用胶体金显示PbGv在脂肪体中的免疫化学定位

胶体金作为标记物最早由 Faulk和 Toylor( 1 971 ) Romano等 ( 1 974)用于电镜免疫细胞化学研究。近年来胶体金探针已成为定位和分析多种蛋白质、多肽、多糖的有力工具。特别是在抗原酶及激素等物质的细胞免疫化学定位中更加显示了其独特的威力。利用 Ig G的双价性 ,它的一臂可结合到事先包被有抗原的胶体金上 ,也可以把抗体分子包被在胶体金上 ,对细胞内的抗原进行定位。昆虫病毒在感染细胞中有很强的能力。其中杆状病毒包含体蛋白的复制量可达到死虫的2 0 %是当前所了解的真核细胞中表达量最大的病毒蛋白质。为了了解这蛋白合成和代谢的…     

免疫胶体金标记电镜技术在研究埃希氏大肠杆菌987P粘着素抗原结构上的应用

作者以单克隆抗体为第一抗体,应用免疫胶体金标记电镜技术研究了埃希氏大肠杆菌987P粘着素抗原结构。结果表明,该粘着素由相同的亚单位组成,并呈螺旋状结构。每个亚单位包含着几个相同的抗原决定簇分子,与酶联免疫吸附电镜技术相比较,该法除具有单克隆抗体极高特异性的特点外,还其有大小一致的胶体金颗粒致密附着在抗原相关位点上,清晰易于识别的优点。     

免疫复型技术的应用

自Faulk和Taylor(1971)报导应用胶体金电镜免疫金染色研究细胞表面抗原的分布以来,许多学者进一步证实了胶体金作为特异细胞成份的标记物具有许多独特的优点。近年来金探针标记技术得到了飞速发展。在电镜下定位各种抗原准确而不遮盖超微结构,可以说已发展成为常规技术。但是对于不同的样品,不同的实验要求,细胞表面或细胞内标记等,还需要摸索出各自的理想的制样方法才能达到预期目的。     

胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒

本实验利用胶体金免疫电镜技术检测番茄环纹斑点病毒（ tomato zonate spot virus, TZSV）,分别以TZSV的N 蛋白多克隆抗体及TZSV的Gn蛋白多克隆抗体为一抗,然后以胶体金标记羊抗兔IgG?gold（10 nm）为二抗对病毒进行胶体金标记,电镜观察用TZSV Gn蛋白抗体标记的胶体金颗粒能很好地结合到病毒粒体上。结果表明该方法可以实现对TZSV更为准确可靠地检测。     

金标免疫电镜在自身免疫性大疱病研究中的应用

采用ＬＲ Ｗｈｉｔｅ作为包埋剂,用胶体金标记包埋后直接和间接免疫电镜技术,对天疱疮、大疱性类天疱疮、线型ＩｇＡ大疱性皮肤病皮损组织中的抗体和血清中自身抗体对正常人皮肤的结合部位进行研究。发现ＩｇＧ型天疱疮抗体位于桥粒上;ＩｇＧ型类天疱疮抗体对半桥粒上及透明层中;而线型ＩｇＡ大疱病ＩｇＡ型自身抗体结合在半桥位、透明层和致密层中。提示寻常型天疱疮和落叶型天疱疮抗原均位于桥粒复合体上;大疱性类天疱疮抗原位于半桥粒上及其下方的透明层虽;线型ＩｇＡ大疱病抗原位于半桥粒上、透明层和、或致密层中。本文同时就金标记包埋后免疫电镜在大疱性皮肤病诊断和研究中的价值进行介绍了讨论。     

应用胶体金标记免疫电镜技术对牛白血病病毒的研究

牛白血病病毒系为逆转病毒科肿瘤病毒亚科C型肿瘤病毒属哺乳动物C型肿瘤病毒亚属成员。该病毒对养牛业危害极大,而且对国济民生也有莫大影响。因此,研究在病毒,防制牛白血病具有深远意义。本试验目的旨在应用免疫胶体金技术进一步确定该病毒的抗原位置。本试验利用牛白血病病毒感染羊胎肾细胞(FLK)作为原材料。羊抗牛白血病病毒血清和免抗羊IgG分别为第一和第二抗体,利用鞣酸一构椽酸三钠还原法制备约5nm粒径的胶体金。按文献报导方法进行标记,常规方法制     

免疫胶体金标记牛小肠碱性磷酸酶的研究

酶在细胞超微结构上的定位,通常是用细胞化学的方法,根据其底物的特异性通过重金属元素进行标记定位;而对于某些底物特异性较差的酶和同工酶在免疫化学上不同时,应用免疫组织学的方法以其抗原——抗体反应的高度特异性为基础,对酶进行定位研究确是一种有力的手段。特别是应用近几年发展起来的免疫胶体金技术对酶进行定位研究,可以得到高分辩率、高特异性的标记,并可对同一细胞内的不同酶的存在进行双重和多重标记。     

病毒感染单层细胞的免疫标记与断裂技术

用抗Sindbis病毒(SbV)囊膜蛋白E_1和E_2的抗体及抗Vesicular Stomatitis病毒(VSV)囊膜蛋白(G蛋白)的抗体分别对病毒感染的BHK-21细胞进行胶体金免疫标记,然后按冰冻蚀刻的制样程序制备铂-碳复型膜以研究病毒囊膜蛋白在细胞质膜上的定位与分布。本文扼要地介绍了这一技术的操作过程,同时,结合我们自己的工作对该技术的要点及其应用进行了讨论。     

扫描电镜显示细胞表面的分子标记

为了研究细胞表面特异蛋白质的分布,铁蛋白、乳胶颗粒、胶体金甚至病毒颗粒一度都曾作为扫描样品的标记物。但目前最有潜力并表现出巨大优越性的无疑是新近发展起来的胶体金标记技术。我们用直径20nm的蛋白A—胶体金和抗水泡性口炎病毒(vsv)表面膜蛋白(G蛋白)的抗体及抗辛德毕斯病毒(sbv)表面膜蛋白(E_1和E_2蛋白)的抗体,按常规免疫标记并经过我们实验室改进的方法,分别标记了VSV和sbv感染的BHK-21细胞或鸡胚成纤维细胞,经固定和临界点干燥后,镀以厚度约为50A的1金膜,在Hitachi S-570扫描电镜下观察。     

辛德比斯病毒6K蛋白在宿主细胞内的分布

6k蛋白是Sindbis病毒(SbV)26S基因组编码的一个仅有55个氨基酸的小分子蛋白质,其生物学功能甚至在细胞内的分布至今尚不清楚。最近在M.Schlesinger实验室中用人工合成的6k多肽得到抗6k蛋白的抗体,使我们的上述工作得到进行。本实验用直径20nm的胶体金—proteinA和直径为5nm的胶体金—羊抗兔抗体的复合物,用常规的免疫电镜技术,先后标记了SbV感染的整装细胞及用于冰冻蚀刻的样品,以观察6k蛋白在细胞表面的分布,又标记了Triton×100处理的整装细胞以研究6k蛋白与细胞骨架的关系。同时还标记了低温包埋剂(LK4M)