梭柄松苞菇多糖CVP-Ⅱ_2的理化性质及其结构研究

以梭柄松苞菇子实体为原料,采用超声辅助水提醇沉法,经脱色、脱蛋白、DEAE-52离子交换柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析分离纯化得到梭柄松苞菇多糖CVP-Ⅱ2,用高效凝胶渗透色谱(GPC)结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100的分离结果鉴定其分子量分布及纯度,利用碘-碘化钾、苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝G-250法、硫酸-咔唑法对其淀粉含量、总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量进行测定;经紫外光谱分析、红外光谱分析、GC分析其官能团特征及单糖组成。结果表明,CVP-Ⅱ2为非淀粉白色絮状均一多糖,其总糖、蛋白质含量、糖醛酸含量分别为:总糖含量为86.76%,不含蛋白质,糖醛酸含量为12.93%;其重均相对分子量Mw为11252u;红外光谱显示CVP-Ⅱ2具有多糖的特征吸收峰且为吡喃型糖环构型;单糖组成结果显示CVP-Ⅱ2含岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为:甘露糖∶岩藻糖∶葡萄糖∶半乳糖=1∶1.63∶29.36∶5.02。     

梭柄松孢菇子实体中多糖组分及体外抗氧化活性分析

采用热水浸提、85%、95%乙醇分级醇沉制备了两种梭柄松孢菇子实体多糖成分:CVP-85和CVP-95,分析了单糖组成,并测定多糖的体外抗氧化能力。结果表明:CVP-85和CVP-95的得率分别为9.57%±0.23%和5.02%±0.12%;CVP-85中的主要单糖物质为甘露糖、葡萄糖、半乳糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸;CVP-95中的单糖物质有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖醛酸。多糖提取物表现出显著的还原能力、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力、ABTS·清除能力,且在一定浓度范围内,随浓度的增加而显著增强。      

梭柄松苞菇子实体营养成分的测定与评价

以野生梭柄松苞菇子实体为原料,依据国标及常规方法对梭柄松苞菇(干制品)的粗蛋白、总糖、粗纤维、粗脂肪、水分、灰分、11种主要矿质元素及17种氨基酸等营养成分进行分析和评价。结果表明,梭柄松苞菇中粗蛋白、总糖、粗纤维、粗脂肪、灰分、水分含量分别为:17.21%、52.48%、4.57%、2.23%、7.73%、10.61%;其中Mg、Mn、Fe、Zn等矿质元素的含量分别为626.35、11.24、523.25、92.40mg/kg;其多糖经凝胶渗透色谱(GPC)检测得其多糖的峰位相对分子质量为:13590、291487、5176u;必需氨基酸占总氨基酸31.13%,氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)、必需氨基酸指数(EAAI)和营养指数(NI)分别为:6.07、6.96、56.76、9.66,鲜味氨基酸占总氨基酸的39.31%。梭柄松苞菇是一种高蛋白,低脂肪,低纤维的食用菌,其营养价值丰富,也含有多糖等药理活性成分,具有良好的经济价值和市场开发前景。      

梭柄松苞菇多糖CVP-Ⅱ2的理化性质及其结构研究

以梭柄松苞菇子实体为原料,采用超声辅助水提醇沉法,经脱色、脱蛋白、DEAE-52离子交换柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱层析分离纯化得到梭柄松苞菇多糖CVP-Ⅱ2,用高效凝胶渗透色谱（GPC）结合葡聚糖凝胶Sephadex G-100的分离结果鉴定其分子量分布及纯度,利用碘-碘化钾、苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝G-250法、硫酸-咔唑法对其淀粉含量、总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量进行测定;经紫外光谱分析、红外光谱分析、GC分析其官能团特征及单糖组成。结果表明,CVP-Ⅱ2为非淀粉白色絮状均一多糖,其总糖、蛋白质含量、糖醛酸含量分别为:总糖含量为86.76%,不含蛋白质,糖醛酸含量为12.93%;其重均相对分子量Mw为11252u;红外光谱显示CVP-Ⅱ2具有多糖的特征吸收峰且为吡喃型糖环构型;单糖组成结果显示CVP-Ⅱ2含岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其摩尔比为:甘露糖∶岩藻糖∶葡萄糖∶半乳糖=1∶1.63∶29.36∶5.02。      

双孢菇废弃菇柄多糖的超声波提取及其体外抗氧化活性

为了提高双孢菇菇柄的综合利用率,以双孢菇废弃菇柄为原料,通过单因素实验探讨了超声功率、超声提取时间、液固比、超声提取次数、醇沉体积对双孢菇菇柄多糖得率的影响,采用正交实验对其提取工艺参数进行优化,并对多糖的抗氧化活性进行研究。结果表明,在提取次数为2次、乙醇用量为4倍体积时,最佳提取工艺参数为超声功率700 W、超声提取时间50 min、液固比为20:1(mL·g^-1),此时双孢菇菇柄多糖得率可达5.35 g·100 g^-1。与抗坏血酸相比,双孢菇菇柄多糖具有较强的DPPH·清除能力,对·OH的清除能力和还原能力较弱。     

两种富硒黄牛肝菌伞多糖的制备、表征及其抗氧化活性

硒是人体必需的微量元素之一,但由于其安全域值较低,极易导致硒中毒。研究发现,硒化多糖和纳米硒有更高的安全性和生物活性,是理想的补硒制剂。本研究以黄牛肝菌伞多糖（polysaccharides from Suillellus luridus,SLPC）为原料制备硒化黄牛肝菌伞多糖（selenide polysaccharides from Suillellus luridus,Se-SLPC）和纳米硒-黄牛肝菌伞多糖（nano-selenium-polysaccharides from Suillellus luridus,SLPC-SeNPs）,比较硒化修饰前后多糖的理化性质和结构特性,观察SLPC-SeNPs的表面形貌并测定其稳定性,同时,评价两种富硒多糖的抗氧化活性。结果表明,Se-SLPC的硒含量为1.62 mg/g,是由半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成的多糖,平均分子质量8.2 kDa,核磁共振分析显示取代反应发生在C4和糖苷键连接位点C3处。SLPC-SeNPs粒径为55.46 nm,表面呈均匀球状,在4 ℃下能稳定保持至少80 d。此外,Se-SLPC和SLPC-SeNPs的抗氧化活性均明显高于SLPC。本研究可为研发安全高效的补硒制剂提供理论支撑。     

乳酸乳球菌富硒及其硒多糖抗氧化活性研究

对乳酸乳球菌富硒工艺进行优化以及对其最优条件下提取的硒多糖抗氧化活性研究,结果表明:接种量、培养时间、亚硒酸钠浓度是影响乳酸乳球菌富硒量的主要因素;当接种量8%,培养时间24h,亚硒酸钠浓度14μg/mL,温度37℃,pH6.6时,乳酸乳球菌的有机硒转化率为59.87%。当最优条件下提取的硒多糖浓度达2mg/mL时,硒多糖对羟自由基和超氧阴离子的清除率为78%和59%,较同等条件下多糖的清除率分别提高了19%和18%。      

松乳菇多糖提取工艺优化及抗氧化活性评价

为了探索松乳菇菌丝体多糖的最佳提取工艺,并对其多糖进行体外抗氧化活性初步研究。采用超声波辅助浸提的方法,以温度、时间、料液比和次数进行单因素实验;在此基础之上,利用Box-Benhnken方法进行四因素三水平实验设计,以多糖得率为响应值,进行响应面分析;通过测定多糖清除DPPH自由基、OH自由基和O₂^-自由基的能力来评价其抗氧化活性,并与维生素C进行对比。结果表明,松乳菇多糖最佳提取工艺条件为:提取温度92.8 ℃、提取时间1.6 h、料液比1:28 (g:mL)和提取次数3次,此条件下松乳菇多糖得率预测值为10.60%,实测值为10.41%,与预测值相对误差为1.79%,说明优化工艺可行。松乳菇多糖对DPPH自由基、OH自由基和O₂^-自由基都具有一定的清除能力,其IC₅₀值分别为0.855,1.147,1.126 mg/mL;但与维生素C比较,其抗氧化活性较弱。热水浸提法提取松乳菇多糖高效、简单、低成本,可用作松乳菇多糖的提取工艺;松乳菇多糖具有明显的体外抗氧化活性。     

羊肚菌菌丝体富硒条件优化及其硒多糖抗氧化活性研究

对羊肚菌菌丝体液体深层发酵富硒条件进行优化,考察培养基中硒浓度、温度、装液量和p H值对富硒率的影响。采用Fenton法、邻苯三酚自氧化法和DPPH(1,1-二苯基-2-苦基肼)还原法对羊肚菌菌丝体多糖的体外抗氧化活性进行了研究。羊肚菌菌丝体富硒的适宜培养条件为:亚硒酸钠质量浓度为10 mg/L,温度25℃,装液量100 m L/250 m L,初始p H值7。在此条件下,富硒率最大达9.10%。羊肚菌菌丝体多糖和羊肚菌菌丝体硒多糖清除羟自由基(·OH)IC50分别为:0.62 mg/m L和0.42 mg/m L;清除超氧阴离子(O2-·)IC50分别为:0.85mg/m L和0.59 mg/m L;清除DPPH自由基IC50分别为:0.66 mg/m L和0.49 mg/m L。羊肚菌菌丝体多糖具有较强的体外抗氧化活性,且随着多糖浓度的增大其抗氧化活性逐渐增强,羊肚菌菌丝体硒多糖抗氧化作用更强。     

香菜多糖的抗氧化及降血糖活性研究

本研究以香菜为原料,探究其多糖的抗氧化活性和降血糖活性。通过测定香菜多糖对DPPH、ABTS+自由基清除能力和总还原能力评价其抗氧化活性,并通过检测香菜多糖对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果研究其降血糖能力。结果表明：随着香菜多糖提取物浓度的增加,其总还原能力以及对自由基清除率提高,当质量浓度为2 mg/mL时,其对DPPH和ABTS+自由基清除率分别为61.32%和70.76%,表明其具有较好的抗氧化活性;此外,对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制率亦随其浓度增加而增大,当香菜多糖浓度为6 mg/mL时,其对这两种酶抑制率分别可达49.01%和64.76%,表明其具有一定的降血糖活性。因此,香菜多糖可作为一种新的天然抗氧化剂和降糖物质,这将为香菜在食品、药品和保健品等方面的开发利用提供理论依据。     

秋刀鱼抗氧化肽制备及其抗氧化活性的研究

本文选择胰酶对秋刀鱼蛋白进行酶解,以蛋白质利用率和氧化自由基吸收能力(ORAC值)为指标,运用响应面分析法优化秋刀鱼蛋白制备抗氧化肽的酶解工艺,并且对酶解产物的特性进行了研究。结果表明:最优酶解条件为加酶量1085 U/g蛋白,水料比3:1,酶解时间8 h时,此时蛋白质利用率和ORAC值分别为76.86%和883.40μmol Trolox equivalent/g。秋刀鱼酶解产物的总氨基酸含量为4576.69 mg/100 mL,其中游离氨基酸和肽态氨基酸分别占34.28%和65.31%;总氨基酸中必需氨基酸占34.76%,抗氧化活性氨基酸和支链氨基酸占26.25%,说明秋刀鱼酶解产物具有较高的营养价值。秋刀鱼酶解产物中相对分子质量在1000~3000 Da之间的组分最多,占44.18%。秋刀鱼酶解产物清除DPPH·的IC50值为3.32 mg/mL,清除O2-·的IC50值为5.08 mg/mL,当秋刀鱼酶解产物的蛋白浓度为10 mg/mL时,其吸光值为0.67,说明秋刀鱼酶解产物具有较高的抗氧化活性。     

蓝莓多糖的抗氧化性与抑菌作用

利用水提醇沉法从蓝莓中提取多糖,再经初步纯化后,进行多糖的抗氧化性及抑菌作用实验。结果表明,蓝莓多糖对羟自由基和DPPH 自由基有较强的清除作用,且清除率50% 所对应的质量浓度IC50 分别为2mg/mL 和7mg/mL。但蓝莓多糖对超氧阴离子自由基几乎没有作用效果。蓝莓多糖对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母均有一定的抑制作用,最小抑制浓度MIC 在50～75mg/mL 之间,对热带假丝酵母、青霉和黑曲霉无抑制作用。     

青蛤多糖的提取工艺优化及其抗氧化活性

研究热水浸提青蛤多糖的提取工艺并测定青蛤多糖的体外抗氧化活性。采用单因素试验和正交试验设计优化提取工艺,优化的提取工艺为:提取温度95℃,提取时间为4 h,液料比10∶1(m L/g),提取次数2次,青蛤多糖的得率为(3.41±0.04)%。对脱蛋白后的青蛤多糖体外抗氧化活性研究表明,其具有较强的和浓度依赖的还原能力和总抗氧化能力,对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除活性均随浓度升高而增大,显示青蛤多糖具有显著的体外抗氧化活性。     

桑葚多糖调节血糖代谢及体外抗氧化效果研究

研究桑葚多糖（mulberry polysaccharides,MBPs）对糖尿病大鼠的降糖效果及体内外抗氧化活性。在体外化学条件下,测定MBPs清除·OH和O2－·能力;采用链脲佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,糖尿病大鼠分别灌胃150、300、450 mg/（kg·d）剂量的MBPs。结果表明：MBPs清除·OH和O2－·的EC50分别为0.17、0.54 mg/mL;MBPs能显著改善糖尿病大鼠血糖水平、血脂指标（甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇）、脂质过氧化水平（丙二醛）和血清抗氧化状态（谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶及总抗氧化能力）;MBPs具有降血糖作用。     

地木耳多糖的抗氧化性与抑菌作用

利用水提醇沉法从地木耳中提取多糖,再经初步纯化后,进行多糖的抗氧化性及抑菌作用实验.结果表明,地木耳多糖对·OH和DPPH自由基有较强的清除作用,且最高清除率分别为71.53％和66.35％.但地木耳多糖对O2-·自由基和亚硝酸盐几乎没有作用效果,最高清除率分别只有33.33％和22.38％.地木耳多糖对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有一定的抑制作用,最小抑菌质量浓度MIC在125～250μg/mL之间.而对金黄色葡萄球菌的抑制作用不明显.     

碱提桑黄菌丝体多糖的抗氧化活性

为了研究碱提桑黄菌丝体多糖PL-N的抗氧化活性。利用物理、化学方法分析了PL-N的化学组成及基本理化性质,在此基础上,通过体外抗氧化模型、细胞试验和D-半乳糖所致的小鼠亚急性衰老模型综合评价了PL-N对DPPH和羟自由基的清除作用、过氧化氢诱导SH-SY5Y神经细胞的保护作用及体内抗氧化活性。结果表明:PL-N的总糖和糖醛酸含量分别为84.92%和16.92%,不含蛋白质,主要由D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其分子摩尔比为5.5:7.8:1.8:1。PL-N具有明显的清除自由基能力,且呈剂量依赖关系,在2.0 mg/mL时,PL-N的DPPH和羟自由基清除率分别为72.1%和83.3%。同时,在80 μg/mL时,PL-N预处理对氧化损伤细胞的存活率达到88.7%,揭示其突出的体外抗氧化活性。与模型组相比,灌胃高剂量PL-N的小鼠脏器指数、血清和肝脏中的抗氧化酶活性和总抗氧化能力均极显著增加(P<0.01),丙二醛含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,PL-N具有突出的抗氧化活性,可作为功能性食品应用于膳食、理疗中。     

两种泽兰酸性多糖的结构和生物活性

从泽兰中提取多糖组分,并评价其体外抗氧化活性和细胞免疫调节活性。通过DEAE-52纤维素柱层析和SephadexG-100柱层析从泽兰粗多糖中分离得到2 个纯多糖,分别命名为LHPS1和LHPS5。采用物理化学方法和免疫学方法对LHPS1和LHPS5的结构和生物活性进行了研究。结果表明,LHPS1（1.13×105 Da）和LHPS5（7.40×104 Da）是由多种单糖和半乳糖醛酸组成的酸性多糖。总还原能力和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率测定结果表明,LHPS1和LHPS5具有显著的体外抗氧化活性。免疫实验分析结果表明,LHPS1和LHPS5能激活RAW264.7细胞促进肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α的产生,并促进脾淋巴细胞增殖。荧光免疫激活转运实验结果显示LHPS1和LHPS5能够通过激活RAW264.7细胞中的核因子κB（nuclear factor kappa-B,NF-κB）调节免疫应答。此外,抑制剂中和实验结果显示两种多糖可能通过结合细胞表面甘露糖受体激活巨噬细胞。LHPS1和LHPS5具有一定的体外抗氧化活性和细胞免疫调节活性,可用作抗氧化补充剂或免疫调节剂。