紫外分光光度法测定蛋白质的含量

蛋白质与生命的起源、存在和进化都密切相关,蛋白质测定涉及到生产和科研的众多领域。本试验用紫外分光光度法进行蛋白质含量的测定,由此分析此方法的特点及适用条件。结果表明,紫外吸收法简单、迅速,且相对较为准确,是测定低浓度蛋白质含量的有效方法。     

蛋白质含量测定方法

蛋白质与生命的起源、存在和进化都密切相关,蛋白质测定涉及到生产和科研的众多领域。本实验用定氮法、紫外吸收法、双缩脲法、考马斯亮蓝法分别对牛奶、酸奶、豆浆进行蛋白质含量的测定。依此分析比较各种测定蛋白质的方法,总结出各方法的特点及适用条件。     

食品中蛋白质含量的测定

我国现行标准GB/T5009.5-2003《食品中蛋白质的测定》中的两种方法＂凯氏定氮法＂和杜马斯（Dumas）燃烧法是先将样品硝化后测出含氮量,然后根据氮元素与蛋白质换算系数计算蛋白质的含量,如果添加含氮量高的物质,如三聚氰胺,就可以测出较高的＂蛋白质含量＂。介绍4种直接测定蛋白质的方法：考马斯亮兰法、双缩脲法、Folin-酚试剂法和紫外吸收光谱法,可以避免上述由于添加违规化学物质造成测定蛋白质含量虚高的结果。     

考马斯法测定棉籽蛋白发酵液中蛋白质含量

介绍了利用生物法来发酵棉籽蛋白,并使用考马斯亮蓝法测定酵液中蛋白质含量的方法.利用蛋白质与考马斯亮蓝显色原理,用紫外分光光度法测定蛋白质含量,检测波长为595 nm,蛋白质含量在0～ 16.67 mg/L时与吸光度有良好的线性关系,测定所得标准曲线方程为y=0.044x+0.09,其中R=0.999.结果表明:这种方法...     

蛋白质含量测定方法的比较

蛋白质与生命的起源、存在和进化都密切相关,蛋白质含量测定涉及到生产和科研的众多领域.目前常用的方法有凯氏定氮法、双缩脲法(Biuret)、紫外吸收法、考马斯亮蓝法(Bradford).本文总结各种方法的特点及适用条件,针对不同的待测样品以及对测定结果准确性的要求不同,我们可以采用不同的方法来测定样品中蛋白质的含量.     

多肽含量的测定方法的比较

多肽含量的测定方法与有些蛋白质含量的测定方法相同,但并非所有蛋白质含量的测定方法都适用于多肽的含量测定,本文介绍了几种常见的多肽含量测定的方法：①双缩脲法;②Folin—酚试剂法;③OPA法（邻苯二甲醛法）;④紫外吸收法,并且进行了比较。     

考马斯法测定棉籽蛋白发酵液中蛋白质含量

介绍了利用生物法来发酵棉籽蛋白,并使用考马斯亮蓝法测定酵液中蛋白质含量的方法。利用蛋白质与考马斯亮蓝显色原理,用紫外分光光度法测定蛋白质含量,检测波长为595 nm,蛋白质含量在0～16.67 mg/L时与吸光度有良好的线性关系,测定所得标准曲线方程为y=0.044 x+0.09,其中R=0.999。结果表明:这种方法快速、简便,RSD=3.86%(n=6),相对标准偏差小于4%,回收率>90%,该法用于实际样品测定取得了令人满意的结果。     

蛋白质测定方法改进

应用消化-紫外分光光度法定氮测定蛋白质含量。该法较常规凯氏定氮法具有快速、简便、准确、灵敏度高等优点,且所用消化设备简便、常用,易于推广。     

玉米粉鼠饵中杀鼠迷的含量测定

杀鼠迷是一种抗凝血灭鼠剂,化学名为4-羟基-3-(1,2,3,4-四氯-1-萘基)香豆素。关于杀鼠迷的测定,有关文献曾述及紫外分光光度法,然而玉米粉中粗脂肪、淀粉和蛋白质等对测定有严重干扰。经过反复试验,我们拟定了能消除上述干扰物质的样品处理方法,并用双波长紫外分光光度法测定玉米粉中杀鼠迷含量,结果尚称满意,兹报道如下。     

考马斯法测定棉籽蛋白发酵液中蛋白质含量

介绍了利用生物法来发酵棉籽蛋白,并使用考马斯亮蓝法测定酵液中蛋白质含量的方法。利用蛋白质与考马斯亮蓝显色原理,用紫外分光光度法测定蛋白质含量,检测波长为595nm,蛋白质含量在0—16．67mg／L时与吸光度有良好的线性关系,测定所得标准曲线方程为Y=0．044x＋0．09,其中R=0．999。结果表明：这种方法快速、简便,RSD=3．86％（n=6）,相对标准偏差小于4％,回收率〉90％,该法用于实际样品测定取得了令人满意的结果。     

粉尘螨滴剂中硫柳汞限度的比色检查

在《中国生物制品规程》中，硫柳汞含量测定采用样品经氧化破坏后，以硫酸铁铵为指示剂，硫氰酸铵滴定法进行测定。该方法繁琐费时，不适合大批量样品测定。全爱顺等采用丙酮．双硫腙．氢氧化钠显色，建立了硫柳汞含量测定的紫外分光法。但应用该方法在检查粉尘螨滴剂中硫柳汞的限度试验中发现，由于粉尘螨滴剂中蛋白质组分干扰，影响硫     

关于几种蛋白氧化后羰基含量的对比研究

羰基含量的测定一直是反应蛋白质氧化程度的重要理化指标,近年来,蛋白中的羰基含量往往采用较简便的DNPH比色法进行检测,但在实际测定过程中存在着蛋白含量不好精确定量、不同种类蛋白紫外吸收波长不统一等问题。且以往研究均是针对单一蛋白的氧化程度进行,鲜有系统性的针对不同种类的蛋白质进行氧化程度与羰基含量相关性研究的报道。针对此问题分别对牛肌原纤维蛋白、牛血清白蛋白以及豌豆蛋白进行了一系列氧化实验及其羰基含量测定,并且在蛋白羰基含量测定方面优化了DNPH比色法,使其可操作性更强,数据稳定性更高。     

紫外分光光度法测定核酸含量的影响因素分析

选择寡聚核苷酸、鲑鱼精单链DNA、小牛胸腺双链DNA标准物质为样本,系统研究了溶液p H、苯酚、丙酮、蛋白质、多糖等对紫外分光光度法测量结果的影响情况,另外考察了核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)的相互影响情况。研究发现基于分光光度法的核酸定量分析,易受溶液p H、苯酚、丙酮、蛋白质、多糖等的影响,另外,DNA和RNA之间也会相互干扰。因此,紫外分光光度法测定核酸含量时,特别是该方法用于核酸标准物质特性量值确定时,需要样品高度纯化,p H确定的条件下才能保证测量结果的准确可靠。     

插入式超声对酵母细胞膜通透性影响的研究

本论文选择生产1,6-二磷酸果糖(FDP)的酵母细胞为研究对象,采用紫外分光光度计测定超声处理后酵母细胞内核酸和蛋白质透出细胞膜的情况,使用次甲基蓝对超声处理后的细胞进行染色,用血球计数,测试经超声处理后细胞的生存能力,及通过测定胞外FDP的浓度变化,反映细胞膜通透性的变化。结果表明,插入式超声对细胞的通透性及细胞的存活率都有很大影响,而脉冲超声的间隙时间对核酸、蛋白质及细胞活性影响不是很大,但对FDP的渗出率有较大影响。     

正交试验优选天龙粉水溶性蛋白质的提取工艺

目的正交试验法优选天龙粉水溶性蛋白质的超声提取工艺。方法以牛血清蛋白标准液为标准品,紫外分光光度法测定吸光度,以水提液中蛋白质含量为考查指标,通过正交试验法探究料液比、超声提取时间、p H对提取效果的影响,从而优化提取工艺条件。结果在所选因素水平范围内,天龙粉水溶性蛋白质最佳提取工艺参数为:料液比为1∶40、超声提取时间为20 min、p H为9。在此条件下,天龙粉水溶性蛋白质的提取含量为50.789 mg/g。结论采用正交试验优化超声提取工艺,有效提高天龙粉水溶性蛋白质提取含量,具有较好的应用前景。     

可见与紫外光度法测定沙棘叶中总黄酮的比较

对可见与紫外分光光度法测定沙棘叶中总黄酮的方法进行了比较。可见分光光度法以芦丁为标准品,硝酸铝作显色剂,在510 nm波长下测定;紫外分光光度法以芦丁为标准品,在358 nm波长下测定。结果表明:紫外分光光度法测定沙棘叶中总黄酮相对简便快速,是一种较理想的测定方法。     

流感疫苗中裂解剂TritonN-101残余量的快速检测方法

目的快速、准确地检测流感病毒裂解疫苗和亚单位疫苗中裂解剂Triton N-101的残余量。方法采用紫外吸收与Lowry蛋白测定相结合的方法。首先绘制裂解剂和蛋白标准曲线,将Lowry法测得的样品蛋白质含量代入蛋白标准曲线的回归方程中,得出样品中蛋白对应的紫外吸收值,再用蛋白样品测得紫外吸收值减去蛋白吸收值的差,代入裂解剂标准曲线,得出裂解剂浓度,并对该法进行精密度和准确度验证。结果经精密度和准确度的验证,该法符合实验要求。结论所采用的方法快速、简便,适用于疫苗生产过程中裂解剂Triton N-101残余量的检测。     

紫外测定壳聚糖脱乙酰度方法的探讨

分别采用直接、一阶导数、多波长和双内标等4种紫外分光光度法测定壳聚糖的脱乙酰度,评价4种紫外测定方法,并与胶体滴定、电位滴定和氢核磁3种测定方法进行了比较。结果表明,采取上述紫外法测定壳聚糖脱乙酰度值均高于胶体滴定和氢核磁测定值。故准确测定高脱乙酰度壳聚糖的脱乙酰度,紫外法非首选方法。     

介绍几种测定蛋白质浓度的新方法

蛋白质的浓度可以由蛋白质的物理和化学性质的数据来推算。物理性质有折光率、比重、紫外吸收等;化学性质有含氮量、缩脲反应和福林——酚试剂反应等。目前,实验室一般常用的方法是紫外分光光度法、缩脲法、福林——酚试剂法等。这些方法各有优缺点,缩脲法是利用肽键和碱性Cu~(2+)的缩脲反应产生的蓝色化合物进行比色。它的颜色不受蛋白质中氨基酸组成的影响,但是灵敏度较差。福林——酚试剂的方法是利用蛋白质中酪氨酸和色氨酸在碱性溶液中易将磷钼酸和磷钨酸的混合物还原为蓝色化合     

青天葵中鼠李秦素在不同溶剂的紫外-可见吸收光谱测定

对青天葵中鼠李秦素不同溶剂的紫外-可见吸收光谱测定研究,考察其紫外-可见吸收光谱的特征。分别以甲醇溶液、甲醇钠甲醇溶液、三氯化铝甲醇溶液、三氯化铝盐酸甲醇溶液、醋酸钠甲醇溶液、醋酸钠硼酸甲醇溶液为溶剂,分别对其进行紫外-可见光谱测定。鼠李秦素在不同溶剂的紫外-可见吸收光谱图有所区别。本法可作为鼠李秦素紫外-可见吸收光谱特征鉴别的依据。