纳豆芽孢杆菌液体发酵条件的优化

以纳豆芽孢杆菌为出发菌,以菌液浊度OD660nm值为指标,对纳豆芽孢杆菌液体发酵培养基的碳源、氮源、pH进行优化。并通过试验确定了纳豆芽孢杆菌的最适接种量和最优发酵条件。试验结果:最优培养基为2%葡萄糖、4%蛋白胨、0.5%NaCl,pH7。最佳接种量为5%培养16h的发酵液,最优培养温度和时间分别为35℃,18h。     

牛类芽孢杆菌BD3526产抗菌物质培养条件的优化

为提高牛类芽孢杆菌BD3526在麸皮培养基中抗菌物质的产量,以藤黄微球菌为指示菌,抑菌圈直径为指标,分别考察了培养温度、培养时间、种龄、接种量以及麸皮浓度5个单因素对抗菌物质产量的影响。其中,培养温度、培养时间、接种量以及麸皮浓度4个因素对抗菌物质产量影响显著,故选取该4个因素进行响应面法优化。优化后的培养条件为:培养温度29℃、培养时间73h、接种量3.2%、麸皮浓度4.2%,在该条件下,BD3526抑菌圈直径为19.88mm,抑菌效价相对于优化前提高了100%。     

利用纳豆杆菌发酵玉米蛋白粉新工艺研究

采用纳豆杆菌对经膨化处理的玉米蛋白粉进行发酵,通过测定培养液中可溶性蛋白含量和抗氧化活性,确定实验范围内纳豆杆菌发酵玉米蛋白粉产生抗氧化活性肽的最佳工艺条件为：采用液体培养方式,温度34℃,时间36 h,转速200 r/min,培养基起始pH值7.0,培养液可溶性蛋白含量和抗氧化活性分别达23.67 mg/mL和223.91 U/mL.在该培养条件下,用凝胶层析柱Superdex peptide对纳豆杆菌发酵玉米蛋白粉培养液中肽的分子量分布进行测定,表明培养液中肽的分子量在327～2 382Da之间.     

混合碳源对地衣芽孢杆菌发酵合成杆菌肽的影响

在10 L发酵罐水平研究了地衣芽孢杆菌批发酵、补料(葡萄糖、乳糖)批发酵对细胞生长以及溢流代谢和杆菌肽合成的影响。批发酵过程中,细胞28 h达到峰值(91×10~8CFU/mL)后自溶,杆菌肽效价32 h达到峰值(960 U/mL)后逐渐降解。20~28 h流加葡萄糖批发酵的峰值生物量(24 h)为115×10~8CFU/mL,比对照提高了26%。但是,流加葡萄糖后杆菌肽合成速率(20~40 h)是17.2 U/(mL·h),仅为补料前(20 h之前)的53%。基料添加乳糖批培养的峰值生物量(32 h)为110×10~8CFU/mL,比分批发酵提高了20.6%,并与流加葡萄糖批发酵接近。同时,杆菌肽以29 U/(mL·h)的速率持续合成至40 h的1 143 U/mL,比分批发酵效价提高了19%。     

食品中多种抗生素残留的微生物筛检方法研究

本文介绍了一种同时使用藤黄微球菌ATCC9341、枯草芽胞杆菌ATCC6633、蜡样芽胞杆菌蕈状变种ATCC11778为敏感菌,一次操作可同时检测在肉类、水产品及蛋中的四大类抗生素残留的微生物抑制方法,该方法的测定低限为β-内酰胺类0.05mg/kg,四环素类0.1mg/kg,大环内酯类0.05mg/kg,氨基糖苷类0.5mg/kg。     

基于细胞碳-氮-氧需求的补料批发酵策略促进杆菌肽合成

为了提高杆菌肽补料发酵的效率,在50 L罐水平研究了pH耦合、间歇-罐压控制和间歇-溶氧(dissolved oxygen,DO)耦合等补料策略对杆菌肽合成的影响。pH耦合策略的杆菌肽效价为1 006 U/mL,但存在对数中后期因pH低于设定值而无法补入葡萄糖的问题。间歇-罐压控制策略的效价(1 118 U/mL)比pH耦合策略提高了11%,但也存在发酵后期补糖量与DO不匹配的问题。间歇-DO耦合策略克服了以上缺陷,糖对杆菌肽的转化率(YP/S)比间歇-罐压控制策略提高了22. 7%。基于间歇-DO耦合补料策略并于24 h二次补入氮源后,其平均杆菌肽合成速率达到了40. 67 U/(mL·h),杆菌肽效价峰值达到了1 220 U/mL。建立了基于细胞需求的综合碳-氮-氧因素的补料策略,为工业化补料发酵生产杆菌肽提供了重要参考。     

苏云金芽孢杆菌液体发酵的研究

对苏云金芽孢杆菌发酵清液进行了工艺条件优化研究,通过试验确定其适宜发酵工艺条件为:溶解氧大于3%,培养温度:1～20 h为30℃,20h以后为33℃,补糖量为2%,发酵周期29h.在此条件下,进行发酵可使发酵液生物效价达到5200 IU/uL的水平,制得干粉生物效价达到120000 IU/uL,晶体含量达12%.     

植物乳杆菌SJ35的抑菌特性及复合保鲜剂配制

以藤黄微球菌、铜绿假单胞菌为指示菌,采用牛津杯双层琼脂扩散法测定植物乳杆菌SJ35代谢产物的抑菌特性,应用单因素试验选取最优的菌株发酵条件,选取亚氯酸钠与代谢产物复配制成复合保鲜剂并测定其抑菌效果。结果表明:菌株SJ35代谢产物的抑菌活性较强,热稳定性好,在酸性条件下稳定,对蛋白酶敏感,且具有细菌广谱抑菌性;最优发酵条件为34℃静置培养36 h,初始p H为6.0,其对藤黄微球菌、铜绿假单胞菌的抑菌圈直径达到25.68,19.96 mm;将80%的SJ35代谢产物与600 mg/L亚氯酸钠复配制成复合保鲜剂,不仅能增强对细菌的抑制作用,而且对霉菌也有一定的抑制作用。     

双氧水对地衣芽胞杆菌合成杆菌肽的影响

在研究地衣芽胞杆菌浊液发酵生产杆菌肽过程中发现存在发酵前期溶氧为零、发酵中期菌体自溶以及二次生长现象,而H2O2是一种携氧剂,可释放O2以及不影响产物分离,因此在10L罐上,考察了流加H2O2对地衣芽胞杆菌浊液发酵合成杆菌肽的影响.在发酵24h时以速率为3mmol/(L·h)恒速流加H2O2至34h,菌体生物量在34h达到最大值为73.5× 109cfu/mL比对照最大值高6.5％(对照最高值为69× 109cfu/mL),自溶时间延后了8h,而且细胞自溶后的菌数最小值为42h的62.1×109cfu/mL,比对照自溶后最低值高了77％.24h～34h的挥发性脂肪酸(VFA)最高值为12.8g/L,比对照减少了11％,糖耗速率是0.36g/(L· h),比对照提高了3％.杆菌肽在24h～34h的合成速率为44.9U/(mL·h)比对照高12％(对照为40.1U/(mL·h)),杆菌肽最终效价为1021U/mL,比对照提高9.9％,说明适量流加H2O2不仅改善了细胞的生长环境,还能促进杆菌肽的生物合成效率.     

产蛋白酶枯草芽孢杆菌的复壮及生产初步研究

对1株产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌进行了复壮,复壮后比复壮前活力提高了26%;在液体深层发酵生产上主要对通气量进行了研究,确定最适通气条件为:前18h通气量240 L/min·m3,18h～24h通气量300 L/min·m3,发酵液活力可达941 1U/mL:对发酵液进行喷雾干燥,所得酶粉中性蛋白酶活力可达139800U/g.     

粉葛多糖促植物乳杆菌P9生长代谢及发酵液抗氧化活性研究

目的 探究粉葛多糖(Puerariae thomsonii Radix polysaccharide, PRP)对植物乳杆菌P9的促生长代谢作用, 评价其益生作用。方法 配制不同质量分数的PRP液体培养基并接种P9, 检测发酵液OD600值和pH, 考察PRP对P9增殖的影响及P9产酸能力。采用高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱法、紫外分光光度计进一步分析添加PRP后, P9发酵液中有机酸、糖类代谢产物变化及其抗氧化活性。结果 添加PRP后, P9发酵液OD600升高, pH下降, MRS+3.00% PRP组达到极值, OD600为3.25, pH为3.56, 表明PRP能促进P9生长且产生了更多的酸性代谢产物, 有机酸测定进一步表明草酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、甲酸、丙酸均升高, 且产生了蜜二糖、水苏糖、棉子糖3种有益的糖类降解物。抗氧化活性结果表明, MRS+3.00% PRP组1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基清除率和羟基自由基清除率最高, 分别为60.88%和97.41%, 较MRS组分别提高9.29%、29.84%; 各组别还原能力与PRP质量分数呈正比, 表明添加PRP后, P9发酵液抗氧化活性增强。结论 综上推测PRP具有益生作用, 经与P9培养后, 发酵液抗氧化活性增强, 为PRP作为益生元的开发提供参考。     

一株长白山温泉高温菌培养条件的优化

对从长白山温泉泥样中分离出的高温菌的培养条件进行研究,考察培养温度、培养基起始pH、装液量、摇床转速对其生长情况的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化,确定该菌株的最佳培养条件为:培养温度为65℃、起始pH 6.5、装液量45mL/100mL、摇床转速为150r/min,在此条件下菌株的生物量OD600是1.369,活菌数为2.1×108cfu/mL。     

辣椒酱发酵菌肠膜明串珠菌C27高密度培养条件优化

为了实现辣椒酱发酵肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）C27的高密度培养，以MRS肉汤培养基为基础，L. mesenteroides C27的菌体密度为评价指标，采用单因素试验和响应面法对培养基中的碳源、氮源、生长因子进行优化，同时采用响应面法对培养条件进行优化。结果表明，最佳培养基配方为蔗糖21 g/L，酵母浸粉22 g/L，土豆汁14 g/L；最佳培养条件为发酵温度38.4 ℃、初始pH值6.2，接种量2.4%。在此优化条件下培养24 h，L. mesenteroides C27的菌体密度（OD600 nm值）达1.034，活菌数为1.30×109 CFU/mL。     

以豆粕为基质纳豆芽孢杆菌生长条件优化

研究纳豆芽孢杆菌在以豆粕为基质的发酵培养基中的生长条件。利用全自动生长曲线测定仪,以菌液浊度OD660nm为指标,对纳豆芽孢杆菌液体发酵培养基中的氮源(豆粕)和碳源(葡萄糖)配比进行研究,确定豆粕质量浓度50g/L,葡萄糖质量浓度10g/L为最佳配比,并通过单因素及正交试验筛选出影响纳豆芽孢杆菌生长的主要条件。再根据Box-Behnken试验优化,结果表明,采用功率80W超声波处理豆粕4.32min,且培养基初始pH6.16,发酵温度35.5℃时纳豆芽孢杆菌在发酵生长13h后达到最大生物量,此时OD660nm为1.635。     

枯草芽孢杆菌液态发酵的研究

该研究选取了一株从无花果中分离出的枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）作为试验菌株,它可以产生抗逆性强的芽孢,非常适合应用于益生菌饲料加工生产。在单因素试验基础上,进行L9（33）正交试验,获得芽孢产量高、原料成本低廉的液态发酵培养基最佳配方为碎米水解液6%、酵母粉0.7%、KH2PO4 0.5%;对该菌的摇瓶发酵条件进行了初步研究,确定了液态发酵的最佳条件为pH值为5,温度37 ℃,接种量6 %,转速200 r/min,培养时间19 h。在此最佳培养基配方及发酵条件下,发酵液OD600 nm值可达7.38。     

植物乳杆菌ZJ316高密度发酵条件优化

以1株植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）ZJ316为研究对象,在MRS液体培养基的基础上,以吸光度值（OD600 nm值）为响应值,通过单因素试验及响应面试验对其高密度发酵培养基组分和培养条件进行优化。结果表明,L. plantarum ZJ316高密度发酵的最优培养基组成为蔗糖43 g/L、玉米浆干粉60 g/L、Na2HPO4-柠檬酸0.12 mol/L、MgSO4·7H2O 0.20 g/L、MnSO4·H2O 0.10 g/L、吐温80 1 mL/L;最优发酵条件为接种量4%、发酵温度30 ℃、初始pH值6.5。在此优化条件下,采用发酵罐静置发酵24 h,植物乳杆菌ZJ316的OD600 nm值为5.13,活菌数可达8.01×109 CFU/mL,较优化前分别提高1.65倍、3.44倍。     

干酪乳杆菌LZ183E高密度培养条件优化

为提高干酪乳杆菌LZ183E在发酵培养液中的菌体密度,首先通过在不同温度下培养菌株,测定48 h内菌液的OD600 nm值并作出生长曲线,得到菌株最适培养温度为37 ℃、接种时间为16 h及收获时间30 h。随后通过单因素试验和正交试验优化,探究不同碳源、氮源、生长因子、初始pH值以及接种量对菌株LZ183E活菌数和OD600 nm值的影响。结果表明,菌株LZ183E的最佳培养条件为葡萄糖25 g/L、酵母膏20 g/L、南瓜汁24 g/L、初始pH 6.5以及接种量2%。此优化条件下,干酪乳杆菌LZ183E的活菌数对数值达到了9.20±0.04,满足高密度培养要求,并且比原始MRS培养基活菌数对数值（8.12±0.06）高出一个数量级,为干酪乳杆菌LZ183E的冻干保护提供了足够的活菌数。     

红参对乳酸菌体外增菌的影响

采用比浊法和活菌计数法研究在基础培养基/菊芋汁基础培养基中添加不同量低聚木糖、低聚果糖、红参提取液及其酸水解物对鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T/保加利亚乳杆菌ATCC 11842生长情况的影响。结果表明:不同添加物对鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T的增菌效果为红参提取液>红参酸水解物>低聚木糖>低聚果糖。当红参提取液添加量为12.50%时,鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T的最大OD600值为1.172,活菌数为2.72×10^8 CFU/mL,比基础培养基中最大活菌数7.75×10^7 CFU/mL增加1个数量级。对保加利亚乳杆菌ATCC 11842的增菌效果为红参提取液>低聚木糖>红参酸水解物>低聚果糖。当红参提取液添加量为6.25%时,保加利亚乳杆菌ATCC 11842的最大OD600值为0.627,活菌数为4.43×10^8 CFU/mL,比菊芋汁基础培养基中最大活菌数1.48×10^7 CFU/mL增加1个数量级。红参提取液比低聚木糖、低聚果糖具有较好的增菌效果,将红参作为益生元研究其益生功能,为研究红参对肠道微生物的影响提供试验依据。     

重组降血压肽发酵培养基及发酵条件的优化实验研究

以纯化的融合蛋白包涵体表达量为考核指标,对重组降血压肽发酵培养基的组成和发酵条件进行了优化实验研究。以富含疏水性氨基酸的麦胚水解物为基础培养基,通过正交实验,优化得到大肠杆菌BL21-MF3A3制备重组降血压肽的麦胚培养基配方为:酵母粉0.5%、麦胚酶解物C2.0%、葡萄糖0.5%和NaCl0.5%。对发酵过程中的诱导条件进行正交优化实验,得到最佳的诱导条件为诱导温度32℃、诱导起始OD6001.4和诱导时间10h,在此条件下包涵体表达量可达到535mg·L-1。     

褐环乳牛肝菌液体发酵培养基的优化

筛选褐环乳牛肝菌（Suillus luteus）最适培养基,以为后续的菌根及生态研究提供研究基础。通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及基于中心组合法的响应面试验,优化了褐环乳牛肝菌液体发酵培养基配方。结果表明,褐环乳牛肝菌最适碳源为果糖,最适氮源为牛肉膏,最佳褐环乳牛肝菌液体发酵培养基组成为牛肉膏7.9 g/L,β-环糊精16.8 g/L,抗坏血酸0.005 5 g/L,果糖20 g/L,CaCl2 0.1 g/L,NaCl 0.075 g/L,MgSO4 0.9 g/L,KH2PO4 1.0 g/L。采用最优培养基培养20 d可获得菌丝干质量7 656 mg/L。