发育调控,具有组织及细胞特异性。目前认为,lncRNA执行重要的生物学功能,涉及转录调控、细胞内物质运输和染色体重塑,参与细胞分化、生长发育、应激反应和疾病发生发展等多种生物学进程。本文在介绍lncRNA的特征、分类、调控机制的基础上,重点对lncRNA的生物学功能进行综述。     

富自体浓缩生长因子生物学作用的研究进展

富自体浓缩生长因子(concentrated growth factor,CGF)为第三代血小板浓缩产物,是再生医疗领域中诱导组织再生分化的一种新型生物材料。CGF通过差速离心可释放出多种生长因子,如血小板衍生生长因子(plateletderived growth factor,PDGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、类胰岛素生长因子(insulin-like growth factor,IGF)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、表皮生长因子(epidermal growth fcator,EGF)及成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)等,这些生长因子相互作用,可发挥促进组织再生的作用。本文就CGF在促进细胞增殖及分化、组织再生及修复、软组织愈合等生物学作用中的研究进展作一综述。     

以白细胞介素-6信号通路为靶点的生物技术药物研究进展

白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)为一种多功能的细胞因子,其仅通过与自身受体形成复合体才能进行信号转导从而发挥生物学作用。鉴于IL-6在多种疾病中发挥的重要作用,随着IL-6信号转导系统研究的日益深入,以IL-6及其受体IL-6R、gp130与sIL-6R等为靶点的药物筛选和药物设计将为多种疾病的治疗开辟新的途径。本文以IL-6信号通路为靶点的生物技术药物研究进展作一综述。     

生物流化床反应器脱氮技术的研究与应用进展

生物流化床技术是废水处理中常采用的生物技术之一。作者介绍了生物流化床脱氮技术的最新研究进展与应用,详细分析了影响生物流化床脱氮效率的主要因素,指出了生物流化床脱氮技术存在的一些急需解决的问题,提出了生物流化床技术今后的发展方向。     

放线菌聚酮类化合物的合成生物学研究及生物制造

聚酮化合物具有广泛的药用活性和极高的经济价值,但如何高效、经济、绿色、环保地合成聚酮化合物是目前急需解决的问题。随着合成生物学的发展及分子生物学技术的进步,不断有新的技术和策略被用于聚酮化合物的生物制造。本文介绍了聚酮化合物生物制造中的关键酶、前体物质及代谢途径等,分析了通过CRISPR技术及翻译后修饰代谢工程优化代谢调控网络;通过替换及优化启动子等手段改造与优化代谢途径;通过构建简单、高效的异源表达系统等策略提高聚酮化合物的生物制造效率等。在此基础上对红霉素、阿维菌素、多杀菌素的合成生物学研究的最新进展进行了总结,进而对当前聚酮化合物生物制造面临的产量及效率低下等问题和可能的解决途径,如平衡初级代谢与次级代谢,构建新型、优势底盘细胞及代谢网络的重新设计与改造等进行了展望。     

鸡尾酒疗法治疗艾滋病药物副作用的研究进展

艾滋病又称为获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染引起的。目前临床上一般采用高效抗反转录病毒联合治疗法(high active antiretroviral therapy,HAART),即鸡尾酒疗法来治疗艾滋病,该疗法联合使用至少3种类型的抗HIV药物,可有效控制患者体内的病毒载量,极大地延长艾滋病患者的生存时长,提高了患者的生存质量,但同时不可避免地造成了一些副反应,如皮疹、肝损伤和注意力不集中等神经精神症状。本文将对鸡尾酒疗法治疗艾滋病过程中的药物毒副作用的研究进展作一综述。     

从虾壳中提取虾青素工艺及其生物活性应用研究进展

虾青素是自然界中分布很广泛的一种叶黄素,具有很强的抗氧化作用和独特的生理功能,存在巨大的商业价值.从甲壳类动物加工下脚料中提取回收虾青索是虾青素生产的重要途径之一.简述了虾青素的结构、生物活性及应用的一些最新研究成果,探讨了从虾壳中提取虾青素的方法,介绍了碱提法、油溶法、有机溶剂法和超临界CO2萃取法.     

左旋葡萄糖酮的研究综述

左旋葡萄糖酮是来源于生物质的一种高附加值化学品,由于其独特的化学结构,是一种极具潜力的手性原料。主要综述了左旋葡萄糖酮的结构、性质、来源、特征反应及其在立体化学合成中的一些应用。