荧光素钠法测定β-葡聚糖含量研究

该试验通过研究荧光素钠与β-葡聚糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖等结合后荧光最大激发和发射波长发生变化,探索在有多种糖存在溶液中鉴别测定β-葡聚糖含量一种方法。结果显示,荧光素钠与β-葡聚糖混合前后紫外吸收分别为436．5 nm和510．6 mn,荧光素钠与β-葡聚糖结合后荧光最大激发和发射波长发生变化,激发和发射波长分别由487．3 nm,517．6 nm变为475．9 nm和510．6 nm,而与其它糖类,如葡萄糖、乳糖、麦芽糖等结合后荧光性质不发生变化,荧光素钠与β-葡聚糖结合适合比例为6:1(百分含量比)、线性浓度范围在0．1～0．25μg／mL,回归方程为y=-2．014x+1．0757,回归系数为R2=0．9978,用此工作曲线测定青稞粗品中β-葡聚糖粗提物纯度为95％(标准酶法测定结果为96％)。     

四碘荧光素荧光法快速检测水中十六烷基三甲基溴化铵的含量

用荧光光谱法研究了阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)与四碘荧光素(TIF)的荧光性质,建立了一种检测微量表面活性剂的新方法。结果表明:在pH9.42的氨性缓冲溶液中,加入十六烷基三甲基溴化铵使四碘荧光素的荧光强度显著增强,体系的激发波长和发射波长分别为529.0nm和560.0nm。阳离子表面活性剂CTMAB质量浓度在0~20.0μg/mL范围与ΔF有良好的线性关系,检出限为0.0348μg/mL,平均回收率为98.6%~102.3%。方法具有高灵敏度和良好选择性,用于环境水中十六烷基三甲基溴化铵的测定,结果令人满意。     

酶法测定大麦提取物β-葡聚糖含量研究

目前国际认可β-葡聚糖含量测定方法是酶法,此法测定成本高,我国目前多采用苯酚- 硫酸法测定,但测定结果准确性较差。该研究在国际β-葡聚糖酶法测定基础上用纤维素酶代替昆布多糖水解酶水解β-葡聚糖,用苯酚-硫酸法代替葡萄糖试剂盒法测定β-葡聚糖酶解后得到葡萄糖含量,设计适于我国应用的β-葡聚糖酶法测定方法。此法测定过程为:1．5 ml浓度为60μg／mL 标准β-葡聚糖和一定浓度样品,用浓度为50U／mL纤维素酶0．5 ml酶解60 min;然后用蒸馏水稀释至30 ml,从中吸取0．5 ml到另一试管,再加入浓度为2 U／mL β-葡聚糖酶1ml,作用15 min后,用苯酚-硫酸法测定标准β-葡聚糖和样品酶解液中葡萄糖含量,计算出样品中β-葡聚糖含量。     

固相萃取-高效液相色谱法测定黄酒中氨基甲酸乙酯

建立一种反相高效液相色谱法测定黄酒中氨基甲酸乙酯的方法。样品经固相萃取柱净化后衍生,采用反相C18色谱柱XB—Cfsf4．6mm×250mm,5μm）,以乙腈-0．02moL／L乙酸纳水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为lmL／min;设定荧光检测器中激发波长为233nm,发射波长为600nm,对黄酒中的氨基甲酸乙酯进行检测。结果表明,在50．0-250．0μg／L添加量范围内,平均回收率为92．9％,相对标准偏差为4．5％（n=6）。方法的检出限为10μg／L,线性范围为100～1500μg／L（R=0．9995）,测定结果与标准气相色谱一质谱法基本相同。所建立的方法可以作为黄酒中氨基甲酸乙酯的检测方法。     

荧光光度法测定白果中游离氨基酸含量

采用邻苯二甲醛(OPA)衍生法，OPA在β-巯基乙醇(β—MCE)存在下与游离氨基酸迅速反应生成1-硫代-2-烷基异吲哚，此加成物具有荧光，从而利用荧光光度法测定市售白果中的游离氨基酸总量。实验对该法的精密度、稳定性以及准确性均进行探讨。在激发波长EX为330nm、发射波长EM为470nm荧光条件下，标准直线方程为Y=0．9950X 0．2063、相关系数7=0．9999，回收率达99．10％。结果表明：白果中含丰富的游离氨基酸，其总量达0．8—1．0g／100g。     

酶法测定大麦提取物中β-葡聚糖含量的研究

在国际β-葡聚糖酶法测定β-葡聚糖含量的基础上,用纤维素酶代替昆布多糖水解酶水解β-葡聚糖,用β-葡聚糖酶代替β-葡萄糖苷酶,用苯酚-硫酸法代替葡萄糖试剂盒法测定β-葡聚糖酶解后得到葡萄糖含量,设计了适合我国应用的β-葡聚糖酶法测定方法。此法测定过程为：1．5mL浓度为60μg/mL的标准β-葡聚糖和一定浓度的样品,用浓度为50U/mL纤维素酶0．5mL酶解60min；然后用蒸馏水稀释至30mL,从中吸取0．5mL到另一试管,再加入浓度为2U/mLβ-葡聚糖酶1mL,作用15min后,用苯酚-硫酸法测定标准β-葡聚糖和样品酶解液中葡萄糖含量,计算出样品中β-葡聚糖的含量。     

茶叶中游离氨基酸含量的荧光光度法测定

本文采用邻苯二甲醛(OPA)衍生法，OPA在β-巯基乙醇(β—MCK)存在下与第一级氨基酸迅速反应生成1—硫代—2—烷基异吲哚，此生成物具有荧光，从而利用荧光光度法测定茶叶中的游离氨基酸含量。实验对该法的精密度，准确性以及稳定性均进行探讨。在激发波长Ex为360nm，发射波长Em为420nm时，标准直线方程为Y＝1．3303X 0．2329，相关系数γ＝0．9999。结果表明：茶叶中含有丰富的游离氨基酸，总量为2．7—3.2g／100g，回收率达99．14％。     

苯酚-硫酸法测定β-葡聚糖含量研究

分别以β-葡聚糖和葡萄糖为标准品测定青稞提取物中β-葡聚糖含量。以β-葡聚糖为标准品时,线性浓度范围在6～13μg/mL,回归方程为y=0.0445X-0.0071,回归系数为R2=0.9568,青稞中提取β-葡聚糖粗提物纯度为22.3%(脱脂)和10.7%(未脱脂);以葡萄糖为标准品时,线性浓度范围在0-21μg/mL,回归方程为y=0.0588X+0.0326,回归系数为R2=0.9934,青稞中提取出β-葡聚糖粗提物纯度为12.5%(脱脂)和4%(未脱脂),二者之间测定结果有78.4%左右误差。在β-葡聚糖含量测定过程中不能用葡萄糖代替β-葡聚糖作标准品,用β-葡聚糖作标准品时苯酚-硫酸法工作曲线线性回归性不强,直接用苯酚-硫酸法测定β-葡聚糖方法不可取。     

乙醇荧光毛细生物传感器的研究

基于ADH和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化还原体系，开发了一种乙醇毛细生物传感器（ECB）。在激发波长350nm、发射波长459nm条件下，用ECB成功地对酒中的乙醇进行了测定；其线性范围为2．0～15g／L，r〉0．9958，检出限为1．11g／L，RSD〈2．3％。ECB重现性好、操作简便，样品用量仅为10μL，测定成本低；可实现乙醇的微量化、快速化测定；ECB可制成荧光毛细乙醇测试盒，用于合乙醇样品的测定。     

荧光光度法测定饮料中苯甲酸含量

本文基于苯甲酸在碳酸钠—盐酸介质中形成荧光配合物，其激发波长为275nm、发射波长为378nm，从而建立了高灵敏度的苯甲酸的荧光测定法。测定下限为23μg/ml，苯甲酸含量在0－10μg/ml范围内具有良好的线性关系，相关系数为0.99995。本法可应用于饮料中苯甲酸的直接测定。     

同步荧光光谱法测定滁菊总黄酮含量

为快速测定滁菊总黄酮含量,根据黄酮类化合物与Al3+形成荧光络合物原理,以芦丁为标样,发射波长和激发波长的差值Δλ为40nm,狭缝均为10nm,测定437nm处的同步荧光强度。结果表明,该方法的检出限为1.6×10-8g/mL,线性范围在0~4.28×10-6g/mL之间,线性回归方程:y=26.6868x+17.7878,相关系数R2为0.9904,平均回收率96.5%~100.7%,相对标准偏差为0.732%。本法操作简便、快速,能够准确测定滁菊总黄酮含量。     

同步荧光法测定荷叶中总黄酮含量

根据槲皮素能与铝离子形成稳定的荧光络合物,建立同步荧光法测定荷叶中总黄酮含量的方法。以槲皮素为标样,选择发射波长与激发波长的波长差△λ为40 nm扫描同步荧光光谱,测定荷叶中总黄酮含量,并进行加标回收试验验证方法的可靠性。试验结果表明,槲皮素浓度在0.008μg/mL~0.40μg/mL范围内与荧光强度具有良好的线性关系,线性回归方程:y=5 780x+3.27,相关系数R为0.999 0。     

光化学荧光法测定蔬菜中残留的氯菊酯

目的建立蔬菜中氯菊酯残留量的光化学-荧光分析方法。方法在pH 9.29的B-R缓冲溶液中,氯菊酯在紫外光照射下发生光化学反应,其荧光强度明显增强,激发波长为281 nm,发射波长为330 nm,用荧光分光光度计测定。结果氯菊酯在0.004～0.036μg/mL浓度范围内与荧光强度呈良好的线性关系,检出限为0.14ng/mL,相对标准偏差为1.0%。结论该方法灵敏度高,选择性好,适合蔬菜中氯菊酯残留量的测定。     

铁(Ⅱ)-4-(2-苯并噻唑偶氮)连苯三酚体系间接光度法测定Vc

5-β-环糊精（β-CD）和曲拉通X-100（TritonX—100）存在下，依据抗坏血酸可定量母Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），Fe（Ⅱ）与4-（2-苯并噻唑偶氮）连苯三酚（BTATB）形成有色络合物，建立了测定抗坏血酸的新方法。配合物的最大吸收波长为650nm，表观摩尔吸光系数为2．40×10^5，Vc含量在0μg/mL～0．8μg／mL范围内服从比尔定律，线性回归方程：y=0．0856x＋0．0012,r=0．9982。本方法已用于水果蔬菜中Vc的测定，结果令人满意。     

高效液相荧光检测法测定柑橘中5-甲基四氢叶酸的含量

利用5-甲基四氢叶酸自身产生荧光的特性,建立高效液相荧光检测法来测定柑橘中5-甲基四氢叶酸的含量。使用ODS-C18反相色谱分离柱,流动相为6%乙腈,94%0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(pH3.0)作为流动相,流速1.0mL/min,柱温23℃,进样量为20μL,激发波长为290nm,发射波长为360nm。结果表明,5-甲基四氢叶酸在0.003μg/mL-0.1μg/mL有良好的线性关系,相关系数为0.9999,检出限为0.01ng/mL,样品测定的精密度为0.99%,样品加标平均回收率为96.6%。建立的高效液相荧光检测法具有良好的精密度和回收率,适合用于柑橘中5-甲基四氢叶酸的测定。     

荧光光度法测定白果中游离氨基酸含量

采用邻苯二甲醛 (OPA)衍生法 ,OPA在β-巯基乙醇 (β-MCE)存在下与游离氨基酸迅速反应生成 1-硫代 - 2 -烷基异吲哚 ,此加成物具有荧光 ,从而利用荧光光度法测定市售白果中的游离氨基酸总量。实验对该法的精密度、稳定性以及准确性均进行探讨。在激发波长EX为 330nm、发射波长EM为 4 70nm荧光条件下 ,标准直线方程为Y =0 .995 0X + 0 .2 0 6 3、相关系数γ=0 .9999,回收率达 99.10 %。结果表明 :白果中含丰富的游离氨基酸 ,其总量达 0 .8- 1.0g/10 0g。     

高效液相色谱法测定玉米中生育酚异构体

建立了一种玉米中生育酚异构体的测定方法。试验采用Sunfire C18反相柱（5μm4,.6×150 mm）,柱温25℃,甲醇＋水（98＋2）作为流动相,流速1.0 mL/min,进样量20μL,通过荧光检测器（激发波长为295 nm,发射波长为330 nm）测定生育酚异构体。方法线形范围为1～100μg/mL,α-生育酚（、β＋γ）-生育酚、δ-生育酚在此范围内线形良好,相关系数为0.99976～0.99983。在5～50 mg/kg浓度范围内,加标回收率为86.5%～97.4%,相对标准偏差为0.4%～3.5%。α-生育酚（、β＋γ）-生育酚、δ-生育酚的检出限分别为0.03、0.02、0.02 mg/kg。方法快速、灵敏、准确、简便易行。     

蛋白饮料中胭脂红酸的高效液相色谱-荧光法检测技术研究

建立了高效液相色谱．荧光法定量检测蛋白饮料中胭脂红酸的方法。样品经过8mol／LNFLOH溶液处理5min,过滤后直接进高校液相色谱。色谱条件：流动相：乙腈和1．19mol／L的甲酸（19：81,v／v）;流速0．8mL／min,进样量：20此,荧光检测的激发波长hx=470nm,发射波长hm=600nm。该方法条件下,胭脂红酸在浓度5斗g,mL-80μg/mL线性关系良好,检测限为0．1mg／kg,相对标准偏差（RSD）小于4．25％,加标回收率为90．34％-95．15％。该方法在多种人工合成红色素的存在的条件下,可以实现对胭脂红酸进行准确的定量检测。     

高蛋白大米粉中磷含量测定

采用GB5413．112010中钒钼酸铵显色法测定高蛋白大米粉中的磷，方法显色效果明显，线性好，灵敏度高。在波长为440nm条件下，分光度与磷浓度在110μg／mL范围内呈线性关系，检出限为0．223μg／mL，测定高蛋白大米粉中磷的计算标准偏差为0．744，相对偏差为0．67％，总回收率为95．2％。     

荧光法测定小麦胚中的谷胱甘肽

研究了用荧光分光光度计测定小麦胚中的谷胱甘肽，其荧光的波长为激发波长EX：340nm，发射波长EM：420nm。回收率为99．7％－100．1％，变异系数（CV）为0．423％。