Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清制备抗氧化活性肽

研究Alcalase碱性蛋白酶酶解鸡蛋蛋清制备小分子活性肽.确定酶解的最佳工艺是:酶解pH值为9.0,酶解温度为70℃,底物浓度[S]为4.5%,酶加入量[E]/[S]为6%.水解时间4 h,水解度达到33%.采用化学发光法研究蛋清肽混合物的抗氧化性,结果表明,不同浓度和水解度的蛋清肽混合物均具有清除活性氧和抗脂质氧化的能力.随着蛋清肽混合物浓度增大,清除能力增大,抗氧化性增大.不同水解度的蛋清肽混合物,其清除活性氧和抗脂质氧化能力稍有不同,但区别不大.用葡聚糖凝胶SephadexG-15测定水解物分子量分布,结果表明水解产物中的主要成分是分子量集中在1300u的寡肽.     

酶解刺参内脏蛋白制备抗氧化肽的研究

对刺参内脏所含的内源蛋白酶的性质进行了初步研究,在此基础上分析和比较了利用内源蛋白酶和外源蛋白酶酶解内脏蛋白制备抗氧化肽的工艺。刺参内脏主要含有四种内源蛋白酶,最适pH分别为2.0、5.0、8.0和12.0。以羟自由基和超氧阴离子自由基清除率为指标,比较了内源蛋白酶和八种外源蛋白酶酶解内脏蛋白制备抗氧化肽的效果,结果表明菠萝蛋白酶为最佳用酶;用正交实验L9(34)对其水解条件进行优化,确定最佳酶解条件为:pH7.8、温度35℃、加酶量5.0g/100g、酶解时间1h,在此条件下所得酶解液对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为79.15%和28.57%。      

碱性蛋白酶Alcalase酶解大米蛋白制备小分子肽的动力学研究

以大米蛋白为原料,用碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解大米蛋白制备小分子多肽。采用单因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中pH、加酶量、底物浓度和温度酶解初速度的影响,并建立了酶解动力学方程。研究了最优酶解条件下酶解过程中酶解产物的分子量分布状态。结果表明,Alcalase2.4 L酶解大米蛋白的最优pH 8.5、温度65℃、酶底比0.096 AU/g(底物),在酶解过程中存在产物抑制,在研究的底物浓度范围内(90 g/kg)不存在底物抑制。主要动力学参数为:Km为5.76(g·min)/mmol,Vmax为0.67mmol/(kg·min),k2为0.28 mmol/(AU·min)。酶解动力学方程为:1/V0=56.29/[S0][E0]+1/0.28[E0]。酶解至3 h时水解度达到16%,酶解产物的分子量在264~584 u之间的组分达到94%,酶解3 h后酶解产物的分子量分布基本保持不变。本研究结果为制备大米蛋白小分子活性肽奠定基础。     

Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子肽的工艺研究

以绿豆为原料,用Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子多肽.采用单因素及多因素试验方法优化酶解条件.考察酶解过程中绿豆分离蛋白预处理、料液比、酶解温度、加酶量、酶解时间等对小肽得率的影响.测定水解产物的功能特性,并用液质联用技术(LC-MS)考察酶解得到的小肽的分子量分布范围.结果表明:绿豆分离蛋白预处理条件为95℃处理20 min.酶解最佳条件为:65℃、pH8.5、底物浓度9%、加酶量6 000 U/g、酶解240 min,水解度可达35.86%.经液质联用(HPLC-MS)分析证明水解产物的分子量集中在1 000 u以下.绿豆分离蛋白各功能特性得到很好地改善,表明该酶对绿豆分离蛋白水解效果良好,完全能达到制备多肽的水解度要求.     

Alcalase蛋白酶酶解高温豆粕制备水溶性大豆多肽

以氮溶指数为指标,应用Alcalase蛋白酶酶促降解高温豆粕,以获得高得率的水溶性大豆肽。酶促降解的优化实验结果表明:在加酶量1750U/g、底物浓度4%（w/w）、温度60℃、pH9.0的条件下酶促降解3h所得到的水解产物其氮溶指数达到了62.97%,比水解前提高了47.87%;酶解前后大豆蛋白的SDS-PAGE图谱表明:Alcalase蛋白酶可以催化大豆蛋白迅速地降解,水解1h后,7S蛋白的α-亚基,α’-亚基,β-亚基以及11S的酸性亚基已经完全消失,水解3h后,11S的碱性亚基也基本消失,且大多数的肽类分子量在20ku以下;与以大豆分离蛋白为原料制备的多肽相比,以高温豆粕为原料制备的多肽苦味值较低。      

大黄鱼内脏抗氧化肽的稳定性研究

本文旨在研究大黄鱼抗氧化肽在不同条件下的抗氧化稳定性。通过凝胶排阻色谱选择抗氧化活性较强的组分,并采用DPPH自由基清除率以及Fe2+螯合力来评价大黄鱼抗氧化肽的抗氧化活性。在中性p H、常温、低浓度Na Cl以及适量K+,Ca2+,Al3+条件下,大黄鱼抗氧化肽抗氧化活性基本保持稳定,DPPH自由基清除率和Fe2+螯合力分别维持在88.5%和66.7%左右。在高浓度盐、高温、Fe2+,Fe3+,Cu2+等离子的引入和长时间紫外辐照下,大黄鱼抗氧化肽抗氧化活性下降超过30%。另外,酸性p H、70℃下加入葡萄糖、果糖、乳糖分别将大黄鱼抗氧化肽DPPH·的清除活性提高至90%左右,相反,碱性条件有利于大黄鱼抗氧化肽螯合Fe2+活性,说明处理过程对不同抗氧化指标的影响有所差异。此外,胃蛋白酶消化处理对大黄鱼抗氧化肽抗氧化活性影响不显著,而进一步的糜蛋白酶消化却显著降低了多肽的抗氧化稳定性。因此,合理的加工、贮藏工艺有利于维持大黄鱼抗氧化肽的稳定性。     

风味蛋白酶酶解桑葚制备抗氧化肽的工艺研究

利用风味蛋白酶酶解桑葚粉制备抗氧化肽。以多肽得率和DPPH·清除率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化酶解工艺。结果表明：最佳酶解条件为酶解温度54℃、pH 6.95、酶解时间4.25 h、酶添加量8%(以桑葚蛋白质量计)、料液比30∶1(g/L),在此条件下桑葚多肽得率为16.76%±0.58%、DPPH·清除率为62.45%±0.93%,制得的桑葚抗氧化肽具有较好的抗氧化活性。     

Alcalase酶解制备大豆肽工艺条件的优化

以大豆分离蛋白为原料,研究了用Alcalase碱性蛋白酶水解制备大豆肽。以蛋白水解度和蛋白水解液等电点溶解度为指标,通过单因素试验及正交试验得出最佳水解条件为：料液比1：20,酶解pH8．5,酶解温度60℃,加酶量5400U／g蛋白。此条件下,蛋白水解度为18．79％,等电点溶解度是86．32％。     

碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解小麦麸皮蛋白制备小分子肽动力学研究

采用单因素实验分析法对碱性蛋白酶Alcalase2.4 L酶解小麦麸皮蛋白制备小分子肽的酶解条件进行了优化,并建立了酶解动力学模型。结果表明,Alcalase2.4 L酶解小麦麸皮蛋白最优条件为:酶底比6%,pH9.0,温度50℃。酶解过程中存在明显底物抑制和产物抑制作用,主要动力学参数为:Km=43.39 g/kg,Vmax=1.12 mmol/kg·min,Ks=58.82 g/kg,k2=3.73 mmol/min·g。     

酶解玉米蛋白粉制备抗氧化肽

以玉米蛋白粉为原料,2709碱性蛋白酶为水解酶,采用正交实验设计优化水解条件,用NBT法和D2-脱氧核糖法测定水解所得玉米肽的抗氧化活性。结果表明,制备玉米抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH9.5,E/S=10%,时间4h,温度55℃,该条件下制备的玉米抗氧化肽对O2-·和·OH有很强的清除作用,清除率分别为54.42%和82.31%。     

Alcalase蛋白酶水解花椒籽蛋白制备抗氧化肽的条件优化

本研究以花椒籽蛋白质抗氧化肽水解度(DH)和DPPH自由基清除率为指标,对酶解花椒籽蛋白制备抗氧化肽的水解用酶及其酶用量、底物浓度、酶解温度、时间等酶解条件进行研究,以期优化得到酶解法制备花椒籽抗氧化肽的最优条件。结果表明Alcalase蛋白酶水解花椒籽蛋白制备抗氧化肽效果最好,通过响应面分析法优化出该酶最佳酶解花椒籽制备抗氧化肽的条件为:底物浓度5%,温度55℃,pH 8.5,加酶量4%;该方法可用于花椒籽蛋白制备抗氧化肽,在此条件下花椒籽水解液DPPH自由基清除率可达到61.00%,水解度为12.00%。     

酶解玉米蛋白粉制备抗氧化肽

以玉米蛋白粉为原料,2709碱性蛋白酶为水解酶,采用正交实验设计优化水解条件,用NBT法和D2-脱氧核糖法测定水解所得玉米肽的抗氧化活性。结果表明,制备玉米抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH9.5,E/S=10%,时间4h,温度55℃,该条件下制备的玉米抗氧化肽对O2-·和·OH有很强的清除作用,清除率分别为54.42%和82.31%。      

酶解蛋白制备抗氧化肽研究进展

从蛋白质酶解产物中制备抗氧化活性肽研究受到高度重视,对蛋白质资源开发利用具有重要意义。该文介绍近年来这一领域研究进展。     

酶解大黄鱼制备咸味增强肽的研究

本文采用木瓜蛋白酶、胰酶对大黄鱼蛋白进行酶解,对酶解产物进行感官咸味评分,并结合味觉传感系统-电子舌进行味觉数值化分析。通过蛋白回收率、水解度以及肽氮回收率研究蛋白酶解过程中氮存在形式的变化规律,结果表明,酶解大黄鱼制备咸味增强肽的最优条件为采用胰酶酶解大黄鱼3 h,此时加酶量为蛋白含量5‰,酶解温度55℃,肉水比1:1,在控制蛋白含量和钠离子含量一致的情况下,感官咸味值和电子舌咸味电信号值均达到最大,具有较好咸味增强作用。抗氧化实验结果表明,3 h时胰酶酶解咸味增强肽还原力可达0.149 mmol TE/mmol,DPPH自由基清除活性可达0.057 mmol TE/mmol。咸味增强肽作为一种生物活性肽,具有重要的营养价值和生物活性,可用于开发高档调味品以及作为功能性食品配料。     

酶解王米蛋白粉制备抗氧化肽

以玉米蛋白粉为原料,2709碱性蛋白酶为水解酶,采用正交实验设计优化水解条件,用NBT法和D2-脱氧核糖法测定水解所得玉米肽的抗氧化活性.结果表明,制备玉米抗氧化肽的最佳酶解条件为pH9.5,[E]/[S]=10%,时间4h,温度55℃,该条件下制备的玉米抗氧化肽对O2-·和·OH有很强的清除作用,清除率分别为54.42%和82.31%.     

Alcalase蛋白酶酶解大豆蛋白制备啤酒糖浆复配液的研究

采用Alcalase蛋白酶酶解大豆蛋白,通过测定酶解产物的蛋白质回收率、水解度、隆丁(Lundin)区分以及SDS-PAGE电泳图谱分析,确定在酶解条件为酶解温度55℃、底物质量分数5%、酶量750 U/g、pH 8.0、反应时间0.5～1.0 h时所得的酶解液为浅棕色,其Lundin分布较为接近麦汁Lundin区分分布的要求,蛋白质回收率约65%,可与啤酒糖浆复配作为啤酒发酵的氮源。     

复合风味蛋白酶酶解麦麸蛋白制备麦麸抗氧化肽的研究

以麦麸蛋白为原料,复合风味蛋白酶为水解酶,探讨麦麸蛋白水解度(DH)与麦麸肽抗氧化能力的关系,并以超氧阴离子自由基(O2-·)清除率为指标,采用正交试验设计优化制备麦麸抗氧化肽的工艺条件.试验结果表明,制备麦麸抗氧化肽的最佳酶解条件为pH 5.0,加酶量为6000U/g麦麸蛋白,底物浓度5%,温度55℃,酶解7.5h,在该条件下制得的麦麸抗氧化肽清除超氧阴离子自由基的清除率可达53.70%.     

碱性蛋白酶酶解红花籽蛋白制备抗氧化肽工艺的研究

以红花籽蛋白为原料,2709碱性蛋白酶为实验用酶,红花籽抗氧化肽液吸光度为指标,研究酶解温度、酶解时间、酶添加量、酶解pH、底物质量分数对红花籽抗氧化肽还原能力的影响,并通过响应面分析对酶解工艺条件进行了优化。得到红花籽蛋白酶解的最佳工艺条件为:酶解pH 8.6,酶解温度49℃,酶添加量7 700 U/g(以底物质量计),底物质量分数5.0%,酶解时间2 h。在最佳条件下,红花籽蛋白水解度为6.389%,红花籽抗氧化肽液吸光度为1.017,还原能力较强。     

猪骨抗氧化肽的酶解制备研究

本文以水解度和自由基清除率为双指标,较深入地研究了两种蛋白酶在生产猪骨抗氧化肽中的应用特性,结果表明中性蛋白酶比木瓜蛋白酶适合水解猪骨明胶制备抗氧化肽,其最佳酶解工艺参数为:pH7,温度40℃,[E]/[S]=10%,[S]=2%,水解时间4h,该条件下制备的抗氧化肽对O2-·有很强的清除作用,清除率达到83.22%.     

Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白的研究

蚕豆经去皮、粉碎、除淀粉后,得到蚕豆粗蛋白.采用Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白制备蚕豆蛋白水解物.通过单因素试验,调查了pH、底物质量分数、酶用量(E∶S)和酶解温度等因素对Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白效果的影响.通过正交试验设计,确定Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白适宜的工艺参数:酶解温度60℃,底物质量分数3％,酶用量(E∶nS)8％,pH 9.0,此条件下,蚕豆蛋白水解度(DH)达最大,为21.67％.该结果与Alcalase碱性蛋白酶水解大豆蛋白、绿豆蛋白和小麦蛋白等适宜条件参数接近.