电离辐射对小鼠脾细胞IL-2Rα表达的影响

研究不同剂量、特别是低剂量辐射全身照射后,小鼠脾细胞ＩＬ－２Ｒα的变化规律,以揭示低剂量辐射免疫增强效应的发生机理,小鼠接受不同剂量Ｘ射线全身照射２４ｈ后,体外诱导脾细胞ＩＬ－２Ｒ的表达,采用直接免疫荧光流式细胞术检测脾细胞ＩＬ－２Ｒα表达的变化。结果 ５０－５００ｍＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ,小鼠脾细胞ＩＬ－２Ｒα粪土同,表现为ＣＤ２５阳性细胞百分率 于假照射对照组,尤其以５０ｍＧｙ照射组了为明     

小剂量照射的脾细胞外液对较大剂量照射小鼠胸腺细胞…

７５ｍｍＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，小鼠脾细胞经ＣｏｎＡ刺激４８ｈ，其细胞外液使２ＧｙＸ射线全身照射小鼠外培养的胸腺细胞凋主恨降低，尤其在培养后７２ｈ降低明显。与此同时，脾细胞ＣＤ２５表达及ＩＦＮ－     

p53和Bcl—2／Bax在辐射诱导胸腺细胞凋亡中的作用

采用流式细胞术对昆明小鼠接受７５ｍＧｙ和２ＧｙＸ射线全身照射后，胸腺细胞内细胞凋亡相关基因ｐ５３，Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白的表达进行了比较研究。结果表明，７５ｍＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，ｐ５３基因蛋白产物的表达显著降低，而２ＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，ｐ５３基因蛋白表达则显著增高。     

乙酰胆碱对小剂量辐射小鼠脾细胞增殖反应的影响

采用７５ｍＧｙ Ｘ射线全身和离体照射昆明系雄性小鼠脾细胞，观察乙酰胆碱对其增殖反应的影响。其结果发现，Ａｃｈ增强脾细胞自发增殖能力及对ＣｏｎＡ５反应性；７５ｍＧｙ Ｙ射线全身和离体照射后脾细胞增殖反应变化不同，全身照射后早期增殖更为显著，而离体照射时似较未受照射细胞为差。     

不同剂量X射线全身照射对小鼠脾细胞周期进程的影响

采用流式细胞术研究了Ｘ射线全身照射后小鼠脾细胞周期的进程及其剂量效应关系。结果表明,７５ｍＧｙＸ射线全身照射后１２￣７２ｈ脾细胞周期各时相细胞数目发生明显变化,Ｇ０／Ｇ１期细胞数低于假照组,Ｓ组细胞数增多,说明其ＤＮＡ合成能力增强,至７ｄ时回复至假照组水平;２．０Ｇｙ全身照射后８ｈ时脾细胞出现明显的Ｇ２阻滞,１２ｈ时Ｇ２阻滞和ＤＮＡ合成抑制达最高点,７２ｈ其细胞周期进程则明显加快,至７ｄ时回复至假     

小剂辐射诱导小鼠免疫细胞早期蛋白质合成动力学变化

采用＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入示踪观察７５ｍＧｙＸ射线全身照射对小鼠免疫细胞蛋白早期合成的影响。结果表明：小剂量Ｘ射线全身照射衙小鼠胸腺细胞蛋白质合成开始增加，６－８ｈ达到峰值，随后逐渐下降。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及光密度扫描结果表明，照射后小鼠胸腺及脾细胞蛋白质合成增加，同一细胞中不同分子量的蛋白质各有其消长特点，不同细胞间合成增加的蛋白质分子量有所不同。     

X射线全身照射后小鼠腹腔巨噬细胞的肿瘤坏死因子？…

用Ｌ９２９细胞染料摄入法检测了小鼠受不同剂量（７５ｍＧｙ，２．０Ｇｙ）Ｘ射线全身照射后小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏因子α（ＴＮＦα）表达量的时程变化及全身照射后２４ｈ的剂量－效应关系。结果可见，７５ｍＧｙ照射后３ｈ，ＴＮＦα表达量有所增加，从６～１２０ｈ，均显著高于对照组，从剂量最高；２．０Ｇｙ照射后３～１２ｈ，不同时间均显著高于对照，表达量最高点为１２ｈ。从剂量－效应关系中可见，经５０ｍＧｙ～２．０Ｃ     

小剂量辐射抑制肿瘤细胞播散的机理研究

观察了静脉注入肿瘤细胞前２４ｈ，７５ｍＧｙＸ射线全身照射对小鼠免疫功能的影响。结果表明照射组小鼠胸腺Ｓ期细胞百分数于照射后４ｄ，胸腺ＣＤ＾３＋细胞百分数于照射后２、８ｄ，脾细胞ＩＬ－２和γＩＦＮ分泌于照射后４ｄ，脾脏ＮＫ细胞活性于照射后２、４、６和８ｄ均较假照射组明显增高。     

小剂量辐射诱导小鼠免疫细胞早期蛋白质合成动力学变化

采用３ＨＬｅｕ掺入示踪观察７５ｍＧｙＸ射线全身照射对小鼠免疫细胞蛋白质早期合成的影响。结果表明，小剂量Ｘ射线全身照射后小鼠胸腺细胞蛋白质合成开始增加，６～８ｈ达到峰值，随后逐渐下降。ＳＤＳＰＡＧＥ及光密度扫描结果表明，照射后小鼠胸腺及脾细胞蛋白质合成增加，同一细胞中不同分子量的蛋白质各有其消长特点，不同细胞间合成增加的蛋白质分子量有所不同。这些早期变化的蛋白分子参与复杂的细胞功能调节，可能与辐射兴奋效应有关。     

小剂量辐射增强化疗药物的抑瘤作用及其机制

在丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）或环磷酰胺（ＣＰ）腹腔注射前６ｈ，给予荷有Ｌｅｗｉｓ肺癌的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠７５ｍＧｙＸ射线全身照射（ＷＢＩ）。结果表明７５ｍＧｙＸ射线全身照射可增强化疗药物的抑瘤作用，肿瘤生长速度明显减慢。同时对与肿瘤免疫相关的某些免疫学指标进行了观察，发现７５ｍＧｙＸ射线全身照射可以促进荷瘤鼠的胸腺和脾细胞的增殖，促进自然杀伤细胞（ＮＫ）、淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）和特异性杀伤性Ｔ细胞（ＣＴＬ）的杀伤功能，增加脾细胞白细胞介素Ｉ（ＩＬ－２）的分泌量，并且减低ＭＭＣ和ＣＰ对免疫功能的损害。     

小剂量电离辐射增强小鼠免疫器官c－fos基因的表达

应用原位杂交方法观察７５ｍＧｙＸ射线全身照射后不同时间小鼠胸腺、脾、肠系膜淋巴结ｃ－ｆｏｓ基因ｍＲＮＡ转录水平的变化。结果发现，假照组胸腺、脾、肠系膜淋巴结内巨噬细胞、多突起细胞、部分淋巴细胞（主要为大淋巴细胞）ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ有低水平基础表达；７５ｍＧｙ全身照射后ｃ－ｆｏｓ的转录水平明显增高，胸腺为１ｈ达峰值，脾脏２ｈ达峰值，肠系膜淋巴结变比幅度较小，但持续时间较长。胸腺和脾脏阳性细胞１２ｈ基本恢复至假照水平，雨淋巴结细胞ｃ－ｆｏｓ至照后１２ｈ仍稍高于对照组。实验结果表明，小剂量电离辐射可使免疫活性细胞ｃ—ｆｏｓ的转录水平上调。     

X射线全身照射对小鼠脾细胞cyclin B1 和cdc2基因转录水平的影响

采用Northern blot杂交法研究了低、高剂量X射线全身照射后不同时间小鼠脾细胞cyclin B1和cdc2基因转录水平的变化。结果表明,75mGy X射线全身照射后2h及12－24h小鼠脾细胞cyclin B1 mRNA表达量略有升高,分别为假照组的1.25、1.27和1.22倍,48h回降至假照水平;而2.0Gy照射后4h开始下降,12h降至最低,与假照组相比降低了39％,48h恢复至假照组水平。同时观察了cdc2 mRNA表达量的变化,结果表明,与假照组相比75mGy X射线全身照射后2－48h的各时间点小鼠脾细胞cdc2 mRNA表达量未见明显变化;而2．0Gy照射后的时程变化与相同剂量照射后cyclin B1的变化基本一致。结果提示：低剂量辐射可诱导小鼠脾细胞cyclin B1转录水平增高,进而促进其细胞周期进程,但对cdc2转录水平无影响;相反,较高剂量辐射可诱导cyclin B1和cdc2转录水平均明显降低,最终发生G2期阻滞。     

X射线全身照射对小鼠胸腺细胞Cyclin B1和p34cdc2蛋白表达的影响

本文采用免疫组织化学法研究了低、高剂量X射线全身照射后不同时间小鼠胸腺细胞CyclinB1和p34^cdc2蛋白表达的变化。结果表明,与假照组相比,75mGy X射线全身照射后8h小鼠胸腺细胞CyclinB1蛋白表达开始升高,12h达高峰,48h恢复至正常水平;而2Gy照射后4h小鼠胸腺细胞CyclinB1蛋白表达开始降低,12h降至最低,24h有回升趋势,48h恢复至假照水平。p34^cdc2蛋白的表达,与假照组相比,75mGy照射后4～48h未见明显变化;而2Gy照射后的时程变化与相同剂量照射后CyclinB1蛋白表达的变化基本一致。提示：低剂量X射线全身照射可诱导小鼠胸腺细胞CyclinB1蛋白表达增强,从而促进细胞周期进程,但对p34^cdc2表达无影响;相反,较高剂量照射导致CyclinB1和p34^cdc2蛋白表达均下降,最终发生G2阻滞。     

电离辐射对小鼠胸腺细胞和脾细胞P53基因mRNA和蛋白表达的影响

采用流式细胞术和Northern blot法检测了不同剂量X射线全身照射后,小鼠胸腺细胞和脾细胞中p53基因mRNA和蛋白表达的变化。结果表明,2．0GyX射线全身照射后,小鼠胸腺细胞p53阳性细胞百分数与对照相比,在照后1h开始升高,8h达最高,以后逐渐下降。不同剂量X射线照射后,小鼠胸腺细胞和脾细胞中p53基因mRNA水平的观测结果表明,75mGy及2.0Gy全身照射后1-48h,小鼠胸腺细胞和脾细胞中p53mRNA水平均未见明显的变化;0.5-6.0GyX射线全身照射后4h,小鼠胸腺细胞和脾细胞中p53 mRNA水平亦未见明显的改变。结果提示,X射线全身照射可诱导小鼠淋巴细胞p53蛋白表达,其p53蛋白表达增加是通过转录后机制实现的。     

不同剂量X射线照射对小鼠巨噬细胞表达CD80和CD86的影响

采用免疫组织化学法观察了X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞及体外照射对培养的小鼠巨噬细胞株J774A．1细胞表达CD80和CD86的影响。结果表明;全身照射和体外照射时2GyX射线诱导CD80表达增高均较0．075Gy为早,而CD86对两种剂量的反应无明显区别,剂量效应关系的研究表明,CD80和CD86的表达无论全身照射或体外照射时均在0．075Gy 剂量点出现峰值,而在较大剂量照射时出现第二个峰值的剂量则全身照射高于体外照射。实验结果显示,B7分子的表达上调可能是参与低剂量电离辐射免疫增强效应的重要因素。     

低剂量电离辐射对小鼠胸腺细胞Fos蛋白表达的影响

应用免疫组织化学、图像分析定量法及流式细胞术分别观察７５ｍＧｙ全身照射后不同时间小鼠胸腺细胞Ｆｏｓ蛋白的变化。结果发现,照射后胸腺细胞Ｆｏｓ蛋白的表达明显增高,２４ｈ达峰值,以后逐渐恢复至假照水平。与以往的低剂量电离辐射全身照射后小鼠胸腺细胞ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ转录水平的变化在时程上一致。提示,低剂量电离辐射可使免疫细胞的活性增强。     

电离辐射对小鼠派伊氏板细菌凋亡的影响

采用原位末端标记（ＴＵＮＥＬ）法研究不同剂理Ｘ射线全身照射后派伊氏板细胞凋亡的时间效应及剂量效应关系。结果表明：２Ｇｙ全身照射后派伊氏板ＴＵＮＥＬ阳性细胞数增加；０．０５Ｇｙ、０．０７５Ｇｙ全身照射后派伊氏板ＴＵＮＥＬ阳性细胞数减少。提示２Ｇｙ全身照射促进细胞凋亡，而低剂量电离辐射抑制细胞凋亡。     

X射线全身照射对小鼠腹腔巨噬细胞c-myc转录水平的影响

c-myc为即刻早期基因之一,其蛋白表达产物具有转录因子的作用。本文用原位杂交方法观察了小鼠受75mGy及2.0GyX射线全身照射后不同时间,腹腔巨噬细胞c-myc mRNA转录水平的变化。结果表明,2.0Gy照射组c-myc表达明显高于75mGy照射组,而且,2.0Gy照射后从30min到8h均有表达增强,16h和24h无表达,48h再次出现表达增强。