嗜酸乳杆菌生物抗性的研究

选择一株嗜酸乳杆菌优良菌株为研究对象,用平板菌落计数法测定嗜酸乳杆菌在各因素的作用下的存活率来研究其耐酸、耐渗透压、耐胆盐能力以及模拟人体肠胃环境研究胃酸、食盐、胆盐对嗜酸乳杆菌的综合影响;从实验结果得出嗜酸乳杆菌具有一定的抗性能力。      

耐酸耐胆盐嗜酸乳杆菌的紫外诱变选育

通过紫外诱变提高嗜酸乳杆菌的耐酸耐胆盐能力。通过正交试验确定了诱变参数：20 W紫外灯,菌液稀释至OD6000.65左右,照射60 s,照射距离为30.5 cm,此条件的致死率为90.5%。诱变处理后的菌体在模拟人肠道胆汁盐浓度（0.3%）以及pH=2的选择性培养基中处理不同时间后,活菌计数,最终筛选出具有耐胆盐能力显著增强的突变体L.a.abr。在含0.3%胆盐和pH为2的选择性培养基中培养1.5、2.0、2.5 h时的存活率分别为19.57%、10.87%和4.78%,而出发菌株的相应存活率分别为3.68%、1%、0.23%。     

嗜酸乳杆菌的筛选及培养基的优化

通过模拟正常人体胃内状态,筛选出10株耐酸耐胆盐的嗜酸乳杆菌。针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比:蛋白胨1%,葡萄糖0.5%,大豆低聚糖1.5%,酵母膏1.0%(均为质量分数);最佳增殖因子添加量为西红柿汁12%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH值和OD值的变化确定增菌培养终止时间为16h,通过平板菌落计数,此时菌数可达2.2×1012mL-1。     

原生质体融合提高嗜酸乳杆菌耐酸及耐胆盐能力

两株不同来源嗜酸乳杆菌La-w1和La-w2进行原生质体融合,获得一株耐酸和耐胆盐能力强的菌株La-F1,并对其生长特性进行研究。结果表明,融合菌株La-F1耐酸性和耐胆盐能力明显高于初始菌株,其生长特性适于乳酸发酵食品要求。     

嗜酸乳杆菌生理特性的研究

本文以实验室保藏的一株嗜酸乳杆菌为研究对象，研究了该菌的生理特性，包括生长曲线的测定，渗透压对菌体生长的影响，耐胆盐性，同化胆固醇及抑菌能力。结果表明，嗜酸乳杆菌为革兰氏阳性菌，培养16h是最佳收获期，最高可耐受浓度为6％的NaCl，菌体在0．5％的胆盐溶液中放置0．5h后存活率为80％，胆固醇同化率为57．06％，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有明显的拮抗作用。     

嗜酸乳杆菌发酵乳的研究

以嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌为发酵剂,发酵制成具有保健功能的新型酸乳——嗜酸乳杆菌发酵乳。     

芦荟嗜酸乳杆菌酸乳的研制

以嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌为发酵剂菌种 ,通过预先筛选和进一步的正交试验确定了芦荟嗜酸乳杆菌保健酸乳的最佳配方和工艺条件 :芦荟全叶汁和 1 1 %的脱脂复原乳以体积比 1∶9混合作为原料 ,添加原料量 8%的蔗糖、1 %的麦芽糖、接种量 2 %,菌种比为 1∶2或 1∶1 ,培养温度42℃。     

嗜酸乳杆菌培养的研究

本实验以普通营养培养基为对照,通过对pH的调节,加入不同碳源、氮源,对嗜酸乳杆菌的培养进行研究,结果表明:嗜酸乳杆菌的生长在很大程度上受到培养基的pH的影响,-般在pH 3.8的时候,嗜酸乳杆菌的生长就会受到抑制;嗜酸乳杆菌的生长也受碳源和氮源比值的限制,培养基中氮源过多,会引起微生物生长过于旺盛,不利产物的积累;如若氮源不足则菌体生长过慢,而碳源供应不足时容易引起菌体衰老和自溶.最佳培养基是:葡萄糖2%、蛋白胨2%、氯化钠0.1%、硫酸锰0.001%、硫酸镁0.02%、乙酸钠0.05%、pH6.0.     

嗜酸乳杆菌板栗酸乳的研制

利用鲜牛乳为原料,通过添加适量的板栗水解液,以嗜酸乳杆菌(同时添加0.5%的嗜热链球菌)为发酵剂,对制作保健型发酵乳进行了研究.结果表明,当嗜酸乳杆菌发酵剂的接种量为2%,发酵温度为37℃,发酵时间为17h,可以得到状态均匀、乳白色、透明、乳香浓郁、酸度和谐一体的酸乳.发酵结束后,在4℃下储藏5d,检测活菌数为4.27×108个/mL.     

嗜酸乳杆菌和双歧杆菌益生特性的研究

以两株嗜酸乳杆菌和三株动物双歧杆菌为研究对象,详细研究它们的耐胃酸性、耐胆汁盐性、抑菌性和抗药性。结果表明:五株益生菌具有良好的耐酸耐胆汁盐性,双歧杆菌的耐酸性较强于嗜酸乳杆菌;抑菌性和抗药性结果表明:五株益生菌对致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌均有抑制作用,嗜酸乳杆菌的抑菌性较强于双歧杆菌;五株益生菌对三种抗生素乙酰螺旋霉素、链霉素和青霉素均敏感,敏感程度各异。     

嗜酸乳杆菌WS所产细菌素生物学特性的研究

LactobacliiusacidophilusWS在MRS培养基中经过37℃培养得到的细菌素经受70℃、121℃处理20min后,活性几乎不变,对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌有明显的抑制作用,而对大肠杆菌为代表的革兰氏阴性菌的抑制作用不明显,说明该细菌素是一种广谱抗菌的细菌素。细菌素对木瓜蛋白酶(papain)、蛋白酶K(proteinaseK)以及胰蛋白酶(trypsin)敏感,而对中性蛋白酶(subtilisin)和胃蛋白酶(pepsin)的敏感性差。在一定的范围内,细菌素的抑菌活性和环境的酸度呈正相关。     

嗜酸乳杆菌生物学特性及其发酵乳的研究

研究了嗜酸乳杆菌的生物学特性,并确定其发酵乳的合适的加工工艺。结果表明,在质量分数为11％脱脂乳培养基中加入质量分数为7％的啤酒能显著提高嗜酸乳杆菌的产酸速率及活菌总数。该菌株耐盐和耐胆酸盐能力分别达到6 0％和1.5％,同化胆固醇达80％,证明是一株性能优良的益生菌株。在此基础上确定嗜酸乳杆菌发酵乳的加工工艺:①采用乳糖部分水解的牛乳（水解率40％）为原料,接种质量分数为3％的嗜酸乳杆菌;②采用混合菌种（嗜酸乳杆菌+唾液链球菌嗜热亚种+德氏乳杆菌保加利亚亚种=3％+0.5％+0.5％）为发酵剂,按常规酸乳工艺生产。产品中嗜酸乳杆菌的活菌数达到109mL-1以上,5d后其活菌数仍有6×108mL-1,且产品口风味良好。     

嗜酸乳杆菌增菌培养研究

对培养嗜酸乳杆菌的基础培养基进行筛选,确定为11％NFM培养基。采用正交试验对增殖因子进行优化,得到最优增菌培养基:基础培养基+5％番茄汁+10％萝卜汁+0.1％肝浸汁+5％啤酒。以最优增菌培养基测定生长曲线、pH值和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10hr,此时活菌数达7.49×10~9cfu/ml。     

嗜酸乳杆菌发酵乳保藏性的研究

对嗜酸乳杆菌发酵乳在冷藏条件下保藏性进行了研究. 结果表明, 7 ℃条件下 14 d两株嗜酸乳杆菌发酵乳中细菌的存活率分别为 3.43% 和 2.20%, 且活菌数仍在 108 mL 1以上, 酸度为 90 ° T和 107 ° T, 双乙酰分别增加了 11.80% 和 56.41%, 乙醛含量分别为 2.993 mmol/ mL和 2.561 mmol/ mL, 使发酵乳具有良好风味.     

嗜酸乳杆菌冻干菌粉保护剂选择的研究

为了开发以嗜酸乳杆菌为基础的各类制品,本文以嗜酸乳杆菌存活率为指标,对保护剂进行了单一和复合的筛选及配方的研究,并进行了验证实验。结果表明,单一及复合保护剂均对菌体存活率具有一定的保护作用,但复合保护剂的效果明显高于单一保护剂。最终确定出配方:脱脂乳(16.0%)、麦芽糊精(10.0%)、海藻糖(10.0%)、L-谷氨酸(1.0%)、维生素C(2.0%)、甘油(2.0%)、MnSO4(0.8%)对嗜酸乳杆菌的保护效果最佳;保护剂与细胞悬浮液最佳比例是2∶1,利用此保护剂,经真空冷冻技术可制得活菌水平在1010cfu/g的嗜酸乳杆菌冻干菌粉。     

嗜酸乳杆菌优良菌株筛选及其生物学性状的研究

对嗜酸乳杆菌6个菌株的产酸力、胆盐抗性、生物量及同化胆固醇性状进行了测定、比较,从中筛选出LA－1、LA－3两株。其产酸力可达209．5°T,胆盐抗性为0．50%的胆盐浓度,能够同化60%－80%的胆固醇,可较好地用于制备微生态活菌制剂。     

酸奶中嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌检测方法的研究

根据嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌对不同碳水化合物的选择性利用，设计了适合上述4种乳酸菌的选择性计数培养基，并对其效果进行了验证。结果表明，利用MRS培养基、麦芽糖-MRS培养基和山梨醇-MRS培养基(两种培养基共同使用)能满足选择性计数的要求。以所设计的选择性培养基，研究了含有4种乳酸菌的酸奶中不同乳酸菌在产品货架期内活菌数的变化规律。     

嗜酸乳杆菌粉末发酵剂的研制

研究了来自动物、植物及微生物的天然复合有机营养物对嗜酸乳杆菌在高温下的保护作用。结果表明,植物寡聚糖和动物多肽,植物寡聚糖和藻类浸提物,植物寡聚糖和动物多肽和真菌多糖,植物寡聚糖和真菌多糖和藻类浸提物,植物寡聚糖和动物多肽和藻类浸提物分别与脱脂乳混合使用,其抗热效果显著,菌存活率分别为32.8％、25.6％、41.8％、29.9％和72.2％,而对照组只有1.21％。以植物寡聚糖和动物多肽和藻类浸提物和质量分数为15％牛乳的混合物为培养基,培养菌体,经喷雾干燥,制得的嗜酸乳杆菌发酵剂,经检测,质量指标均符合发酵剂要求,其中嗜酸乳杆菌活菌数达8.7×108g-1。     

瑞士乳杆菌和嗜酸乳杆菌的益生免疫特性的研究

以瑞士乳杆菌KLDS 1.8701和嗜酸乳杆菌KLDS AD1、KLDS AD2为研究对象,详细研究了它们对体外模拟人工胃肠道的耐受性,并评估了三株乳杆菌对小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响,初步探讨了三株乳杆菌的免疫活性。结果表明,三株乳杆菌对人工胃液、人工肠液、胆汁盐环境具有很好的耐受性,瑞士乳杆菌KLDS 1.8701和嗜酸乳杆菌KLDS AD1较强于嗜酸乳杆菌KLDS AD2。乳杆菌对脾淋巴细胞增殖活性的作用表现出明显的量效关系,活菌数为107CFU/mL时,对脾淋巴细胞活性影响大小为KLDS AD1>KLDS 1.8701>KLDS AD2;KLDS 1.8701对脾淋巴细胞的增殖具有很好的促进作用,只有当KLDS AD1的活菌数达到107CFU/mL时才具有促进作用,而KLDS AD2没有促进作用。