虫草头孢菌粉抗心律失常活性成分的分离纯化及结构鉴定

目的：研究虫草头孢(Cephalosporium sinensis)菌粉的抗心律失常活性成分。方法：在活性检测结果的指导下,采用硅胶柱色谱法、ODS RP C18高效液相色谱法分离纯化虫草头孢菌粉中的抗心律失常活性化学成分,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其化学结构。结果：从虫草头孢菌粉乙醇提取物的水饱和正丁醇萃取部位中分离得到5个化合物,分别是尿苷(化合物1)、胸苷(化合物2)、腺苷(化合物3)、2’-脱氧尿苷(化合物4)、尿嘧啶(化合物5)。结论：核苷类化合物为虫草头孢菌粉中的主要的抗心律失常成分。     

虫草头孢菌粉粗多糖的理化性质和含量测定研究

目的:研究虫草头孢菌粉粗多糖的理化性质并测定其多糖含量。方法:用斐林试剂检测其还原性;用硫酸-苯酚法测多糖的含量。结果:本方法制备的虫草头孢粗多糖没有还原性,不含蛋白质成分;粗多糖中多糖的含量为35.37%。     

反相液相色谱法测定发酵虫草菌粉腺苷含量

通过样品处理及检测条件的优化,建立发酵虫草菌粉腺苷含量的RP-HPLC检测方法.结果表明:Agilent-C18柱(4.6mm×300mm,5μm),乙腈+甲醇+水=5+5+90(体积比)作为流动相,检测波长260nm,流速为1.2mL/min,柱温35℃,进样量为20μL,腺苷浓度在10μg/mL～50μg/mL时,浓度与峰面积呈线性关系,最低检出浓度为1.2μg/mL,定量限为4.0μg/mL,加标回收率为95.30％～105.20％,相对标准偏差为2.32％～5.70％.     

瑞士乳杆菌LH-G51冻干菌粉生产工艺研究

目的:对瑞士乳杆菌LH-G51菌粉生产工艺进行优化。方法:通过单因素及正交试验设计,确定适合LH-G51生长的发酵培养基、冻干保护剂配方及生产工艺。结果:发酵时间、碳氮源及微量元素添加量均对LH-G51生长有明显影响。最终确定LH-G51培养基碳氮源及微量元素为葡萄糖20 g/L、大豆蛋白胨10 g/L、酵母膏15 g/L、MgSO_4·7H_2O为250 mg/L、MnSO_4·H_2O为50 mg/L、发酵时间10 h、保护剂为B。结论:根据优化工艺,LH-G51冻干菌粉活菌数可达到4.21×10^(11)CFU/g。     

不同中和剂对植物乳杆菌LP-C冻干菌粉制备的影响

研究了氨水(NH_3·H_2O)、氢氧化钠(NaOH)及碳酸钠(Na_2CO_3)作为发酵中和剂对植物乳杆菌LP-C(以下简称LP-C)冻干菌粉制备的影响。研究中对高细胞密度培养过程中的活菌数、碱液消耗速率、细胞长度及冻干过程中的冻干存活率等参数进行了监测。结果表明:(1)在高细胞密度培养阶段,使用Na_2CO_3作为中和剂时,培养终点活菌数最高,可达到(1.31±0.08)×10~(10)CFU/m L;各实验组碱液消耗速率变化趋势基本一致,均是在培养前期0~6 h快速增长,之后逐步下降;各实验组菌体长度均随培养时间推移逐渐减小,至培养终点,Na_2CO_3实验组细胞长度最小,为(1.05±0.13)μm;(2)在离心、冻干后,Na_2CO_3实验组获得的冻干菌粉活菌数最高,为(5.17±0.27)×10~(11)CFU/g,冻干存活率最高,为(89.31±0.74)%。由此可以得出,Na2CO3更合适作为中和剂应用于LP-C冻干菌粉的制备,碱液消耗速率可作为判断LP-C生长情况的间接指标,较小的细胞形态更利于提高培养液活菌数和冻干存活率。     

产肌醇的植物乳杆菌ZJ2868菌粉制备工艺

为研究产肌醇的植物乳杆菌ZJ2868的菌粉制备工艺,以菌体的存活率为指标,研究植物乳杆菌ZJ2868菌粉制备过程中的离心转速、保护剂配方、菌粉复溶条件和菌粉贮藏稳定性.结果:菌体收集的最佳离心条件:4000 r/min、10 min.最佳冻干保护剂配方:谷氨酸钠11％、脱脂乳14％和海藻糖9.0％.最佳复溶条件:在原保...     

虫草头孢提取物Fr.8组分对HepG-2胰岛素抵抗的改善作用

为探讨虫草头孢正己烷分离组分Fr.8对高胰岛素诱导的HepG-2细胞胰岛素抵抗的改善作用,作者建立了稳定的胰岛素抵抗细胞模型,并检测了Fr.8组分对胰岛素抵抗细胞(HepG-2/IR)的葡萄糖消耗、葡萄糖摄取及相关基因转录和蛋白质表达的影响。结果显示,5μmol/L胰岛素是诱导细胞成为HepG-2/IR的最佳作用浓度;Fr.8组分在无细胞毒性范围内可显著增加HepG-2/IR对葡萄糖的消耗及摄取;Fr.8(25μg/mL)可明显上调IR、IRS1、IRS2、Glut2、AMPKαmRNA的表达水平,并上调IR、IRS、Glut2、p-AMPKα、p-AKT蛋白质的表达。研究表明,虫草头孢Fr.8可改善HepG-2胰岛素抵抗,其机制可能与胰岛素受体及底物、葡萄糖转运蛋白2、pAMPKα和p-AKT蛋白的激活有关。     

几种虫草菌发酵提取物的抗菌抗肿瘤活性研究

对4种虫草菌进行液体发酵培养,以乙酸乙酯萃取获得粗提物,采用双层打孔法和体外细胞毒MTT法分别测试其抗菌和抗肿瘤活性.结果表明,深红虫草的发酵提取物兼具有较高的抗菌和抗肿瘤活性,对指示菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿色木霉和黑曲霉均表现出较强的抑制作用,对中枢神经系统癌细胞SF-268的抑制率达97.8%.高活性虫草菌在食品防腐剂和功能食品的研发方面具有开发潜力.     

几种虫草菌发酵提取物的抗菌抗肿瘤活性研究

对4种虫草菌进行液体发酵培养,以乙酸乙酯萃取获得粗提物,采用双层打孔法和体外细胞毒MTT法分别测试其抗菌和抗肿瘤活性。结果表明,深红虫草的发酵提取物兼具有较高的抗菌和抗肿瘤活性,对指示菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿色木霉和黑曲霉均表现出较强的抑制作用,对中枢神经系统癌细胞SF-268的抑制率达97.8%。高活性虫草菌在食品防腐剂和功能食品的研发方面具有开发潜力。      

植物乳杆菌菌粉对肥胖大鼠肠道黏膜屏障功能的影响

目的:探究植物乳杆菌菌粉对肥胖大鼠肠道黏膜屏障功能的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组及高脂饮食组,分别给予普通饲料及高脂饲料饲喂。饲喂5周后将高脂饮食诱导肥胖成功的大鼠随机分为肥胖模型组及高、中、低剂量菌粉干预组。菌粉干预组给予生理盐水稀释的植物乳杆菌菌粉,其余组灌胃生理盐水,每日1次。干预8周后测大鼠体质量、体脂率,酶联免疫吸附测定法测定大鼠血清脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)及D-乳酸(D-lactic acid,D-LA)质量浓度,苏木精-伊红染色观察小肠组织形态结构,实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫组织化学及Western Blot方法评估各组大鼠小肠组织ZO-1、Occludin、Claudin-1 mRNA和蛋白表达水平。结果:低剂量植物乳杆菌菌粉干预可显著减轻高脂饮食引起的大鼠体质量及体脂率升高(P<0.05);同时,也可以显著降低高脂饮食大鼠血清LPS、D-LA含量(P<0.05),缓解高脂饮食引起的肠道黏膜损伤。低剂量菌粉干预显著提高了大鼠小肠组织紧密连接蛋白ZO-1(P<0.01)、Occludin、Claudin-...     

红油香椿嫩芽不同部位理化指标及其体外抗氧化活性

试验以红油香椿为对象,研究香椿嫩芽的叶、茎不同空间部位(顶部、中部、下部)的总多酚、VC、可溶性糖、叶绿素、黄酮、可溶性蛋白质、亚硝酸盐等理化指标及其抗氧化活性,以期为香椿合理、科学、安全地开发利用加工提供理论依据。理化分析显示:除可溶性蛋白质及亚硝酸盐外,其他理化指标在香椿嫩叶中的含量均极显著高于茎中的含量(p0.01),在叶中,总多酚及VC主要集中在顶叶;叶绿素及黄酮主要富集在下部叶片;可溶性糖在中叶中含量最高。茎中不同空间部位各理化指标之间差异不显著。抗氧化活性测定结果基本和理化分析结果一致,叶部的总还原力仍高于茎部。就嫩叶各空间部位来说,顶叶对清除·OH能力及总还原能力最高,远远高于其它部位;而不同部位茎的DPPH·的清除能力差别不大,浮动范围在2.29~3.37之间。     

木瓜提取物抗氧化性质的初步研究

目的:研究木瓜抗氧化作用及抗氧化作用机制。方法:采用邻苯三酚自氧化法、DPPH法、Fenton反应法检测木瓜提取物对体外超氧阴离子自由基(O-2·)、DPPH活性氧自由基、羟自由基(·OH)的清除作用以及对小鼠心、肝、肾、血清超氧化物岐化酶、过氧化脂质、肝过氧化物酶等指标。结果:木瓜提取物可以有效清除O-2·、DPPH·、·OH等自由基,并对小鼠血清、心、肝、肾脂质过氧化物的升高有明显抑制作用,可提高其超氧化物岐化酶,过氧化酶的活性。结论:木瓜黄酮有较好的抗氧化作用。     

苦荞不同提取物对糖尿病模型大鼠血糖的影响

采用不同浓度的乙醇溶液处理苦荞麸皮原料,得到苦荞黄酮和自由D-手性肌醇含量差异显著的两种苦荞提取物。通过糖尿病模型大鼠试验发现,两种苦荞提取物对大鼠血糖相关生理指标的影响显著不同(P<0.01)。富含自由D-手性肌醇而苦荞黄酮含量较低的苦荞提取物A,其降血糖效果明显好于苦荞黄酮含量高而自由D-手性肌醇含量低的苦荞提取物B。     

中草药提取液对冬虫夏草深层培养的影响

试验了11种中草药提取液对冬虫夏草液体培养生物量和多糖产量的影响。结果得出：这11种中草药水提液除川牛膝、黄精、山药对冬虫夏草的生物量有抑制作用外，其它几种中草药均有促进作用，增幅范围在0．007-0．94倍。该11种中草药均对冬虫夏草胞外多糖的产量有促进作用，其胞外多糖增幅在0．09～0．88倍；中药醇提液除川牛膝、石斛、黄芪对冬虫夏草的生物量有抑制作用外，其它几种中药促进作用的增幅在0．16～0．67倍。除山药和黄芪外均能提高冬虫夏草胞外多糖的产量，它的增幅在0．03～0．73倍。通过比较，最后实验了当归、党参、枸杞子、川牛膝的最适添加量，前三者在150g／L，后者在50g／L。在此条件下，生物量最大分别可达26．13、22．14、23．55、15．83g／L，胞外多糖的最大产量分别达到7160．2、7580．3、6830．5、6583．6g／L。以上11种中药对冬虫夏草胞内多糖也有一定的促进作用，但增幅不大。     

化学保藏剂对离体中华枝睾吸虫囊蚴生命力的影响

目的 探究柠檬酸、乙酸、氯化钠、亚硝酸钠和乙醇5种化学保藏剂对离体中华枝睾吸虫囊蚴生命力的影响.方法 从感染中华枝睾吸虫的鱼肉中消化分离出中华枝睾吸虫囊蚴,吸取一定数量的囊蚴置于添加有不同食品化学保藏剂的PBS缓冲液中,观察其活动能力及形态结构随时间的变化.结果 柠檬酸、氯化钠、亚硝酸钠对中华枝睾吸虫囊蚴的致死效果微弱,浓度＞5％的乙酸溶液及浓度＞10％的乙醇溶液能够使囊蚴失去活动力而死亡,但作用时间较长.低浓度乙醇则会刺激囊蚴、囊蚴内幼虫,使其活动加剧,但随时间延长,活动力减弱.结论 化学保藏剂对中华枝睾吸虫囊蚴的致死效果微弱,其他非热处理方式及作用效果仍值得进一步研究探讨.     

青蛤酶解多肽对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用

研究酶解法制备的青蛤多肽（Cyclina sinensis peptides,CSP）对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。以RAW264.7巨噬细胞相对增殖率为指标,选用胃蛋白酶对青蛤肉进行酶解,酶解液经超滤、冷冻干燥后,采用噻唑蓝（methyl thiazolyltetrazolium,MTT）法筛选出增殖活性最高的组分进行免疫调节作用研究。采用MTT细胞增殖实验、倒置显微镜观察、中性红吞噬实验、硝酸根还原酶法及酶联免疫吸附检测法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定CSP-5对RAW264.7巨噬细胞的生长与增殖、细胞形态、吞噬能力、一氧化氮（nitric oxide,NO）分泌能力及细胞因子白介素（interleukin,IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）分泌能力的影响;同时还研究了CSP-5对巨噬细胞各周期分布的影响。结果表明,分子质量小于3 kDa的CSP-5对RAW264.7细胞的生长与增殖具有明显的促进作用,且主要作用于G0/G1期,对细胞吞噬能力、NO分泌能力和细胞因子分泌能力的提高具有显著的促进效果;形态学观察结果显示经CSP-5作用后巨噬细胞体积变大且长出较多伪足。由此可知,CSP-5具有激活巨噬细胞增强机体免疫力的潜在作用。     

冬虫夏草多糖组分研究及药理实验

虫草多糖是冬虫夏草中的主要有效成分。对虫草菌菌种进行了分离纯化及选育,筛选出一株稳定的产生可溶性虫草多糖水平最高的菌株,优化培养基配方,进行了发酵罐中试生产,制订出虫草多糖的提取及精制工艺,采用层析及电泳技术,分析了虫草多糖的成分及结构。对虫草多糖进行了毒性及药理研究,结果显示属于无毒物质,并且具有明显的增强免疫和抑制肿瘤的作用。     

冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性

研究了人工培养冬虫夏草胞外多糖的体外抗氧化活性。通过体外抗氧化模型和分光光度法研究了5种胞外多糖级分在不同体系中对超氧阴离子和羟自由基的清除作用、Trolox等价抗氧化能力。结果表明:胞外多糖各级分均能较好的清除O2-.、.OH和ABTS+.自由基,且级分EPS-1A-F3的作用效果强于其他各级分,进一步揭示其在膳食和理疗上具有潜在的应用价值。     

冰温结合开孔调湿包装对香椿嫩芽的保鲜效应

以红油香椿为试验材料,4℃预冷12h后装入不同开孔面积(厚度0.06mm)的PE保鲜袋中,封口后置于冰温库(-0.5℃)中贮藏。通过测定贮藏期间香椿失重率、VC、可溶性蛋白、叶绿素、总多酚、黄酮、可溶性糖、丙二醛(MDA)含量及多酚氧化酶(PPO)活性变化,探讨冰温结合开孔调湿包装技术对香椿嫩芽贮藏保鲜效应的影响。结果表明:在-0.5℃,PE保鲜袋适宜的开孔面积为141.3 mm2(占总面积的0.14%)时,可以有效降低产品失重率,延缓VC、可溶性蛋白质、总多酚、可溶性糖、叶绿素、黄酮含量的下降,并能延缓膜脂过氧化的进程,抑制多酚氧化酶活性,较好地保持香椿嫩芽的贮藏品质。