番茄红素对鱼藤酮损伤PC12细胞的保护作用研究

目的:探讨番茄红素(Lycopene)对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法:采用鱼藤酮诱导PC12细胞损伤模型,给予番茄红素预处理后,CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)释放量;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化;比色法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC);DCFH-DA染色检测细胞内活性氧类物质(ROS)水平。结果:番茄红素能明显提高鱼藤酮损伤PC12细胞存活率(p<0.05),恢复细胞增殖;明显减轻了细胞损伤的形态的改变,降低LDH的释放、MDA和ROS含量(p<0.05),提高PC12细胞内SOD活性、GSH含量、T-AOC能力(p<0.05)。结论:番茄红素拮抗鱼藤酮致PC12细胞的损伤,其机制可能与抗氧化,清除细胞内ROS,诱导抗氧化酶的活性有关。     

番茄红素对鱼藤酮损伤PC12细胞的保护作用研究

目的:探讨番茄红素（Lycopene）对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法:采用鱼藤酮诱导PC12细胞损伤模型,给予番茄红素预处理后,CCK-8法检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态,测定细胞培养液上清乳酸脱氢酶（LDH）释放量;碘化丙啶（PI）染色流式细胞术检测细胞周期变化;比色法测定细胞内谷胱甘肽（GSH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、总抗氧化能力（T-AOC）;DCFH-DA染色检测细胞内活性氧类物质（ROS）水平。结果:番茄红素能明显提高鱼藤酮损伤PC12细胞存活率（p<0.05）,恢复细胞增殖;明显减轻了细胞损伤的形态的改变,降低LDH的释放、MDA和ROS含量（p<0.05）,提高PC12细胞内SOD活性、GSH含量、T-AOC能力（p<0.05）。结论:番茄红素拮抗鱼藤酮致PC12细胞的损伤,其机制可能与抗氧化,清除细胞内ROS,诱导抗氧化酶的活性有关。      

核桃多酚对皮质酮损伤PC12细胞的作用机制

核桃多酚为核桃粕中的生物活性物质,具有重要的开发和应用价值。为探讨核桃多酚的潜在抗抑郁活性,采用皮质酮诱导的大鼠嗜铬瘤(PC12)细胞损伤模型,以细胞活力、细胞凋亡、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放量、细胞内钙离子水平评价核桃多酚在皮质酮损伤模型上的作用,并进一步采用蛋白免疫印迹法探讨核桃多酚对皮质酮损伤PC12细胞作用的机制。结果表明:核桃多酚(75、150μg/mL)预处理可显著逆转皮质酮损伤引起PC12细胞活力降低、细胞凋亡、LDH释放量增加和钙超载,发挥细胞保护作用;此外,核桃多酚可显著逆转皮质酮诱导的PC12细胞中cAMP依赖性蛋白激酶A(cAMP-dependent protein kinase A, PKA)活性降低,并下凋cAMP反应原件结合蛋白(cAMP-response element binding protein, CREB)133位丝氨酸的磷酸化和下游靶蛋白脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的表达量;进一步应用PKA阻断剂H89预处理消除了核桃多酚对皮质酮诱导的PC12细胞的保护作用,说明增加PKA/CREB/BDNF 信号通路活性是核桃多酚发挥抗皮质酮损伤作用必需的。研究结果表明,核桃多酚具有潜在的抗抑郁活性,可能是核桃饮食发挥抗抑郁作用的重要物质基础,其对皮质酮损伤的PC12细胞的保护作用与上调PKA/CREB/BDNF 信号通路有关。研究结果旨在探明核桃多酚的潜在抗抑郁活性及机制,并为核桃粕的高值化利用提供理论参考。     

英国红芸豆抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用

为了探究英国红芸豆抗氧化肽组分的抗氧化作用,采用超滤、葡聚糖凝胶G-15层析技术对碱性蛋白酶酶解英国红芸豆抗氧化蛋白质制备的抗氧化产物进行分级,研究抗氧化活性较高的组分对H₂O₂损伤的PC12细胞的影响。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H₂O₂对PC12造成的细胞生长抑制作用,随着肽浓度的提高,细胞内活性氧（ROS）水平,丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）胞外活力均有所降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力以及还原型谷胱甘肽（GSH）含量均具有所提高,尤其BRKBAPC-2浓度为200 μg/mL时,ROS水平为32.53%,MDA含量为0.96 nmol/μg prot,LDH胞外活力为202.12 U/L,与模型组相比,均极显著降低（P<0.01）;SOD活力为（555.48±3.64）U/mg prot,CAT活力为（14.77±1.30）U/mL,GSH含量为（140.88±8.19）μmol/g prot,与模型组相比,均极显著提高（P<0.01）,此外,其可抑制线粒体膜电位的降低,改善细胞周期的阻滞情况,阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对H₂O₂引起的PC12细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

基于PC12细胞模型分析大豆蛋白水解物对神经元氧化损伤的保护作用

本文基于PC12细胞模型研究大豆蛋白水解物(Soybean protein isolate hydrolysates,SPIHs)对神经元氧化损伤的保护作用。以大豆蛋白为原料,经过酶解和膜分离得到四种分子量不同的水解物,我们首先检测了SPIHs的抗氧化能力;然后用H2O2刺激P12细胞,建立神经元氧化损伤模型,并以适当浓度的SPIHs处理细胞,通过检测各种生物学指标评价对细胞氧化损伤的保护作用。结果显示,低分子量的SPIHs表现出最强的抗氧化活性;能够提高损伤细胞的存活率和抗氧化酶活力,减少乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和丙二醛(MDA)的生成,抑制细胞活性氧(ROS)的累积(p0.05或p0.01),且变化呈现一定的剂量依赖关系。研究认为,低分子量的SPIHs对神经元氧化损伤具有保护作用,可以作为功能性成分用于保护神经元氧化损伤相关的功能食品和保健品的开发。     

虾肽对过氧化氢诱导RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用

为研究虾肽对H2 O2诱导的RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用,利用CCK-8法检测不同剂量虾肽对RAW 264.7细胞的存活率的影响,通过酶联免疫试剂盒和荧光实时定量PCR检测细胞因子和mRNA的表达水平;Western Blotting检测细胞中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-rel...     

基于PC12细胞的西维因神经损伤作用机理研究

本文以PC12细胞为神经细胞模型,研究了西维因对神经细胞的损伤作用机理。当PC12细胞暴露于0.00μg/m L~200.00μg/m L不同浓度的西维因溶液时,表现出了一系列显著变化。随着西维因溶液浓度的增大,细胞的存活率从(100.00±0.46)%下降到了(27.86±1.69)%;细胞内乳酸脱氢酶(LDH)漏出率增多;丙二醛(MDA)含量从19.27±0.96 nmol/mg prot逐渐增加到112.39±1.59nmol/mg prot;超氧化物歧化酶(SOD)活力从4.08±0.87 U/mg prot增强到17.77±0.43 U/mg prot,同时其抑制率也从(19.00±1.66)%增加到了(73.00±1.71)%;同时谷胱甘肽(GSH)含量从96.15±6.10μmol/g prot逐渐减少到22.91±3.98μmol/g prot;细胞相对荧光强度(RFI)从37.38±11.48先增强到45.56±11.96,后因细胞严重损伤又减弱到17.11±1.50。细胞液内乙酰胆碱(ACh)含量也逐渐增加。同时,利用激光共聚焦扫描显微镜观察到了线粒体膜电位的显著下降。西维因对PC12细胞表现出很强的神经毒性。     

软枣猕猴桃黄酮对过氧化氢诱导HaCaT细胞损伤的保护作用

研究软枣猕猴桃中黄酮类化合物对过氧化氢（H2O2）损伤人永生化表皮细胞（HaCaT细胞）的保护作用。 以湖南省浏阳市大围山软枣猕猴桃为实验材料,以体外培养的HaCaT细胞为实验对象。实验分为空白对照组、H2O2 模型组、阳性对照组（VC组）和黄酮处理组（软枣猕猴桃黄酮0.1～1.0 mg/mL预处理）,以细胞内超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase,SOD）活力、活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平为综合评价指标,并以VC作 为阳性对照评价其抗氧化活性。实验结果表明：当H2O2浓度为30 μmol/L时,细胞相对存活率为40%左右,较好地 诱导了HaCaT细胞氧化损伤模型。当加入黄酮类化合物对细胞进行预保护后,质量浓度0.3、0.6 mg/mL的黄酮处理 组细胞相对存活率为60%左右,较模型组均提高了20%左右。0.3 mg/mL黄酮处理组细胞内SOD活力（6.33 U/mg） 较模型组升高了约1 倍,且存在明显差异（P＜0.05）;ROS水平显著下降,与模型组（677.80）相比下降了13%左 右。说明软枣猕猴桃中黄酮类化合物对H2O2造成的氧化损伤具有一定的预保护作用,可进一步将其开发成相应的天 然抗氧化剂产品投入市场。     

红酵母红素对氧化受损PC12细胞的保护作用

研究红酵母红素对氧化受损PC12细胞的保护作用。将培养的PC12细胞分为7组:对照组和模型组(在培养液中加入200μmol/L H2O2),番茄红素组(阳性对照组)和实验组Ⅰ—Ⅳ在氧化应激条件下分别添加红酵母红素(1、2、3、4μmol/L)。采用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒观察细胞的存活率以及毒性变化;通过酶标法测定胞内抗氧化酶系的活性和丙二醛(MDA)的含量变化;应用流式细胞术分析细胞内活性氧(ROS)的聚集变化。结果显示,实验组Ⅰ—Ⅳ都明显提高了细胞存活率(p0.01)和降低了细胞毒性(p0.05),也显著增强了胞内抗氧化酶系的活性(p0.05),减少了丙二醛(MDA)的生成(p0.05),还抑制了细胞内活性氧的聚集。其中,实验组Ⅲ的抗氧化效果最好。红酵母红素对氧化受损PC12细胞有保护作用,在红酵母红素的四个浓度梯度中,3μmol/L红酵母红素抗氧化能力最强。     

Antioxidative and Anti-Inflammatory Neuroprotective Effects of Astaxanthin and Canthaxanthin in Nerve Growth Factor Differentiated PC12 Cells

ABSTRACT: Nerve growth factor differentiated PC12 cells were used to examine the antioxidative and anti‐inflammatory effects of astaxanthin (AX) and canthaxanthin (CX). PC12 cells were pretreated with AX or CX at 10 or 20 μM, and followed by exposure of hydrogen peroxide (H₂O₂) or 1‐methyl‐4‐phenylpyridinium ion (MPP⁺) to induce cell injury. H₂O₂ or MPP⁺ treatment significantly decreased cell viability, increased lactate dehydrogenase (LDH) release, enhanced DNA fragmentation, and lowered mitochondrial membrane potential (MMP) (P < 0.05). The pretreatments from AX or CX concentration‐dependently alleviated H₂O₂ or MPP⁺‐induced cell death, LDH release, DNA fragmentation, and MMP reduction (P < 0.05). Either H₂O₂ or MPP⁺ treatment significantly increased malonyldialdehyde (MDA) and reactive oxygen species (ROS) formations, decreased glutathione content, and lowered glutathione peroxidase (GPX) and catalase activities (P < 0.05). The pretreatments from AX or CX significantly retained GPX and catalase activities, and decreased MDA and ROS formations (P < 0.05). H₂O₂ or MPP⁺ treatment significantly decreased Na⁺‐K⁺‐ATPase activity, elevated caspase‐3 activity and levels of interleukin (IL)‐1, IL‐6, and tumor necrosis factor (TNF)‐α (P < 0.05); and the pretreatments from these agents significantly restored Na⁺‐K⁺‐ATPase activity, suppressed caspase‐3 activity and release of IL‐1, IL‐6, and TNF‐α (P < 0.05). Based on the observed antioxidative and anti‐inflammatory protection from AX and CX, these 2 compounds were potent agents against neurodegenerative disorder.     

Protective Effects of Merlot Red Wine Extract and its Major Polyphenols in Pc12 Cells under Oxidative Stress Conditions

Abstract: The potential effect of the extracts from free‐run and pressed Merlot red wine has been evaluated in PC12 cells under oxidative stress situation. Comparing both vinification process, pressed Merlot red wine extract possessed higher neuroprotective activity than the free run wine, possibly attributed to the major content in all global polyphenolic families. High performance liquid chromatography determination of individual polyphenols showed that the major compounds found in Merlot red wine extract were quercetin, catechin, epicatechin, tyrosol, gallic acid, and procyanidins. Pretreatments with these polyphenolic compounds (0.25 mM and 0.1 mM, 24 h) significantly increased cell viability of H₂O₂ and Fenton reaction treated cells. Moreover, these polyphenols attenuated ROS production and decreased the Redox Index of glutathione (RI = GSSG/GSH + GSSG) in cells treated only with Fenton reaction. Furthermore, some polyphenols induced antioxidant enzymes activity and protein expression. Quercetin was the most active. These results support the beneficial effects of red wine extracts and some of its polyphenols under oxidative stress conditions. Practical Application: This research provides evidences of the preventive properties of wine extracts and its major polyphenols under oxidative stress conditions.     

牡蛎寡肽对H2O2氧化损伤L02人肝细胞的保护作用

为了研究牡蛎寡肽对自由基清除作用及对人肝细胞L02细胞氧化损伤的保护作用,测定了牡蛎寡肽对羟自由基(·OH)的清除率,并建立过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)氧化损伤人肝细胞L02的模型,研究牡蛎寡肽对氧化损伤L02细胞的存活率、活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)、抗氧化酶系(superoxide dismutase/SOD,glutathione/GSH)含量的影响。结果表明,牡蛎寡肽对羟自由基的IC_(50)为0.38 mg/m L。2 mg/m L牡蛎寡肽对于L02细胞的增殖率仍为123.98%。模型组SOD和GSH水平分别降低了40%、64.87%,而ROS增加了1倍。当添加不同剂量牡蛎寡肽后,中剂量组细胞中SOD含量几乎恢复到正常组水平,GSH活性也提高了118.89%,ROS水平降到模型组的62.43%,说明牡蛎寡肽对L02细胞无毒,能降低氧化损伤的L02细胞内的ROS水平,显著提高SOD和GSH含量,对细胞起到保护作用。因此,牡蛎寡肽对H2O2致氧化损伤的人肝L02细胞具有保护作用,可能是通过清除自由基,保护细胞内抗氧化酶系活性,抑制ROS的过多积累来实现。     

东革阿里多糖对红细胞氧化溶血的保护作用

采用超声结合水提的方法提取东革阿里的多糖,通过L9(34)正交试验确定最佳提取条件。利用柱层析纯化得到一种含糖醛酸的新型多糖组分Ali-1;通过分子量检测和单糖组成分析对Ali-1进行基本结构表征;采用氧自由基吸收能力(ORAC)和人血红细胞溶血模型测定多糖的抗氧化活性,并同时测定红细胞内活性氧物质(ROS)、丙二醛(MDA)水平和过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)抗氧化酶活力的变化。结果表明:东革阿里多糖最佳提取条件为料液比1:40、浸提温度95℃、超声波破碎功率300 W、浸提时间2 h,最适条件下东革阿里的粗多糖得率为10.09%;Ali-1的平均分子量为14.3 ku,主要由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸组成,其摩尔比为:4.43:1.10:1:1.14;Ali-1的QRAC值为302.48±2.71μmol Trolox/g,且Ali-1的预处理使得AAPH损伤的人血红细胞内的ROS和MDA水平降低,使红细胞恢复到正常状态;虽SOD、GSH-Px和CAT平均酶活力降低,但结果表明较弱的红细胞也受到了保护。综上所述,经分离纯化后的东革阿里多糖组分Ali-1可以保护人血红细胞免受AAPH的损伤,具有较好的抗氧化活性。