抗幽门螺杆菌卵黄抗体的制备及其效价的评定

本论文研究了抗幽门螺杆菌蛋黄抗体(IgY—HP)的制备方法。以HP超声粉碎上清和HP尿素酶混合抗原物免疫鸡蛋，从蛋黄中提取纯化得到了很高纯度的IgY—HP。ELISA实验表明，IgY—HP的抗HP效价和一般IgY相比提高了32倍。其可以应用于食品保健或各种HP相关胃病的抗菌免疫治疗中。     

鸡卵黄免疫球蛋白的糖基化及其构效关系研究进展

鸡卵黄免疫球蛋白（egg yolk immunoglobulin,IgY）是鸡卵黄中的一种免疫球蛋白。由于其具有原料易得、制备简单、不与类风湿因子以及哺乳动物的补体发生交叉反应等优点,IgY是一种颇具潜力的抗生素替代品,但由于IgY性质不稳定,易受温度、pH值、酶的影响,从而限制了其实际应用。糖链在维持IgY理化性质、抗原特性等功能中扮演着重要角色。因此,对IgY进行糖基化修饰,从而改善其理化性质和抗原特性,不仅能使鸡蛋资源得到充分利用,也为开发蛋黄保健食品、添加剂以及相应的医药产品提供科学依据。本文归纳几种常见的IgY的糖基化方法,并论述IgY糖基化与其结构、理化性质之间的关系。     

免疫蛋黄抗体的研究进展

用特殊抗原免疫母鸡,并从免疫蛋中获取特异性抗体(IgY)已受到人们的关注。文章重点介绍了免疫蛋抗体IgY的理化性质和制备方法,并结合食源性疾病诊断与治疗以及我国食品工业发展的趋势,对IgY的应用前景进行了论述。     

鸡卵黄免疫球蛋白作为食品添加剂和抗体食品的应用

鸡卵黄免疫球蛋白IgY(Egg Yolk Immunoglobulin)是一种与哺乳动物IgG结构类似,具有较强免疫特性的功能蛋白.口服IgY可使机体获得被动免疫,抑制有害细菌或病毒对人体的侵害,增强机体的免疫力,因此IgY可作为食品添加剂或直接以具有免疫特性的卵黄制成抗体食品,达到防治疾病,保护健康的目的.     

防治"非典"人人有责

今年春天，“非典”成为使用频率最高的词汇。“非典”是对我们每个人健康和意志的考验，越是在突发的严峻时刻，越是能够考验和彰显人们的精神和素质。“非典”病毒并不可怕，可怕的是缺乏科学的精神和认真负责的态度。为此，本刊特发专栏提示广大读以及你们的家属，养成良好的卫生习惯和科学的生活方式，以抵抗“非典”病毒的攻击，确保身心健康。防治“非典”事关国家大局。我们坚信，在党和政府的领导下，只要万众一心，众志成城，防治“非典”一定能够取得全胜。     

不同鸡蛋中鸡卵黄免疫球蛋白的比较

采用PEG分步沉淀法分别从京红一号鸡蛋、市售鸡蛋、土鸡蛋中制备鸡卵黄免疫球蛋白(IgY).通过SDS-PAGE分析提取物,发现存在2条主要的蛋白带:分别为66.4kDa和29.0kDa,与文献报道的IgY重链(～ 60kDa)和轻链(～ 30kDa)的分子量相符.     

表面等离子体共振技术分析卵黄抗体对酪氨酸酶与底物相互作用的影响

目的：采用表面等离子体共振技术（surface plasmon resonance,SPR）测定酪氨酸酶与特异性卵黄抗体（IgY）及其与底物L-多巴的亲和力,探讨特异性IgY对酪氨酸酶与底物亲和力的影响。方法：将裸金芯片进行自组装修饰,以3-巯基丙酸作为基底膜对酪氨酸酶进行固定,SPR实时监测特异性IgY及底物L-多巴与酪氨酸酶结合后芯片表面的响应信号变化。将数据导入CLAMP分析软件,进行拟合分析,确定动力学常数。结果：酪氨酸酶与特异性IgY的结合常数（4.50×106?L/mol）明显高于其与底物L-多巴的结合常数（4.95×103?L/mol）,且酪氨酸酶与特异性IgY结合后,其与底物L-多巴结合常数明显下降。结论：相比底物L-多巴,酪氨酸酶更易与特异性IgY结合,而且从结合动力学角度说明特异性IgY可以明显抑制酪氨酸酶与底物结合从而抑制酶活性。     

检测食品中志贺氏菌的双抗夹心ELISA方法的研究

研究获得纯化抗志贺氏菌IgY,经检测10mg/mL纯化抗志贺氏菌IgY的效价为1∶320;以志贺氏菌免疫新西兰大耳白兔,获得抗志贺氏菌的兔抗体,效价可达1∶12800。以此两种抗体建立双抗夹心ELISA,正交试验分析表明,兔抗体包被条件为4℃过夜,采用不封闭,抗原与包被抗体结合条件为37℃、1h;加入检测抗体(IgY)的浓度为0.25mg/mL,其结合条件为37℃、1h。该方法对纯培养菌液检出限为105cfu/mL,具有良好的敏感性;10株其他菌株的检测结果表明,该方法只与志贺氏菌发生特异性反应,不与其他菌株的抗原发生交叉反应。染菌的食品样品经选择性增菌后进行双抗夹心ELISA检测,含0.1～1cfu/mL志贺氏菌的样品在增菌13h后可检出阳性反应,含1～10cfu/mL志贺氏菌的样品在增菌11h后可检出阳性反应。     

抗副溶血弧菌IgY的制备及活性检测

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemololyticus,Vp)是我国微生物食源性疾病的主要病因,且是海水养殖业中的常见病原菌,造成巨大的经济损失。本研究制备副溶血弧菌免疫原,并以5×107、5×108CFU/ml两种剂量分别免疫母鸡,获得特异性的抗副溶血弧菌IgY;并建立ELISA方法检测免疫鸡蛋中的抗体效价,高剂量免疫组的抗体效价可达1:57600,低剂量免疫组的抗体效价达1:28800;低剂量组抗体效价可维持250d,高剂量组抗体效价可维持300d以上。     

卯黄抗体冻干粉除菌技术的研究

卵黄抗体(Immunoglobulin of yolk,IgY)是禽类经过特定抗原刺激产生的特异性免疫球蛋白,在生产过程中不能采用高温灭菌.为获得优质的IgY,利用微生物技术分析IgY冻干粉中的微生物,反复冻融和抗菌肽处理,ELISA技术测定IgY效价,抑菌圈法、试管二倍稀释法和琼脂平板计数法测定抗菌肽对IgY冻干粉残...     

卵黄抗体咀嚼片配方优化及生物稳定性研究

以卵黄抗体(immunoglobulin of yolk,IgY)、脱脂奶粉和硬脂酸镁等为原辅料混合直接压制成卵黄抗体咀嚼片。以硬度和感官评分为指标,通过单因素和正交试验确定IgY咀嚼片压制配方;体外探讨不同温度、pH、胃蛋白酶和胰蛋白酶处理对咀嚼片中IgY效价的影响并模拟胃肠道消化;通过灌喂小鼠,探究IgY咀嚼片的体内消化代谢。IgY咀嚼片最佳配方为脱脂奶粉45%、硬脂酸镁1.9%、矫味剂45%、微晶纤维素6.1%。IgY咀嚼片在60℃温度处理1 h,IgY咀嚼片抗体效价为阴性。在pH 4～8之间IgY咀嚼片效价稳定;在pH 1.2条件下处理3 h,抗体失活率53.63%;胃蛋白酶消化2 h,抗体失活率19%;胰蛋白酶消化3 h,抗体失活率91.03%。体外模拟胃肠道消化5 h,IgY咀嚼片无抗体活性。小鼠体内消化代谢高中剂量组,灌喂0.5～1 h,在胃、十二指肠内检测抗体效价阳性;灌喂3 h,在空肠中检测抗体效价阳性;灌喂6 h,在回肠中检测抗体效价阳性;灌喂12 h,在消化道内均检测抗体效价阴性。IgY咀嚼片适口性好,可以在消化道内保存一定的生物稳定性,为IgY的使用提供了新的思...     

特异性抗肠出血性大肠杆菌O157:H7内毒素鸡卵黄抗体的制备

目的:比较研究LPS和O-SP的免疫原性,制备出特异性抗内毒素(LPS)鸡卵黄免疫球蛋白(eggyolkimmunoglobulin,IgY),用于对E.coliO157:H7的免疫预防及检测。方法:分别用灭活E.coliO157:H7菌体、不同浓度内毒素(LPS)及O-特异性多糖链(O-SP)与不完全弗氏佐剂充分乳化后作抗原免疫临产蛋母鸡,以水稀释法从卵黄中提取抗体,阴离子交换色谱法实现对抗体的纯化,间接ELISA及双向免疫扩散检测抗体产生效价与活性。结果与结论:所制内毒素(LPS)和O-SP均有较好的免疫原性,刺激鸡体后可产生高效价抗体,灭活菌体、600μg/mlLPS、1200μg/mlLPS、2000μg/mlLPS、O-SP抗体产生效价最高可分别达1:32000、1:28000、1:32000、1:12000、1:40000。结合离子交换色谱,用0.185mol/L的离子强度可实现一步洗脱纯化抗体,制备出高纯度、高活性、特异性强的鸡卵黄免疫球蛋白IgY,为大肠杆菌O157:H7的感染防治提供了可靠的保证,在此实验基础之上可进一步探讨应用特异性IgY对大肠杆菌O157:H7的检测。     

一种新型的食品添加剂——鸡卵黄免疫球蛋白

当用某种抗原免疫产蛋母鸡时，鸡可产生相应的多克隆抗体─—免疫球蛋白，并被运送和储存于鸡卵的卵黄中，此种免疫球蛋白称为IgY（ImmumoglobulinofYolk）。一只母鸡一经免疫应答后，即可从其不断生产的鸡卵的卵黄中获得大量的、均一的、高效价的IgY，而且lgY有许多独到的优点，具有许多潜在的应用价值，可代替由免疫小鼠、兔等哺乳动物制备的抗体。因而近年来，国外对IgY的研究应用十分活跃，特别是将IgY作为食品的免疫型强化剂的应用研究正在不断开展，前景非常广阔。一、IgY的特点：1．IgY类似于哺乳动物的igY.分子量为180lH＞，…     

盐析法提取卵黄免疫球蛋白的研究

为了确定盐析法提取特异性卵黄免疫球蛋白的最佳盐浓度，采用SDS—PAGE鉴定IgY的纯度，用RID测定IgY含量，间接ELISA法检测特异性卵黄抗体的活性。结果表明：用饱和度50％的硫酸铵盐析一次，再用140g／L的硫酸钠溶液盐析，可以获得469，6的回收率和77％的纯度。盐析液经超滤膜包超滤后制得的冷冻干燥制品，保持了完整的抗体结构和良好的抗体活性。这一结果为IgY的进一步分离纯化奠定了基础。     

博采

我国率先掌握食品中SARS病毒检测技术　　一种检测食品、动植物及其产品中是否存在“非典”病毒的方法 5月 8日在京通过专家鉴定。这项技术是国际首创 ,填补了国内外食品、动植物及其产品“非典”病毒检测领域的空白。这项技术是由国家质检总局中国进出口商品检验技术研究所自主设计开发并自行实验完成的 ,从提出课题到研究完毕仅用了 18天时间。根据质检部门的大量检测 ,目前尚未发现任何国内食品、动植物及其产品中存有“非典”病毒 ,世界卫生组织也宣布 ,目前还没有流行病学资料显示来自“非典”感染地区的货物、产品或动物会成为人类…     

如何做好传染病流行期间的军需保障工作

传染病是由各种病原微生物(如病毒、衣原体、支原体、细菌、螺旋体和真菌等)感染体所引起的具有传染性的疾病。它具有流行速度快、传播途径简单多样被传染范围广和预防难度大等特点。2002年11月份在我国广东佛山发现了首例“非典型”肺炎患者，其后病毒迅速向内地传播，并一度在我国大部分地区流行，给人民的日常生活和生命安全带来了巨大威胁，同时也对军队的军需保障工作提出了新的挑战。虽然，目前非典病毒得到有效控制，但如何做好传染病流行期间的军需保障工作，这即使军需工作人员平时所需要具备的知识，也是战时不可回避的现实。本文就这一问题，发表一下自己的粗浅见解，与广大军需工作者商酌。     

3种特异性IgY与IgG相对亲和力特性的比较研究

采用硫氰酸铵和尿素洗脱ELISA法两种方法,分别对牛β-酪蛋白、κ-酪蛋白和大肠杆菌O157:H7与对应抗原的卵黄抗体(IgY)与免疫球蛋白(IgG)抗体相对亲和力特性进行比较研究。结果表明：3种特异性IgY与抗原的相对亲和力比IgG要高,对蛋白抗原,两种抗体的相对亲和力相差不大,而对大肠杆菌O157:H7,两种抗体的差别明显加大,IgY的相对亲和力较IgG强。两类乳源蛋白抗体亲和力比较,发现κ-酪蛋白抗体与抗原的亲和力高于β-酪蛋白抗体,前者用于乳品免疫检测中,可提高方法灵敏度。     

双抗夹心ELISA检测食品中大肠杆菌O157:H7方法研究

研究获得纯化抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体,经检测10mg/ml纯化IgY抗体的效价为1:320;以大肠杆菌O157:H7免疫新西兰大耳白兔,获得兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体,效价达1:25600。以兔抗大肠杆菌O157:H7IgG抗体稀释3200倍作为捕获抗体,抗大肠杆菌O157:H7IgY抗体为检测抗体建立双抗夹心ELISA方法检测大肠杆菌O157:H7,正交试验分析表明,捕获抗体于37℃包被2h、不封闭、抗原与捕获抗体于37℃结合2h、检测抗体浓度为0.25mg/ml、与抗原于37℃结合1h为最优反应条件。该方法对纯培养菌液检出限为105CFU/ml,具有良好的敏感性及特异性。染菌样品经在EC增菌液中选择性培养后进行双抗夹心ELISA检测,接种量为0.1～1CFU/g(ml)的样品在培养12h后可检出阳性反应,1～10CFU/g(ml)的样品在培养8h后可检出阳性反应。     

饮食中的误区

生吃鸡蛋：生鸡蛋内含有“抗生素蛋白”和“抗胰蛋白酶”，前者能影响人体的吸收利用，后者能破坏人体的消化功能，所以鸡蛋应煮熟吃。豆浆冲鸡蛋：鸡蛋中的粘液性蛋白和豆浆中的胰蛋白酶结合后，会形成一种不易被人体吸收的蛋白物质，故豆浆不宜冲鸡蛋吃。茶蛋：茶蛋对人...     

3种天然提取物对胰脂肪酶卵黄抗体的增效作用

胰脂肪酶卵黄抗体(Egg yolk immunoglobulin,IgY)可通过与胰脂肪酶特异性结合从而抑制胰脂肪酶活性,考察单因素茶多酚、决明子提取物、荷叶生物碱提取物对胰脂肪酶IgY的作用,结果表明,3种提取物均能增强胰脂肪酶IgY对胰脂肪酶的抑制作用,且增强效果随3种提取物浓度的升高而增强。采用二次正交旋转组合设计研究3种物质混合后对IgY作用效果,结果表明,3种物质对IgY作用效果的影响大小依次为茶多酚荷叶生物碱提取物决明子提取物,当茶多酚、决明子提取物、荷叶生物碱提取物浓度分别为1.6、1.2、2.05 mg/m L时,能对IgY产生最佳作用效果,此时胰脂肪酶抑制率68.6%,且茶多酚与荷叶生物碱提取物之间存在协同交互作用。