一种海洋黑曲霉耐盐内切纤维素酶的分离纯化和酶学性质研究

采用实验室从海底淤泥中筛选得到的海洋黑曲霉固态发酵生产纤维素酶,纤维素酶粗酶液经过硫酸铵分级沉淀、超滤、离子交换层析和疏水层析分离纯化后,得到了电泳纯的内切纤维素酶,酶的比活力由37.72 U·mg~(-1)提高到557.27 U·mg~(-1)。SDS-PAGE显示该内切纤维素酶的分子量约为34 kDa。考察了该酶的酶学性质,结果表明该酶的最适温度为60℃,最适pH为4.5,具有较好的热稳定性和p H稳定性。金属离子对该内切纤维素酶的酶活影响较大,Cu~(2+)、Fe~(2+)对内切纤维素酶具有一定的激活作用,Mn~(2+)、Ni~(2+)、Zn~(2+)对酶活性具有强烈的抑制作用。当NaCl浓度为40 g·L~(-1)时具有最佳酶活,在20~60 g·L~(-1)的高NaCl浓度环境下的酶活均高于不含NaCl环境下的酶活,在200 g·L~(-1) NaCl高盐浓度下,该酶尚能保持初始酶活的89%,是典型的耐盐型酶。对该酶的酶促进反应动力学进行研究发现其在pH4.5、60℃条件下米氏常数Km为11.7 mg·mL~(-1),Vmax为943.4 U·mg~(-1)。     

盐碱胁迫对羊草叶片离子含量的影响

为了解羊草(Leymus chinensis)叶片无机离子含量对盐碱土壤的响应,模拟3组不同盐碱梯度土壤胁迫,测定了羊草叶片中K~+、Na~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)含量。结果表明:随着土壤盐碱梯度的增加,叶片中Na~+含量显著增加,K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)含量显著减小。盐碱胁迫增加,土壤渗透势下降,使离子失衡。     

不同金属离子对天冬氨酸酶基因工程菌活性影响的研究

研究Na~+、K~+、Ca~(2+)、Ba~(2+)和Mg~(2+)五种金属离子对天冬氨酸酶基因工程菌活性的影响。结果表明:Mg~(2+)、Na~+对天冬氨酸酶的活性起促进作用,Ba~(2+)、Ca~(2+)对天冬氨酸酶活性起抑制作用,K~+对酶的活性未有明显变化,其中物质的量浓度为1.5×10~(2-)mol/L的Mg~(2+)催化作用最好,Ba~(2+)的抑制作用最明显,且Ba~(2+)和Ca~(2+)离子浓度在5×10~(-3)mol/L~35×10~(-3)mol/L的范围内,酶活性逐渐降低。     

FH-1型腐植酸树脂处理酸性含铜镍废水的研究

在pH=3—5.5,Cu~(2+)、Ni~(2+)等重金属离子总浓度<150mg/1,Ca~(2+)、Mg~(2+)总浓度<1g/1条件下的废水,经FH-1型树脂处理,重金属含量低于国家排放标准时,树脂吸附总量达50mg/g-R,饱和吸附量在45—95mg/g-R之间。     

磷酸中铁、铝、镁对复合肥中钾和磷水溶性的影响

通过向磷酸中添加FeSO_4·7H_2O、MgSO_4·H_2O、Al_2(SO_4)_3·18H_2O形成不同金属含量的磷酸,磷酸、硫酸与液氨经过反应、造粒、干燥后形成颗粒复合肥,考察Fe~(2+)、Al~(3+)、Mg~(2+)含量对复合肥中钾和磷水溶性的影响。结果表明,随着Fe~(2+)、Al~(3+)、Mg~(2+)含量的增加,复合肥的水溶磷和水溶钾表现出不同程度的降低;Mg2+含量的增加对复合肥中水溶磷和水溶钾的影响较小,Fe~(2+)和Al~(3+)对复合肥中水溶磷和水溶钾的影响较大,尤其是复合肥中Fe~(2+)和Al~(3+)质量分数在0.6%～1.0%时,对复合肥中水溶磷和水溶钾的退化作用最为显著。     

不同离子对漆酶酶活的影响

设置一系列不同种类、不同浓度的离子溶液,探究其对漆酶酶活的影响。结果表明,阳离子中Fe~(2+)、Fe~(3+)对漆酶的抑制作用显著,并分析了离子浓度对漆酶的影响以及不同离子对漆酶的抑制机理。分析表明Fe~(2+)可能是通过与2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基结合影响漆酶酶活,Fe~(3+)可能是通过影响或置换漆酶中的部分铜离子影响漆酶活性,其中因为漆酶的活性中心是由四个铜离子组成,特别分析了Cu~(2+)对漆酶活性的影响,Cu~(2+)可能是通过与漆酶中的酸性氨基酸残基作用或通过影响漆酶的电荷平衡影响漆酶活性。在常见的阴离子溶液中,CO_3~(2-)抑制漆酶酶活,NO_3~-和SO_4~(2-)对漆酶有一定程度的激活,Cl~-轻微抑制漆酶酶活。分析表明阴离子的抑制作用可能是通过与底物分子竞争Ⅱ铜中的某一个位点来实现,激活作用可能是通过修饰漆酶氨基酸残基来实现。还研究了不同类型离子的复配,结果显示不同类型的复配对漆酶的影响方式也不同,但主要是通过作用于漆酶活性位点来影响酶活。     

污水中离子对疏水缔合型聚合物溶液粘度的影响研究

通过开展单因素对疏水缔合型聚合物溶液粘度的影响实验,研究污水中非还原性离子Na~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)和还原性离子S~(2-)、Fe~(2+)对疏水缔合型聚合物溶液粘度的影响。单因素实验研究表明,疏水缔合型聚合物溶液粘度保留率为60%时,单因素Na~+含量达到350 mg/L,单因素Ca~(2+)或Mg~(2+)含量达到100 mg/L左右,单因素S~(2-)含量达到6.5mg/L,单因素Fe~(2+)含量达到0.5 mg/L,确定对疏水缔合型聚合物溶液粘度的影响顺序是Fe~(2+)>S~(2-)>Ca~(2+)≈Mg~(2+)>Na~+,一方面,少量的还原性离子S~(2-)、Fe~(2+)对疏水缔合型聚合物溶液粘度影响较大,另一方面污水中非还原性离子Na~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)含量较高,对疏水缔合型聚合物溶液粘度的影响也不能忽视。     

Ca~(2+)、Mg~(2+)对剩余污泥自培养产酶影响

为提高剩余污泥投加复合菌后产水解酶效果,探讨了添加Ca~(2+)、Mg~(2+)对剩余污泥自培养产酶中污泥水解的影响。结果表明,未加Ca~(2+)、Mg~(2+)的空白组,蛋白酶和淀粉酶活力均呈现第1 d上升至最大值,后持续降低的趋势。添加0.03 mol/L Ca~(2+)组的蛋白酶活力第1 d快速升至246.14 U/mL,后持续上升,并在第7 d酶活力达最大值340.07 U/mL,蛋白酶活力最大值较空白组增加了53.94%;淀粉酶活力在第1 d快速升至351.02 U/mL后快速下降,第7d酶活力为70.79 U/mL,淀粉酶活力最大值较空白组增加了51.93%,表明添加0.03 mol/L Ca~(2+)可以提高灭菌污泥自培养产酶效果。而添加0.06 mol/L Ca~(2+)组酶活力呈下降趋势,表明高浓度Ca~(2+)对产酶有抑制作用。添加0.03 mol/L或0.06 mol/L Mg~(2+),不能提高产酶效果,但能维持酶活力稳定。添加合适浓度Ca~(2+)、Mg~(2+)能强化剩余污泥产酶过程中污泥水解效果,促进污泥上清液中有机物水解。     

磷酸质量对饲料级磷酸一二钙生产影响的研究

以脱氟磷酸为原料生产饲料级磷酸一二钙,考察脱氟磷酸中SO_4~(2-)、Fe~(3+)、Mg~(2+)、Al~(3+)对反应过程和产品质量的影响。结果表明:SO_4~(2-)使产品中磷和钙含量降低,游离酸升高,降低了磷酸的反应率。Fe~(3+)、Mg~(2+)、Al~(3+)含量高使得磷酸中的氢离子浓度降低,反应活性下降,产品中的游离酸和残余碳酸钙含量升高,磷和钙含量降低,严重影响产品质量。     

金属离子对磷矿醚胺反浮选脱硅的影响

本文采用醚胺类捕收剂D-609作为磷矿反浮选脱硅捕收剂,通过纯矿物试验和矿物表面Zeta电位分析,探索了Ca~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(3+)、Al ~(3+)对石英和磷灰石浮选的影响。试验结果表明:Al ~(3+)、Fe~(3+)可以明显抑制石英的上浮;Ca~(2+)在酸性条件下对石英有较弱的抑制作用,在碱性条件下可以活化石英;Mg~(2+)在酸性和碱性条件下可以抑制石英的浮选;Ca~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(3+)、Al ~(3+)对磷灰石浮选的影响较小。     

控制PH值测定石灰石及其产品中钙镁含量

碳酸钙工业生产过程中,测定石灰石及其产品Ca~(2+)、Mg~(2+)含量是保证产品质量的关键工作,用EDTA络合滴定法测量比其他方法迅速、准确。在一定PH值下,Ca~(2+)、Mg~(2+)与EDTA形成稳定的配位化合物,反应如下:     

南极菌Pseudoalteromonas sp.A211-5产碱性α-淀粉 酶Amy172的克隆表达及酶学性质研究

对具有淀粉降解活性的南极菌Pseudoalteromonas sp.A211-5进行测序分析,根据基因注释结果,获得了一条基因序列为2 139 bp的淀粉酶基因,命名为amy172;通过特异性引物克隆获得Amy172的基因序列并进行异源表达;采用Ni-NTA层析柱对重组α-淀粉酶Amy172进行纯化,采用DNS法测定其酶学性质,采用薄层层析(TLC)技术对其酶解产物进行分析。结果表明:SDS-PAGE显示在分子量为79 kDa左右有一条明显的目的蛋白条带;重组α-淀粉酶Amy172最适温度为50℃,最适pH值为10.0,且在pH值5.0～10.0的范围内仍能保持80%以上的酶活,金属离子Fe~(3+)、Mn~(2+)、Mg~(2+)、Fe~(2+)、Ca~(2+)、K~+、Sr~(2+)、Ni~(2+)和Ba~(2+)对酶活性具有抑制作用;TLC分析Amy172的酶解产物为葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖和麦芽四糖。     

重金属铅与有益元素钙共同作用于平菇的研究分析

以平菇为材料,探究有害重金属铅、有益元素钙及二者共同作用对平菇的影响,为食用菌安全问题奠定理论基础。通过在培养基中添加铅和钙离子,研究重金属铅和有益元素钙共同存在的情况下对平菇菌丝体生长的影响,固体培养阶段取Pb2+浓度为100 mg/L,Ca2+浓度为0.1%~1.0%,确定Ca2+浓度,在此基础上做液体培养进一步研究平菇菌丝体对重金属铅和有益元素钙的吸收。有益元素钙对重金属铅产生了拮抗作用,其抑制了平菇菌丝体对重金属铅的吸收,其中以加0.6%的有益元素钙的效果最为明显。     

产没食子酸脱羧酶的菌种筛选及其酶活研究

为了筛选产没食子酸脱羧酶的菌种并对其相应的酶活性质进行研究,文中首先利用底物诱导对可以产没食子酸脱羧酶的不同菌种进行了筛选,初步研究了没食子酸脱羧酶的专一性及影响其酶活的因素,由结果可知:待筛选的5株菌种均能降解没食子酸生成焦性没食子酸,其降解效果由强到弱为弗式柠檬酸杆菌(Citrobacter freandii)CICC 22001、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)CICC 10017、肠杆菌属(Enterobacter spp.)CICC 23468、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)CICC 20772、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)CICC 20804;没食子酸脱羧酶(GAD)对没食子酸具有较强的专一性,在粗酶液5.0 m L,没食子酸0.4 mg/m L,发酵温度35℃,磷酸盐缓冲溶液pH=6.0对其酶活的促进作用最强,而金属离子的促进作用强弱为Mg~(2+)Sn~(2+)Cu~(2+)Zn~(2+)K+Ca~(2+)Fe~(2+),添加剂的抑制作用强弱为EDTASDSTriton X-100Tween 20。     

聚丙烯腈基改性功能纤维选择性吸附饮用水中Cu2+研究

将聚乙烯亚胺(PEI)接枝到聚丙烯腈(PAN)纤维上制备了氨基螯合纤维(PAN-PEI纤维),在初始pH值为7.2、铜离子(Cu~(2+))浓度为3.00 mg/L条件下,分别研究了PAN-PEI纤维吸附混合溶液及饮用水中Cu~(2+)时对钙离子(Ca~(2+))和镁离子(Mg~(2+))的选择性。结果表明:在混合溶液中Cu~(2+)初始浓度不变的情况下,随着Ca~(2+)和Mg~(2+)初始浓度的增加,PAN-PEI纤维吸附Cu~(2+)时对Ca~(2+)和Mg~(2+)的吸附选择系数降低,但仍具有很好的吸附选择性;在饮用水中Cu~(2+),Ca~(2+),Mg~(2+)浓度分别为0.011,42.42,11.17 mg/L的情况下,将Cu~(2+)浓度加标至3.00 mg/L,采用PAN-PEI纤维处理饮用水,纤维吸附Cu~(2+)时对Ca~(2+)和Mg~(2+)的吸附选择系数分别为2 808和1 647,处理后饮用水中Cu~(2+)浓度为0.17 mg/L,Cu~(2+)去除率为94.33%,Ca~(2+)和Mg~(2+)仅分别损失了0.59%和0.98%;采用PAN-PEI纤维处理Cu~(2+)含量超标饮用水,吸附Cu~(2+)时对Ca~(2+)和Mg~(2+)具有很好的选择性。     

纤维素酶酶解香蕉皮制备葡萄糖工艺研究

以香蕉皮为纤维素酶解原材料,采用温和碱法对香蕉皮进行预处理,探究了激活剂、酶用量、温度、pH对香蕉皮酶解效率的影响。实验探究发现,在以Na~+、Mg~(2+)、Zn~(2+)为激活剂的单因素实验中,浓度为1.67mg/mL的Na~+对香蕉皮酶解反应的促进作用最佳。在以1.67mg/mL的Na~+作为激活剂对酶用量、温度、pH三种影响因素探究的实验中,酶解效率最佳的工艺条件为:温度45℃、酶量2.25%、pH为4.8,该条件下酶解产率达到21.3%。     

离子色谱法测定钙镁片中钙、镁离子的含量

采用离子色谱法进行了钙镁片中Ca~(2+)和Mg~(2+)的含量测定,过程为:先采用盐酸将样品溶解之后,采用阳离子交换色谱柱分离,用阳离子抑制器,分别进行精密度试验,重复性试验,加样回收率试验,系统适用性试验,最后结果检测。实验结果表明Ca~(2+)和Mg~(2+)的质量浓度处于2~18mg·L~(-1)和0.4~9mg·L~(-1)之间时,具有标准的线性关系,其相关系数都接近于1;Ca~(2+)和Mg~(2+)的检出浓度为0.003mg·L~(-1)和0.015mg·L~(-1),其定量浓度为0.004mg·L~(-1)和0.002mg·L~(-1),回收率也均接近100%;实验测的5批样品中Ca~(2+)的含量分别为13.5%、14.8%、15.0%、16.3%、10.6%,Mg~(2+)的含量分别为5.2%、3.8%、4.5%、6.0%、3.9%。     

Photobacterium sp.QH氨肽酶的基因克隆及其序列、酶学性质分析

目的克隆盐湖菌株Photobacterium sp.QH(Ps sp.QH)氨肽酶的基因,并对其进行序列及酶学性质分析。方法从青海盐湖采集水样,筛选Ps sp.QH菌株,进行16S rRNA分子生物学测定。通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析法从筛选菌株的发酵液中纯化氨肽酶,同时对其进行质谱分析,基因克隆及酶学性质分析。结果获得的菌株Ps sp.QH与Photobacterium halotolerans为同一属。该菌株分泌的氨肽酶属于金属螯合氨肽酶M28家族,全基因序列长1 527 bp,共编码508个氨基酸,预测其全酶分子相对分子质量为55 900,氨基酸序列与Photobacterium halotolerans氨肽酶(KKC99795.1)同源性达98%。该氨肽酶在50℃时酶活最高,40~50℃及pH 8.5时稳定性较好;Co~(2+)对其有激活作用,Mg~(2+)、Mn~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)、Fe~(2+)及Cu~(2+)对其有不同程度的抑制作用;该酶在1~3 mol/L的Na Cl溶液中仍保持较高活性。结论 Ps sp.QH分泌的氨肽酶对高盐有一定的耐受性,具有潜在的工业应用价值。     

对湘Q\HG68—80企业标准中硫酸锌含量测定方法的意见——与同行商榷

<正>在湘Q/HG68—80企业标准(简称企标)中规定:一水硫酸锌含量的测定是在PH10的氨性缓冲溶液中,以铬黑T为指示剂,用EDTA标准溶液直接滴定锌,最后算出一水硫酸锌的含量。从文献资料得知:这种滴定方法受到多种元素的干扰,铬黑T指示剂也被许多元素封闭,如Cu~(2+)、Co~(2+)、Ni~(2+)、Al~(3+)、Fe~(3+)、Ti~(4+)等。Ca~(2+)Mg~(2+)、Cd~(2+)Mn~(2+)、Pb~(2+)、Hg~(2+)等元素亦会部分或全部被络合滴定。对上述提到的锰、铁、重金属(镉、铅、汞等)在企标中作了单项测定,规定了很底的极限度,其干扰程度可忽略。剩下的铜、钴、镍、铝、钛、钙、镁共存时的干扰测定问题需要解决。这些元素中,有的也属于重金属。但没有测定,多年来我们化验了很多样品,结果如下表;     

杂质对磷酸脲收率和质量的影响

分析湿法磷酸中存在的SO_4~(2-)、SiF_6~(2-)、Fe~(3+)、Al~(3+)和Mg~(2+)等杂质离子对磷酸脲的收率和产品质量的影响。实验结果表明,SiF_6~(2-)离子浓度高有利于提高产品收率,SO_4~(2-)、Fe~(3+)、Al~(3+)和Mg~(2+)等会降低磷酸脲的收率,但都对产品质量有不同程度的影响。