高效液相色谱进展（五）——HPLC手性固定相和色谱柱近年的发展

液相色谱手性固定相和色谱柱是HPLC的重要课题，近年受人们高度重视，因为在生物和药物领域有大量的手性化合物存在，需要识别和拆分它们，HPLC是一种首选的方法。本文综述了HPLC手性固定相和色谱柱最近几年的发展，着重讨论了应用较多的一些手性固定相和色谱柱。     

利用手性固定相拆分2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇对映体

利用第二代Pirkle型手性固定相,用液相色谱法拆分了2,2,2－三氟－1－（9－蒽基）乙醇对映体,讨论了流动相组成,配比,流速,柱温等对色谱分离的影响,提出了可能的分离机理。     

6种手性化合物在自制的直链淀粉-三[（s）-α-甲基苄基氨基甲酸酯]手性固定相上的直接拆分

本文在自制的涂敷型直链淀粉-三[（s）-α-甲基苄基氨基甲酸酯]手性固定相上对反-2,3-二苯基环氧乙烷、托葛尔碱、苯偶姻、喹禾灵、戊唑醇、禾草灵等6种手性化合物进行了手性拆分。同时在流速0．5mL／min,检测波长254nm条件下,系统考察了多种色谱模式（正相、反相和极性有机相）下流动相组成对6种化合物手性分离的影响。化合物2、3和6获基线分离,化合物1、4和5获部分分离。     

手性农药在纤维素—氯苯基氨基甲酸酯手性固定相上的拆分

分别以4,4′-二苯基甲基二异氰酸酯或六亚甲基二异氰酸酯为连接臂,采用6-位选择键合法,将纤维素-(3-氯苯基氨基甲酸酯)键合于氨丙基硅胶上,制备了两种键合型纤维素-(3-氯苯基氨基甲酸酯)手性固定相(BClCTPC-CSP1,BClCTPC-CSP2),同时制备了涂敷型纤维素(3-氯苯基氨基甲酸酯)手性固定相(CClCTPC-CSP)。在正相模式下,对4种手性农药进行了拆分。实验结果表明:所制备的手性固定相均具有一定的手性识别能力,键合型手性固定相可以使用四氢呋喃作流动相极性改性剂,使得在常规流动相中三种固定相上未获拆分的手性农药甲霜灵获得拆分。     

超临界流体色谱分离手性药物研究进展

本文根据SFC所用流动相模式不同将手性固定相分为四大类,即正相模式、反相模式、极性有机模式和极性离子模式,并综述了各类模式下SFC分离手性药物的进展。SFC法作为一种很有潜力的色谱分离技术,将在手性药物分离及分析等方面发挥巨大作用。     

二维色谱法分离、分析正常人血浆和尿液中苏氨酸异构体

为了分析正常人血浆和尿液中苏氨酸四个异构体的分布,用NBD-F作为荧光衍生化试剂,结合反相高效液相色谱和手性固定相色谱分离、分析了苏氨酸的四个异构体.在血浆中只有L-Thr存在;尿样中D-Thr为1.33±0.54 nmol/L,D-allo-Thr为9.54±4.82 nmol/L,L-Thr为186士97 nmol/L,血浆和尿样中均未测出L-allo-Thr.     

HPLC-MS/MS法手性拆分泮托拉唑钠对映体及大鼠血浆中药代动力学研究

利用高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）建立了大鼠血浆样本中泮托拉唑钠手性对映体的拆分方法,并进行药代动力学研究。样品采用乙腈蛋白沉淀法提取,Chiralpak IE色谱柱（4.6 mm×250 mm×5 μm）分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈溶液为流动相等度洗脱,流速0.9 mL/min,内标法定量。结果表明,泮托拉唑钠手性对映体可实现基线分离,方法的线性范围为5.0～5 000.0 μg/L。该方法的回收率、基质效应、精密度、准确度、稳定性、稀释可靠性、残留均符合方法学验证要求,可用于大鼠血浆中药代动力学研究。     

HPLC法测定甲磺酸帕珠沙星中光学异构体的方法研究

采用HPLC法测定甲磺酸帕珠沙星中的光学异构体。采用色谱柱Inertsil ODS-35μm 4.6×250mm;流动相为乙腈:0.2mol/L无水柠檬酸(pH3.0):水(每100 mL水中加D-苯丙胺酸0.15g,加氯化铜0.15g溶解后混匀)=8∶1∶92;检测波长322nm,流速1.5mL/min。在0.10~0.30μg范围内,主药峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9999。用HPLC法测定甲磺酸帕珠沙星中光学异构体,方法简便,专属性及重现性好。     

盐酸舍曲林与其异构体的毛细管电泳分离方法研究

用毛细管电泳法分离盐酸舍曲林异构体。采用未涂层熔融石英毛细管柱(57cm×75μm,有效长度50cm);20mM四硼酸钠5、0mM胆酸钠5、mM羟丙基-β-环糊精1、5mM高磺化-β-环糊精为运行缓冲液(pH9.0);压力进样;运行电压为20kV;分离温度为20℃;检测波长为214nm。结果,(+)盐酸舍曲林和(-)盐酸舍曲林的分离度为1.25,(-)盐酸舍曲林在0.64~255.6μm/mL范围内线性关系良好,r值为0.9999。可用于该药的产品质量控制。     

高效液相色谱在多肽分离分析中的应用

多肽的高生物活性和低毒副作用使其成为近来国内外生命科学研究的热点,因此多肽的分离与分析也愈发的关键。高效液相色谱(HPLC)以其极高的分离效率和良好的选择性已经成为实验室和工业分离分析生物大分子最常用和有效的方法。本文主要介绍了HPLC以及一些新型色谱在多肽分析分离中的应用。     

高效液相色谱法检测葡萄酒中的白藜芦醇及其糖苷异构体

白藜芦醇是一类具有保健作用的生物活性物质。本文采用高效液相色谱法同时检测葡萄酒中反式白藜芦醇、顺式白藜芦醇、反式白藜芦醇苷和顺式白藜芦醇苷4种化合物。方法准确、快捷。     

大气颗粒物中左旋葡聚糖及其异构体的质谱分析

生物质燃烧是大气污染的重要来源,左旋葡聚糖是公认的示踪物质,其定量测定大多使用质谱完成。本文综述了近十几年国内外使用质谱测定左旋葡聚糖及其异构体的方法及应用,并比较了不同方法的优劣,为有关部门进行大气颗粒物中左旋葡聚糖及其异构体的监测与评价提供技术咨询。     

吡虫啉及其中间体的高效液相色谱法同时测定

研究了用高效液相色谱法同时分离测定农药吡虫啉原粉和中间体2-氯-5-甲基吡啶及2-氯-5-氯甲基吡啶含量的方法。色谱柱为Hypersil ODS2柱,流动相为甲醇：水（48：52）,检测波长为270mm,三个组分均能得到完全分离。方法回收率为99.6%～100.4%,变异系数为2.6%～3.7%,本法简便、快速、准确。为吡虫啉产品质量检测及中间体含量控制提供了可靠的分析方法。     

HPLC测定N-丙酰基-5-甲氧基色胺的含量及其有关物质检查

建立N-丙酰基-5-甲氧基色胺含量测定和有关物质检查的方法。采用DikmaDiamonsil C_(18)(5μ,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为乙腈-水(35:65),流速1.0mL/min,检测波长224nm。在所选定的液相色谱条件下,有关物质与N-丙酰基-5-甲氧基色胺完全分离,N-丙酰基-5-甲氧基色胺在100-400 μg/mL(r=0.9995)内线性关系良好,最低检测限为10ng,检测3批样品,主峰含量均在99.0%以上,有关物质在1%以下。此法简便、灵敏、准确,可用于N-丙酰基-5-甲氧基色胺的含量测定和有关物质检查。     

高效液相色谱法测定水产品中结晶紫及其衍生物的残留

为研究水产品中结晶紫及其衍生物隐色结晶紫的高效液相色谱检测方法,采用Kromasil C18色谱柱,二氧化铅∶硅藻土(1∶1)柱后氧化柱,以乙腈∶乙酸铵缓冲溶液(v/v,90∶10,pH 4.5)为流动相,并用紫外可变波长检测器进行检测和分析。测得结晶紫和隐色结晶紫的加标回收率分别为89.1%和88.3%,相对标准偏差分别为4.2%和4.9%。检测灵敏度为2μg/kg。该方法可用于水产品中结晶紫和隐色结晶紫的检测。     

HPLC法测定阿苯哒唑含量及有关物质

目的 建立了反相高效液相色谱测定阿苯哒唑的含量及有关物质的方法.方法 采用Apollo C18分析柱(5μm,250mm × 4.6mm),以流动相A0.025 mol·L-1醋酸铵溶液(冰醋酸调pH=3.5),流动相B甲醇,为流动相,梯度洗脱;柱温40℃;流速为1.0mL·min-1;检测波长254nm.结果 阿苯哒唑的线性范围为0.1～2.5mg·mL-1;相关系数为0.9997.平均回收率(n=3)为99.1%,RSD为0.21%.结论 采用反相高效液相色谱法测定阿苯哒唑的含量和有关物质,方法准确,结果可靠.     

高效液相色谱法测定片剂中的盐酸舍曲林及有关物质的含量

目的:建立盐酸舍曲林片含量及有关物质测定的高效液相色谱方法。方法:色谱柱为Diamonsil C_(18) (4.6mm × 200mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%三乙胺溶液(用磷酸调到pH4.0) (60:40),流速1.5mL/min;检测波长225nm。结果:进样量在2.49～19.94μg范围内,与峰面积线性关系良好,平均回收率为99.55%,RSD为0.60%(n=9)。结论:该方法简单、快速、准确,重现性及专属性好,可用于盐酸舍曲林片的质量控制。