雉鸡乳酸菌DCe13的分离及降胆固醇特性的研究

从雉鸡肠道分离得到1株生长良好的乳酸菌DCe13,菌株革兰氏阳性、接触酶阴性。经系统发育和rec A基因特定片段分析,结合菌落形态、细胞形态、生化反应试验,确定菌株DCe13为植物乳杆菌。菌株DCe13培养36 h,乳酸含量9.08μg/m L,而p H值下降为4.7。菌株具有酸耐受性、胆盐耐受性和一定的胆固醇清除能力。菌株在p H 2.0培养2 h后仍能达到7.9×104CFU/m L;5 h内,加胆盐(0.3%~0.4%)对菌株生长量(OD值)没有影响。胆固醇去除量与菌体的生长呈正相关,培养48 h,单位细胞干重能清除最大的胆固醇量为22.71μg/mg。另外,对比试验中生长细胞单位干重去除的胆固醇量达到10.50μg/mg,但热杀死和休眠细胞能去除很少的胆固醇,分别是3.59μg/mg和8.26μg/mg。菌株DCe13去除胆固醇可能的机理是菌体对胆固醇的吸附及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用。研究表明该菌株具有添加到食品中降低血液胆固醇的潜能。     

蒙氏肠球菌Sna的抗氧化及降胆固醇特性

目的从雉鸡嗉囊分离得到一株生长良好的乳酸菌Sna,测试其抗氧化活性和降胆固醇的能力和模式。方法菌株鉴定通过菌落、菌体形态、生化试验和16S rRNA序列分析。抗氧化和降胆固醇作用通过体外实验完成。结果乳酸菌Sna确认为蒙氏肠球菌。当菌体浓度为10~9 CFU/mL时,菌株Sna对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为78.8%、34.9%和43.3%。单位细胞干重去除胆固醇量与菌体生长有一定的相关性,在培养36 h单位细胞干重能清除最大的胆固醇量5.14μg/mg。对比试验显示生长的细胞单位干重去除的胆固醇量达到4.96μg/mg,但热杀死的和休眠的细胞去除胆固醇量分别为4.39μg/mg和4.23μg/mg。结论菌株Sna具有抗氧化作用和胆固醇的清除能力;菌株Sna去除胆固醇可能的机制是菌体对胆固醇的吸附及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用。该菌株具有添加到食品中来抵抗氧化作用和降低血液胆固醇的潜能。     

具有胆固醇去除能力和胆盐水解酶活性的乳酸菌的体外筛选

对分离自内蒙古传统稀奶油或酸化稀奶油中的10株乳酸菌进行了胆固醇去除能力和胆盐水解酶活性的研究(定性和定量),筛选出了3株具有较高胆固醇去除能力和胆盐水解酶活力的乳酸菌菌株,分别为KLDS6.0330、KLDS6.0333和KLDS6.0335,并对它们进行16SrDNA分子生物学鉴定、酸耐受性和胆盐耐受性的测定。结果表明:这3株菌均为植物乳杆菌(L.Plantarum),并且表现出了较好的酸耐受性和胆盐耐受性。     

芒果源高降胆固醇乳酸菌的特性及其作用机制

目的:明确芒果源高降胆固醇乳酸菌去除胆固醇的机制,为以后应用于果汁发酵生产具有降胆固醇作用的果汁饮品提供优良的菌种。方法:对降胆固醇能力强的15个菌株进行体外耐受性及其降胆固醇吸附作用的研究,采用气-质联用色谱对体外耐受性好,降胆固醇能力高的菌株MPL1进行细胞脂肪酸组成研究。结果:12个菌株可耐受p H 1.0的极酸性环境,15个菌株在质量浓度0.3 g/100 m L的各种胆盐介质中生长良好;7个菌株在人工肠液中培养4 h后,存活率均在97%以上。菌株MPL1、MPL2、MPL5、MPL8和MPL16的生长菌体对胆固醇的去除量比休眠菌体和热灭活菌体多。菌株MPL1在胆固醇存在或没有胆固醇的培养基中生长,其细胞脂肪酸组成含量发生了变化,说明培养基中的胆固醇被菌株同化到细胞膜中。结论:15个高胆固醇降解乳酸菌中,有7个菌株可以体外高度耐酸、耐胆盐,能顺利通过胃部进入肠道环境并在肠道里良好生长。菌株MPL1通过同化和吸附胆固醇来去除胆固醇。     

11株乳酸杆菌胆汁耐受性、耐酸性及降胆固醇能力研究

对11株乳酸杆菌的胆汁耐受性、耐酸性及降胆固醇能力进行了研究,探究了乳酸杆菌菌株去除胆固醇的机制。结果表明,所有乳酸杆菌菌株可在12.03～32.25μg/mL的水平上同化胆固醇,其胆固醇去除能力与培养物的生长有关。热灭、休眠细胞清除的胆固醇干重为0.79～3.82mg/g;生长细胞清除的胆固醇干重为4.53～16.03mg/g,干酪乳杆菌L.casei ASCC 292和嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus 4962菌株表现出良好的耐酸性和耐胆汁性,说明乳酸杆菌菌株可以通过多种机制去除胆固醇,可作为降低血清胆固醇的膳食添加剂。     

乳酸菌的抗氧化活性和耐酸耐胆盐性能的研究

以清除DPPH自由基和还原能力为指标,对实验室保藏的25株乳酸菌的菌体和无细胞提取物进行体外抗氧化性研究;将抗氧化性强的10株乳酸菌,进行对模拟胃液酸度和肠道胆盐的耐受性研究,比较不同乳酸菌株的抗氧化和耐酸耐胆盐能力,为开发功能性乳酸菌食品提供理论依据。研究表明:不同属和同属的不同菌株的乳酸菌抗氧化能力和耐酸耐胆盐存在差异,且其抗氧化活性物质存在部位不同。比较发现干酪乳杆菌GL-2抗氧化性高且耐酸耐胆盐。干酪乳杆菌GL-2菌体浓度为109cfu/mL时,菌体和无细胞提取物DPPH自由基清除率分别为37.22%、42.78%,还原活性分别相当于104.84、107.10μmol/L L-半胱氨酸;pH=3.0的酸性缓冲溶液处理2h后存活率均达100%,在改良MRS培养基(胆盐为0.5%(W/V))处理4h存活率为0.35%。     

植物乳杆菌ST-Ⅲ菌株降胆固醇影响因素的研究

研究发现植物乳杆菌ST-Ⅲ菌株降低胆固醇作用受胆盐和胆固醇影响.在培养基中添加不同的胆盐,能增加ST-Ⅲ菌株降胆固醇能力,依次为牛磺胆酸钠>牛胆盐>胆酸,当牛胆盐的添加浓度为3.0g/L时,降胆固醇率达到最高值38.57%;在培养基中添加不同来源和不同浓度的胆固醇,ST-Ⅲ菌株均具有降低作用,但降低能力有差异,依次为羊血清>鸡蛋黄>卵磷脂-胆固醇胶束溶液,且降低能力受胆固醇的浓度影响较大,当浓度低于0.5mg/mL时,降胆固醇率可维持在40%左右,高于0.5mg/mL时,降胆固醇效果则显著降低;降胆固醇量在胆固醇浓度为1.0mg/mL时达到最高值307μg/mL,这可能是高浓度胆固醇抑制ST-Ⅲ菌株的生长所致.     

自然发酵肉制品中乳酸菌的体外降胆固醇特性

为筛选出具有高效降胆固醇作用的乳酸菌,以自然发酵肉制品中分离出的13株乳酸菌为实验对象,采用邻苯二甲醛法对其体外降胆固醇能力进行测定,并对其中2株菌（M12、M23）的作用机理进行初步探讨。结果表明,2株菌均通过同化吸收和共沉淀作用协同降低培养基中的胆固醇;添加0.3 g/100 mL胆盐可极显著增加菌体对胆固醇的去除作用（P＜0.01）,去除率分别为56.05%和58.49%;添加胆固醇和胆盐均可显著提高菌株经超声波处理后的存活率（P＜0.05）,存活率分别为32.09%和37.93%;2株菌的热灭活菌体和休眠菌体也具有一定的胆固醇去除能力,且休眠菌体的去除率高于热灭活菌体。经16S rRNA序列分析,菌株M12为弯曲乳杆菌（Lactobacillus curvatus）,菌株M23为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）。     

来宾酒糟酸菜中降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及发酵工艺研究

该研究采用钙溶圈法及MRS-胆固醇培养基从来宾酒糟酸菜汁中分离筛选具有降胆固醇能力的乳酸菌,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,同时对其耐酸性、耐胆盐性能进行研究,并以胆固醇去除率为考察指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选得1株具有去除胆固醇能力的乳酸菌,编号为XL-02,经鉴定,菌株XL-02为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,其具有较好的耐酸能力和胆盐耐受性。在pH2.0的酸性环境下培养24 h,菌株存活率为3.14%;在胆盐含量为0.3%条件下培养24 h,菌株存活率为12.17%。菌株XL-02去除胆固醇的最优发酵条件为以MRS液体培养基为发酵培养基,初始pH值6.0,接种量4%,发酵温度39 ℃,发酵时间72 h。在此优化条件下,胆固醇去除率为（61.56±0.08）%。     

分离自传统自然发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选与评价

为了筛选优良的降胆固醇乳酸菌,本分析了从传统自然发酵食品中分离的30株乳酸菌,从中筛选出WS1、LP2、LP3、LP4、LP5和LP6 6株具有较强降胆固醇能力的乳酸菌,并通过对其胆盐耐受性及在含胆盐MRS培养基中的降胆固醇效率的分析,复筛出其中的WS1、LP2、LP3和LP6 4株乳酸菌。对4株乳酸菌的生长特征、产酸特征、不同生长阶段的种子液对胆固醇的降低效率的影响、耐酸特征及人工胃酸的耐受性进行分析和评价。结果显示,4株优选的乳酸菌降胆固醇能力较好,在胆盐中具有一定的存活力。胆盐的存在对降胆固醇能力具有一定的促进作用,4株菌在常规MRS培养基中生长和产酸特征稳定。不同生长时期的种子液对乳酸菌的降胆固醇能力有一定影响,对数期优于稳定期。耐酸性分析表明, pH越高,乳酸菌耐受性越好。pH 2.5,处理2h,乳酸菌依然具有一定的存活力;pH 3.5,乳酸菌存活力和存活时间都有所提高,pH 4.5时的存活力基本和自然pH的保持一致。在人工胃酸条件下,4株复筛乳酸菌在pH 2的条件下,存活时间超过4 h,随着pH的升高,存活率和存活时间都有所提高。本试验结果表明,4株乳酸菌均具有降胆固醇的特征,为后续优良菌株的降胆固醇机理研究打下了基础。     

Leuconostoc fallax,an acid and ethanol tolerant lactic acid bacterium

Leuconostoc fallax, known to be present in sauerkraut, was reisolated from exudates of Gerbera jamesonii. The identity of the isolates with L fallax was demonstrated by sequence analysis of the first 600 bases of the 16S rRNA. L fallax utilised a small number of sugars and showed a remarkable resistance to lactic acid. The final pH in glucose broth was 3·9. Moreover it was able to grow in the presence of ethanol (9·0% v/v) and salt (5·5%), but it was unable to carry out a malo-lactic fermentation.     

Acid, bile, and heat tolerance of free and microencapsulated probiotic bacteria

ABSTRACT:  Eight strains of probiotic bacteria, including Lactobacillus rhamnosus , Bifidobacterium longum, L. salivarius, L. plantarum , L. acidophilus , L. paracasei , B. lactis type Bl-O4, and B. lactis type Bi-07, were studied for their acid, bile, and heat tolerance. Microencapsulation in alginate matrix was used to enhance survival of the bacteria in acid and bile as well as a brief exposure to heat. Free probiotic organisms were used as a control. The acid tolerance of probiotic organisms was tested using HCl in MRS broth over a 2-h incubation period. Bile tolerance was tested using 2 types of bile salts, oxgall and taurocholic acid, over an 8-h incubation period. Heat tolerance was tested by exposing the probiotic organisms to 65 °C for up to 1 h. Results indicated microencapsulated probiotic bacteria survived better ( P < 0.05) than free probiotic bacteria in MRS containing HCl. When free probiotic bacteria were exposed to oxgall, viability was reduced by 6.51-log CFU/mL, whereas only 3.36-log CFU/mL was lost in microencapsulated strains. At 30 min of heat treatment, microencapsulated probiotic bacteria survived with an average loss of only 4.17-log CFU/mL, compared to 6.74-log CFU/mL loss with free probiotic bacteria. However, after 1 h of heating both free and microencapsulated probiotic strains showed similar losses in viability. Overall microencapsulation improved the survival of probiotic bacteria when exposed to acidic conditions, bile salts, and mild heat treatment.     

鼠李糖乳杆菌耐酸及胆盐能力研究

本实验对来源于婴儿粪便鼠李糖乳杆菌进行耐酸、耐胆盐能力表征及模拟胃液和模拟肠液实验。结果获得鼠李糖乳杆菌菌株B在pH1.8条件下,维持2h,活菌数达到107CFU/ml以上;在pH值为2.2以上的培养基中生长良好,而且随着时间的延长菌株的数量增加。在胆盐浓度在0.5%以下的MRS-broth培养基中鼠李糖乳杆菌B菌株维持4h,活菌数均达到108CFU/ml以上,而且随着时间的延长活菌数均有所增加。模拟胃液和模拟肠液实验结果表明该菌株能够有效通过胃环境,并能在肠道中繁殖。结果可见,鼠李糖乳杆菌B具有较强的酸的胆盐的耐受能力,符合微生态制剂和乳酸菌发酵功能食品菌种的要求。     

生物胺降解乳酸菌的筛选与特性研究

为筛选出高效降解生物胺的优良乳酸菌,该研究以实验室前期筛选的41株乳酸菌作为研究对象,运用显色培养、高效液相色谱（HPLC）法对菌株生物胺产生和降解能力进行筛选,并对筛选出的菌株进行耐盐及耐酸实验。结果表明,筛选得到5株高效降解生物胺菌株,其中以植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）30的生物胺降解能力最好,其对尸胺、组胺、酪胺的降解率分别为62.42%、74.32%、89.97%。植物乳杆菌30能在含盐量0～9%和pH为4.5～8.5环境中较好的生长繁殖,该菌株无生物胺生成活性,并同时具备生物胺降解能力和耐盐耐酸能力,可作为蛋白质类发酵食品的发酵剂运用于食品中降低生物胺毒性。     

Acid and bile tolerance and cholesterol removal ability of lactobacilli strains

Eleven strains of lactobacilli were studied for their acid and bile tolerance. Possible mechanisms of cholesterol removal by strains of lactobacilli were examined. Cholesterol assimilation as determined by the difference in cholesterol content in the medium before and after the incubation period showed that all lactobacilli strains were able to assimilate cholesterol at varying levels ranging from 12.03 to 32.25 microg/mL. Cholesterol removal was associated with growth of cultures. Binding of cholesterol to lactobacilli cells was determined using growing, heat-killed, and resting cells in phosphate buffer. Cholesterol removed by dead and resting cells ranged from 0.79 to 3.82 mg/g of dry weight compared with growing cells, which ranged from 4.53 to 16.03 mg/g of dry weight. Fatty acid methyl esters, as quantified using gas chromatography, showed changes in lipid profiles in cells grown in the presence of cholesterol compared with those grown without cholesterol. Fatty acid profiles, especially of hexadecanoic, octadecanoic, total saturated, and unsaturated acids suggested that cholesterol from the medium was incorporated into the cellular membrane. These findings suggest that strains of lactobacilli could remove cholesterol via various mechanisms and may be promising candidates for use as a dietary adjunct to lower serum cholesterol in vivo.     

外源添加亮氨酸提高乳酸乳球菌酸胁迫抗性

在乳酸乳球菌生长过程中外源添加浓度为10mmol/L的亮氨酸,可有效提高乳酸乳球菌在酸胁迫环境下的酸耐受性。在酸性环境中(pH5.0),添加亮氨酸的菌株的生物量为对照菌株的1.24倍;经过酸胁迫(pH4.0)5h后,添加亮氨酸菌株的存活率是对照菌株的28.5倍。进一步的研究表明,亮氨酸的添加可提高胞内NH4+浓度,有效的维持酸胁迫环境下胞内pH(pHin)的稳定,并有效维持乳酸脱氢酶(LDH)的活性,从而有效提高了乳酸乳球菌对酸胁迫的抵御能力。     

多耐性酒精酵母菌的选育及特性研究

以酿酒酵母spc1,Y14,S16为出发菌株,经紫外线诱变和筛选,获得了3株对温度、乙醇浓度、pH耐性有所提高的正向突变株UVs,UV14,UV16;以这些菌株为出发菌株,进行三轮原生质体融合,最终获得了能耐受48℃,19%vol乙醇浓度和耐酸(pH 2.6)的酵母菌TY33.该突变株对温度和耐酒精能力分别提高了17.1%和58.3%.该菌株在35℃下发酵72h酒精产量为101.58g/L,比出发菌株spc1在35℃发酵液中最高乙醇浓度83.82g/L提高了21.1%.     

雉鸡益生菌MCm2的分离及鉴定

目的从野雉鸡肠道得到的菌株MCm2并测试其益生活性。方法通过形态、生理生化和16S rDNA序列分析鉴定菌株,通过体外试验测试其益生性。结果菌株在pH 2.0培养2 h后仍能达到2.6×104CFU/mL;6h内,加胆盐(0.3%～0.4%)对菌株生长量影响很小。经16SrDNA系统发育和recA基因特定片段分析,菌株MCm2为植物乳杆菌。菌株MCm2培养36 h后,乳酸含量为24.7μg/mL,而pH值下降至3.7。结论植物乳杆菌MCm2具有益生作用添加到食品中的潜能。     

贵州泡菜中润肠通便功能乳酸菌的筛选及其特性研究

该研究从贵州泡菜中分离鉴定乳酸菌,并筛选具有润肠通便功能的乳酸菌,对其耐受性和黏附性进行评价。美国癌症研究所（ICR）小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药物对照组（麻仁丸）、乳酸菌组,使用复方地芬诺酯建立小鼠便秘模型。结果显示,从贵州泡菜中分离鉴定出1株产酸能力强的乳酸菌GZ15,被鉴定为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）。通过润肠通便功能动物筛选试验,发现菌株GZ15给药7 d后,便秘小鼠首次排便时间最短,6 h排便粒数、质量和小肠墨汁推进率最高,具有良好的润肠通便功能。菌株GZ15具有良好的酸、胆盐耐受性,且平均每个细胞可以黏附（4.68±0.59）个肠道上皮细胞。结果表明,干酪乳杆菌GZ15具有良好的润肠通便功能,且菌株特性优良,能顺利到达肠道,并黏附于肠道上皮细胞,发挥益生功效。     

4株乳酸菌对模拟胃肠环境的耐受性及生长特性研究

对4株来源于自然发酵肉制品中的乳酸菌进行耐酸耐胆盐性能的测定,选取在pH3.0和含0.3 g/100 mL胆盐的MRS培养基中存活率均超过50%的2株菌（M12、M23）,进一步研究其在模拟胃肠液中的耐受性及MRS培养基中的生长特性。结果表明,这2株乳酸菌对人工模拟胃肠道环境有较好的耐受性,经过人工模拟胃液处理2 h后,存活率均＞50%,经人工模拟肠液处理10 h后仍可存活;这2株菌具有较强的增殖及产酸能力,24 h内均已进入稳定生长期,随着菌体数目的增加,培养基pH值快速降低,在肉制品的发酵温度范围内均能较好地生长。因此,这2株菌可作为潜在的益生菌菌株应用于肉制品的发酵。