间接竞争酶联免疫分析方法检测花生中黄曲霉毒素B1

目的:针对花生中强毒性污染物黄曲霉毒素B_1(AFB_1)建立了一种准确、灵敏的间接竞争酶联免疫分析方法(ic-ELISA)。方法:制备了AFB_1包被抗原,包被量为0.1μg/孔;抗体稀释64 000倍;选用0.1%脱脂乳粉为方法封闭液,0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)为样品稀释液;结果:在最优的试验条件下,建立的ic-ELISA对目标物AFB1的检测线性范围为0.0097～0.088μg/L(R2=0.999);灵敏度(IC50)和检出限(IC15)分别达到0.027μg/L和0.0066μg/L。板内变异系数(n=6)为0.29%～16.9%,板间变异系数(n=6)为0.22%～21.19%。在花生样品中AFB_1的检测灵敏度(IC50)为1.04μg/kg,回收率为96.67%～106.51%。结论 :本研究建立的ic-ELISA方法操作相对简便,检测灵敏度高、准确性好,可稳定地用于花生样品中AFB_1污染物的定量分析检测。     

酶联免疫法测定食品和饲料中的黄曲霉毒素

本实验应用酶联免疫方法对食品和饲料中的黄曲霉毒素进行测定，奶粉中黄曲霉毒素M1的多次重复测定的结果的变异系数小于12％，回收率接近90％。说明本试剂盒测定结果比较精确，重现性较好。食品辅料及饲料中的黄曲霉毒素B1的测定结果的变异系数小于15％。说明实验结果的重现性较好。     

酶联免疫法测定食品和饲料中的黄曲霉毒素

本实验应用酶联免疫方法对食品和饲料中的黄曲霉毒素进行测定,奶粉中黄曲霉毒素M1的多次重复测定的结果的变异系数小于12%,回收率接近90%。说明本试剂盒测定结果比较精确,重现性较好。食品辅料及饲料中的黄曲霉毒素B1的测定结果的变异系数小于15%,说明实验结果的重现性较好。     

酶联免疫法（ELISA）测定婴幼儿配方奶粉中的黄曲霉毒素M1方法改进

本文对ELISA检测婴幼儿配方奶粉中的黄曲霉毒素M1含量方法进行改进,处理方法为（1＋1）甲醇水提取再经三氯甲烷净化,提取效果比直接提取更佳。此方法的灵敏度为0.1μg/kg,加标回收率为90.0%～105.6%,相对标准偏差为6.57%,方法重复性良好,能有效消除假阳性。     

酶联免疫法检测酱油中的黄曲霉毒素B1

目的建立酶联免疫法检测酱油中黄曲霉毒素B_1(Aflatoxin B_1,AFB_1)的分析方法。方法酱油样本经纯乙腈(料液比=1:2,V:V)提取,再做1:9稀释,通过酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定样本中AFB_1。结果当加标浓度为2μg/kg和5μg/kg时,纯乙腈对酱油中AFB_1的提取回收率结果分别为121.3%和106.5%;方法检出限为1μg/kg。与国标方法检测结果的相对标准偏差小于10%。结论本方法准确、灵敏度高,可适用于酱油中AFB_1的检测。     

酶联免疫法 (ELISA)测定婴幼儿配方奶粉中的黄曲霉毒素M1方法改进

本文对ELISA检测婴幼儿配方奶粉中的黄曲霉毒素M1含量方法进行改进,处理方法为(1+1)甲醇水提取再经三氯甲烷净化,提取效果比直接提取更佳。此方法的灵敏度为0.1μg/kg,加标回收率为90.0%～105.6%,相对标准偏差为6.57%,方法重复性良好,能有效消除假阳性。     

酶联免疫法测定婴幼儿配方乳粉中黄曲霉毒素M1的方法研究

采用酶联免疫法建立婴幼儿配方奶粉中黄曲霉毒素M1的测定方法。样品经冷冻离心、脱脂棉去脂等简便的前处理操作,采用黄曲霉毒素M1的酶联免疫试剂盒进行分析。结果显示,黄曲霉毒素M1在0～0.08 μg/L范围内线性关系良好,方法检出限为0.05 μg/kg,回收率为90.0%～105.0%,精密度相对标准偏差（RSD）为8.1%。该方法快速、简便、特异、可靠,适于现代批量检测的需求,为保证乳制品的质量安全提供了一可靠的筛选方式,将更好地配合液相色谱-质谱法作定性和定量分析。     

酶联免疫法测定绿豆沙中黄曲霉毒素B1实验

依据GB/T17480-2008《饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法》测定绿豆沙中黄曲霉毒素B1含量,绿豆沙由颗粒状变为半固体豆沙状,实验验证该方法对绿豆沙中黄曲霉毒素B1检测的适用性,并对方法的检出限、准确性进行验证,确定酶联免疫法适用于绿豆沙中黄曲霉毒素B1的检测,规范检测细节及注意事项。     

浅谈用酶联免疫测试盒法对食品中黄曲霉毒素B1的检验

黄曲霉毒素是一种强致癌性极毒物质,是黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株的代谢产物,普遍存在于霉变的粮食制品中。黄曲霉毒素十分耐热,在烹调过程中不易被破坏,对人体及动物内脏器官尤其是肝脏有严重损害作用。在所有真菌毒素中,黄曲霉毒素B1的毒性、致癌性、污染频率均居首位,它在WTO确定的重点研究毒物中被列为首位。黄曲霉毒素B1简称AFB1。AFB1的原始检验方法为薄层色谱(TLC)法,此法必须直接使用标准毒素,经过多次薄层点样、展开,进行定性和定量分析,有不慎接触或吸入毒素引发急慢性AFB1中毒的危险,许多检验人员对AFB1的检测存在心理…     

酶联免疫吸附法测定黄曲霉毒素

<正> 酶联免疫吸附法检测黄曲霉毒素,与薄层层析法等各种方法相比具有灵敏度高,干扰少,测定步骤简便、快速,操作安全,设备投资少,测定结果准确可靠的优点。我们采用由美国Romer Labs公司提供的AgraQuant~(R)黄曲霉毒素检测试剂盒,以及同样由该公司提供的,配合AgraQuant~(R)检测试剂盒使用的Stat Fax(R)303 plus酶标读数仪,联合测定黄曲霉毒     

酶联免疫法测定不同食用植物油中黄曲霉毒素B_1

用酶联免疫法(ELISA)测定食用植物油中黄曲霉毒素B1,并对如何防控食用油中黄曲霉毒素B1进行探讨。在所分析菜籽油、大豆油、花生油、核桃油4种油中,以菜籽油黄曲霉毒素B1含量最低,其次是大豆油和核桃油,花生油含量最高。方法检测灵敏度为0.1μg/kg,平均回收率为91.4%～93.5%,相对标准偏差小于5%;结果表明,酶联免疫法测定准确,稳定性和重现性好,可广泛用于食用植物油黄曲霉毒素B1检测。     

酶联免疫法检测混合植物油中黄曲霉毒素B1的含量

目的建立酶联免疫法测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的分析方法。方法采用直接竞争酶联免疫吸附法对样品进行测定。样品经甲醇溶液提取,提取的抗原及黄曲霉毒素B_1标记物与微孔板上的黄曲霉毒素B_1特异性单克隆抗体竞争结合,洗涤除去未结合杂质。将底物加入孵育,产生蓝色产物,加入终止液终止反应蓝色产物变成黄色产物,450nm处测量吸光度。结果本方法在2h内完成混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的测定。黄曲霉毒素B_1的加标浓度在1.0～20.0μg/kg之间时的回收率为76.5%～120.2%,方法定量限为1.00μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1。     

酶联免疫法测定干红辣椒中的黄曲霉毒素B1

本实验采用酶联免疫法对干辣椒中的黄曲霉毒素B1 进行检测,并对黄曲霉毒素的防控措施进行讨论。结果显示,检测灵敏度为0.1μg/kg,相对标准偏差小于3%,平均回收率达97%,说明本法稳定性好,测定准确,重现性好,能有效的应用于干辣椒中黄曲霉毒素B1 的检测。     

QuEChERS-酶联免疫快速检测法测定茶叶中 黄曲霉毒素B1

目的建立QuEChERS-酶联免疫快速检测茶叶中黄曲霉毒素B1的方法,并对样品前处理条件进行优化。方法茶叶样品用70%乙腈水提取溶液进行提取目标物,离心后取上清液并用PSA+MgSO4进行净化处理后,采用酶联免疫快速检测方法进行分析测定。结果本方法的检出限为0.078μg/kg,线性范围为0.125~0.854μg/kg,IC50值为0.327 ng/m L。在三个不同添加水平下,样品的平均回收率为87.66%~97.17%,相对标准偏差为4.89%~7.16%。检测结果与高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)方法的相关系r2=0.9854,线性相关性良好。结论该方法更加简便、快速、高效,能够用于茶叶中黄曲霉毒素B1的检测。     

间接竞争ELISA检测试剂盒测定粮油食品中的 黄曲霉毒素B1

目的建立一套适用于食品中黄曲霉毒素B1的快速、简便、准确的检测方法,同时,进一步验证本公司研制的黄曲霉毒素ELISA检测试剂盒的检测效果。方法用酶联免疫法和高效液相色谱法分别对市售的食用油、花生、谷物样品中AFB1的污染程度进行检测分析。结果用ELISA法和HPLC法测定食用油样品的回收率分别为87.1%~92.7%和85.8%~100.8%;花生样品的回收率分别为76.0%~92.8%和76.3%~92.9%;谷物样品的回收率分别为82.6%~92.7%和82.7%~106.4%,花生加标样品6次平行测定的RSD分别为1.29%~2.46%和5.15%~8.70%,11份阳性样品测定结果表明2种方法具有很好的一致性(r2=0.995)。结论 ELISA法和HPLC法均有很好的线性关系,且测定结果相近。本公司研制的黄曲霉毒素ELISA试剂盒可以快速地检测食品中黄曲霉毒素B1,分析周期短,分析效率高。     

酶联免疫吸附和免疫亲和微柱法快速检测粮油食品中黄曲霉毒素B1的比较分析

用酶联免疫吸附-酶标仪分析法和免疫亲和微柱-荧光仪分析法分别对粮油样品中黄曲霉毒素B1进行测定,对其检测条件和结果进行差异性分析比较,两种检测方法都比较适宜在广大基层实验室推广应用。酶联免疫吸附分析法适宜大批量样品快速筛选;免疫亲和微柱分析法适宜单一样品现场快速检测,特别适宜对食用植物油中AFB1快速检测。     

免疫法快速检测食品中黄曲霉毒素的研究进展

黄曲霉毒素(aflatoxin)是由霉菌黄曲霉和寄生曲霉感染后产生的次生代谢产物,是自然界中毒性最强的化合物之一,被世界卫生组织的癌症研究机构(IARC)划定为I类致癌物质,与肝癌的发生密切相关。黄曲霉毒素很容易污染谷物、坚果、香料、植物油脂、乳类及其制品等多种食品。因此,研究出快速、准确、高效的食品中黄曲霉毒素的检测方法是政府、企业和研究者们一直以来的共同目标。本文综述了近年来基于免疫技术发展的各种快速检测黄曲霉毒素方法,主要包括酶联免疫吸附测定法、胶体金免疫层析法、免疫传感器、免疫亲和柱-高效液相色谱法、免疫荧光法、放射免疫法、时间分辨荧光免疫分析法和量子点探针法的基本原理、适用范围、检测效果、优缺点及国内外应用等方面进展,为今后研发更优的检测黄曲霉素新方法提供借鉴。     

酶联免疫法测定苦荞制品中的黄曲霉毒素B1

用酶联免疫法（ELISA）测定不同苦荞制品中的黄曲霉毒素B1,对如何防控苦荞制品中的黄曲霉毒素B1进行探讨。在分析的4类产品中,苦荞营养粉的黄曲霉毒素B1含量最低,其次是苦荞速溶片和苦荞醋,苦荞米茶中最高。方法的检测灵敏度为0.1 μg/kg,平均回收率在84.70~84.95%,相对标准偏差小于5%。结果表明,酶联免疫法测定准确,稳定性和重现性好,可广泛应用于苦荞及其制品中黄曲霉毒素B1的检测。     

酶联免疫吸附分析法测定食品中的黄曲霉毒素B1

用酶联免疫吸附分析法测定食品中的黄曲霉毒素B1,线性范围0.25～5.0ng/ml,检测灵敏度达0.015μg/kg,比薄层色谱法提高300～400倍,回收率大于89.2,精密度大于7.67%。整个测定过程仅为4h,大大缩短了检测时间。     

呋喃唑酮代谢物间接竞争化学发光酶免疫法的建立

建立快速检测动物源性食品中呋喃唑酮代谢物AOZ的间接竞争化学发光酶免疫法。利用对醛基苯甲酸（4-CBA）将AOZ衍生化为CPAOZ,利用活化酯法将CPAOZ与卵清蛋白（OVA）偶联,生成完全抗原CPAOZ-OVA。对包被原与抗体的最佳稀释倍数、封闭液浓度、竞争时间、酶标二抗稀释倍数进行优化,建立标准曲线,同时对方法的特异性进行评价。结果表明:包被抗原最佳稀释倍数为2000倍,抗体的最佳稀释倍数为20000倍、封闭液为2%脱脂乳粉、竞争时间为2 h、二抗最佳稀释倍数为4000倍;线性范围是0.075⁷.396 ng/m L,半抑制浓度IC₅₀为0.74 ng/m L,对呋喃唑酮原药的交叉反应率为23.4%,与其他结构类似物及衍生化试剂的交叉反应率均小于0.1%。该方法灵敏度高、特异性好,可为监管部门对于快速检测动物源性食品中AOZ提供依据。