猪肾γ-谷氨酸基转移酶(GGT)的提纯及其稳定性

目的 提纯活性稳定的GGT，制备用于GGT（测定的参考品。方法 用差速离心法从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜，用 Triton X－100溶解膜结合的酶，用抗GGT亲和层析柱提纯 GGT，检测提纯品的有关特性。结果 提纯品GGT比活600IU/mg蛋白，得率45.5%，未测出临床常测的酶，在不同方法间的活性比与人血清GGT相似，在特定介质中制成冻干品，经加速变性试验，在-20℃和4℃预期年失活率分别为0．02％和0．25％。结论 本法提纯GGTT速度快，得率高，几乎不含杂酶，稳定性好，在不同方法间与人血清酶有互换性，是用于制备酶参考品提纯GGT的理想方法。     

四(对-磺酸钠苯基)卟啉的提纯

改进了四（对－磺酸钠苯基）卟啉（TPPS4）的合成,特别是提纯方法。以四苯基卟啉为原料,经氢横酸或浓硫酸处理合成了TPPS4,详细介绍了后处理过程。     

一种溶解酶(ATE)的分离纯化及其稳定性

An antithrombus enzyme (ATE) was precipitated by (NH4)2SO4 or ethanol from supernatant of Bacillus subtilis culture broth then purified using ion exchange chromatography on CM-sepharose fast flow. The effects of ionic strength and pH value on protein adsorption, the gradient elution at different flow rates and step elution were examined respectively. The recovery yield of the optimised process was 74.5% with a purification factor 8.1. The ATE molecular weight was estimated as 30ku by SDS-PAGE. The experimental results showed that the enzyme was stable in the range of pH 7 to pH11, and temperature 25℃ to 37℃.     

流行性乙型脑炎减毒活疫苗生产毒种(SA14-14-2株)及其疫苗的表型和E基因稳定性研究

目的　对乙脑减毒活疫苗SA14 14 2株生产毒种及其疫苗病毒滴度、脑内毒力和E区核苷酸序列进行回顾性测定。方法　应用乳金黄地鼠肾传代细胞 (BHK 2 1)结晶紫蚀斑法进行病毒滴度的测定 ,小鼠脑内法检测疫苗脑内毒力。应用RT PCR方法扩增SA14 14 2生产毒种和疫苗E区的核苷酸 ,经凝胶层析纯化的PCR产物直接用于测序或克隆到pGEM T载体中 ,经酶切和PCR鉴定后进行测序。结果　疫苗在 - 2 0℃保存长达 10多年 ,疫苗病毒滴度下降不超过 0 5lg;脑内毒力未见毒力回升。病毒蚀斑形态仍保持较SA14野毒株形态小的特性 ;以不同批次疫苗和生产毒种提取的病毒RNA作为模板进行RT PCR扩增 ,扩增的基因片段与预期大小一致 ;E区基因序列与野毒株差异的 8个氨基酸没有一个发生回复突变。结论　SA14 14 2生产毒种及其不同年度不同批次疫苗的生物表型和E区核苷酸的特性是十分稳定的