金黄色葡萄球菌拮抗菌株的筛选及鉴定

从甘肃中部干旱生境土壤中分离筛选到一株对食源性致病菌金黄色葡萄球菌具有抑制作用的拮抗菌,对其发酵液抑菌最低浓度稀释梯度及抑菌谱进行了测定,并通过形态学、生理生化及16S rDNA分子生物学方法鉴定了其种属.结果表明,该金黄色葡萄球菌拮抗菌株还对大肠杆菌、植物酸杆菌和表皮葡萄球菌具有抑制作用,其发酵液对金黄色葡萄球菌抑菌最低浓度稀释梯度为10-6,经鉴定,该拮抗菌为产碱杆菌属菌株Alcaligenes sp..     

均匀设计优化生物防腐发酵工艺

利用2株有抑菌作用的乳酸菌(植物乳杆菌L3026、发酵乳杆菌L9235)和1株具促抑菌作用的酿酒酵母737Z共同发酵得到具生物防腐作用的共生发酵复合谷物。以生物防腐效果为指标，在单因素试验的基础上经均匀设计优化生物防腐发酵工艺。结果表明：在发酵温度33℃、发酵时间12 h、接种量15 mL/100 g、菌种体积比(乳酸菌∶酵母菌)5∶1时，制得的共生发酵复合谷物能有效抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌在其中的生长；微生物挑战试验中，4 h后已不再能检出大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，基本实现生物防腐。     

北冰洋来源白色念珠菌拮抗菌株的分离与鉴定

采用涂布平板法、对峙培养法及琼脂扩散法从北冰洋沉积物样品中分离、筛选对白色念珠菌（Canidia albicans）具有良好拮抗作用的菌株,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并对其抑菌谱进行研究。结果表明,从北冰洋沉积物样品中共分离纯化出314株菌株,其中,4株菌株对白色念珠菌具有明显拮抗作用,且菌株56#拮抗效果最好,抑菌圈直径为（32.14±0.72） mm。菌株56#被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,其对大肠杆菌、副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、鼠伤寒沙门氏菌、肺炎克雷伯氏菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌都有一定的抑制作用,是一株广谱抗菌的海洋微生物。     

荸荠表面拮抗细菌的分离鉴定及其表面抑菌活性

为探究荸荠表面泥土中拮抗微生物的作用,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作为筛选测试菌株,对泥土中的拮抗细菌进行分离,采用菌体形态、生理生化特征及16S rDNA基因序列分析对筛选菌株进行鉴定,并考察其发酵滤液对荸荠表面微生物的影响。结果表明,从带泥荸荠表面泥土中分离出2株拮抗细菌WB22、WB39,经鉴定其分别为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和弯曲假单胞菌(Pseudomonas geniculata)。2株细菌发酵滤液对荸荠表面的细菌、酵母菌和霉菌数均有一定的抑制作用。其中,B.amyloliquefaciens对细菌、酵母菌、霉菌的抑菌率分别为17.42%、9.05%和13.74%,且对球菌的抑制作用强于杆菌,对G+菌的抑制作用强于G-菌。而P.geniculata对细菌、酵母菌、霉菌的抑菌率分别为20.29%、4.64%和16.14%,对球菌和杆菌、G+菌和G-菌均具有较强的抑制作用。本研究为今后荸荠生物贮藏保鲜技术的开发提供一定的理论依据。     

海洋微生物的抑菌谱研究

本实验研究13种来源于海洋沉积物的海洋微生物对9种致病菌(大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,白色念珠菌,弧菌,铜绿假单胞菌,沙门氏菌,肺炎克雷伯菌,屎肠球菌,鲍曼不动杆菌)的抑菌谱,并对效果最好的64号菌株进行鉴定,确定其为芽孢杆菌。     

鼠李糖乳杆菌的培养上清液对几个致病菌和腐败菌的抑菌作用研究

研究了Lactobacillus rhamnosus6013菌在MRS中的最佳培养条件，再用琼脂杯扩散法研究该条件下的培养上清液对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌和EHEC0157的抑菌作用，发现该菌的最佳培养条件为37℃，厌氧培养48h，该培养上清液对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、沙门氏菌有良好的抑菌作用。通过HPLC分析得知，乳酸含量高达4．38g/100mL，该浓度的乳酸溶液对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌效果。抑菌效果受1mol／L的NaOH溶液，胰蛋白酶，胃蛋白酶处理的影响，表明发酵上清液的抑菌效果可能是乳酸和蛋白质类物质的综合作用。     

湖光岩水域细菌的纤维素降解活性及抑菌活性的研究

从湖光岩水体和底泥分离出的异养细菌中选出了20株细菌,通过刚果红染色筛选和摇瓶发酵筛得到了9株具有纤维素酶活性的菌;金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的抑菌试验表明有10株菌对金黄色葡萄球菌有抑制作用,对枯草芽孢杆菌和大肠杆菌均无抑制作用。     

肉桂酸钾的抑菌性能研究

采用生长速率法和细胞死活染色鉴别法评价肉桂酸钾对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、芽孢杆菌和酿酒酵母的生长抑制作用,并测定其最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。通过检测细胞膜完整性和膜电位研究肉桂酸钾对4种微生物的抑菌机制。结果显示,肉桂酸钾对4种菌的生长表现出不同程度的抑制作用,其中对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为5mg/m L,对芽孢杆菌的MIC为10 mg/mL,对酿酒酵母的MIC为250μg/m L。经肉桂酸钾处理的微生物细胞膜的完整性受到破坏,膜电位降低,从而影响了微生物的正常生长和繁殖。研究表明,肉桂酸钾具有广谱的抑菌能力,其在食品防腐领域具有重要的应用潜力。     

ε-聚赖氨酸抑菌性能研究

分别采用分光光度法、菌体量法以及孔扩散法研究了ε-聚赖氨酸对细菌和真菌的抑菌活性及ε-聚赖氨酸浓度、pH值和温度对其抑菌活性的影响。结果表明,ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黄曲霉、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、保加利亚乳杆菌等6种供试微生物均有一定的抑制作用,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、保加利亚乳杆菌抑制效果较好,对黄曲霉较差;对各种菌的最小抑菌浓度(MIC)为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、保加利亚乳杆菌12.5 mg/L;枯草芽孢杆菌25 mg/L;酿酒酵母800 mg/L;黄曲霉1 600 mg/L。ε-聚赖氨酸的抑菌活性随其浓度的增加而增强,热稳定性非常好,能耐100℃的高温,在pH5～8抑菌活性最强,与甘氨酸、Nisin都有协同增效的作用。     

一株安徽传统酸奶中产抑菌物质的乳酸菌的筛选与鉴定

目的从安徽传统发酵酸奶中筛选出一株具有抑菌活性的乳酸菌(编号为SN-5)。方法通过菌落形态观察、染色镜检、生理生化和分子生物学实验进行鉴定分析,利用牛津杯法进行抑菌实验。结果通过实验排除乳酸、乙酸和过氧化氢干扰后,L.delbrueckii ssp.bulgaricus SN-5的无细胞发酵上清液(cell-free fermentation supernatant,CFS)对大肠杆菌(ATCC8099)和金黄色葡萄球菌(ATCC6538)仍具有抑制作用,且经胰蛋白酶、胃蛋白酶和胃蛋白酶K处理后抑菌作用下降明显,说明L. delbrueckii ssp. bulgaricus SN-5所产主要抑菌物质为蛋白类物质。结论 L. delbrueckii ssp. bulgaricus SN-5可作为食品运输和贮藏过程中控制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的拮抗制剂出发菌株,为新型生物防腐剂的开发奠定了一定的理论基础。     

东北泡菜中抑菌微生物的分离筛选及鉴定

实验的目的是分离延边泡菜中具有抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的微生物。采用稀释涂布的方法分离泡菜中微生物,挑选110株拟似乳酸菌的菌落,采用管碟法筛选具有抑菌能力的乳酸菌,通过菌落的培养特征、革兰氏染色实验和过氧化氢酶反应实验、生理生化(糖发酵实验)及16S rRNA基因鉴定,结果为62株抑制金黄色葡萄球菌的乳酸菌中11株为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum;51株为Lactobacillus acidophilus。91株抑制大肠杆菌的乳酸菌中72株为植物乳杆菌Lactobacillus plantarum;19株为Lactobacillus brevis。表明东北泡菜中乳酸菌具有抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的作用。     

酵素源乳酸菌的益生功能及抑菌特性评价

为筛选到发酵性能稳定且高效的功能性菌株,以韶关紫背桃源生产的酵素中分离出的12株乳酸菌为试验菌株,测定其益生特性。分别对12株乳酸菌进行了自聚集性、耐酸性,以及对胆盐、胃蛋白酶、胰蛋白酶与抗生素的耐受性和对肠道致病菌的拮抗作用实验,结果表明：12株受试乳酸菌均表现出良好的自聚集性;除XZJ07外,其他11株菌株在pH值为2.5的模拟胃液中培养3 h存活率仍达75%以上;在人工模拟胃液以及肠液中对胃蛋白酶和胰蛋白酶孵育2、3 h存活率仍超过75%;在含有胆盐浓度为3 g/L MRS培养基中培养3 h后,活菌数仍达106 CFU/mL,另外,受试菌株对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌均有一定的抑制作用,对大肠杆菌抑菌圈直径均大于15 mm,对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径均大于17 mm;受试菌株对氨苄青霉素敏感,对四环素、红霉素、土霉素较为耐受。研究结果预示着受试菌株具有作为优质益生性发酵剂的潜在能力。     

产蛋白酶海洋微生物的筛选鉴定及发酵

从秦皇岛附近海域水样中筛选出了1株蛋白酶生产菌,并对其发酵条件进行了初步研究.经16S rDNA鉴定此菌株属假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.),所产蛋白酶为中性蛋白酶.液体培养基为人工海水,蛋白胨10.0g/L,酵母浸粉5.0g/L,葡萄糖5.0g/L,硝酸铵1.0g/L,无水氯化钙1.0g/L,在33℃,初始pH值6.0,50mL装液量,200r/min条件下发酵,发酵液酶活可达1140 U/mL.     

姜黄油抑菌作用的研究

就姜黄油对几种常见细菌、霉菌抑菌效果进行了研究.结果表明：姜黄油对几种菌有明显的抑制作用.其中对金黄色葡萄球菌最强,MIC=1.25%,抑菌圈直径为17.5mm,对大肠杆菌的抑制作用较弱,MIC=5%,抑菌圈直径为10mm.     

重组人汗腺抗菌素蛋白的异源可溶表达、发酵优化及分离纯化研究

目的:实现人汗腺抗菌素（Dermcidins,DCD-1L）的原核异源可溶表达,并进行纯化及活性分析。方法:首先检索NCBI确定人DCD-1L的序列,构建载体并转化E. coli ER2566,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达后,进行SDS-PAGE电泳进行鉴定。其次,通过单因素实验,对不同温度、转速和补料速度等发酵条件进行研究与优化,根据DCD-1L蛋白特性优化蛋白纯化工艺。最后采用质谱和牛津杯法对纯化的蛋白进行分子量和抗菌活性鉴定。结果:经SDS-PAGE凝胶检测,在上清中分子量处检测到条带,证明采用原核表达系统可实现人DCD-1L的可溶表达;通过单因素实验获得最佳DCD-1L的发酵条件为:37 ℃培养,转速400 r/min,开启蠕动泵以50 mL/30 min补料速度自动加入发酵罐中;研究还建立了包括超滤、Q柱洗脱和分子筛在内的一整套优化的蛋白纯化工艺,获得的产品纯度大于96%,总回收率18.4%;最后,通过牛津杯法检测,纯化的重组人DCD-1L在浓度为50 μg/mL时,对表皮葡萄球菌这类革兰氏阳性菌较大肠杆菌具有更明显的抑菌活性。结论:本研究对重组人DCD-1L蛋白实现了原核可溶表达,并建立了稳定可靠的发酵、纯化工艺,并进行了初步的抗菌活性鉴定,为后续重组人DCD-1L蛋白的应用研究奠定了基础。     

响应面法优化Chlamydomonas sp.212产胞内多糖发酵工艺及其抑菌活性

通过响应面法优化淡水微藻Chlamydomonas sp.212产胞内多糖的发酵工艺,并采用滤纸片法对其抑菌活性进行研究。经优化后,Chlamydomonas sp.212产胞内多糖发酵工艺的最优参数为Na NO3质量浓度305.01 mg/L、NaCl质量浓度93.66 mg/L、NaHCO_3质量浓度2.12 g/L;在此条件下,其胞内多糖产量为91.182 3 mg/L,比优化前提高了1.6倍。抑菌活性研究结果表明:Chlamydomonas sp.212的胞内多糖对细菌有一定程度的抑制作用,其中对沙门氏菌的抑菌作用最强,对大肠杆菌、白色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱;对真菌的抑制作用较弱,仅对黑曲霉有较弱的抑制作用。本研究为筛选新的天然抗菌活性物质及产油微藻的综合开发利用提供了一定的理论依据。     

暗纹东方鲀鱼精蛋白的纯化及抑菌活性研究

采用葡聚糖凝胶(Sephadex G-50)层析和羧甲基琼脂糖凝胶FF(CM Sepharose Fast Flow)离子交换层析对暗纹东方鲀鱼精蛋白进行纯化,利用精氨酸显色反应鉴定鱼精蛋白,并测定了鱼精蛋白对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度、抑菌圈直径和生长曲线的影响。结果表明,暗纹东方鲀鱼精蛋白在217,273nm处各有1个吸收峰且217nm处的吸收峰较高,经SDS-PAGE电泳发现纯化后的鱼精蛋白白条带较纯化前的细且无拖尾现象;暗纹东方鲀鱼精蛋白对革兰氏阴性菌(沙门氏菌和大肠杆菌)和革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)均具有抑制作用,可以延缓菌种的生长,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度分别为500,1 000,1 000mg/L。     

重组大肠杆菌产青霉素酰化酶的发酵动力学研究

对产青霉素酰化酶重组大肠杆菌M3进行分批发酵动力学研究。根据Logistic和Luedeking-Piret方程,拟合出重组大肠杆菌M3分批发酵过程中菌体生长、青霉素酰化酶合成、基质消耗的动力学模型及模型参数。结果表明,重组大肠杆菌M3产青霉素酰化酶的发酵动态过程能很好的被该模型所表达。     

高产红曲色素红曲霉菌株的筛选及抑菌试验的研究

用麦芽汁分离培养基从红曲中分离到1株产红曲色素较高的红曲霉S8.研究了S8发酵培养时间对红曲色素及干重的影响,结果表明,当培养时间为72h时,红曲色素及干重均达到最大,分别为158U/mL、0.6657g/L.同时还研究了发酵上清液的抑菌性,结果表明其上清液对指示菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、短小杆菌、枯草芽孢杆菌)均有较强的抑菌活性.