南极磷虾对大鼠骨质疏松模型的影响

目的观察不同剂量南极磷虾粉及其与钙联合对骨质疏松模型大鼠的作用。方法将大鼠随机分为10组,即虾粉低、中、高剂量组、钙组、联合低、中、高剂量组、氟化钠组、假手术组、模型对照组,每组10只,通过切除双侧卵巢建立骨质疏松模型,假手术组仅切除卵巢附近部分脂肪组织。各实验组分别灌胃低、中、高剂量虾粉、钙、低、中、高剂量虾粉+钙、氟化钠,假手术组与模型对照组正常饮食。12周后,经腹动脉取血,分离血清,检测钙离子浓度及碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性;取股骨观察骨密度及生物力学差异,并检测骨灰分含量;取胫骨检测骨氟含量。结果虾粉低、中、高剂量组及联合低、中、高剂量组大鼠血钙浓度随虾粉剂量的增加逐渐降低,虾粉高剂量组与模型对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),而联合低、中、高剂量组大鼠血钙浓度高于模型对照组;虾粉低、中、高剂量组ALP活性均高于模型对照组(P<0.05),且随着虾粉剂量的增加,ALP活性增强。联合低、中、高剂量组大鼠骨密度均高于模型对照组(P均<0.05),且优于低、中、高剂量虾粉组;与模型对照组相比,虾粉低剂量组及联合中、高剂量组均可明显增加骨最大力学载荷值(P均<0.05);与模型对照组相比,低、中、高剂量虾粉组随虾粉剂量增加骨氟含量增多,与钙联合应用后,降低了骨氟含量(P均<0.01),联合低、中、高剂量组与相同剂量的虾粉组相比,骨氟含量均降低;虾粉低、中、高剂量组与模型对照组相比,骨灰分含量升高(P均>0.05)。结论使用虾粉治疗骨质疏松时,低剂量效果最佳;若虾粉与钙联合治疗,中剂量虾粉加钙改善骨质疏松效果最佳。     

胶原蛋白肽复合配方对去势大鼠骨质疏松的防治研究

目的评价胶原蛋白肽、植物雌激素染料木素和大豆甙元、柠檬酸钙联合防治去势大鼠骨质疏松的作用。方法 50只平均体重250g的三月龄SD雌性大鼠,随机分为5组,包括假手术组、去势对照组、雌激素组以及配方高剂量及低剂量组。给药12周,测定受试大鼠骨密度、Mi—cro—CT以及骨生物力学等。结果配方高剂量组与去势对照组相比股骨、股骨头以第四腰椎骨骨密度均有显著性的提高(P<0.05),并且比单独应用雌二醇效果更加明显。通过Micm—CT测得给药后受试大鼠的骨微结构相比去势对照组在骨容积率、骨小梁数量及骨小梁厚度上均有改善。给药组股骨的最大载荷与去势对照组相比有升高的趋势。结论高剂量的植物雌激素、胶原蛋白肽与柠檬酸钙联合应用能够改善卵巢去势大鼠的骨密度、骨微结构以及骨生物力学性质,对临床应用具有指导作用。     

培哚普利与缬沙坦对高胆固醇兔脑组织AngⅡ的影响及其抗氧化应激作用

目的探讨高胆固醇兔脑组织RAAS与氧化应激的关系及培哚普利、缬沙坦的干预效果;方法:32只健康新西兰白兔随机分为4组:正常组,高脂组,培哚普利组,缬沙坦组。喂饲8周后,测定血清总胆固醇(Total cholesterol,TC)及低密度脂蛋白(Low den-sity lipoprotein,LDL)浓度。取脑组织测血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ),血红素氧合酶(hemo oxygenase-1,HO-1)的表达及超氧化物岐化酶(SOD)活力,丙二醛(MDA)含量;结果:与正常组相比,高脂组AngⅡ,HO-1表达明显增强,SOD活力下降,MDA升高,培哚普利可降低AngⅡ,而缬沙坦不能,二者均可使HO-1表达上调,SOD活力升高,MDA降低;结论:1)高胆固醇血症时脑组织处于氧化应激状态,肾素血管紧张素醛固酮系统(Rennin-angiotensin-aldosterone system RAAS)激活;2)培哚普利和缬沙坦对组织具有抗氧化应激的保护作用。     

大豆膳食纤维对糖尿病大鼠模型血糖的影响

目的探讨大豆膳食纤维对糖尿病大鼠模型血糖的影响。方法腹腔注射链脲佐菌素溶液(150 mg/kg)构建糖尿病大鼠模型。建模成功后,灌胃给予低、中、高大豆膳食纤维溶液(1.35、2.70、5.40 g/kg),同时设对照组(灌胃给予10 mg/kg的格列本脲),空白组及模型组灌胃给予0.9%生理盐水,每日给药1次,连续给药42 d。测定各组大鼠体重、空腹血糖值、血清中糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)、胰岛素(insulin,INS)、肝糖原(glycogen)含量及胰腺/体比,并取胰脏组织,制作HE染色病理学切片进行观察。结果与空白组比较,模型组大鼠体重、INS、glycogen及胰腺/体比明显下降(P0.05),空腹血糖值及GSP含量明显升高(P0.01),且胰腺组织损伤严重,胰岛萎缩,细胞水肿变形,细胞间隙存在出血点及炎性细胞浸润现象。与模型组比较,除低剂量大豆膳食纤维剂量组外,中、高剂量组大鼠体重及INS均明显升高(P0.01),GSP明显下降(P0.01);各剂量大豆膳食纤维剂量组及对照组大鼠空腹血糖值明显下降(P0.05),glycogen含量明显升高(P0.05);高剂量大豆膳食纤维剂量组及对照组大鼠胰腺/体比明显升高(P0.05);且各剂量组大鼠胰腺组织损伤程度明显减轻,胰岛细胞数目增多,且细胞水肿变形程度减轻。结论大豆膳食纤维可降低糖尿病血糖含量、修复氧化损伤,且可改善糖尿病对大鼠胰腺的损伤情况,改善效果与剂量呈正相关。     

Ⅰ型糖尿病模型大鼠在重复给药毒性试验中的应用

目的研究Ⅰ型糖尿病模型大鼠在精蛋白重组人胰岛素注射液重复给药毒性试验中的应用。方法使用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)对健康SD大鼠造模,55 mg/kg,计算6个月后的存活率。取模型大鼠,分高、中、低剂量(30、12、5 U/kg)组和对照组,每组20只,雌雄各半,高、中、低剂量组给予精蛋白重组人胰岛素注射液,对照组给予精蛋白重组人胰岛素注射液辅料空白液,均经大鼠皮下注射,1次/d,连续4周,进行重复给药毒性试验,给药4周后,经大鼠腹主动脉采血,检测血清胰岛素含量、C肽含量、糖化血红蛋白含量以及血液生化学和血液细胞学相关指标,并进行组织病理学观察。结果模型大鼠血糖均高于16.7 mmol/L,建模成功率为91.7%,6个月存活率为82%,确定建模成功。重复给药毒性试验高剂量组大鼠死亡4只。与其他剂量组相比,给药结束后和恢复期结束后高剂量组大鼠血清中糖化血红蛋白降低(P0.05);与对照组相比,给药结束后,胰岛素、C肽含量升高(P0.05),恢复期结束后,高、中剂量组胰岛素、C肽含量升高(P0.05);与对照组相比,给药结束后,高剂量组雄鼠和雌鼠血清中白蛋白、血小板升高(P0.05),淋巴细胞数降低(P0.05),而雌鼠红细胞、白细胞减少(P0.05),其余血液细胞学指标未见明显差异。恢复期结束后,各剂量组血液生化学和血液细胞学指标均无差异,建模成功大鼠主要脏器均出现病理变化,重复给药毒性试验中各组大鼠各主要脏器在给药结束后和恢复期结束后也分别出现不同程度的病理变化。结论用STZ造模的Ⅰ型糖尿病大鼠对于精蛋白重组人胰岛素产生的低血糖反应具有较好的耐受性,接近于临床患者的病理生理特征,在使用精蛋白重组人胰岛素进行重复给药毒性试验中具有实际应用价值。     

福辛普利对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织ACE和ACE2基因mRNA转录水平的影响

目的探讨福辛普利对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠肝组织ACE和ACE2基因mRNA转录水平的影响,为阐明NASH的发病机制及探索新的治疗策略提供实验依据。方法将40只雄性SD大鼠用普通饲料喂养1周后,随机分为4组:正常对照组(NC组,普通饲料+生理盐水1 ml灌胃)、高脂组(HC组,高脂饲料+生理盐水1 ml灌胃)、药物对照组[NF组,正常饲料+福辛普利3.6 mg/(kg.d)灌胃]和药物干预组[HF组,高脂饲料+福辛普利3.6 mg/(kg.d)灌胃],每组10只。给药24周后,分析各组大鼠肝组织病理学变化,检测各组大鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、甘油三酯(Triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein,LDL)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、血管紧张素转换酶(Angiotensin-convert ingenzyme,ACE)、ACE2、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)和Ang(-1-7)的水平;RT-PCR检测各组大鼠肝组织ACE和ACE2基因mRNA的转录水平;Western blot检测各组大鼠肝组织Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)的表达水平。结果给药24周后,HF组非酒精脂肪性肝病活动度评分和肝纤维化程度与HC组相比,均明显下降(P<0.001);HF组血清中ALT、ALP、TG、LDL、TGF-β、ACE和AngⅡ的水平均明显低于HC组(P<0.05),而ACE2和Ang(-1-7)的水平均明显高于HC组(P<0.05);福辛普利可显著降低肝组织ACE基因mRNA的转录水平(P<0.001)和CollagenⅠ蛋白的表达水平(P<0.01),升高ACE2基因mRNA的转录水平(P<0.01)。结论福辛普利可能通过下调ACE和上调ACE2的生成和表达,从而降低AngⅡ和升高Ang(-1-7)的生成,具有改善NASH和抗肝纤维化作用。本实验为阐明NASH的发病机制及探索新的治疗策略提供了实验依据。     

丙戊酸钠对慢性不可预见性温和刺激致抑郁大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能的影响

目的探讨丙戊酸钠对慢性不可预见性温和刺激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)所致抑郁大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(hypothalamic-pituitary-adrenal axis,HPA)功能的影响及其机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(CG)、模型组(MG)、丙戊酸钠给药对照组(VCG)和丙戊酸钠给药模型组(VMG),每组15只。模型组采用孤养结合CUMS的方式建立大鼠抑郁模型,建模周期为28 d。VCG和VMG组灌胃给予丙戊酸钠300 mg/(kg·d),CG和MG组灌胃等体积的0.5%CMC-Na溶液。采用旷场试验和强迫游泳试验评价大鼠抑郁行为,试剂盒测定大鼠大脑皮层丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和血清皮质酮(concertmaster,CORT)含量,RT-PCR和Western blot法检测大鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin releasing factor,CRF)基因m RNA和蛋白的表达水平。结果与CG组相比,MG组大鼠水平活动和垂直活动水平得分明显下降(P0.01),不动时间明显延长(P0.01),大脑皮层MDA含量明显升高(P0.05),SOD活力显著下降(P0.05),血清CORT含量明显升高(P0.05),下丘脑CRF基因m RNA及蛋白表达水平明显升高(P0.01及0.05);丙戊酸钠能够明显阻遏上述变化。结论丙戊酸钠能够明显改善CUMS大鼠的抑郁行为,改善机体氧化应激失衡,下调HPA轴功能。     

可溶性鸟苷酸环化酶激活剂cinaciguat对糖尿病大鼠氧化应激的影响

目的分析可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanylate cyclase,s GC)激活剂cinaciguat对糖尿病大鼠氧化应激的影响。方法用高脂高糖饲料喂养及腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和cinaciguat低、中、高剂量[3.5、7、14μg/(kg·d)]组。各组大鼠饲养12周,cinaciguat干预14 d后,经下腔静脉采血,采用全自动生化分析仪检测大鼠血糖及血脂水平,比色法检测血清总氧化物歧化酶(superoxide dismu-tase,SOD)活性、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,内皮素(endothelin-1,ET-1)ELISA试剂检测血浆ET-1含量。结果与模型组比较,cinaciguat各剂量组大鼠血糖值下降不明显(P均0.05);甘油三酯(triglycerides,TG)和总胆固醇(cholesterol,TC)含量均明显降低(P均0.05);cinaciguat各剂量组SOD活性明显升高,MDA及ET-1含量明显降低。结论 cinaciguat可能具有调节血脂,降低糖尿病大鼠氧化应激水平,改善血管内皮功能的作用。     

毒死蜱对雄性大鼠生精功能的影响

探讨毒死蜱(chlorpyifos,CPF)对雄性大鼠生殖功能的影响.选择6周龄雄性SD大鼠按体重随机分成4组,每组10只.灌胃给予CPF,剂量为0(对照组)、0.82、2.45、7.35 mg/(kg·d).于染毒8周后,观察大鼠体重、睾丸和附睾重量及脏器系数、精子畸形率、精子计数、活动精子百分率,光镜病理学检查;检测睾丸组织匀浆的乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)的活性.与对照组比较,随CPF染毒剂量的增加,体重显著下降(P＜O.05),染毒组睾丸重量显著升高(P＜0.05),7.35 mg/kg染毒组附睾重量显著升高(P＜0.05),各自脏器系数均显著升高(P＜0.05).与对照组比较,7.35 mg/kg染毒组的附睾精子数及附睾精子活力显著降低,LDH和AKP的活性受到明显抑制(P＜0.05).2.45、7.35 mg/kg染毒组的ACP活力较对照组显著降低,精子畸形率显著升高(P＜0.05).3个染毒组γ-GT活性较对照组增加,差异显著(P＜0.05).CPF可对机体产生明显的毒性作用,主要靶器官为睾丸,对大鼠精子形成和成熟过程有损伤作用,有雄性生殖毒性.     

胆固醇在高脂高胆固醇诱导非酒精性脂肪性肝炎发生发展过程中的动态作用

目的探讨胆固醇在高脂高胆固醇诱导的非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)发生发展过程中的动态作用。方法将SD大鼠随机分为CON组(正常饮食)、HFC0组(20%脂肪)、HFC1组(20%脂肪+1%胆固醇)、HFC2组(20%脂肪+2%胆固醇)及HFC5组(20%脂肪+5%胆固醇)。饲喂第4、6、8及12周末,采血并取肝脏组织;采用油酸(oleic acid,OA)及OA+低密度脂蛋白-胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)诱导人肝脏正常细胞(HL-7702)5 d后,构建NASH模型,同时以RPMI1640培养基(含10%FBS)为对照组。分别检测大鼠血浆及HL-7702细胞培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)的含量,大鼠肝脏组织及HL-7702细胞中总胆固醇(total cholesterol,TC)及甘油三酯(triglyceride,TG)的含量;HE及Masson染色观察肝脏组织病理改变;油红O及菲律宾菌素染色观察HL-7702细胞内脂滴及胆固醇含量;Western blot法检测活性n-固醇调节元件结合蛋白-2(n-sterol regulatory element binding protein 2,n-SREBP-2)、低密度脂蛋白受体(low-density lipoproteins receptors,LDLR)及3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGCR)的蛋白表达水平。结果动物水平:12周末,与CON组比较,HFC2组、HFC5组血浆中ALT、AST及肝脏组织中TC、TG含量均显著升高(P均<0.05),肝细胞脂肪变性、气球样变性及纤维化病变明显,HFC2组、HFC5组大鼠NASH诱导成功;经Western blot分析,4、6及8周末,HFC2组、HFC5组较CON组LDLR蛋白表达水平均显著升高(P均<0.05),12周末,HFC5组较CON组LDLR蛋白表达水平显著降低(P<0.05);4、6及8周末,各组n-SREBP-2蛋白表达水平与CON组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),12周末,HFC2组、HFC5组较CON组n-SREBP-2蛋白表达水平均显著升高(P均<0.05);4、6及12周末各组HMGCR蛋白表达水平与CON组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),8周末,HFC5组较CON组HMGCR蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。细胞水平:OA+LDL-C组较对照组及OA组细胞内胆固醇含量、n-SREBP-2及HMGCR蛋白表达水平均显著升高(P均<0.05);OA组及OA+LDL-C组较对照组LDLR蛋白表达水平均显著降低(P均<0.05)。结论胆固醇摄入量和摄入时间的长短与NASH肝损伤呈正相关;胆固醇可诱导肝细胞高表达LDLR,促使胆固醇进入肝脏增加,抑制HMGCR调控的内源性胆固醇合成;随着肝内胆固醇堆积增多,肝细胞LDLR表达减少,使肝内胆固醇相对不足,反馈性调节n-SREBP-2及HMGCR表达升高,打破肝脏胆固醇代谢稳态,促进了NASH的发生发展。