马尾松种子劣变中超微结构的电镜观察

马尾松是我国主要造林树种之一,其种子在室内挂藏时会发生老化劣变。劣变种子生理生化的变化与胚根尖细胞的超微结构变化相关。我们对种子胚根尖细胞的超微结构进行电子显微研究,以掌握劣变原因,选择科学的贮藏方法。供测种子产自浙江天台,一组为低温密闭贮藏(5—3℃冰箱中),一组室温密闭贮藏,另一组为室内挂藏。贮藏二年后测定发芽率等。选用高活力和劣变的种子作电镜观察,经吸胀萌发后切下胚根尖,2.5％戊二醛前固定4小时,1％锇酸后固定3小时,包埋,切片后镜检。据测定低温密闭贮藏种子活力最高,室内挂藏种子活力最低,严重劣变。电镜下可见高活力种子胚根尖细胞     

扁桃酸酰胺作用阴道滴虫的电镜观察

扁桃酸酰胺(Mandelic Amide)已证实为桃叶膏抗滴虫的有效成份,为探讨此成份的杀虫机制,作者曾作了光镜下的形态观察,而对电镜下的超微结构改变未见有过记载。本文就电镜下的观察结果报导如下。观察方法是在培养48小时的滴虫培养管内加入40mg/5ml扁桃酸酰胺,培养48小时后制备样品。另外取一滴虫培养管不加药品作对照组,并与实验管同时进行样品制备。样品制备是将上述两种标本,先以2.5％戌二醛液在室温下作一级固定,15分钟后,用pH7.4磷酸缓冲液水洗1小时,再入1％四氧化锇二级固定2小时。用乙醇进行系列脱水,用环氧树酯包埋处理48小时,作超薄切片,切片用醋酸铀和柠檬铅作双染色,随后在H—600型电镜下观察拍片。     

肾组织的低温快速冷冻固定及冷冻置换研究

超低温快速冷冻固定以极高的冷冻速率对生物样品进行固定,可使生物组织结构、组织内可溶性离子及游离性物质得到保存,使被固定后的生物组织仍旧保持于最接近原自然状态。作者对肾组织的超低温快速冷冻固定及冷冻损伤进行了探讨。取雄性大鼠肾皮质用振动切片机切成150～200/μm厚的薄片,采用Reichert-Jung KF-80弹射式快速冷冻仪将切片快速插入经液氮冷冻至-175℃的冷冻剂F22中,再迅速转移到置换液丙酮中,并保持温度在-80℃(34小时);-60℃(48小时);-20℃(12小时)和-4℃(1小时),缓慢升至室温。常规包埋切片并观察。电镜下,从肾皮质表层到30μm深的范围内,组织超微结构保存良好,细胞核、核仁和微绒毛等结构清晰显     

在中性领域,P-NPP酶活性检出方法中几种铅盐的效果比较

为了探索在中性环境中P—NPP酶活性的检出方法,对作为捕捉剂的铅盐种类进行了对比和选择。实验动物为体重35—40g的ddy系小白鼠。方法:用含20％多聚甲醛和0.5％戊二醛的固定液灌流固定10分钟,取出肾脏,做20—40μm厚的未冻切片,分别投入下面五组反应液中,37℃,浸渍30分钟。反应液的组成为:Tricine-NaOH缓冲液2.5mM,pH7.4;p-NPP10mμ;KC150mμ;levamisole2.5mμ;DMSD25％;再各个加入柠檬酸铅、硝酸铅、硫酸铅、氯化铅、醋酸铅4mμ。反应后,光镜用1％硫化铵液浸1—2分钟,电镜则用1％OsO_4后固定。再进行常规处理、分别用光镜和透视电镜观察、照像。     

热暴露大鼠脑组织超微结构改变

机体在热环境中的耐受能力有一定限度,超过限度就会发生中暑,中暑常常伴有谵妄和昏迷等神经系统症状,因此热暴露对脑组织的影响特别受到注意。光镜观察已经积累了许多材料,但是电镜观察尚未见有报导,为此选择大鼠脑组织神经细胞和毛细血管为对象观察超微结构改变。大鼠在干球温度38—40℃、湿球温度31—32℃的高温仓中受热致死,取5只作电镜观察,平均受热时间215分钟,平均最高体温41.7℃。死亡大鼠立即开颅取大脑与小脑皮质部份组织,以戊二醛固定,再以锇酸固定,Epon812包埋,半薄切片作Giemsa染色,超薄切片作铅铀染色。另有3只大鼠不受热,在室温条件作对照观察,活杀取材,处理相同。     

团头鲂(Megalobrama amblycephala)脑垂体促性腺激素分泌细胞的超微结构及其在人工催产过程中的变化

以团头鲂为材料,对其脑垂体促性腺激素分泌细胞(GTH细胞)的超微结构及其在人工合成催产剂(LRH—A)作用下的变化进行观察和研究。取性腺IV的雌团头鲂50尾,注射LRH—A催熟9小时,再注射绒毛膜促性腺激素(HCG),每隔2—4小时取一次材,另取一些未经催产的鱼作为对照。样品经4％戊二醛和1％O_sO_4各固定2小时,丙酮梯度脱水,醋酸双氧铀块染,Epon 812环氧树脂包埋,LKB—V超薄切片机切片,日立H—600—2A型电镜观察。     

免疫金法与ABC法在电镜包埋前染色之比较

包埋后免疫电镜术虽能精确定位抗原,但难度大。本文用胶体金标记法与ABC法对人鼻中线恶网瘤组织在树脂包埋前作抗人T细胞免疫染色,并对两种方法进行比较。简述如下:临床活检鼻中线恶网组织,经4％多聚甲醛加1％戊二醛4℃固定,振动切片(50μm),PBS冲洗,在预先硅化的载玻片上作免疫染色:鼠抗人T细胞McAb(Dako公司出品)孵育过夜;金标羊抗鼠抗体(10nm,军科院基础所出品)室温下孵育1小时,再将切片倾入小瓶,经1％锇酸后固定,常规脱水包埋及超薄切片,不作铀铅复     

Co－Si界面低温（≤450℃）相变的电子显微术研究

本文用透射电镜的衍射方法，研究Ｃｏ薄膜和衬底之间的界面的低温相变．用小角解理方法制备的室温原始样品经分析发现：室温下薄膜没有相变．在２５０℃，Ｃｏ２Ｓｉ为最先形成的硅化物；２５０℃３０分钟处理后，产生大量的ＣｏＳｉ相．４５０℃１小时处理形成单相的ＣｏＳｉ．从本实验结果与前人研究结果对比发现：观察手段、样品制备方法、镀膜方法等因素会影响低温相变结果．     

肾穿组织远程邮寄超微结构病理检验

为了更好地普及肾穿组织超微结构病理检验 ,我们研制和利用肾穿组织电镜固定邮寄盒收集院外标本 ,自 1998.11～ 1999.6间共接收 12 1例进行常规电镜制样和观察。结果显示电镜固定邮寄盒完全达到了前固定组织的目的 ,电子致密物、基底膜、系膜及各种细胞的细胞核以及细胞质的大部分结构保存良好 ;邮寄盒均无渗漏及变形 ,大小符合普通信件邮寄标准 ,使用方便 ,无需低温送检。     

高温环境对腹腔巨噬细胞的影响

本文观察了外界高温(干球40℃,湿球35℃),不同劳动负荷等因素对SD大鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力及超微结构的影响。材料与方法:81只160～230gSD大鼠被随机分成七个组。Ⅰ组为对照组,Ⅱ组为受热1小时组,Ⅲ组为受热2小时组,Ⅳ组为单纯游泳组V组为受热1小时游泳组,Ⅵ组为受热1小时延期4小时活杀组,Ⅶ组为受热1小时延期24小时活杀组。受热动物放入人工气候室受热,游泳组动物投入32℃温水中游泳,沉入水中10秒者判为劳动力衰竭。断颈活杀,收集腹腔巨噬细胞,做腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数、Fc受体、酸性磷酸酶活性等观察。在巨噬细胞混悬液中加鸡红细胞孵化10分钟后,用1％戊二醛固定,按常规方法电镜制样。在电镜随     

精索静脉曲张不育者精子的超薄切片和冷冻蚀刻的电镜观察

精索静脉曲张影响精子发生和精液质量,导致男性不育。为探讨不育的原因,本实验采用超薄切片和冷冻蚀刻复型膜的电镜观察。材料和方法:两例青年男性不育者,年龄为29岁,31岁,婚后三年不育,有双侧中度精索静脉曲张。超薄切片制备:2.5％二醛,1％锇酸双固定,酒精脱水,环氧树脂812包埋,超薄切片厚度500埃左右,铀、铅双染色。冷冻蚀刻复型膜制备:新鲜精液固定于2.5％戊二醛,经30％甘油生理盐水处理12小时,BAF—400D高真空冷冻蚀刻仪制成复型膜,电镜观察。观察结果:超薄切片:精索静脉曲张患者精液内可见头帽期和顶体期精子细胞,且形态异常,如顶体扩张,细胞核染色质松散,核内出现大空腔。发育成熟的精子头畸形,中段线粒体排列紊乱等。冷冻蚀刻复型膜:患者     

用常规透射电镜观察半薄切片——铀—铅—铜浸染技术的应用

在常规透射电镜中,超薄切片的厚度一般不超过0.1微米,否则就看不清样品的细节。但是,使用特殊的标本本浸染方法,选择性地对某些细胞结构染色,就可以在一般透射电镜下观察半薄切片。本实验采用铀—铅—铜浸染技术,选择性地染色一部分细胞器,在75—100KV透射电镜下观察0.25—0.5微米的半薄切片。结果表明,这一技术在超微结构研究中有一定实用意义。实验方法:用2％戊二醛灌注大鼠,取肝、肾、十二指肠和睾丸等组织,切成1立方毫米小块。组织块经缓冲液漂洗后,在42℃下先放入5％醋酸铀水溶液(PH3.5)浸染1小时,再在硝酸铅—硫酸铜—枸椽酸钠溶液中浸染1小时,然后在4℃下用1％饿酸后固定12小时、常规环氧树脂包埋,最后将组织块切成0.25—0.5微米半薄切片,在透射电镜下观察。     

一株正常人外周血带EB病毒的B淋巴细胞(H—18)的超微结构研究

H—18细胞系由我国一例正常人外周血分离出的B淋巴细胞培养成株。经免疫荧光及免疫酶标光镜检查发现该细胞EB病毒壳抗原(VCA)阳性,如用正丁酸钠及巴豆油等病毒激活剂处理后,大量细胞(30—40％)显示VCA阳性。分离出的病毒可使体外培养细胞转化。用正常H—18细胞为对照,经正丁酸钠(4mM/ml)及巴豆油(500ng/ml)处理H—18后12,24,36,48,72小时的标本用国产DXB 2—12电镜观察。发现正常H—18细胞超微结构与正常人B淋巴细胞有很大差别。大小不一,核很不规则,核比例大,且几全部由常染色质组成。为分化很差或为转化的淋巴细胞。个别细胞内可见EB病毒之核壳体及其形态发生过程,证明该细胞带有EB病毒并进行病毒的复制。经正丁酸钠及巴豆油处理后12小时,部分细胞可见病毒大量复制。随时间的延长逐步增多,至72小     

小脑浦肯野细胞酶细胞化学的超高压电镜观察

本研究采用电镜酶细胞化学方法显示小脑浦肯野细胞酸性磷酸酶活性分布,在超高压电镜下进行了观察,探讨了线状溶酶体的存在。实验动物采用 wistar 成年健康大鼠,体重150克左右,乙醚麻醉,用30mM pipes 缓冲液(PH7.4,8％蔗糖)缓冲配制的2％PFA(多聚甲醛)和GLA(戊二醛)混合固定液进行心脏灌流10分钟,立即取小脑切1mm×2mm小块,于4℃继续浸泡固定1小时后,同种缓冲液洗净。用 microslicer(微组织切片机)作成40μm非冻结切片,置入 Gomori’s 改良法配制的孵育液中,37℃恒温振荡孵育40分钟。对照组去除底物,在孵育液中加入氟     

GaAs MESFET低温性能实验

本文介绍了在低温下,对GaAs MESFET(包括12GHz低噪声器件、双栅器件、功率器件及振荡用器件)所进行的性能测量与分析。在218K(-55℃)下,上述各类器件的跨导g_m相对于室温可增加5～8％,器件的C_(gs)可减少20～50％,器件的寄生电阻R_s和R_d可减少15～40％,R_g也存在缓慢下降的趋势。 文章还给出了低温下低噪声GaAs MESFET放大器的噪声、增益—温度曲线。在218K下,放大器的噪声相对室温可下降1dB左右,单级增益相对室温可增加1～1.5dB,即在低温表现出良好的微波性能。     

Ni顺—1,4—聚丁二烯结晶的形态结构

以镍为催化剂,定向聚合得到的顺—1,4—聚丁二烯(Ni—PB)具有较好的分子结构规整性。在适当的低温下,极易结晶。本文详细讨论了Ni—PB的溶胶及凝胶对低温结晶成核及生长的影响。采用燕山石化总公司,胜利化工厂生产的Ni—PB为样品。各样品的顺式含量均在92—96%之间。将0.5%Ni—PB甲苯溶液,在甘油表面上成膜、蒸馏水清洗后,捞在电镜载网上。经-30℃下不同时间结晶后,用OsO_4固定。在H—500型电镜下观察。 Ni—PB在-30℃下结晶的TEM照片给出可以得到尺寸为几+μm的球晶。其生长速率为1μm/min。对于凝胶含量较小的试样,结晶诱导期较长,晶核为单个片层或片层束(图a)。在片层的生长过程中,首先形成宽约为1000—2000A的界面不十分清晰的白色区,为预结晶区。进一步结晶,排列为规整的,有清晰界面的片层。如     

LambdaDNA诱导非细胞体系核重构过程的超微结构研究

非洲爪蟾未受精的卵细胞去胶膜后,经钙离子载体A23187活化及松胞素B处理,10,000G离心裂胞,除掉脂滴、卵黄颗粒、色素颗粒及卵核等,可得到可溶性胞质。在可溶性胞质中先加入ATP再生系统。将在65℃处理5分钟的Lambda DNA引入上述爪蟾卵非细胞体系,置22℃温育。以温育开始为零时,每隔一定时间取样固定做电镜观察,共取到温育4小时。取出的样品用戊二醛、锇酸双固定,Epon812包埋后做超薄切片,经醋酸双氧铀——柠檬酸铅染色,在JEM-100CX透射电镜下观察。同时按常规方法做冰冻蚀刻观察。     

急性砷中毒大鼠心肌的电镜细胞化学观察

本实验是把显示葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的电镜细胞化学技术应用于研究急性砷中毒大鼠心肌G-6-Pase活性的变化,目的在于从亚显微水平上进一步探讨砷对心肌结构和功能的影响。选用健康wistar大鼠20只,随机分成实验组和对照组,每组10只。实验组大鼠每天自由饮用含As_2O_350PPm的蒸馏水,对照组饮用蒸馏水。35天后急性处死取其心尖部组织,置于4％多聚甲醛+1％戊二醛内前固定,入孵育液,37℃下孵育60min,1％锇酸后固定,常规脱水包埋,超薄切片,不经电子染色进行电镜观察。     

兔病毒性出血症病毒血凝作用的扫描电镜观察

兔病毒性出血症病毒对人的A、O、B、AB型红细胞有明显的凝集作用,并可被相应的兔免疫血清所抑制[1]。本文应用扫描电镜技术对兔病毒性出血症病毒的血凝过程进行了较系统的观察。材料与方法:取0.1毫升病毒材料(病兔肝脏经研磨、冻融离心后的上清液)与等量的1％的人O型红细胞悬液混匀后,分别在4℃,室温(20℃)、37℃条件下,反应1秒、30秒、1分、10分、30分等不同时间。之后,加入2.5％戊二醛2毫升固定3小时。固定好的样品经乙醇逐级脱水后滴加到盖玻片上,进行离子溅射,扫描电镜观察。     

睡莲(Nymphaea tetragona)叶部厚壁细胞内钙的定位

睡莲(Nymphaea tetragona)叶部厚壁细胞(1),将透过细胞化学法加以钙定位的研究,应用锇酸/焦锑酸钾(osmium tetroxide—potassium pyroantimonate,OTPA)与钙作用产生沉淀,再介著电子显微镜之观察,可成功地对于植物细胞内之钙加以定位(2)。不同发育时期之叶片切成小片之后,经过2.5％戊二醛/2％焦锑酸钾/0.1％单宁酸/0.1M磷酸缓冲液加以2小时的前固定后,再经1％锇酸/2％焦锑酸钾/0.1M磷酸缓行冲液的后固定,经过丙酮系列脱水后再包埋于Spurr胶中,超薄切片将直接观察,或经漂浮处理于50mM EGTA(pH7.9)或蒸馏水(pH 7.9),60℃,1 hr后再加以观察,部分切片则经由醋酸铀及柠檬酸铅双重染色,超薄切片以日立 TEM,H—600,75KV观察。