Co60诱变原生质体选育高产酒精酵母

将较高产酒精酵母制备成原生质体,经Co^60诱变后,采用四级筛选,得到高产酒精酵母菌株Co-158,其遗传性状稳定。以玉米粉糖化醪为基质发酵72h,成熟醪酒精体积分数为17～％（v／v）,残还原糖为0．0137％。Co-158菌;洙成熟醪酒精体积分数比出发菌株提高了16．34％,比ADY提高了24．48％,残还原糖含量亦远远低于出发菌株和ADY。     

紫外诱变选育高产酒精及酸的酿酒酵母

利用紫外辐照的方式对从葡萄表面筛选的菌株Y6进行诱变,选育出产酒精能力强、产酸能力高并且发酵性能稳定的酿酒酵母菌株。通过单因素试验选择酵母菌株距30 W紫外灯30 cm照射100 s,致死率为75.62%为最佳诱变条件。采用三苯基氯化四氮唑（TTC）法和溴甲酚绿法以及杜氏小管筛选出产酒精和产酸强的目标菌株Y6-5,并对其遗传稳定性进行研究。结果表明,诱变菌株Y6-5与出发菌株Y6相比较,其产酒精、产酸能力分别提高了28.13%和201.41%,并且遗传稳定性良好。     

耐高酒度酵母菌株的选育

本研究从工业微生物菌种保藏中心和生产厂提供的２６支菌株，采用浓糖化酵发酵，初筛出发菌株，并经紫外线诱变（照射３０秒）和驯化分离，筛选的一支耐高酒精度酵母菌株，在１０升发酵罐规模，拌料水比１∶２．６，发酵６８小时，成熟醪酒精分可达１３％（ｖ／ｖ）以上，残总糖。残还原糖分别在１．５％、０．２％以下。该菌株用于酒精生产，可提高生产能力２０％以上，降低生产成本，还可减少酒精糟排放量，从而降低生产蛋白饲料的投资，能耗与成本。     

高产β-苯乙醇黄酒酵母的选育

黄酒中重要的风味物质β-苯乙醇主要由黄酒酵母(酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae)代谢产生,提高黄酒酵母β-苯乙醇产量可显著提升黄酒风味。本研究以绍兴地区酿酒酵母为紫外诱变出发菌株,对紫外诱变菌株进行底物类似物抗性筛选、酒精耐受性筛选、黄酒模拟液筛选,得到可提高β-苯乙醇产量的正突变菌株,再经产孢纯化与筛选得正突变菌株BYC-3。在发酵体系不外源添加前体化合物情况下,正突变菌株BYC-3菌株β-苯乙醇产量达238.12 mg/L,是出发菌株的2.67倍,其产酒精能力与出发菌株没有显著性差异,可为高品质黄酒开发提供参考。     

利用电场诱导原生质体融合技术选育高产耐高温酵母融合株

本实验以酒精生产菌株ｓｂ７２４的呼吸缺陷突变株ｒｈｏ－和１３００（Ｈｉｓ－）及耐高温菌株ｙ－ｗ（Ａｐｓ－）（假丝酵母）为出发菌株，采用电场诱导原生质体融合技术，经发酵筛选获得了２株稳定的单核融合子Ｆ１６和Ｆ１９。同时对两株融合子的生物学特性、倍性遗传稳定性及耐高温和发酵性能的测试结果表明：Ｆ１６为三倍体，不生假丝；Ｆ１９为非整倍体，也不生假丝。它们在３８℃下比生产菌株ｓｂ７２４的酒精生产率分别增加１２２％和４６７％。     

桑椹果酒专用酵母的诱变选育研究

将筛选到的一株桑椹果酒专用酵母Y11进行单倍体细胞的制取,分别先后进行紫外辐照和微波处理诱变,利用三级筛选模式,从大量的平板中筛选出一株具有酿造桑椹果酒的优良酵母ME44菌株。筛选结果表明,紫外辐照20-40s内可获得较好的诱变结果（正变率31．1％～41．2％）,微波处理15s可获得理想的诱变结果（正变率22．1％）,增大剂量可增加正变率。ME44菌株在7d的发酵周期内酒精体积分数为11．7％Vol,比出发菌株提高了7％以上,且菌株起酵快,可提高果酒品质。     

耐高温耐高酒度醋酸菌突变株的选育

以从高温季节发酵良好的醋醅中，分离筛选出的N9、F17两株醋酸菌为出发菌株，经紫外线、硫酸二乙酯逐级诱变，分别获得编号为HNl5、HF6两株耐高温耐高酒度醋酸菌株。在培养温度40℃，培养基酒度12％（V／V）条件下，HN15酒精转化率为75％，HF6酒精转化率为70％。     

耐高温酒精酵母菌株的筛选及发酵能力比较

采用酵母菌富集培养方法和选择性培养基从中国传统大曲酒等基质中共分离得到58株具有一定的酒精发酵能力的酵母菌株。经过初筛和复筛,从中筛选获得1株能在33℃～42℃生长良好,并具有良好酒精发酵性能的酵母菌株XG-1,经分类鉴定为酿酒酵母菌（Saccharomyces cerevisiae）。40℃液体摇瓶培养条件下,XG-1菌株活菌数占总菌数的比率较安琪耐高温酿酒高活性干酵母（TRADY）高15％。将其与TRADY菌株进行木薯酒精发酵比较,33R2条件下两者的酒精发酵能力相当,但在42℃时进行酒精发酵,XG-1菌株的酒精度比TRADY菌株高20％。     

优良耐酸酿酒酵母的筛选及发酵特性研究

该研究采用酸性选择培养基、氯化三苯基四氮唑（TTC）显色法、杜氏小管发酵法从实验室保藏的87株酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）中筛选耐酸性强的优良菌株，并测定其最适生长条件、耐受性及发酵性能。结果表明，最终筛选出一株耐受性强及发酵性能优良的菌株SC-62，其最适生长温度为28 ℃、最适pH为4.0，可耐受乙醇体积分数14%、NaCl 100 g/L、葡萄糖500 g/L，具有发酵力[5.93 g CO2/（100 mL·24 h）]强，酒精产量（7.55%vol）高，延滞期（12 h）短、适应性强等优点。该菌株的成功筛选为后续高效生产酒精提供了良好的菌种来源。     

利用淀粉进行酒精连续发酵的研究

从多株酒精酵母菌株中筛选出Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｘｉａｅ ＫＧ作为连续发酵菌株，在酒精连续发酵过程中使用带有细胞循环的双罐系统、淀粉经酸酶复合糖化、然后送入酒精连续发酵系统，酒精生产强度可达到２８．５（ｇ／Ｌ．ｈ）。     

蔗汁酒精发酵中酵母菌株筛选及发酵工艺优化

以甘蔗汁为培养基比较CICC1308、As2．1190、广西贵糖4608、As2．109（GIM2．34）和R12（GIM2．84）五株酿酒酵母的酒精发酵特性。通过酒精耐受性及发酵能力测试,选出适合蔗汁酒精发酵的菌株为CICC1308。通过CICC1308菌株发酵工艺的单因素试验对发酵液原始pH值、发酵温度、接种量及发酵时间进行优化。结果表明：发酵液原始pH值5．0、发酵温度30~C、接种量15％（v／v）和发酵时间60h为最优条件试验,酒精产率可达92．15％。     

菠萝蜜果酒发酵菌种的选育及其性能测定

为筛选出一株适合菠萝蜜果浆发酵的酿酒酵母,提高菠萝蜜酒的酒精度和品质,以菠萝蜜为发酵原料,通过富集培养和分离纯化,三级筛选得出一株适合菠萝蜜果酒发酵的酵母菌菌株并对其进行形态学、生理生化和分子生物学鉴定。结果表明,筛选出的菌株为酵母属的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。经过性能测定,该酵母菌的最适发酵温度为28~31 ℃,最适初始糖度为29 °Brix,最适pH为5.5,最适SO₂添加量为80 mg/L,当初始酒精度为7％时能抑制该酵母菌的生长,初始酒精度为11％时,接近酵母菌酒精度耐受性的极限。经测试发现,该酵母菌的传代稳定性良好,产酒精度稳定在10°左右。此酵母能在高糖度且较高酒精度的胁迫下发酵菠萝蜜果浆,产生具有菠萝蜜特征香气的酒,可作为改良驯化及菠萝蜜果酒发酵菌种。     

蛹虫草高产胞外虫草素和虫草多糖的诱变育种

通过诱变获得高产胞外虫草素和虫草多糖的蛹虫草菌株.采用紫外线诱变(UV)、化学诱变(LiCl)、复合诱变(UV-LiCl) 3种方式对蛹虫草孢子进行诱变;发酵检测存活菌株的胞外虫草素和虫草多糖的含量.结果:以胞外虫草素为指标,3种诱变方式的最大正突变率分别为化学突变(29.2％)＞紫外突变(28.6％)＞复合诱变(26.5％);以胞外多糖为指标,最大正突变率分别为紫外诱变(35.7％)＞复合诱变(33.3％)＞化学诱变(27.0％).紫外诱变突变株Z-5-1胞外虫草素产量达0.842g/L,比出发菌株高311％;紫外诱变突变株Z-4-7胞外虫草多糖产量达5.250g/L,比出发菌株高148％.在连续培养5代后,仍具有较好的遗传稳定性.紫外诱变能获得较高的蛹虫草正突变率,同时能获得高产虫草素、虫草多糖的突变株.     

己酸、酒尾对低浓度乙醇体系中己酸乙酯的影响

向0.26g/L己酸乙酯乙醇溶液(15%)中加入己酸、酒尾,定期测定溶液中己酸乙酯含量变化情况。结果表明,己酸和酒尾均可使低浓度乙醇溶液中己酸乙酯含量上升。与酒尾相比,己酸对低浓度乙醇溶液中己酸乙酯含量影响更为显著,更加有益。贮存期内增强环境的酸性,可使低浓度乙醇条件下己酸乙酯含量提高。     

一株低产高级醇桑椹果酒酵母的分离、鉴定

以桑椹为分离源,从其自然发酵醪液中分离得到35株酵母菌,采用杜氏小管发酵法初筛,产乙醇能力复筛,耐乙醇和SO₂能力三级筛选,再与葡萄酒活性干酵母的发酵性能和高级醇产生量进行比较,得到1株发酵性能优良且高级醇产生量低的桑椹果酒酵母—S-2。对S-2菌种进行的研究表明,该菌在12 h开始产气,48 h后产生的气体充满杜氏小管,在14%乙醇和120 mg/L SO₂的胁迫下仍有较好的发酵表现,该菌在正常情况下发酵产生的乙醇含量高达10.56%,且高级醇产生量为312.41 mg/L。采用18S rDNA对其进行序列鉴定,确定其与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)同源性最高,相似度达到100%。该菌完全可以取代葡萄酒酵母专门用于桑椹果酒的发酵。     

桔子果酒的发酵工艺优化

以四川桔为原料,对桔子果酒发酵工艺参数进行优化。比较两株果酒酵母的发酵性能,单因素试验基础上对发酵初始糖度、发酵温度、初始pH值和酵母菌接种量进行L9（34）正交试验。发酵性能结果表明果酒酵母菌株1为最佳发酵菌株,影响桔子果酒感官品质的各因素主次顺序为发酵温度〉酵母接种量〉初始糖度〉初始pH,结合酒精度和感官综合评分控制主发酵温度为21℃、酵母接种量为6%、初始糖度为20%和初始pH 3.4的条件下选用果酒酵母1发酵新鲜桔子全汁,可以获得口感、香气适宜的桔子果酒。     

耐受性黄酒酵母YS6.2.5的选育及初步应用

黄酒酵母的耐受性对黄酒酿造至关重要。对原始菌株YS 分别采用乙醇- 热冲击法、细胞紫外诱变法和原生质体紫外诱变法,结合高温驯育进行选育,筛选到一株在38℃能正常生长发酵的黄酒酵母突变株YS6.2.5。YS6.2.5体积小,近似圆形,产香好,产酸少,30℃时产酒精能力、酒精耐性、高糖耐性分别为9.0%、19%、30°Bx,38℃时相应指标分别为6.5%、20%、28°Bx。酿酒实验表明,其生理耐性强,酿酒性能好,遗传性状稳定,具有较好的工业应用前景。     

酿造糯米酒优良根霉与酵母菌株的筛选

为开展纯菌种液态曲糯米酒酿造工艺研究,对九种传统糯米酒曲进行优良菌种筛选试验.经液化力、糖化力测试选取3种酒曲,从中分离纯化出9株根霉,对其进行糖化试验,筛选出一株30℃糖化70h产总糖(354.0g/L)、葡萄糖(153g/L)最高的根霉E-2.经产酒精能力测试选取4种酒曲,从中分离纯化出10株酵母,对其进行发酵力试验,筛选出一株30℃发酵80h产酒精量最大,发酵效率(92.9％)最高的酵母Y-1Y.     

姬松茸保健酒的制备

本文以姬松茸菌丝体的深层发酵液为原料,研究了姬松茸保健酒的制备工艺。先将姬松茸菌丝体进行深层发酵、分离,并对分离后菌丝进行超声破碎30min,然后重新将菌丝体加入到分离后的发酵液中并添加193g／L庶糖进行发酵,其发酵参数为：酒精发酵酵母接种量为1．5％,发酵温度为26℃,后酵时间为6d。此工艺下制得的保健酒的酒精度为8-9°,粗多糖含量大于3．00％,总酸度为0．5g,L,酒质柔顺爽口,具有姬松茸独特的香气。     

枣酒酵母菌的驯化研究

为获得优良的枣酒生产用的酵母菌,以酵母菌ZJ16为出发菌株,对其耐酒精能力和耐高糖能力进行驯化,最终获得的菌株ZJ16-8-6可以耐36Brix的高糖,在酒精度为24%时仍能正常发酵,并确定了该菌株发酵的最佳初始糖度为20Brix。最终酿制出酒精含量为9.9%、残糖为2.9Brix、pH为3.3,呈琥珀色,清澈透亮,枣香浓郁的枣酒。