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在国标GBT23527-2009福林酚试剂法测蛋白酶活力的基础上,以自产白曲为材料,研究底物浓度,反应时间,酶液浸取时间以及三氯乙酸沉淀时间对酶活测定结果的影响,并对方法进行部分改进。实验结果显示:国标法测白曲酸性蛋白酶活力时,存在底物不足的问题,利用Hanes作图法求得该酶米氏常数Km约为2.67g/L,确定底物酪蛋白浓度为30g/L;由反应进程曲线得到,反应时间5min更适合酶活测定;酶液浸取时间长会增加比色测定时背景值的干扰,在不影响测定结果的情况下,缩短了酶液的浸取时间;充分摇匀的前提下,三氯乙酸沉淀时间对测定结果无显著影响。 相似文献
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结合生产实际对影响河内白曲酸性蛋白酶活力的因素进行分析和工艺改进。结果表明,以麸皮为主要原料,加入5%的豆粕,入房水分为52%~56%,培养温度32℃~37℃,控制好起温并及时排潮,可明显提高白曲的酸性蛋白酶活力。 相似文献
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酸性蛋白酶对淀粉酶的影响试验 总被引:3,自引:1,他引:2
酒曲是多种酶的混合体,各种酶在酿酒时起到相互激活或抑制作用。酿酒原料中的淀粉,对液化型淀粉酶有吸附作用。被淀粉吸附的液化型淀粉酶活性,则被削弱或失去应有的液化作用。这对酿酒的出酒率上极为不利。但曲中的酸性蛋白酶,可使被淀粉吸附的液化型淀粉酶,从淀粉上... 相似文献
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河内白曲霉是酿酒行业中常见的一株优良糖化菌种,现用于做麸曲优质酒工艺的糖化剂较多,为进一步解剖河内白曲霉菌各酶活性对酿酒的作用而做本试验,其结果报告如下。 (1)菌种来源:本单位提供。 (2)测定方法:见《酿酒》杂志1991年第5期“白酒大曲的测定”。 (3)试验条件。一河内白曲霉与其它霉菌酶活性比较为了进一步了解河内白曲霉特性及其与其它酿酒用菌的地位,遂进行了与其它酿酒常用菌的酶活性对比试验,测定结果如表1。 相似文献
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酱油酿造中添加酸性蛋白酶生产性试验 总被引:3,自引:3,他引:0
酱油酿造中添加酸性蛋白酶生产性试验于丽萍王金英何家芬(黑龙江省科学院应用微生物研究所哈尔滨150010)我国酱油生产普遍采用低盐固态发酵法工艺,由于整个生产过程偏长,工艺繁多,技术条件复杂,许多工厂因种种原因造成原料的全氮利用率、氨基酸生成率和酱油的... 相似文献
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白曲霉酸性蛋白酶在白酒酿造发酵过程中具有溶解发酵原料的颗粒,促进微生物繁殖,分解蛋白质生成香味物质,降解酵母菌体蛋白等多种功能,可以提高白酒风味,因此被广泛应用于白酒生产中。本研究利用经基因工程改造的低内源蛋白背景的黑曲霉宿主SH-2,表达白曲霉酸性蛋白酶基因pepB。通过PCR技术获得pepB以及表达元件糖化酶启动子PglaA、糖化酶终止子TglaA、乳清酸核苷-5-磷酸脱羧酶标记基因pyrG,在pMD18-T载体基础上,构建了pepB表达载体,通过PEG介导转化法转化无孢黑曲酶SH-2。重组菌株经发酵罐发酵240 h,发酵粗酶液酶活达9722 U/mL,是报道的白曲原始菌株酶活的8.5倍,SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为47 ku。酶学性质分析结果表明,该酸性蛋白酶最适反应温度为35℃,最适pH为4.0,Mn~(2+)、Cu~(2+)对酶活有显著地激活作用。最后,探究了在不同发酵初始pH下重组菌株酶活的变化,结果显示,在pH 4.5~6.5范围内,适当提高发酵初始pH,酸性蛋白酶酶活会提高。以上结果表明,本研究成功构建了一株能胞内高效表达白曲酸性蛋白酶的菌株。 相似文献
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在酱油制曲过程中通过单因素试验分别探讨制曲过程中预处理条件和制曲条件对蛋白酶和谷氨酰胺酶比活力的影响,通过正交试验确定制曲过程中对酶比活力影响的各因素的重要性次序和最佳工艺参数组合。影响蛋白酶比活力的重要性次序为:接种量>制曲时间>制曲温度;酶比活力最高的制曲工艺参数组合为:接种量0.8%、制曲温度32℃、制曲时间36h;影响谷氨酰胺酶比活力的重要性次序为:制曲温度>制曲时间>接种量;酶比活力最高的制曲工艺参数组合为:接种量0.5%,制曲时间60h,制曲温度28℃。 相似文献
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以提高酱油种曲孢子数和成曲酶活力为目标,在麸皮培养基的基础上,对酱油种曲培养基的外加碳源、氮源、无机盐进行优化研究。结果表明:在葡萄糖1.00%、氯化钙0.10%、硫酸锌0.05%、豆粕3.00% 的条件下孢子数可达(15.77 ± 0.49)× 109 个/g 干重,比对照组提高了84.87%。同时对优化种曲和利用该种曲制得的大曲的酶活力进行比较,表明种曲培养基的优劣对酱油发酵有重要影响,其中种曲酶活力提高25.04%,大曲酶活力提高17.40%。 相似文献
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构树叶饲喂小白鼠的亚慢性毒性试验 总被引:4,自引:0,他引:4
选取平均体重18~20 g左右,公、母各半的昆明系小白鼠64只,随机分为4组,每组16只,进行35 d的亚慢性毒性饲养试验。A组为对照组,饲喂小白鼠基础日粮。B、C、D组为试验组,分别饲喂用10%、20%、40%的构树叶粉取代等量基础日粮的试验日粮。结果表明:D组的血清尿素氮(BUN)含量和C、D组的碱性磷酸酶(ALP)活性显著高于A组(P<0.05),D组的谷丙转氨酶(ALT)极显著高于A组(P<0.01);D组组织切片可见肝、肾组织有轻度的病理变化。B、C组未见明显毒性变化。 相似文献