酶解拟黑多刺蚁制备抗氧化活性肽

分别采用Alcalase2.4L、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰酶水解拟黑多刺蚁,利用超氧自由基、DPPH自由基、羟基自由基清除能力、还原力、铁离子螯合能力、亚油酸自氧化抑制能力6个指标衡量水解物的抗氧化能力,并结合水解度(DH)、蛋白质利用率、多肽含量等理化指标筛选最适蛋白酶。结果表明,酶解物具有良好的体外抗氧化活性,其抗氧化活性与抗氧化肽的剂量呈正相关,其中Alcalase2.4L水解能力、酶解液抗氧化能力最强。还研究了热处理、超声、均质等预处理方式对水解能力、抗氧化能力的影响,发现均质对酶解产物的影响最大。      

拟黑多刺蚁乙醇浸提液的理化性质及抗氧化活性研究

采用Alcalase 2.4 L水解拟黑多刺蚁,以抗氧化活性为指标,并结合蛋白质利用率、多肽含量等指标比较拟黑多刺蚁及其酶解物的醇提物的理化性质及抗氧化性的区别。结果表明,在乙醇浓度介于35~75%,酶解拟黑多刺蚁醇提物的氨基酸和多肽含量分别介于4.20~3.19 mg/g和5.19~4.07 mg/mL,是没有经酶解的拟黑多刺蚁醇提物的2倍左右。酶解提高了拟黑多刺蚁醇提物的抗氧化性,在乙醇浓度为55%时,其超氧自由基、DPPH自由基、羟基自由基清除能力和还原力的IC50分别为0.276、0.106、0.279和0.227mg/mL。同时,酶解拟黑多刺蚁醇提物的重要微量元素Zn、Mn和Ca也有显著提高。     

拟黑多刺蚁的理化分析

主要测定了拟黑多刺蚁的理化性质。拟黑多刺蚁蛋白质含量为54.51%,氨基酸总量为43.91%,必需氨基酸占氨基酸总量的32.49%,必需氨基酸指数为0.97,故该蚁是一种优质蛋白源;电感耦合等离子体质谱测定结果显示拟黑多刺蚁富含多种微量元素,特别是K、Fe、Ca、Mg、Na等;采用考马斯亮兰法测定不同pH值下可溶性蛋白质的变化,发现拟黑多刺蚁在偏酸和偏碱的条件下可溶性蛋白质逐步升高,且碱性条件下较酸性条件下高;采用顶空/气相-质谱联用法测定水浸提液的风味成分,共检出12类36种物质,主要成分为C2-C13的小分子的醇类、醛类、胺类。拟黑多刺蚁营养成分丰富,结构合理,综合应用前景十分广阔。     

血红林蚁与拟黑多刺蚁对小鼠迟发型超敏反应的影响

本文研究了血红林蚁与拟黑多刺蚁对小鼠迟发型超敏反应的影响。结果表明血红林蚁对正常小鼠的ＤＴＨ具有增强作用，表明血红林蚁具有增强小鼠细胞免疫功能的作用；血红林蚁，拟黑刺蚁对环磷酰胺所致免疫亢进或低下小鼠的ＤＴＨ具有恢复正常水平的作用，表明血红林蚁，拟黑多刺蚁具有双向调节机体细胞免疫功能的作用。     

黑蚂蚁蛋白的酶解优化及抗氧化肽的超滤膜分离

本文研究了酶量、温度、pH和时间四个因素对黑蚂蚁蛋白的碱性酶法水解的影响。通过响应面设计,以各个抗氧化活性为指标,优化了超氧自由基清除率,DPPH自由基清除率,羟基自由基清除率,还原力和亚油酸自氧化抑制作用最强的酶解工艺条件。验证实验证实方程的准确率达95%以上。采用超滤膜及离子交换色谱对酶解产物进行了分离,发现5-10 kDa和1-3 kDa组分的抗氧化能力最强,碱性肽对超氧自由基清除能力、羟基自由基清除能力、亚油酸自氧化抑制作用贡献较大,酸性肽对DPPH自由基清除能力及还原力的贡献较大。     

拟黑多刺蚁制品祛黄褐斑作用的人体试食观察研究

为了解拟黑多刺蚁制品祛黄褐斑的保健作用,对30例黄褐斑志愿者进行了初步人体试食观察。每日服用以拟黑多刺蚁为主要原料的××口服液,日服3次,每次2支,每支10mL,连续30d,结果表明受试者黄褐斑面积平均下降30.08±27.41mm     

拟黑多刺蚂蚁的营养成分分析和蚁皇浆的研制

本研究测定了拟黑多刺蚂蚁的蛋白质、氨基酸、某些维生素和微量元素的含量。用该种蚂蚁的提取物配以食药两用的红景天等中草药，制成了保健饮品＂蚁皇浆＂，观察了＂蚁皇浆＂的抗衰老、增强免疫等功能作用。     

Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清制备抗氧化活性肽

研究Alcalase碱性蛋白酶酶解鸡蛋蛋清制备小分子活性肽.确定酶解的最佳工艺是:酶解pH值为9.0,酶解温度为70℃,底物浓度[S]为4.5%,酶加入量[E]/[S]为6%.水解时间4 h,水解度达到33%.采用化学发光法研究蛋清肽混合物的抗氧化性,结果表明,不同浓度和水解度的蛋清肽混合物均具有清除活性氧和抗脂质氧化的能力.随着蛋清肽混合物浓度增大,清除能力增大,抗氧化性增大.不同水解度的蛋清肽混合物,其清除活性氧和抗脂质氧化能力稍有不同,但区别不大.用葡聚糖凝胶SephadexG-15测定水解物分子量分布,结果表明水解产物中的主要成分是分子量集中在1300u的寡肽.     

双酶酶解制备黑小麦麸皮抗氧化肽

采用双酶法分步酶解黑小麦麸皮蛋白制备抗氧化肽,以水解度、肽得率及总抗氧化活性为指标,通过单因素试验及正交法优化其最佳工艺条件。第一步采用碱性蛋白酶酶解的最佳条件为pH 9,时间2 h,温度50℃,酶添加量18000 U/g;黑小麦麸皮蛋白水解度为11.46%,肽得率为38.33%,总抗氧化活性为6.65μmol/g。第二步采用风味酶酶解的最佳条件为pH 6,温度50℃,时间2 h,酶活添加量10000 U/g;此时水解度为22.74%,肽得率为52.36%,总抗氧化活性为8.47μmol/g。     

响应面试验优化酶解法制备海洋微藻微拟球藻抗氧化肽工艺

以海洋微藻饵料微拟球藻蛋白为原料,采用胃蛋白酶酶解制备微拟球藻抗氧化肽。以酶解产物的水解度和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除活性为评价指标,研究酶底比（质量百分比）、底物质量浓度、酶解温度和pH值对酶解产物的影响。在单因素试验的基础上,利用响应面法优化制备高抗氧化活性抗氧化肽的工艺条件,确定最佳酶解工艺条件为：底物质量浓度5.0?mg/mL、酶解温度32?℃、pH?1.36、酶底比6%。在最佳酶解条件下实际测得微拟球藻抗氧化肽的DPPH自由基清除率为51.85%。     

藻蓝蛋白抗氧化肽的制备工艺研究

研究了藻蓝蛋白抗氧化肽制备的最佳酶解工艺及抗氧化活性。以还原能力为考察指标,藻蓝蛋白为底物,木瓜蛋白酶为水解酶,采用正交设计优化水解条件。结果表明,影响藻蓝蛋白抗氧化肽制备的各因素排列顺序为:时间>温度>pH值>[E]/[S],制备藻蓝蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为温度50℃、时间为3h、[E]/[S]1:20、pH7.0,此条件下制备的藻蓝蛋白抗氧化肽还原能力最强为0.948。另外藻蓝蛋白抗氧化肽对超氧阴离子和羟基自由基均具有显著的清除作用,且表现出一定的量效关系。     

酶法制备碎米抗氧化肽的研究

以碎米为原料,采用酶法制备抗氧化肽。以水解物的还原力为评价指标,利用不同蛋白酶水解碎米蛋白,结果得出风味蛋白酶为最佳水解酶;通过单因素和正交实验,得到最佳酶解工艺条件:液料比6∶1(mL/g)、pH6.5、加酶量4000U/g、酶解温度53℃、酶解时间3h,在此条件下水解液还原力最大。      

酶解王米蛋白粉制备抗氧化肽

以玉米蛋白粉为原料,2709碱性蛋白酶为水解酶,采用正交实验设计优化水解条件,用NBT法和D2-脱氧核糖法测定水解所得玉米肽的抗氧化活性.结果表明,制备玉米抗氧化肽的最佳酶解条件为pH9.5,[E]/[S]=10%,时间4h,温度55℃,该条件下制备的玉米抗氧化肽对O2-·和·OH有很强的清除作用,清除率分别为54.42%和82.31%.     

酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的研究

为优化Alcalase蛋白酶酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以DPPH自由基清除率作为指标,通过单因素试验考察酶解温度、底物浓度、酶与底物浓度比（[E]/[S]）、酶解pH和时间对DPPH自由基清除率的影响,在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken设计,建立并分析各因素与清除率之间关系的数学模型;并对酸枣仁蛋白酶解产物的氨基酸组成及含量进行分析。结果表明:酶解酸枣仁蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件为酶解温度51.2℃、酶解pH8.1、底物浓度4.7%,在此条件下DPPH自由基清除率的最大理论值为91.59%,该回归模型具有较好的预测性能,可用于指导生产实践。酸枣仁蛋白酶解产物共含有17种氨基酸,富含脯氨酸、甘氨酸和谷氨酸。      

酶解法制备豌豆抗氧化肽及其稳定性的研究

以DPPH自由基清除率为指标,研究了豌豆蛋白经过碱性蛋白酶酶解后的豌豆多肽的抗氧化活性,并研究了温度、p H及胃肠模拟消化条件下对豌豆抗氧化肽活性的影响。试验结果表明,在p H为7,温度为37℃条件下,豌豆抗氧化肽的DPPH自由基清除率保持稳定。高温、过酸或过碱条件均可大幅度降低豌豆抗氧化肽的DPPH自由基清除率。胃蛋白酶处理对豌豆抗氧化肽的活性无显著影响,胃蛋白酶和胰蛋白酶共同处理后,豌豆抗氧化肽的活性显著提高(P0.05)。豌豆蛋白是潜在的制备抗氧化肽的优质资源。     

二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究

通过碱性蛋白酶进行第一步酶解,胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分别进行第二步酶解制备鱼鳞明胶抗氧化肽。结果表明,二步酶解法能有效提高酶解物的水解度,降低水解物的分子量,碱性蛋白酶—胰蛋白酶水解物具有显著的自由基清除能力和Fe~(2+)螯合能力。通过响应面优化的胰蛋白酶最佳二步酶解工艺为:底物浓度100 mg/mL、pH 7.8、温度53℃、时间50min,该条件下制备的水解物的Fe~(2+)螯合率为65.72%,清除DPPH·、·OH和O_2~-·的IC_(50)值分别是7.39,0.68,1.84mg/mL。     

酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的研究

利用木瓜蛋白酶酶解核桃分离蛋白制备小分子活性肽,并研究了不同分子量段核桃小分子肽的抗氧化性能。通过单因素实验和正交实验,确定了木瓜蛋白酶制备抗氧化肽的最佳酶解条件为:pH8.5,温度50℃,酶与底物浓度之比[E]/[S]=3:100,底物浓度[S]=3.5g/100mL,酶解时间5h。用截留分子量分别为3kDa和10kDa的超滤膜将核桃粗肽液分离成<3kDa、3～10kDa及>10kDa3个分子量段,并对不同分子量段核桃多肽的抗氧化性进行了研究,结果表明,分子量<3kDa的核桃多肽的抗氧化性大于其他两个分子量段。     

绞股蓝黑蚂蚁复合保健饮料的研制

以绞股蓝和黑蚂蚁为主要原料,运用正交试验设计对绞股蓝黑蚂蚁复合保健饮料的加工进行研究。结果表明绞股蓝适宜水提工艺为料液比1:14(g/ml)、提取时间2h、提取温度80℃,黑蚂蚁酶解适宜工艺为木瓜蛋白酶添加量0.3%、pH6～7、料液比1:8(g/ml)、酶解温度45℃、酶解时间2.5h,复合饮料的配方为:绞股蓝水提液:黑蚂蚁酶解液2:1、混合液10%、蜂蜜2.8%、柠檬酸0.10%、白砂糖10%、食盐0.05%。该饮料色香味俱佳、营养丰富且具保健功能。