人体β-防御素-3突变基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的对人体β-防御素-3基因进行定点突变,并在E.coli中表达。方法从人正常皮肤组织中提取总RNA,经RT-PCR扩增编码β-防御素-3成熟肽的cDNA,测序正确后,设计含突变位点的引物,用PCR重叠延伸法对β-防御素-3成熟肽cDNA进行定点突变,将突变产物克隆至pUC18,并在E.coli中融合表达。结果测序结果表明,经RT-PCR所得的β-防御素-3成熟肽序列与GenBank中报道的序列完全一致。经过突变,β-防御素-3成熟肽第29位谷氨酰胺密码子由CAG突变为精氨酸密码子CGA,其余核苷酸序列均未发生变化。将突变β-防御素-3基因在E.coli中诱导表达后,可见突变β-防御素-3蛋白表达。结论已成功克隆并表达了β-防御素-3突变体基因。     

白色念球菌对小鼠阴道内β-防御素-2表达的影响

目的探讨白色念球菌对小鼠阴道内β-防御素-2表达的影响。方法将白色念球菌按约500个/(0. 5 mL·只)注入小鼠阴道,建立阴道感染模型,于建模0、24、48和72 h经尾部采血,检测白细胞数量;建模72 h将小鼠断颈处死,取其阴道组织,通过免疫荧光和Western blot检测β-防御素-2的表达。结果随着感染时间的增加,小鼠血液中白细胞数显著增加(P 0. 05),小鼠阴道内β-防御素-2的表达水平显著增加(P 0. 05)。结论白色念球菌可显著提高小鼠阴道内β-防御素-2的表达,为β-防御素-2的进一步研究奠定了基础。     

人β防御素-3的研究进展

人防御素是一类人体内源性抗微生物阳离子短肽,富含精氨酸,以其广谱高效的抗菌活性和独特的作用机制,成为人体天然免疫体系的重要组成部分。在人防御素家族中,人β防御素-3(HBD-3)具有较强的抗菌活性和更广的抗菌谱,对盐浓度相对不敏感,对宿主细胞毒性低,这些特点使其成为当前研究的热点。本文就其结构特征、生物学功能及其在抗感染方面的应用前景等方面的研究进展作一概述。     

防腐蚀涂料

<正>201506021含有微胶囊化有机防腐剂的纳米复合防腐涂料的制备[刊,英]/Rahimi,Azam//Journal of Coatings Technology and Research.-2015.12(3).-587~593对金属基材进行有效的防腐预处理是确保金属基材及其部件具有持久防腐性能的关键,为了提高溶胶凝胶法杂化涂料的防腐性能,本研究将防腐剂[如2-巯基苯并噻唑(MBT)和2-巯基苯并咪唑(MBI)]经β-环式糊精(β-CD)处理后,形成微胶囊,并添加到上述     

沙门菌对小鼠胃癌细胞增殖及β-防御素-2表达的影响

目的探讨沙门菌对小鼠胃癌细胞MFC增殖及β-防御素-2(mouseβ-defensin,m BD-2)表达的影响。方法将不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌分别作用MFC细胞不同时间(12、24和48 h)后,MTT法检测沙门菌对细胞抑制的最佳浓度及时间;TUNEL法检测不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌作用MFC细胞不同时间(12、24和48 h)对细胞凋亡的影响;将不同浓度(10、10~2、10~3和10~4个/ml)沙门菌作用MFC细胞4、8和12 h,定量PCR及Western blot法检测m BD-2 m RNA及蛋白水平。结果浓度103个/ml沙门菌作用24 h对MFC细胞的抑制作用明显,细胞凋亡也明显;沙门菌作用MFC细胞8 h时,m BD-2的表达量无论在蛋白还是m RNA水平均较高。结论m BD-2的表达在浓度103个/ml沙门菌作用8 h后达到最高,为进一步研究m BD-2的产生机制奠定了基础。     

雷公藤甲素普通脂质体与包合物脂质体体外释药特点对比分析

分别制备雷公藤甲素普通脂质体、β-环糊精(β-CD)包合物脂质体和羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)包合物脂质体,采用透析法进行体外释药实验并绘制释药曲线,对比分析3种脂质体在不同释放介质中的释药特点。研究发现,不同释放介质会对3种雷公藤甲素脂质体的体外释药曲线具有不同程度的影响,影响最大的是β-CD包合物脂质体、其次是普通脂质体,影响最小的是HP-β-CD包合物脂质体。在与人体体液更为接近的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,与普通脂质体相比,β-CD包合物脂质体具有明显的持续缓释作用,其累积释药率为60.0%;而HP-β-CD包合物脂质体释药初期具有缓释作用,中期释药加速,后期又趋缓,其累积释药率为90.0%,释药最为充分。     

一种 β-联苯双酯的改进制备方法

β-联苯双酯是合成五味子丙素及五味子酯丁的重要中间体。β-联苯双酯可通过两分子6-溴-3,4-亚甲二氧基-5-甲氧基苯甲酸甲酯经Ullmann偶合得到,其偶合单体的区域选择性6-位溴化成为大量制备β-联苯双酯的关键。本文通过选择性脱溴方法制备得到6-溴化物,进而制备得到β-联苯双酯。产物经IR,~1HNMR,~(13)CNMR,~1H-1H COSY,HSQC,HMBC和MS进行结构确认。本方法操作简单,原料价廉易得,适合于工业化大生产。     

中药黄芪中异黄酮苷类化合物的高效液相色谱-串联质谱分析

利用高效液相色谱-大气压化学电离质谱联用技术,建立了黄芪提取物中的有效成分毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的定性分析方法。这两个化合物在大气压化学电离质谱条件下,质谱裂解行为的研究表明,二者具有相似的特征质谱裂解行为,即在正离子模式下的一级质谱中均产生强的准分子离子[M+H]+峰和苷元离子[M+H-G lu]+峰;且苷元离子经碰撞诱导解离均产生.CH3(15 Da)、CH3OH(32Da)和2CO(56 Da)的中性丢失;同时发生Retro-D iels A lder(RDA)裂解反应,导致在毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的二级质谱图中分别产生相对分子质量为m/Z148和m/Z133的特征碎片离子峰。这些特征碎片可以作为这两个化合物定性的依据。该方法已成功应用于黄芪注射液中的这两种物质的定性分析。     

新缩瞳药包公藤甲素类似物的研究

本文以6β-羟基-3-托品酮和6β-乙酰氧基-3α-托品醇为原料,合成7个包公藤甲素类似物。经药理筛选其中两个,即对甲基苯甲酸一6β-乙酰氧基-3α-托品酯和3α,6β-二乙酰氧基托品烷具有纵肠肌收缩作用。     

国内专利文献

β-羟基异戊酰紫草素衍生物及其制备方法一种医药化工技术领域的β-羟基异戊酰紫草素衍生物及其制备方法。β-羟基异戊酰紫草素衍生物结构式Ⅰ中的因子R1、R2为H、1～6个碳原子的烷基、苯基,R3为H、甲基、乙基、乙酰基;结构式Ⅱ中的R1为含氧杂环;结构式Ⅲ中的R1为H、甲基、乙酰基,R2为H、1～4个碳原子的烷基。由于β-     

改性β-环糊精为载体的七氟菊酯微胶囊的制备及性能测试

[目的]制备以改性的β-环糊精为载体的七氟菊酯微胶囊。[方法]以聚乙烯醇-1788为乳化分散剂,运用溶剂挥发法制备微胶囊,使用激光粒度分析仪、光学显微镜、扫描电镜对微胶囊进行形貌表征,用紫外分光光度计研究微胶囊的缓释行为。[结果]β-环糊精与PBS按4∶3的比例共混改性后制备的载体微胶囊的包封率为87.08%、载药量为57.81%,平均粒径为10μm,缓释期为25~27 d。[结论]改性后的β-环糊精载体微胶囊具有较好的结构形貌,载药量和包封率均比脲醛树脂载体微胶囊高,且缓释性更好。     

阿那白滞素与白细胞介素-1β的分子作用机制

阿那白滞素(Anakinra)是一类重要的白细胞介素-1β的抑制剂,对于治疗多种疾病引起的并发症具有重要作用。采用分子对接和分子动力学方法研究了Anakinra抑制白细胞介素-1β的分子作用机制。结果表明,Anakinra可由氢键作用结合于白细胞介素-1β的表面,它的结合使白细胞介素-1β的结构趋于稳定,从而抑制其生物活性。Anakinra的结合没有明显改变白细胞介素-1β的亲水性和疏水性,白细胞介素-1β内部氢键数目的改变是稳定性发生改变的主要原因。     

肌生成抑制素及其抑制剂

肌生成抑制素是转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员,具有与TGF-β共有的结构特征,对骨骼肌生长起负调控作用,是近些年研究发现的又一影响畜禽瘦肉率、改善肉质性状的重要营养因子。研究其作用机制,筛选其抑制剂,使之丧失生物活性,在医学和畜牧业上有重要意义。本文在介绍肌生成抑制素的结构和激活因子的基础上,重点总结其抑制剂及作用机制。     

HPLC-DAD及HPLC-MS研究干燥工艺对中药粗榧化学成分的影响

用高效液相色谱-二极管阵列检测器及高效液相色谱-质谱联用技术,发现常压及减压干燥能使粗榧提取物中两个主要的化合物(1号峰和2号峰)发生降解。减压干燥后两个化合物分别减少了20.2%和45.6%,常压干燥后,两个化合物均检测不到。与干燥前相比,减压干燥和常压干燥使3号峰面积分别增加了1.90倍和5.74倍。1~3号峰均具有特征性的黄酮化合物的两个紫外吸收带(240~280 nm和300~400 nm),被推测为黄酮化合物,质谱研究推测1~2号峰发生了苷键断裂生成3号峰。用AB-8大孔吸附树脂,葡聚糖凝胶LH-20,反相硅胶(ODS)柱色谱分离纯化得到1~3号峰的3个化合物,对其进行了红外和核磁测定,鉴定出芹菜素-5-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷和芹菜素-5-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-6″-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷两个黄酮苷,干燥过程使它们苷键断裂生成了苷元芹菜素(3号峰)。     

UPLC法测定α-倒捻子素对芒果炭疽病菌麦角甾醇含量的影响

[目的]探明α-倒捻子素对芒果炭疽病菌麦角甾醇合成的影响。[方法]通过测定α-倒捻子素对芒果炭疽病菌菌丝生长毒力,建立超高效液相色谱法(UPLC)分析其对菌丝麦角甾醇含量的影响。[结果]采用UPLC法检测,麦角甾醇的保留时间为2.58 min,在2.5~100 mg/L时线性相关系数为0.9999,平均回收率为85.72%,相对标准偏差为4.24%。α-倒捻子素对芒果炭疽病菌菌丝生长的EC_(50)和EC_(80)值分别为73.01、403.96 mg/L;在生长抑制剂量下,α-倒捻子素显著降低病原菌中麦角甾醇含量(P0.05),且对麦角甾醇合成抑制作用呈现剂量依赖性。[结论]UPLC法适用于麦角甾醇的快速检测,α-倒捻子素对芒果炭疽病菌生长和麦角甾醇合成具有明显抑制作用。     

大肠埃希菌诱导小肠上皮细胞产生β防御素-3的机制

目的探讨大肠埃希菌诱导小肠上皮细胞产生β防御素-3(mouseβ-defensin 3,mBD-3)的机制。方法用大肠埃希菌作用于小肠上皮细胞0、24和48 h后,MTT法检测细胞增殖情况;免疫组化荧光法检测mBD-3的表达;Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路中p-ERK1/2、p-JNK及p-p38的表达。结果大肠埃希菌作用小肠上皮细胞48 h时,细胞生长率最低,为(7. 12±0. 31)%;mBD-3的表达在48 h时最高;p-ERK1/2的表达在48 h时最高,显著高于0和24 h(P 0. 01)。结论大肠埃希菌抑制小肠上皮细胞的增殖,并促进mBD-3的表达,这种促进机制是通过ERK1/2途径实现。     

质谱法定量研究气相中二价锰离子与环糊精的非共价复合物

为了探索+2价过渡金属锰离子与环糊精(CD)的非共价作用,采用质谱法(ESI-MS)研究了Mn~(2+)与α-环糊精(α-CD)、β-环糊精(β-CD)、γ-环糊精(γ-CD)、2,6-二甲基-β-环糊精(DM-β-CD)或2,3,6-三甲基-β-环糊精(TM-β-CD)气相中的非共价复合物。一级质谱实验结果表明,Mn~(2+)可以在气相中与α-CD、β-CD、γ-CD、DM-β-CD或TM-β-CD结合,形成配合比为1∶1的非共价复合物,二级质谱进一步确认了复合物的形成。碰撞诱导解离实验显示,[DM-β-CD+Mn]~(2+)(m/z=693)前体离子在较高的碰撞能量时(20 eV),不仅出现丢失甲基化葡萄糖单元中性分子的A系列碎片离子,甲基化葡萄糖单元也可能获得质子,并发生进一步碎裂,产生失去水分子的系列分子离子峰。采用质谱滴定法定量测定了四种复合物[Mn+α-CD]~(2+)、[Mn+β-CD]~(2+)、[Mn+DM-β-CD]~(2+)和[Mn+TM-β-CD]~(2+)的解离常数。结果表明,Mn~(2+)与α-CD、β-CD、DM-β-CD和TM-β-CD复合物的解离常数(K_(d1))分别为4.9、8.8、9.9、6.2μmol/L。     

四磺酸钠杯[4]芳烃对碱性品红和罗丹明B的包结行为

利用紫外-可见光谱法研究了四磺酸钠杯[4]芳烃(C[4]A-SO_3Na)对碱性品红(BF)、罗丹明B(RhB)的包结。结果表明,C[4]A-SO_3Na对BF和RhB的包合比均为1∶1,25℃下的包合常数分别为1.42×10~3L·mol~(-1)和3.0×103L·mol~(-1)。在C[4]A-SO_3Na-BF体系中分别加入阳离子Zn~(2+)、Cu~(2+)、Mn~(2+)、Cd~(2+)和Ag+,体系在最大吸收波长处吸收强度稍有增大,且加入Cu~(2+)时提高最明显,Cu~(2+)具有阻碍C[4]A-SO_3Na包结BF的作用;5种阳离子不影响C[4]A-SO_3Na对RhB的包结。阴离子HPO_4~(2-)和Cl-对C[4]A-SO_3Na包结BF几乎无影响;SO_4~(2-)可降低体系在λmax处吸收强度,具有促进C[4]A-SO_3Na对BF包结的作用;Cl~-和SO_4~(2-)对C[4]A-SO_3Na包结RhB几乎无影响,HPO_4~(2-)可提高体系在λmax处吸收强度,具有阻碍C[4]A-SO_3Na对RhB包结的作用。还研究了pH对C[4]A-SO_3Na与BF包结物(C[4]A-SO_3Na-BF)吸收强度的影响,结果表明,在pH为5~8范围内,C[4]A-SO_3Na对BF有稳定作用。     

2,4,8,10—四硝基—6,12—双[β,β,β—三硝基乙基]—2,4,6,8,10,12—六氮杂三环[7.3.0.0~(3,7)]十二烷—二酮—[5,11]及相关物的合成

本文叙述了2,4,8,10-四硝基-6,12-双[β,β,β-三硝基乙基]-2,4,6,8,10,12-六氮杂三环[7.3.0.0~(3,7)]十二烷-二酮-[5,11]及十个相关物的合成,并介绍了题称化合物的理化与爆炸性能。     

O-糖苷-α-芳基硝酮的合成及其晶体结构特征

以葡萄糖和乳糖为原料,经全乙酰化、溴代得到溴代的葡萄糖和乳糖,再与含羟基的芳香醛反应得到糖苷醛类化合物,进而与羟胺反应合成9个O-糖苷-α-芳基硝酮,产率为75%~92%。所得化合物经IR、~1HNMR、~(13)CNMR、MS表征,并对化合物N-苄基-C-[4-甲氧基-3-(2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖基)氧]苯基硝酮进行了X-射线单晶衍射分析,进一步确定了目标化合物的结构。结合化合物的氢谱和晶体数据表明,所合成的硝酮糖苷均具有单一构型(β型)。