氯霉素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用化学发光免疫分析(CLIA)技术检测动物性食品中的氯霉素(CAP)残留量。将兔抗氯霉素多抗吸附在聚苯乙烯微孔板上制成固相抗体,在氯霉素上连接辣根过氧化物酶(HRP)制成标记物,鲁米诺体系作为发光底物,建立了氯霉素酶促化学发光免疫分析方法。方法学分析灵敏度为0.05 ng/ml,批内变异系数小于8%,批间变异系数小于20%,以牛奶为样品的分析回收率为87%～100%,稀释实验相关系数为0.999,检测线性范围为0.1～10 ng/ml。     

CA50酶促化学发光免疫分析方法的建立

将同一株CA50单克隆抗体用于固相包被，辣根过氧化物酶偶联制备酶标记物，以鲁米诺为发光底物，采用一步法，建立了CA50酶促化学发光免疫分析法。对各种分析进行优化，确定了分析方法。     

促黄体生成激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心一步检测法和鲁米诺-过氧化氢发光体系建立了血清促黄体生成激素(LH)的酶促化学发光免疫分析方法。结果显示,本方法测量范围为1.5~200 IU/L,灵敏度为0.08 IU/L,批内变异系数9%,批间变异系数11%,回收率为96.3%~112.1%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0.995。与进口酶促化学发光免疫分析试剂盒测定的临床值进行比较,线性相关方程为y=0.967x+0.0689,相关系数r=0.975,相关性良好。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

胰岛素酶促化学发光免疫分析方法的建立

胰岛素是由胰腺β细胞分泌的蛋白类激素，由2条氨基酸肽链组成，A链有21个氨基酸，B链有30个氨基酸，相对分子质量为5700，是调节糖代谢的重要物质。在临床诊断中，血液中胰岛素含量的测定对于了解糖尿病的发生、发展、预测糖尿病的预后，制定适当的治疗方案非常重要。     

前列腺抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1.5～80μg/L,灵敏度为0.12μg/L,批内变异＜5%,批间变异＜15%。回收率为83.8%～118.7%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.999。本方法与免疫放射分析方法的相关方程y=1.07x+0.68,相关系数r=0.97。     

游离前列腺特异性抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

采用双抗体夹心法建立了定量测定血清游离前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗总前列腺特异性抗原的单克隆抗体作为包被抗体,另1株抗游离前列腺特异性抗原的单克隆抗体作为标记抗体.总测量范围为0.2～10 ng/mL,灵敏度为0.01 ng/mL,批内变异<10%,批间变异<20%.本方法与Monobind游离前列腺特异性抗原化学发光测定试剂盒比对的相关方程为y＝0.72x-0.22,相关系数r＝0.90.     

前列腺特异性抗原酶促化学发光分析方法的建立

前列腺特异性抗原（PSA）是由前列腺上皮和尿道周围腺体产生的一种相对分子质量为33000-35000道尔顿的单链糖肽。在正常情况下，PSA主要分泌到前列腺液或精液中，血清中浓度很低，仅为0～4μg／L。当前列腺发生病变时，PSA大量进入血液，引起血液PSA浓度升高，     

促卵泡激素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用双抗体夹心法建立了测定人血清FSH酶促化学发光免疫分析方法。本方法的测量范围为1．5～100IU／L,灵敏度为0．36IU／L,批内变异系数为1．0％～1．6％,批间变异系数为4．0％～4．6%,回收率为90．6％～117．8％,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0．990。与TSH的交叉率〈0．23％,与LH和HCG的交叉率分别〈0．16％和〈0．27％。与贝克曼化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y=0．85x—0．03,相关系数r=0．954。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y=0．97x＋5．29,相关系数r=0．965,与放射免疫分析试剂盒,进行比较,相关性方程为y=0．95z-3．82,相关系数r=0．954。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。     

氯霉素酶联免疫分析方法的建立

以兔抗氯霉素多抗为包被抗体,氯霉素（CAP）辣根过氧化物酶连接物为标记物,四甲基联苯胺（TMB）为显色底物,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫分析（CAP-EIA）方法.本方法灵敏度为0.046 μg /L,批内变异系数＜10%,批间变异系数＜24%,回收率62%～145%.用牛奶样品预处理所得上清液为稀释液做得稀释实验,相关方程为y=3.988x-0.234, 相关系数为0.999.标准曲线范围为0.1～10 μg /L.     

人促甲状腺激素酶联免疫吸附分析试剂盒的研制

TSH多抗用于固相包被，一株TSH单抗与辣根过氧化物酶偶联制备TSH标记物，以四甲基联苯胺（TMB）为底物，采用二步法，建立了TSH酶联免疫吸附分析法（ELISA）。本方法灵敏度为0.06mIU/L，批内CV≤5.9%(n=8)，批间CV≤9.1%(n=7)。回收率为（98．4－101．4）％。77例正常人血清的TSH均值为1.96mIU/L，用本法与IRMA法同时23例病人血样，两者相关方程为Y＝1．01X－0．47，相关系数r=0.992。本方法具有简便，快速和准确的特点，适于临床检测和科研应用。     

催乳素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用两株催乳素(PRL)单克隆抗体,一株包被化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,研制了测定人血清PRL浓度的酶促化学发光免疫分析试剂盒。本试剂盒测定范围50~4 000 mIU/L,灵敏度4.26 mIU/L,批内、批间变异系数分别小于10%、15%,回收率90.3%~100.8%;血清样品倍比稀释后的测定值和稀释度的相关系数为1;本试剂盒正常参考值范围:女性43.2~513.1 mIU/L(n=52),男性54.8~334.3 mIU/L(n=68)。     

人促甲状腺激素生物素—亲和素系统免疫放射分析法的建立

报道将ＢＡＳ引入双们点夹心ＩＲＭＡ，建立了人血清ＴＳＨ固相试管双位点夹心ＢＡＳ－ＩＲＭＡ。该法批内ＣＶ为１．４％－８．３％，批间ＣＶＯ ６．１％－８．４％，最小检出量为０．０４ｍＩＵ／Ｌ，平均回收率为１００．１６％，灵敏度约是同条件下ＩＲＭＡ的３倍；与ＩＲＭＡ对比测定２０份病人血管ＴＳＨ样品，经统计学处理，两者测定结果呈良好相关性。     

磺胺喹噁啉酶联免疫分析方法的建立

利用抗磺胺喹噁啉(SQ)多抗建立酶联免疫分析方法，以测定SQ在动物源食品中的残留。方法学鉴定结果表明，灵敏度为0.2ng/mL，批内、批间变异分别为7.8%～10.0%、10.5%～12.0%；牛奶、蜂蜜、鸡肉、鸡蛋样品的添加回收率分别在93.1%～107.0%、69.0%～104.0%、40.0%～73.6%、50.0%～84.0%之间。牛奶稀释实验表明，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数R=0.997。     

一种新型酶促化学发光增强液的发光性能及其在免疫分析中的应用

在辣根过氧化物酶／鲁米诺／增强剂／过氧化氢(HRP／luminol／enhancer／H2O2)增强化学发光体系中，加入一系列辅助试剂，获得了一种灵敏度高、发光持续稳定、可长期贮存的新型酶促化学发光增强液。该增强液灵敏度为2．4amol／孔，发光半衰期为40min，工作液在室温可稳定存放1个月，在37℃下可稳定存放14d。在此基础上，在TSH-BAS ECLEIA和AFP ECLEIA上进行了应用。TSH-BAS ECLEIA测量范围为0．17～35mIU／L．信噪比大于5；分析灵敏度为0．04mIU／L，功能灵敏度为0．06mIU／L；批内变异系数为2．96％～5．05％，批间变异系数为4．01％～7．56％；回收率为101％～119％；稀释实验相关方程为y=44．650x 0.352,r=0.352,r=0.996；与Bayer ACS：180系统进行方法学比较，相关方程为y=0．889x=0．351，r=0．984。AFP ECLEIA测量范围为5～2000ng／mL，信噪比大于4。动力学实验表明，加入发光液之后15min测量，结果准确可靠。     

CA125单克隆抗体的制备及其初步应用

利用CA125抗原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,建立分泌抗CA125抗体的杂交瘤细胞株。将CA125单克隆抗体应用到化学发光免疫分析和免疫放射分析方法中,病理值的测定结果和进口试剂盒测定值相关方程分别为y=0.85x+11.1,r＝0.932和y=0.87x－12.8,r＝0.983;正常血样测量值范围分别为3.3～26.7和1.5～27.0U/mL。CA125单克隆抗体制备的包被板和包被管在37℃下可稳定存放14d,且不影响分析结果。