1名Am亚型患者的血型血清学鉴定及输血策略

目的对Am亚型患者的血型进行血清学鉴定,并为其输血选择适合的血液成分。方法对1名ABO正反定型不相符患者,用抗-A、抗-A1、抗-B、抗-AB和抗-H单抗检测红细胞ABH抗原;A、B、O型红细胞与血浆反应检测ABO血型抗体及不规则抗体;吸收放散试验检测红细胞弱抗原;中和抑制试验检测唾液中ABH血型物质。根据患者血型血清学检测结果,选择相容血液成分进行输血。结果该患者符合Am亚型的血型血清学特征,输入O型少白细胞红细胞6U,A型单采血小板1治疗量后,均能达到预期疗效,无不良反应。输血后3个月的血型血清学检测结果与输血前完全一致。结论ABO血型鉴定时坚持正、反定型,可避免将Am亚型误定为O型,对Am亚型的准确鉴定有赖于多种血型血清学试验。Am亚型患者输血时可选择O型红细胞、A型血小板、A型或AB型血浆。     

实验性T多凝集红细胞的血型检测

人红细胞经神经氨酸酶处理后,与A、B、A B、O型成人血清及人血清制备的血型试剂都出现血凝,抗A、抗B血型单克隆抗体只与相应红细胞凝集;抗T单抗和花生血凝素只与T激活红细胞反应;抗M、抗N单抗和兔免疫血清试剂与T激活红细胞无凝集。进一步证实了人血清及其制备的血型试剂中含有抗T抗体。用血型单克隆抗体检测T激活红细胞,能得到正确的ABO定型;T激活红细胞的MN抗原已被神经氨酸酶破坏,用单抗和兔免疫血清试剂抗M、抗N都不能判断其原来MN血型。     

ABO反定型试剂特异性检测用国家参考品的制备

目的研制检测ABO反定型试剂特异性项目的血清国家参考品。方法收集健康献血员A_1、B、A_1B、O型4种型别血清,经确证实验及8家实验室联合标定,对其进行特异性、效价、不规则抗体、冷凝集抗体及稳定性考核。结果4种血清无冷凝集抗体及不规则抗体,其中A_1、B、O型血清效价均≥1∶8。根据实验结果特异性质量标准制定为A_1型血清与A_1、A_2、O型反定型红细胞反应为阴性,与B、A_2B型反定型红细胞反应为阳性;B型血清与B、O型反定型红细胞反应为阴性,与A_1、A_2、A_2B型反定型红细胞反应为阳性;A_1B型血清与A_1、A_2、A_2B、B、O型反定型红细胞反应均为阴性;O型血清与O型反定型红细胞反应为阴性,与A_1、A_2、A_2B、B型反定型红细胞反应均为阳性。本参考品开瓶12 d及25℃放置3 d、4℃5个月、-20℃半年,保存稳定性均良好,但不能反复冻融。结论已成功制备可用于多种血清免疫方法学的ABO反定型试剂特异性检测用国家参考品。     

戊型肝炎病毒抗体检测试剂的比较

目的比较国内外戊型肝炎病毒(HEV)抗体检测试剂的差异。方法用4种抗-HEVIgM试剂和5种抗-HEVIgG试剂分别检测66份急性肝炎患者血清及77份采自17名急性肝炎患者的系列血清,比较各试剂检测结果之间的差异。结果检测66份急性肝炎患者血清样本时,M1、M2、M3和M4试剂检出的IgM抗体阳性率分别为47.0%、71.2%、42.4%和40.9%;G1、G2、G3、G4和G5试剂检出的IgG抗体阳性率分别为77.3%、87.9%、66.7%、81.8%和66.7%。检测77份系列血清样本时,M1、M2、M3和M4试剂检出的IgM抗体阳性率分别为64.9%、84.4%、31.2%和32.5%;G1、G2、G3、G4和G5试剂检出的IgG抗体阳性率分别为94.8%、98.7%、83.1%、96.1%和88.3%。结论抗-HEV抗体检测试剂,尤其是抗-HEVIgM抗体检测试剂之间存在较明显的差异,临床上应结合检测HEV其他标志物对HEV感染进行综合判断。     

抗C(IgM)血型定型试剂国家参考品的研制

目的研制抗C(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)效价测定用国家参考品。方法筛选抗C(IgM)杂交瘤细胞,获得培养上清液,根据效价进行稀释,经冻干为国家参考品。对其进行分装均匀性、冻干后的外观、水分、效价检测,并联合多家实验室进行协作标定,同时进行瓶间精密度及热稳定性检测。结果国家参考品为白色冻干粉末,复溶后外观为无色或淡黄色透明液体,平均水分含量为1.70%,分装瓶间均匀性良好。经协作标定,抗C血型定型试剂(单克隆抗体)对CC红细胞的效价为1∶16,对Cc红细胞的效价为1∶8。瓶间精密度效价检测结果均一致。参考品于37℃放置3、7、14 d后,与-20℃保存的参考品效价一致。结论成功制备了抗C(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品,可用于抗C(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)效价检测的质量控制。     

抗D(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品的研制

目的研制抗D(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品。方法将抗D(IgM)杂交瘤细胞培养上清液经0. 22μm滤膜无菌过滤分装,冻干制备抗D(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品(简称参考品)。按YY/T 1238-2014《RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)》行业标准,检测其外观、pH、特异性、亲和力及效价;并由4家实验室进行协作标定,进行瓶间精密度及热稳定性试验。结果参考品外观为白色冻干粉末,复溶后为无色或淡黄色透明液体,无摇不散的沉淀及异物;pH为7. 2;效价为1∶64;与RhD阳性红细胞有凝集反应,与RhD阴性红细胞无凝集反应;凝集时间均在15 s以内,3 min凝集块均大于1 mm2。经各实验室协作标定,随机抽取的2支参考品效价均为1∶64;37℃放置3、7、14 d的效价均为1∶64。结论成功制备抗D(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)国家参考品,其瓶间精密度及稳定性均较好,可用于抗D(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)效价检测的质量控制。     

谱红细胞库的建立与应用

目的　通过对献血员和血站职工等群体普查ABO、Rh、MNSs、Duffy等 12个血型系统抗原 ,建立谱红细胞库和谱红细胞反应格局 ,用于临床鉴定特异性抗体。方法　选用盐水、菠萝酶和间接抗人球蛋白法。结果　筛出 9组O型Rh血型遣传式 (R1R1、R2 R2 、R1R2 、R1RZ、R2 RZ、R1r、R2 r、rr、rr′)和 2 9种抗原 (D、C、E、c、e、Cw、M、N、S、s、P1、Lea、Leb、Fya、Fyb、K、k、KPa、Kpb、Kpc、JSa、JSb、Dia、Xga、Lua、Lub、JKa、JKb、Jra)。结论　精选出 15个O型红细胞组成谱细胞格局 ,有 2 0种抗原鉴定抗体概率符合P <0 .0 5的要求。目的　通过对献血员和血站职工等群体普查ABO、Rh、MNSs、Duffy等 12个血型系统抗原 ,建立谱红细胞库和谱红细胞反应格局 ,用于临床鉴定特异性抗体。方法　选用盐水、菠萝酶和间接抗人球蛋白法。结果　筛出 9组O型Rh血型遣传式 (R1R1、R2 R2 、R1R2 、R1RZ、R2 RZ、R1r、R2 r、rr、rr′)和 2 9种抗原 (D、C、E、c、e、Cw、M、N、S、s、P1、Lea、Leb、Fya、Fyb、K、k、KPa、Kpb、Kpc、JSa、JSb、Dia、Xga、Lua、Lub、JKa、JKb、Jra)。结论　精选出 15个O型红细胞组成谱细胞格局 ,有 2 0种抗原鉴定抗体概率符合P <0 .0 5的要求。     

孕妇IgG类红细胞血型不规则抗体对早期诊断Non-ABO-HDN的意义

目的探讨孕妇IgG类红细胞血型不规则抗体对早期诊断Non-ABO-HDN的意义。方法筛查4200份孕妇血清中红细胞血型不规则抗体,阳性者检测抗体特异性、免疫球蛋白类型及效价;对检测出IgG类不规则抗体者,分娩时取脐血(或新生儿血)检测血清(浆)游离抗体,并进行红细胞直接抗球蛋白试验和红细胞放散试验,以诊断其是否发生HDN。结果4200份孕妇血清中检出红细胞血型不规则抗体44份(阳性率为1.05%),其中20份孕妇血清的抗体为IgG类或IgG及IgM混合抗体,脐血(或新生儿血)检测结果,10名婴儿发生了Non-ABO-HDN,1名发生了宫内死胎。致病的抗体特异性分布为:抗-D2例、抗-c1例、抗-E2例、抗-cE1例、抗-M4例(其中1例并有抗-A)。结论孕妇体内IgG类的Rh血型系统的抗体及抗-M易引起non-ABO-HDN,检测孕妇IgG类红细胞血型不规则抗体对早期诊断Non-ABO-HDN、鉴别引发HDN的抗体型别、评估HDN的严重程度及制定治疗方案均具有重要意义。     

高密度介质固相抗人球蛋白法检测孕妇ABO血型系统IgG抗体效价

目的探讨利用高密度介质固相抗人球蛋白法检测孕妇ABO血型系统IgG抗体效价的可行性。方法应用不完全抗体检测试剂盒(高密度介质固相抗人球蛋白法)检测40例O型血孕妇ABO血型系统IgG抗体效价,并与传统抗人球蛋白试管法进行对比。结果以IgG抗A(B)效价≥1:64定为阳性,两种方法的阳性检出率一致,均为50%(20/40);两种方法检测的抗体效价的几何均数差异无统计学意义(P>0.05);两种方法高度相关,r=0.9079(tr=13.36,P<0.001)。结论高密度介质固相抗人球蛋白法与传统抗人球蛋白试管法比较,操作简单,耗时短,结果准确,可应用于ABO血型系统IgG抗体效价的检测。     

用于血型鉴定的国产微柱凝胶卡抗体试剂的选择

目的筛选特异性强、效价高、亲和力高的用于血型鉴定的国产微柱凝胶卡抗A、抗B及抗D抗体试剂。方法按《中国生物制品规程》2000版中《抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)制造及检定规程》的要求,对4家公司的抗A、抗B及抗D抗体试剂进行特异性、效价、亲和力检测。结果 3批抗A、抗B单克隆抗体试剂及3批抗D抗体试剂的特异性、效价和亲和力检测结果均符合《中国生物制品规程》2000版中《抗A、抗B血型定型试剂(单克隆抗体)制造及检定规程》的要求,选择成本相对较低的上海血液生物医药有限责任公司生产的抗A、抗B试剂和英国Millpore公司亲和力更好、效价更高的抗D抗体试剂,用于制备国产微柱凝胶卡。结论 3批抗A、抗B、抗D单克隆抗体试剂均合格,已选择更优的试剂用于制备国产微柱凝胶卡。     

微柱凝胶卡式法检测红细胞不规则抗体的效果

目的评价微柱凝胶卡式法(microtubes gel test,MGT)检测红细胞不规则抗体的效果。方法分别采用MGT和传统试管抗人球蛋白法(test tube Coombs test,TT-Coombs’T)对2011年9月～2012年12月在河北省大名县人民医院输血治疗的1 147例患者的血清样本进行不规则抗体筛查,并以TT-Coombs’T作为"金标准",对MGT进行敏感性、特异性评价;采用MGT对不规则抗体检测为阳性的样本进行进一步的抗体鉴定。结果 MGT及TT-Coombs’T测定1 147份样本不规则抗体的结果均为阳性的为10份,阴性为1 137份,阳性率为0.87%,MGT的敏感性和特异性均为100%;经MGT进一步鉴定,10份不规则抗体中Rh系统抗体9份(抗-E 5份,抗-c 2份,抗-D 1份,抗-C 1份),MNS系统抗体1份(抗-M)。结论微柱凝胶卡式法检测红细胞不规则抗体敏感性和特异性好,其操作较传统试管法简便、快捷,且操作和结果的判读易于标准化,影响因素少,更适用于临床输血前不规则抗体筛查试验。     

低浓度红细胞同种抗体的浓缩提纯

目的探讨一种低浓度红细胞同种抗体浓缩提纯的方法。方法采用液态氯化钙-草酸钾法("钙-草"法)或凝血酶法去除血浆中纤维蛋白,使血浆转化成血清,再经聚乙二醇(PEG)法浓缩提纯。对浓缩提纯的终产品进行各项质量指标检测及初步应用。结果处理的8份抗-M、N、S血浆("钙-草"法)、4份抗-D、E血浆("钙-草"法)及15份抗-A、B血浆(凝血酶法和"钙-草"法)成功去除了血浆中的纤维蛋白,转化成血清,浓缩提纯的终产品各项质量指标均合格,检测献血者红细胞和血型的结果与市售试剂一致。结论以"钙-草"法去除血浆纤维蛋白,PEG法浓缩提纯血型抗体操作简便,成本低,便于推广使用。     

24例输血患者血型不规则抗体分析

目的对输血患者中血型不规则抗体检出情况进行分析,探讨不规则抗体筛检及抗体鉴定在临床输血中的意义。方法收集2006年11月～2007年9月,在山西省临汾市人民医院院输血治疗的患者标本3115份,应用盐水法、RhD初筛试验凝聚胺法检测不规则抗体,抗体筛检阳性标本进一步以微柱凝胶抗人球蛋白法鉴定,分析抗体的特异性。结果凝聚胺法检出不规则抗体22份,微柱凝胶抗人球蛋白法检出24份,其中抗-E抗体占20.8%,抗-c抗体占25.0%,抗-D抗体占12.5%,抗-P1抗体占12.5%,抗-Jkb抗体占29.2%。阳性标本中,Rh系统占62.5%,其他系统占37.5%。结论输血前对受血者进行常规的抗体筛检试验,对预防溶血性输血反应,提高临床用血的安全性和有效性具有重要意义。     

红细胞瞬间磁化试剂的制备与应用

目的研制用于ABO、RHD血型检测试剂的红细胞瞬间磁化试剂。方法采用共沉淀法制备磁性粒子,并检测其主要成分及粒径大小,用此磁性粒子制备红细胞瞬间磁化试剂,并分别进行各项检测。结果磁性粒子的主要成分为四氧化三铁,粒径100nm左右。该试剂的外观及特异性均合格,磁响应时间不超过30s,重复性较好,敏感性为98.20%,与试管法检测结果比较,差异无显著意义。结论红细胞瞬间磁化试剂可用于红细胞系统的血型检测。     

韶关地区人群ABO、Rh、MN、P及Jk~(a-b-)血型分布

目的了解韶关地区人群的ABO、Rh、MN、P及Jk(a-b-)血型的分布规律,为献血者招募及科学合理储存血液提供理论依据。方法采用U型96孔微量板法,对献血者血样进行ABO正反定型及Rh、MN、P血型检测,结果可疑者用试管法确认,并进行Jk(a-b-)表型筛查。结果ABO血型基因频率r>p>q,表型分布规律为O>A>B>AB;Rh(D)阴性占0.16%;A2亚型在AB型的检出率高于A型;MN血型的基因频率m>n,表型分布规律为MN>M>N;P血型的基因频率p2>p1,表型分布特征为P2>P1;Jk(a-b-)表型检出率为1∶22161.5。结论韶关地区血型分布以O型所占比例最多,且A型多于B型,A2亚型检出率高,Rh(D)阴性率低,Jk(a-b-)表型更低;应加大O型、A型献血者的招募并相应增加其库存量,特别是要加强Rh(D)阴性和Jk(a-b-)表型献血者的档案管理、Rh(D)阴性血液和Jk(a-b-)血液的冰冻保存工作及Jk(a-b-)人员的自身储血工作。     

梯形微板法在ABO反定型中的应用

目的评价梯形微板法在ABO反定型中的应用。方法采用梯形微板进行血型抗原抗体免疫学反应,利用高科技摄像数码分析技术进行凝集判别,确定血型,分析该方法的准确性、可靠性、重复性和脂血抗干扰性,同时以U型微板法作平行对照。结果梯形微板法的准确性为99.97%,可靠性较高,重复性为100%,且能有效避免脂血的干扰,各项指标均优于U型微板法。结论梯形微板法在ABO反定型鉴定中是一项准确性高、稳定性好的检测手段,更适合于血站系统的大批量标本的结果处理。     

强碱-阳极氧化法处理Ti片制备TiO_2薄膜的研究

本文利用强碱-阳极氧化法对钛片进行改性,制备TiO2薄膜;用扫描电镜（SEM）、X射线光电子能谱（XPS）考察了不同电解液浓度下氧化电压对TiO2氧化膜形貌及组成的影响。结果发现,在本实验条件下,该法制得的氧化膜是由三种钛氧化物组成的,主要成分是TiO2,此外还有低价钛氧化物Ti2O3及TiO;氧化电压的不同会对薄膜形貌产生重要的影响,当氧化电压较高时,氧化膜的厚度比较厚且致密;钛表面生成氧化膜大致过程可概括为：Ti→TiO→Ti2O3→TiO2,其中TiO转为为TiO2的几率依靠电势的大小及氧化时间的长短。