~(188)Re-7E11C5.3在前列腺癌裸鼠模型中的放射免疫治疗研究

为探讨188Re标记前列腺特异膜抗原单克隆抗体7E11C5.3放射免疫治疗前列腺癌裸鼠移植瘤的效果,将32只荷LNCaP移植瘤裸鼠随机分成4组:188Re-7E11C5.3组、188Re-mIgG组、188ReO4-组和对照组,采用5.55 MBq单剂量尾静脉注射给药,连续4周观察裸鼠体重和肿瘤体积变化.实验结束后,检测裸鼠血清PSA水平,测定移植瘤重量,计算抑瘤率.结果显示,188Re-7E11C5.3组的瘤体重量和动物血清PSA水平均小予对照组(P＜0.01),抑瘤率为60.7%.188Re-mIgG组和188ReO4-组的瘤体重量和裸鼠血清PSA水平与对照组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结果表明,188Re-7E11C5.3能有效抑制前列腺癌裸鼠移植瘤的生长,具有较好的抗前列腺癌应用前景.     

~(123)I-3H11在荷瘤裸鼠体内的SPECT显像

研究了123I标记单克隆抗体3H11在荷瘤裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。体内生物学分布显示,肿瘤摄取24 h时达最大值(11.06±1.86)%ID/g,注射123I-3H11 24 h T/NT比值分别为:肿瘤/血,2.90±0.06;肿瘤/甲状腺,1.51±0.42;肿瘤/胃,9.96±0.56。注射7.4 MBq123I-3H11于2、24 h行SPECT显像,显像结果表明,24 h后能清晰显像。标记抗体的裸鼠体内生物学分布结果与显像结果基本一致。生物分布和显像表明,123I-3H11可能成为一种新的胃癌SPECT显像剂。     

188Re-DTPA-DG的制备及其在荷瘤裸鼠体内的分布

制备了188Re-DTPA-DG,并观察了其在荷MCF-7乳腺癌裸鼠体内的分布。188Re-DTPA-DG制备时采用正交实验设计,结果表明,10mgDTPA-DG、100μL0.5mol/L葡萄糖酸钠溶液、100~200μL370MBq/mL新鲜淋洗的高铼酸盐、400μLpH5.0磷酸缓冲溶液、4mgSnCl2·2H2O,37℃恒温箱中反应3h为最佳标记条件。在此条件下,放化纯度为95%。标记物体外稳定性较好,室温放置6h,其放化纯度仍>92%。188Re-DTPA-DG在荷瘤裸鼠体内的分布结果显示,其在肿瘤中的摄取较高,静脉注射188Re-DTPA-DG后12h,肿瘤与周围肌肉的摄取比值(T/NT)高达12.76,显示出良好的肿瘤靶向性。     

直接法制备188Re-碘化油

探讨直接法制备188Re-碘化油的实验条件及标记物性质.在温度为75～120℃和不同实验条件下,直接标记法制备188>Re-碘化油,观测标记物标记率在室温和37℃人血浆体系中随时间的变化情况;采用红外光谱仪分析标记对碘化油分子结构的影响;用肿瘤模型动物显像验证碘油对188Re的包埋效果,以及在生物体内的稳定性半定量分析.直接法制备188Re-碘化油,在最佳标记条件下,标记物标记率可达(99.1±0.4)%;标记物在室温和37℃人血浆体系中放置3 d,标记率可保持在(90.9±1.9)%和(92.8±1.2)%.红外光谱结果显示本标记方法不改变碘化油的分子结构;荷S180骨肉瘤鼠显像表明,瘤内注射标记物48 h后,肿瘤部位仍有明显的放射性浓聚.188Re直接标记碘化油易于操作,标记物标记率高,体外稳定性好,碘油对放射性核素铼的包裹效果良好.     

NGR短肽的188Re标记及其在荷瘤裸鼠体内的生物分布和SPECT显像

采用¹⁸⁸Re标记含有天冬酰胺、甘氨酸、精氨酸（Asn-Gly-Arg,NGR）序列的肿瘤血管靶向性短肽,得到¹⁸⁸Re-NGR,观察了¹⁸⁸Re-NGR在荷HepG2肝癌细胞严重联合免疫缺陷（Severe Combined Immunodeficiency,SCID）裸鼠肿瘤模型中的生物分布,并对其进行了SPECT显像。结果显示,¹⁸⁸Re-NGR的标记率>85%,放化纯度>90%。¹⁸⁸Re-NGR在肿瘤模型鼠体内的生物分布显示,注射¹⁸⁸Re-NGR后12 h,肿瘤放射性摄取达最高,为(4.62±0.71)%ID/g,24 h时仍有(2.01±0.38)%ID/g,说明标记物在肿瘤内停留时间较长;竞争性抑制组中,12 h肿瘤放射性摄取为(1.43±0.61)%ID/g,明显低于实验组。肿瘤与肌肉组织的放射性摄取比(T/NT) 12 h为4.76。注射后1 h肿瘤可显像,4～8 h显像逐渐清晰,12 h时更为清晰。以上结果提示,¹⁸⁸Re-NGR具有良好的肿瘤血管靶向性。     

99Tcm标记NGR及其在荷人HePG2肝癌裸鼠体内的生物分布及SPECT显像

用⁹⁹Tc^m标记了含有天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸（Asn-Gly-Arg）序列的血管靶向性短肽NGR,评价了标记物⁹⁹Tc^m-NGR的放化性质以及在荷HePG2肝癌模型裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。标记结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR的标记率>90%,放化纯度>95%。荷瘤裸鼠体内生物分布结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR在肾脏和肝脏的摄取率较高,注射后1 h肿瘤摄取达（2.52±0.62）%ID/g,最高达（7.26±2.71）%ID/g,12 h仍然达（3.93±1.93）%ID/g,但在竞争性抑制组中摄取率为（1.29±0.85）%ID/g。荷瘤裸鼠的SPECT显像结果显示,除肿瘤外,其他组织器官的放射性摄取随时间延长逐渐降低,肿瘤与肌肉组织的放射性攝取比（T/NT）4 h时最高,可达3.25。注射后1 h肿瘤可见,12 h时最为清晰。以上结果提示,⁹⁹Tc^m-NGR易于制备,具有良好的靶向性, 在肿瘤的诊疗中具有良好的研究前景。     

188Re直接标记单克隆抗体TGLA及其生物学评价

单克隆抗体TGLA是一种特异性靶向CD20的嵌合抗体,能有效杀伤肿瘤细胞和抑制肿瘤细胞增长,已用于B细胞淋巴瘤的临床治疗。本研究采用直接标记法,制备188Re-TGLA,并优化了标记条件。在最佳标记条件下,标记率可达93%,体外放置24 h后,放化纯度≥85%,体外稳定性良好。荷淋巴瘤裸鼠体内分布结果表明,188Re-TGLA在肿瘤的摄取较高,在24 h时为（6.46±2.01）ID%/g,提示188Re-TGLA可以作为一种有效的显像剂,但是为了更好的显像效果,可使用抗体片段进行标记,以缩短抗体的体内半衰期,更好地与188Re匹配。     

抗乳腺癌单克隆抗体6C6和人-鼠嵌合抗体6C6CHI的放射性标记及动物实验研究

为了研究99Tcm标记的抗乳腺癌单抗6C6及嵌合抗体6C6CHI在动物体内的生物学分布及在荷瘤裸鼠肿瘤中的摄取情况,采用改进的Schwartz法进行99Tcm标记抗体。标记后的抗体由小鼠尾静脉注射,观察不同时间的小鼠血液清除、全身清除以及两种99Tcm标记的抗体在荷人乳腺癌MCF7细胞的裸鼠中肿瘤的摄取情况,并在γ相机下于注射后不同时间显像。结果表明,99Tcm标记两种抗体的标记率均大于90％,标记抗体的免疫活性大于80％。99Tcm-6C6的全身清除半衰期为4.1 h,在血液中的半衰期分别为Tα=0.55 h、Tβ=12.42 h;99Tcm-6C6CHI的全身清除半衰期为4.28h,在血液中半衰期分别为Tα=0.98h、Tβ=12.42h。在荷人乳腺癌裸鼠中的体内分布结果是:在注射99Tcm-6C6后23h肿瘤和血的％ID·g-1分别为7.42±0.85和5.67±1.44。除肾外,T/NT(肿瘤/非肿瘤)比值均大于1。在注射99Tcm-6C6CHI后23h肿瘤和血的％ID·g-1分别为4.23±0.64和6.97±0.23,除瘤/血、瘤/肾比值小于1外,其余组织的T/NT均大于1。荷瘤鼠γ显像结果显示:在注射标记抗体后24h,肿瘤显像清晰,除肾外其它脏器无异常浓聚。抗乳腺癌单抗6C6在肿瘤中有较好的特异性,而人源化抗体6C6-CHI的肿瘤摄取稍低于6C6抗体,且血中放射性比6C6抗体高,但肿瘤显像清晰,而其它脏器的T/NT比值大于1,     

~(99)Tc~m(CO)_3-BPHRGD的制备及其在荷M21人黑色素瘤裸鼠体内的生物分布

制备了99 Tcm(CO)3-BPHRGD,并进行了荷M21人黑色素瘤裸鼠体内生物学评价。在pH=7、75℃条件下反应30min,99 Tcm(CO)3-BPHRGD的标记率大于80%,纯化后标记物的放化纯度大于98%。体外稳定性实验结果显示,37℃下,标记物在生理盐水、人血清中具有很好的稳定性。荷M21人黑色素瘤裸鼠体内分布显示,注射99 Tcm(CO)3-BPHRGD后0.5、1、2、4h,标记物的瘤/血比分别为0.70±0.45、0.87±0.05、1.10±0.19、1.68±0.04。随着时间的延长,靶与非靶的放射性摄取比(T/NT)增大,表明该标记物在肿瘤细胞中的清除速度慢于其他组织。通过进一步结构修饰,改变其体内代谢途径及药代动力学性质,99 Tcm(CO)3-BPHRGD非常有希望成为一种新型肿瘤显像剂。     

3H11的~(123)I标记及其生物分布

采用Iodogen氧化法对胃癌单克隆抗体3 H11进行了123I标记,用PD-10层析柱分离纯化标记物,纸层析法测定标记物的标记率和放化纯度,评价标记物的体外稳定性,并观察了标记物在正常小鼠体内的生物分布。标记结果显示,123I-3 H11的优化标记条件为:Iodogen 10μg、3 H11 30μg、Na123I溶液20μL(13.3 MBq)、磷酸盐缓冲溶液100μL(pH7.4、0.2 mol/L)、常温下反应8 min,123I-3 H11标记率70%~80%;稳定性结果显示,标记物在4℃人血清中的体外稳定性较好,放置48 h后放化纯度92%;正常昆明鼠体内生物学分布显示,全抗3 H11血液半清除时间为12.25±0.25 h,胃组织有明显摄取。以上结果提示,123I-3 H11是一种很有前景的肿瘤放射免疫显像剂。