团头鲂脑垂体的显微和超微结构以及其GTH细胞在人工催产过程中的变化

光镜和电镜观察显示团头鲂脑垂体的神经垂体主要由神经分泌纤维、脑垂体细胞和微血管构成；腺垂体由促肾上腺皮质激素分泌细胞和催乳素分泌细胞组成的前腺垂体，由促性腺激素分泌细胞、促生长激素分泌细胞和促甲状腺素分泌细胞组成的中腺垂体，以及由后腺垂体分泌细胞组成的后腺垂体构成。促性腺激素分泌细胞（组成细胞）只有一种类型，但在不同的时期表现出不同的超微结构特征。在人工催产过程中该细胞也呈现出明显的超微结构变化。     

神经损伤后运动终板乙酰胆碱受体的电镜观察

本文观察了大白鼠切断坐骨神经后,神经肌肉接头乙酰胆碱受体(简称AchR)的分布改变及运动终板超微结构改变。在细胞水平阐述了AchR在去神经后的分布特点。方法:取Wistar大鼠10只,分以下5组:(1)去神经实验组:分别在大鼠左侧后肢中部完全切断坐骨神经后第2天、第7天、第16天、第25天,取左后肢伸趾长肌,以支架维持肌原来长度,在含1.0×10~(-7)Mα—银环蛇毒—HRP(简称α—BT—HRP)结合物的Tyrode培育液中,37℃,吹氧培育1小时,Tyrode液4℃漂洗4小时,经2％戊二醛—0.1M=甲砷酸钠(PH=7.4)固定30分钟,分离肌束,漂洗过夜,以0.03％DAB—0.01％H_2O_2     

赞育丹 对大鼠LRH模型睾丸和GTH细胞超微结构的影响

以大剂量LRH-A200μg/次,隔日皮下注射持续60天,造成雄性大鼠生殖功能障碍的动物模型。以“赞育丹”进行实验性治疗,以电镜技术为手段,对模型组、中药组和对照组动物的睾丸和垂体促性腺激素(GTH)细胞进行观察。结果表明,“赞育丹”对大剂量LRH类似物的抗精子发生效应有一定的拮抗作用;同时也表明,中医“肾主生殖”理论与下丘脑—垂体—性腺轴有关。     

纤毛细胞膜特化结构的冷冻蚀刻研究

六十年代以来,冷冻蚀刻技术的应用和发展,能较满意地揭示生物膜上某些特化区域的蛋白分子排列方式和三维图象。本文应用此技术,研究纤毛细胞表面特化结构。家兔整体麻醉后,开胸取新鲜气管上皮层数条,用0.IM磷酸缓冲液配制的2％戊二醛(PH7.2)在4C固定一小时,洗涤24小时后浸入30％甘油生理盐水,待组织条沉没数分钟后,取出样品,置于样品台上,用液氮冷冻后,迅速放入FD—3A 冷冻蚀刻仪中,在真空优于2×~(-6)Torr下做断裂,蚀刻和喷涂白金及碳,用10％次亚氯酸钠溶化喷涂样品,洗净复型膜,捞取在载网上,待干后用TEM—100CXⅡ电镜观察。     

用常规透射电镜观察半薄切片——铀—铅—铜浸染技术的应用

在常规透射电镜中,超薄切片的厚度一般不超过0.1微米,否则就看不清样品的细节。但是,使用特殊的标本本浸染方法,选择性地对某些细胞结构染色,就可以在一般透射电镜下观察半薄切片。本实验采用铀—铅—铜浸染技术,选择性地染色一部分细胞器,在75—100KV透射电镜下观察0.25—0.5微米的半薄切片。结果表明,这一技术在超微结构研究中有一定实用意义。实验方法:用2％戊二醛灌注大鼠,取肝、肾、十二指肠和睾丸等组织,切成1立方毫米小块。组织块经缓冲液漂洗后,在42℃下先放入5％醋酸铀水溶液(PH3.5)浸染1小时,再在硝酸铅—硫酸铜—枸椽酸钠溶液中浸染1小时,然后在4℃下用1％饿酸后固定12小时、常规环氧树脂包埋,最后将组织块切成0.25—0.5微米半薄切片,在透射电镜下观察。     

六胺银多糖定位的电镜细胞化学技术运用

本文运用过碘酸——六亚甲四胺银的电镜细胞化学技术,分别显示出团头鲂(Megalobrama ambly cephala)脑下垂体促性腺激素(GTH)细胞分泌颗粒中的糖蛋白和莼菜(Brasemia schreberi)表皮腺毛细胞高尔基体内含物中的多糖,为这两种材料的细胞生物学研究提供了一些有意义的资料。     

团头鲂脑垂体GTH细胞钙调素免疫电镜定位

本实验运用电镜免疫胶体金技术对团头鲂脑垂体GTH细胞进行了钙调素(CaM)的超微结构定位。钙调素也称钙调蛋白(Calmodulin)是存在于所有真核生物体中的一种独特的功能蛋白,它在细胞的各种生命活动中起着举足轻重的作用。垂体促性腺激素细胞(GTH细胞)是调控生殖生理过程的关键细胞,因此研究其内CaM分布将有助于鱼类生殖生理的研究。将垂体从团头鲂脑颅中取出,戊二醛及四氧化锇双固定,梯度丙酮脱水,Epon 812环氧树脂包埋,LKB-V     

大鼠板层骨的扫描电镜观察

骨组织经常处于活跃的形成、吸收和改造,这主要发生于骨表面,故很适于用扫描电镜观察。下面介绍我们用扫描电镜对大鼠板层骨进行研究的初步的结果。材料和方法:(1)为观察骨表面细胞,经主动脉向下肢灌流2％戊二醛固定后取股骨中段,用牙科薄砂轮纵行锯开,经注射器用盐水轻轻冲掉骨髓,戊二醛浸泡,1％锇酸后固定,临界点干燥、离子溅射仪喷金,JSM35—CF扫描电镜观察骨内膜表面细胞。同时取胫骨上端、矢状锯开,观察新生骨梁;(2)为观察去掉表面细胞后类骨组织的表面,取胫骨中段如前法,用力冲洗,足可去掉绝大部分表面细胞,必要时使用超声震荡;(3)为观察骨组     

一株正常人外周血带EB病毒的B淋巴细胞(H—18)的超微结构研究

H—18细胞系由我国一例正常人外周血分离出的B淋巴细胞培养成株。经免疫荧光及免疫酶标光镜检查发现该细胞EB病毒壳抗原(VCA)阳性,如用正丁酸钠及巴豆油等病毒激活剂处理后,大量细胞(30—40％)显示VCA阳性。分离出的病毒可使体外培养细胞转化。用正常H—18细胞为对照,经正丁酸钠(4mM/ml)及巴豆油(500ng/ml)处理H—18后12,24,36,48,72小时的标本用国产DXB 2—12电镜观察。发现正常H—18细胞超微结构与正常人B淋巴细胞有很大差别。大小不一,核很不规则,核比例大,且几全部由常染色质组成。为分化很差或为转化的淋巴细胞。个别细胞内可见EB病毒之核壳体及其形态发生过程,证明该细胞带有EB病毒并进行病毒的复制。经正丁酸钠及巴豆油处理后12小时,部分细胞可见病毒大量复制。随时间的延长逐步增多,至72小     

稻幼胚的形成

稻台中籼试204号和高雄140号两品仲於开花盛期人工自花授粉,取授粉后4、8小时,与1、2、3、及5天的颖果,以二甲次砷酸盐缓冲液配制的2.5％戊二醛固定液中减压,4℃固定12小时。清洗后,1％四氧化锇固定1小时。然后以乙醇脱水,Spurr剂减压包埋。切成0.5μm半厚片及银色超薄片,以1％甲苯胺蓝或柠檬酸铅染包,分别以光显及电显观察。稻卵细胞的授精发生於授粉后4小时,已如另文所述。此等授精卵於授粉后8小时已形成二个细咆的幼胚(图1),一天时幼胚已具数十个细胞(图2),三天时幼胚为卵圆形且具有上千细胞(图3),五天时幼胚已分化成胚的雏形,即具胚盘,子叶,胚轴,胚芽鞘等(图4)。幼胚的细胞分裂,极为旺盛。此之为何三天龄的幼胚已具上千个细咆。分裂的幼胚细胞中,常见核膜破裂,其外围有为数众多的粒线体以及质体(图5)。进入有丝分裂早中期的幼胚细胞则可见细长的染色体,粗面内质网等(图6)。     

人早幼粒白血病细胞(HL—60)的表面超微结构及其在诱导分化过程中的变化

为了解HL—60细胞的表面形态特征以及它们在诱导分化过程中的变化,我们应用扫描电镜技术,结合超薄切片和组织化学方法,对HL—60细胞的表面形态进行了观察分析。 HL—60细胞常规培养,部分细胞以终浓度为10~(-6)M的维生素A酸处理。在指定时间内,收集对照组与给药组的HL—60细胞,2.5％戊二醛固定。经锇酸—单宁酸—锇酸处理后,梯度乙醇脱水,CO_2临界点干燥,真空喷金。在日立S—450扫描电镜下观察。透射电镜标本制备和糖原的组织化学反应(PAS)按常规进行。扫描电镜下,HL—60细胞最明显的表面形态特征是绝大多数细胞(约占90％)具有丝状伪足。这种丝状伪足     

凝集素—胶体金结合物在巨噬细胞中的内在化及外排

凝集素种类甚多,本实验将胶体金标记的刀豆素A(ConA)复合物注入小鼠腹腔中,经过不同时间间隔的体内孵育,观察腹腔巨噬细胞对刀豆素A—胶体金结合物(简写为CG-ConA)的内在化及外排过程。昆明种小鼠18只,随机分为A、B、C三组,每组6只。1％糖原2ml腹腔内注射刺激巨噬细胞增生。柠檬酸钠还原法制备胶体金溶液,测定ConA最适稳定量后进行标记。A组(标记组)动物给予腹腔注射CG-ConA 1ml。B组(未标记组)动物给予腹腔注射未标记的胶体金溶液1ml。两组动物均于5'、10'、20'、30'、1h、2h后收集腹腔巨噬细胞,2％戊二醛固定0.5～1h。收集C组(冷孵育组)动物     

睡莲(Nymphaea tetragona)叶部厚壁细胞内钙的定位

睡莲(Nymphaea tetragona)叶部厚壁细胞(1),将透过细胞化学法加以钙定位的研究,应用锇酸/焦锑酸钾(osmium tetroxide—potassium pyroantimonate,OTPA)与钙作用产生沉淀,再介著电子显微镜之观察,可成功地对于植物细胞内之钙加以定位(2)。不同发育时期之叶片切成小片之后,经过2.5％戊二醛/2％焦锑酸钾/0.1％单宁酸/0.1M磷酸缓冲液加以2小时的前固定后,再经1％锇酸/2％焦锑酸钾/0.1M磷酸缓行冲液的后固定,经过丙酮系列脱水后再包埋于Spurr胶中,超薄切片将直接观察,或经漂浮处理于50mM EGTA(pH7.9)或蒸馏水(pH 7.9),60℃,1 hr后再加以观察,部分切片则经由醋酸铀及柠檬酸铅双重染色,超薄切片以日立 TEM,H—600,75KV观察。     

小脑浦肯野细胞酶细胞化学的超高压电镜观察

本研究采用电镜酶细胞化学方法显示小脑浦肯野细胞酸性磷酸酶活性分布,在超高压电镜下进行了观察,探讨了线状溶酶体的存在。实验动物采用 wistar 成年健康大鼠,体重150克左右,乙醚麻醉,用30mM pipes 缓冲液(PH7.4,8％蔗糖)缓冲配制的2％PFA(多聚甲醛)和GLA(戊二醛)混合固定液进行心脏灌流10分钟,立即取小脑切1mm×2mm小块,于4℃继续浸泡固定1小时后,同种缓冲液洗净。用 microslicer(微组织切片机)作成40μm非冻结切片,置入 Gomori’s 改良法配制的孵育液中,37℃恒温振荡孵育40分钟。对照组去除底物,在孵育液中加入氟     

内分泌细胞的溶酶体与激素分泌调节—超微结构和细胞化学研究

溶酶体在内分泌细胞中的作用之一是参与激素分泌的调节。已知在蛋白类激素分泌细胞中,溶酶体通过crinophagy机制即与分泌颗粒融合进而消化降解它们,参与了激素分泌量的调节。但在类固醇激素分泌细胞中是否也存在类似的溶酶体调节机制,这方面的研究未见报道。我们选择下丘脑-垂体-性腺轴中的两种内分泌细胞-垂体促性腺激素细胞(分泌蛋白类激素)和睾丸间质细胞(分泌类固醇激素)为研究对象,用给动物(成熟雄性大鼠)注射雄激素制剂的方法,造成这两种细胞的分泌抑制状态,观察在此状态下这两种细胞的超微结构和细胞化学变化,特别是溶酶体和自体吞噬泡的形态数目。实验结果显示: 1.给药动物的睾丸间质细胞和垂体促性腺激素细胞中溶酶体的数目较未给药者增多;(表1) 2.给药动物的睾丸间质细胞中各种形态的自体吞噬泡数日较未给药者增多;(图1,2)     

维生素A类化合物诱导人早幼粒白血病细胞(HL—60)分化的超微结构研究

我们曾报道了维生素A酸(RA)及两种新RA衍生物维胺脂(RI)、维胺酸(RII)和二甲基亚砜(DMSO)对人早幼粒白血病细胞(HL—60)的NBT还原能力、细胞膜C_3补体受体的诱导作用以及对该细胞的生长抑制作用。本文应用透射电镜技术,研究了HL-60细胞在诱导分化过程中超微结构的变化,以期作为HL-60细胞分化的形态学标志。 HL-60细胞培养在含20％小牛血清和适量抗菌素的RPMI—1640培养液中,5％CO_2湿空气37℃悬浮培养。收集对数生长期细胞并以1.6×10~5/ml活细胞浓度接种。RA、RI、RII分别以乙醇配成10~(-3)M溶液,然后用培养液稀释到10~(-6)M,对照组加等容量的乙醇。在给药一定时间内,电镜取材,常规标本制备,超薄切片在日立H600-4型电镜下观察。     

大鼠急性铀中毒肾坏死及螯合剂治疗效果的超微结构研究

急性铀中毒主要表现为肾近曲管上皮细胞坏死,其主要急救手段是螯合剂促排治疗。我们以前利用大鼠进行光镜研究时看到,由于常用的螯合剂也是一种肾脏毒,因此只有在中毒极早期给药(H—73—10及DTPA)方可奏效,中毒1—3天后给药不但无益相反可以促进铀所引起的肾脏坏死。本文进一步利用电镜研究铀中毒肾坏死及中毒后不同时间使用螯合剂治疗的效果。材料和方法:共观察雄性大鼠22只,硝酸铀酰水溶液皮下注射1mgU/kg体重,中毒15分和2天后用H—73—10(0.5g/kg体重)腹腔注射治疗,每天一次连续5天。铀中毒后6小时、1天、7天处死,取肾皮层,戊二醛锇酸双固定,少数动物主动脉灌流固定,超薄切片,DXA4—10型透射电镜观察。     

鲇脑垂体的超微结构研究

观察了鲇(Silurus asous)脑垂体的超微结构.结果表明,性成熟鲇脑垂体结构呈背腹型,由神经垂体和腺垂体两部分组成.神经垂体存在A1、A2和B型神经分泌纤维,其终端与腺细胞、毛细血管和组织间隔形成直接或间接的联系.神经垂体组织存在两种类型的脑垂体细胞.腺垂体分布催乳激素分泌细胞、促肾上腺皮质激素分泌细胞、生长激素分泌细胞、促甲状腺素分泌细胞、促性腺激素分泌细胞、促黑色素激素分泌细胞、过碘酸反应细胞(PAS-反应细胞)等7种分泌细胞类型和一种非分泌细胞(星状细胞).本文对硬骨鱼类脑垂体的超微结构特点和腺细胞类型作了讨论.     

孕期微量染镉对雄性胎鼠性腺分化发育影响的研究

目的：探讨孕期微量染镉对胎鼠睾丸分化发育的影响及作用机制。方法：SD孕鼠16只,随机分为镉组（A组）、己烯雌酚组（B组）、镉加他莫静酚组（C组）和正常对照组（D组）,每组4只。A组于孕期第9、11、13天腹腔注射氯化镉1．5H影（kg．d）,B组于妊娠第9至17天皮下注射已烯雌酚10％g／（kg．d）,C组注射氯化镉的同时给予雌激素受体拮抗剂他莫昔酚50mg／（kg．d）,D组注射与镉等体积生理盐水。妊娠第18天,削商产取雄性胎鼠睾丸作光、电镜观察;免疫组化测定各组胎鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）表达水平;RT—PCR法测定曲勒氏管抑制物（MIS）表达量。结果：光镜下A组和B组睾丸生精小管内支持细胞排列紊乱,间质成分增生,C组未见明显的形态学改变;电镜下A组和B组均可见支持细胞、生殖母细胞及间质细胞线粒体肿胀、内质网扩张以及间质细胞内脂滴堆积,C组超微结构退变轻于A组和B组;A组和B组间质细胞中StAR阳性产物表达均显著低于D组（P〈0．01）,C组StAR阳性产物表达虽低于D组,其差异没有统计学意义（P〉0．05）,但却明明显高于A组（P〈0．05）;各组间MIS表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：孕期微量镉暴露可影响雄性胎鼠性腺的分化与发育,且镉具有雌激素样作用．     

山莨菪碱对缺氧心肌超微结构改变的影响

近时有人报告,654—2能保护休克大鼠胰腺细胞的溶酶体膜,我们设想它可能对缺氧心肌细胞也有保护作用,据此观察了其对缺氧离体大鼠心肌超微结构改变的影响。取体重200—300克Wistar大鼠,对照组(n=17)和实验组(n=17)分别于麻醉和肝素化后取心脏施