柠檬酸与胃蛋白酶协同水解牛骨粉的工艺优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺;采用对比和正交实验相结合的设计方案,用柠檬酸与胃蛋白酶协同水解牛骨粉,以水解度、钙溶出率为特征性指标,三氯乙酸中可溶性氮含量评定水解效果。结果表明:牛骨在121℃,0.14MPa条件下,蒸煮120min全部松软,蛋白质暴露面积增加,有利于其水解;用柠檬酸水解牛骨粉,水解度与钙溶出率呈极显著相关性(P<0.01);柠檬酸与胃蛋白酶协同水解牛骨粉的最佳条件:柠檬酸浓度0.5mol/L、酶与底物蛋白量比(E/S)为500U/g、底物浓度11%、反应时间为6h,水解度与钙溶出率分别达33.7%和11.2%;三氯乙酸中可溶性氮含量达到97.2%,表明大部分产物为低分子肽类,溶解性高。      

Flavourzyme蛋白酶酶解牛骨制备低聚肽的处理条件研究

采用酶法可有效地将骨中蛋白质水解成低分子肽,提高其营养价值和功能特性。实验采用酶制剂Flavourzyme蛋白酶对牛骨粉进行水解,测定水解率和氮溶出率,确定了水解最佳处理条件。结果表明,牛骨粉经121℃,30min的加热预处理显著提高水解度和氮溶出率。风味酶在pH7.0、温度50℃、底物浓度9%、酶量与底物蛋白量之比为50LAPU/g的条件下,水解5h,水解产物的水解度和氮溶出率分别为20.6%和95.5%,且水解产物在不同pH条件下氮溶解指数均达90%左右,三氯乙酸氮溶解指数为90.1%,可见,采用风味酶水解牛骨粉,其酶解产物绝大部分为小分子肽且具有高的溶解性,可直接作为营养强化剂应用于食品中。      

Flavourzyme蛋白酶酶解牛骨制备低聚肽的处理条件研究

采用酶法可有效地将骨中蛋白质水解成低分子肽,提高其营养价值和功能特性。实验采用酶制剂Flavourzyme蛋白酶对牛骨粉进行水解,测定水解率和氮溶出率,确定了水解最佳处理条件。结果表明,牛骨粉经121℃,30min的加热预处理显著提高水解度和氮溶出率。风味酶在pH7.0、温度50℃、底物浓度9%、酶量与底物蛋白量之比为50LAPU/g的条件下,水解5h,水解产物的水解度和氮溶出率分别为20.6%和95.5%,且水解产物在不同pH条件下氮溶解指数均达90%左右,三氯乙酸氮溶解指数为90.1%,可见,采用风味酶水解牛骨粉,其酶解产物绝大部分为小分子肽且具有高的溶解性,可直接作为营养强化剂应用于食品中。     

酶解罗非鱼鱼骨粉制备可溶性钙的工艺研究

采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶酶解罗非鱼鱼骨粉,以酶解液中可溶性钙含量、水解度和氮收率为特征性指标,利用L16(54)正交实验设计优化水解鱼骨粉的工艺条件。结果表明:采用胃蛋白酶水解鱼骨粉,效果优于其它三种酶;胃蛋白酶水解鱼骨粉的最佳条件是:pH2.0、料液比1∶3、酶用量0.3%、时间5h、温度37℃;所得酶解液中钙含量为23.68g/L,水解度和氮收率分别达14.07%和56.35%,可溶性氮含量达97.43%,Fe、Zn、Mg、P的含量分别为0.36、3.84、716.67mg/L和10.89g/L。      

两种乳杆菌协同发酵牛骨粉促钙转化的工艺研究

以牛骨为钙源,利用嗜酸乳杆菌与鼠李糖乳杆菌的共生作用发酵牛骨粉,提高骨钙转化率。采用单因素试验确定两种益生菌协同发酵牛骨粉的最适比例、发酵时间、骨粉浓度、葡萄糖添加量。采用响应面试验设计,以钙转化率为特征性指标,优化两种益生菌协同发酵牛骨粉的工艺条件。结果表明：两种益生菌具有共生作用,均能将牛骨粉中结合态的钙转变为游离态。发酵时间与骨粉浓度是影响钙转化率的主要因素。两种益生菌协同发酵牛骨粉的最适发酵条件为菌种比例4.67:1(m/m)、发酵时间69.96h、骨粉浓度4.45%、葡萄糖添加量12.26%,钙转化率达32.21%。     

双酶分步水解牛骨蛋白工艺的优化

以新鲜牛骨为原料,探讨牛骨粉的制备工艺。选用枯草杆菌中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白,以水解度为特征性指标,采用L9(34)正交试验设计优化双酶水解牛骨粉的工艺条件。结果表明：牛骨粉蛋白质含量高达30.72%,约为鲜骨蛋白质含量的3倍;采用胰蛋白酶先水解,中性蛋白酶后水解的方式分步水解牛骨蛋白,其效果优于两种酶同时水解及中性蛋白酶先水解,胰蛋白酶后水解;中性蛋白酶与胰蛋白酶分步水解牛骨蛋白的最佳工艺条件：固液比1:2,起始pH8.0,胰蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃、150r/min振荡水解3h,然后用中性蛋白酶2000U/g蛋白质于45℃以150r/min振荡水解3h,水解度达18.34%;粒径小的活性炭对酶解液脱苦、脱色及除腥效果优于粒径大的活性炭。     

牛骨粉对挂面品质的影响研究

以特制一等粉和牛骨粉为原料,进行和面、熟化、压延、切割、烘干等工序制作牛骨粉挂面。探究牛骨粉的添加量对牛骨粉挂面的蒸煮损失率、熟断条率、蛋白含量、钙含量、脂肪含量和酸度值的影响,以及制作过程中牛骨粉添加量、食盐添加量和熟化时间对挂面感官评分的影响,并通过正交实验对挂面的制作配方进行优化。结果表明,随着牛骨粉添加量的增大,蒸煮损失率显著增大,钙含量和蛋白质含量显著提高,脂肪含量和酸度值无显著性变化;在低浓度范围内牛骨粉挂面的熟断条率无明显变化。牛骨粉的添加量、食盐添加量、熟化时间等因素可以显著影响牛骨粉挂面的感官品质,经过正交实验的优化得到最佳配方为牛骨粉的添加量为5%、食盐添加量为0.6%、熟化时间为20 min,得到的牛骨粉挂面的感官评分为90.31。研究结果为补钙挂面的生产提供理论基础。     

胰蛋白酶对猪血红蛋白酶解脱色条件优化

以酶解液水解度（hydrolysis degree,DH）、三氯乙酸（trichloroacetic acid,TCA）可溶性氮含量及血红素残留量为评定指标,采用单因素试验比较胰蛋白酶和碱性蛋白酶对猪血红蛋白的酶解脱色效果。在单因素试验基础上,进行4因素3水平正交试验。结果表明：胰蛋白酶水解脱色的效果更好,最佳酶解工艺参数为酶底比7500 U/g、酶解温度45 ℃、pH 7.5、底物质量浓度8 g/100 mL,在此条件下,酶解液DH为25.67%,TCA可溶性氮含量为80.05%,血红素残留量为18.34%,猪血红蛋白多肽粉蛋白含量83.17%;对此条件下制备的猪血红蛋白多肽粉进行分子质量分布分析,分子质量在1 000 Da以下的小肽占比94.20%;最佳酶解脱色条件下,猪血红蛋白多肽粉中TCA可溶性氮含量为80.05%的蛋白占猪血红蛋白多肽粉蛋白含量的96.25%,这与分子质量分布结果比较符合。     

碱性蛋白酶水解鸭血工艺条件的研究

选用碱性蛋白酶对鸭血进行单酶水解研究。在单因素分析的基础上采用正交实验对鸭血的酶解条件进行优化,得出最佳的水解条件为:温度50℃,酶用量8 000 U/g底物,底物浓度7%,pH值为10,酶水解2 h,在此条件下的三氯乙酸可溶性氮含量(SN-TCA指数)为66.0%。     

高压脉冲电场协同酶法提取牛骨蛋白的研究

以新鲜牛骨为原料,研究高压脉冲电场协同风味酶提取牛骨蛋白。实验结果表明,牛骨粉经高压脉冲电场处理再进行酶解,不仅能够提高骨蛋白溶出率,而且能缩短酶解时间。在电场强度30kV.cm-1、脉冲数25、料液比1∶8、酶用量4000U/g（骨粉质量）、酶解温度50℃、pH6.5等条件下,酶解30min,牛骨蛋白溶出率可达65.2%。      

双酶分步水解制备花生多肽工艺优化

为了开发和利用花生蛋白资源,生产高附加值蛋白产品,以花生分离蛋白为原料,采用Alcalase 和Flavourzyme 分步水解法制备花生多肽。通过单因素试验和响应面中心组合设计试验,研究Flavourzyme 水解花生分离蛋白过程中加酶量、底物质量分数、酶解温度、酶解时间和酶液pH 值等因素对水解的影响。建立水解液中可溶性氮质量浓度与各种影响因素的回归模型;确定Flavourzyme 酶解反应的最佳工艺参数为pH7.0、加酶量1714U/g 底物、底物质量分数5%、酶解温度55℃、酶解时间90min。在此条件下,酶解产物中可溶性氮质量浓度为19.44mg/mL。     

猪皮胶原粉的制备工艺及功能特性研究

本研究在4℃条件下用弱酸加酶法提取可溶性胶原并干燥成粉,然后对已提取过的猪皮用60%乙醇溶液作载体进行胶体磨研磨,制备不溶性胶原粉。进一步对其进行胶原含量及功能特性的测定。结果表明：猪皮胶原粉的最佳制备工艺为：采用pH2.0 醋酸+0.2% 胃蛋白酶、料液比1:15 条件下提取猪皮48h,可溶性胶原溶出率为0.602%;剩余猪皮采用60% 乙醇载体研磨后干燥可制得不溶性胶原粉。所得胶原粉各项功能特性优良,通过羟脯氨酸含量测定得出可溶性胶原粉胶原纯度为95.1%,不溶性胶原粉胶原纯度为82.9%,工艺路线易于实现规模化生产。     

虾壳中复合钙粉的制备工艺优化及大鼠对其吸收效果的评价

为研究虾壳中复合钙粉的制取工艺及评价大鼠对其吸收效果,以南美白对虾虾壳为研究对象,采用胰蛋白酶-柠檬酸法制取钙粉,进而以缺钙为模型研究大鼠对复合钙粉的吸收效果。结果表明：采用胰蛋白酶-柠檬酸制取复合钙粉的最佳工艺为加酶量2.5×103 U/g、酶解pH 8.0、酶解时间1.5 h、酶解温度45 ℃,此时,蛋白水解度为57.24%;柠檬酸浓度0.35 mol/L、柠檬酸用量20 mL、处理时间1.5 h时,钙溶出率为85.78%;制取的复合钙粉中钙含量为19.6%,总氨基酸含量为18.3%。复合钙粉质地细腻,呈淡褐色,无异味。动物实验表明,从虾壳中制取的复合钙粉的大鼠钙吸收效果显著（P＜0.05）,灌胃剂量66.5 mg/（kg•d）（以钙含量及大鼠体质量计）的复合钙粉能明显提高大鼠血清钙、磷水平,促进大鼠正常生长。胰蛋白酶结合柠檬酸能有效地从虾壳中制取复合钙粉,其吸收效果优于相同钙含量的碳酸钙。     

酶解制备猪小肠粘膜蛋白粉工艺条件优化

为研究蛋白酶酶解制备猪肠粘膜蛋白粉工艺,以天然猪肠衣加工副产物肠粘膜为原料,以酶解产物中可溶性蛋白含量为指标,通过单因素实验和响应面实验,筛选适宜用于酶解猪小肠粘膜的蛋白酶并对其酶解工艺条件进行优化。结果表明,木瓜蛋白酶酶解猪肠粘膜制备蛋白粉可溶性蛋白含量达7.37%±0.06%,显著高于胰蛋白酶和胃蛋白酶酶解制备得到的肠粘膜蛋白粉可溶性蛋白含量,最佳酶解工艺条件为:水解时间6.5 h,酶添加量5400 U/g蛋白,液固比4 mL/g,在此条件下酶解产物中可溶性蛋白含量为15.81%±0.04%,这表明酶法制备肠粘膜蛋白粉工艺合理可行,为动物副产物的开发利用提供参考依据。     

利用罗非鱼废弃碎肉制备低聚肽的研究

为了利用罗非鱼废弃碎肉制备低聚肽,研究了采用酶解、膜分离和冷冻干燥等技术制备低聚肽的工艺,先通过4组单因素实验确定最佳酶,再用16组正交实验,以水解度、氮溶出率和三氯乙酸溶解指数为指标,对酶解工艺进行优化,最后对其进行膜分离和冷冻干燥。结果表明,用此工艺制得的蛋白粉总氮含量为15.8%,其中分子量小于1000u的肽占总含量的88%,符合GB/T22729-2008对低聚肽粉的规定。     

低值淡水鱼蛋白酶法水解工艺研究

以水解度为指标,考察酶解温度、pH、底物浓度、加酶量等因素对鲢鱼蛋白水解度的影响。在单因素实验基础上采用中心复合组合设计实验对酶解温度、pH和加酶量进行优化,以氨基酸态氮为指标,确定最佳酶解时间。结果表明:酶解pH9.37,酶解温度48.33℃,酶与底物比93.87AU/kg,酶解时间6h,在此条件下水解体系水解度为39.54%,氨基酸态氮含量为2.31g/L,总氮回收率为93.55%,蛋白质浓度为3.62%。     

酶法制备白鲢鱼蛋白粉的研究

对白鲢鱼肉进行酶水解经喷雾干燥以制备水溶性高的鱼蛋白粉。研究了木瓜蛋白酶的添加量、温度、时间、底物浓度和pH水解条件对鱼蛋白水解度的影响以及喷雾干燥条件对蛋白粉物性和水溶性的影响。结果表明:木瓜蛋白酶对鲢鱼蛋白的最适水解条件是温度50℃、加酶量4000U/g蛋白质、底物浓度为5.5%、pH6.5、时间4h,水解度达到29.82%;该水解液经浓缩至浓度25%～30%时,通过控制进风温度170～180℃、出风温度80～90℃用喷雾干燥得到鱼蛋白水解产物,相对分子量在1000以下组分占90.90%,溶解度达98.52%,是一种营养价值高和溶解好的蛋白质功能性食品配料。      

正交试验优化哈蟆油蛋白双酶法水解工艺

目的：考察双酶法制备哈蟆油蛋白的最佳工艺。方法：以哈蟆油为原料,采用柠檬酸浸提和水煎煮的方法提取哈蟆油蛋白,先后加入胃蛋白酶和碱性蛋白酶进行酶解,根据酶解后哈蟆油蛋白相对分子质量分布,应用单因素和正交试验确定哈蟆油蛋白酶解的最佳条件。结果：最佳酶解条件为胃蛋白酶与底物比（m/m）1∶2 000、酶解时间2 h、碱性蛋白酶与底物比（m/m）1∶100、酶解时间6 h,酶解后哈蟆油蛋白相对分子质量小于5 000所占的比例为94.85%,哈蟆油蛋白中蛋白质含量为49.85%。结论：胃蛋白酶与碱性蛋白酶结合使用可以有效地降低哈蟆油蛋白的相对分子质量,利于人体吸收。     

羊骨胶原钙螯合肽酶解工艺的研究

本试验采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶四种蛋白酶酶解羊骨胶原蛋白,以酶解液中游离钙含量为试验指标,采用正交实验以及极差分析法确定了酶解羊骨蛋白获得胶原钙螯合肽的最佳用酶和酶解工艺条件。试验结果表明:胃蛋白酶为最佳用酶,最佳酶解工艺条件为:酶解时间6h,底物浓度为0.2kg/L,酶用量为1900U/g,酶解温度37℃,最适pH值3.0。酸性条件有利于钙的溶出。