发酵性丝孢酵母发酵产油脂的碳源和氮源选择

以发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)为实验菌株,通过液体摇瓶发酵研究了碳源和氮源种类对其生长及细胞积累油脂的影响。结果表明:发酵性丝孢酵母以葡萄糖、乳糖、蔗糖及可溶性淀粉作为碳源,以牛肉膏、蛋白胨作为氮源发酵时,菌体生物量和细胞油脂含量均在发酵72 h时达到最大值,继续延长发酵时间不利于油脂积累。以硫酸铵为氮源,木糖为碳源时,菌体最大生长和细胞油脂最大积累不同步。发酵性丝孢酵母发酵产油脂宜选择硫酸铵作为氮源,葡萄糖作为碳源。     

粗状假丝酵母产脂肪酶发酵条件的优化

利用粗状假丝酵母发酵生产脂肪酶,通过对粗状假丝酵母胞外脂肪酶发酵过程的培养基和发酵培养条件的优化,得出产脂肪酶的最佳条件:碳源为聚乙烯醇乳化的橄榄油和葡萄糖,氮源为蛋白胨和尿素,酵母浸出液4.5g/L,MgSO4.7H2O0.4g/L,K2HPO43.5g/L;反应温度30℃,培养基初始pH7.0,接种量为10%,摇床转速180r/min,培养24h。在此发酵条件下,发酵液的最高酶活达到12U/mL。      

发酵条件对发酵性丝孢酵母脂肪酸组成的影响

通过摇瓶发酵，研究了温度、摇瓶转速、碳源种类和浓度对发酵性丝孢酵母（Trichosporom fermentans）脂肪酸组成的影响。气相色谱法分析结果表明，较高发酵温度能提高菌体油脂的脂肪酸饱和程度，此条件下饱和脂肪酸含量占脂肪酸总量的49．1％：摇瓶转速高有利于菌体油脂不饱和脂肪酸的生成；木糖浓度为100g／L时菌体油脂中饱和脂肪酸含量最高，占脂肪酸总量的50．4％；木糖比葡萄糖更容易被转化生成饱和脂肪酸含量较多的油脂。菌体脂肪酸组成包括肉豆蔻酸、棕榈酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸和亚油酸，其中棕榈酸和油酸含量较高。     

粗状假丝酵母产脂肪酶发酵条件的优化

利用粗状假丝酵母发酵生产脂肪酶,通过对粗状假丝酵母胞外脂肪酶发酵过程的培养基和发酵培养条件的优化,得出产脂肪酶的最佳条件:碳源为聚乙烯醇乳化的橄榄油和葡萄糖,氮源为蛋白胨和尿素,酵母浸出液4.5g/L,MgSO4.7H2O0.4g/L,K2HPO43.5g/L;反应温度30℃,培养基初始pH7.0,接种量为10%,摇床转速180r/min,培养24h。在此发酵条件下,发酵液的最高酶活达到12U/mL。     

一株丝孢酵母属菌株发酵产油脂的研究

通过摇瓶发酵,比较丝孢酵母属菌株JM-B在不同营养和发酵条件下的产油脂情况。以菌体生物量、油脂产量、油脂含量及油脂系数为指标,优化碳源质量浓度、氮源组成与质量浓度、磷酸盐质量浓度等发酵培养基组成,优化接种量、发酵温度、摇床转速、发酵时间等发酵条件,利用气相色谱法测定油脂脂肪酸组成。结果表明:最适培养基组成为葡萄糖100 g/L,硫酸铵1.0 g/L,酵母膏10 g/L,磷酸二氢钾4 g/L,p H自然;最适发酵条件为发酵温度25℃,摇床转速160 r/min,种子液种龄36 h,接种量10%(以发酵液体积计),发酵时间144 h。在最适培养条件下,得到的菌体生物量和油脂产量最高,分别为16.14、6.64 g/L,油脂产量较优化前提高了161.4%,油脂中饱和脂肪酸含量比优化前降低了28.1%。可以认为丝孢酵母属菌株JM-B是一株很有开发潜力的产油脂菌株。     

磁性多孔微球固定化假丝酵母脂肪酶的研究

通过悬浮聚合法制备了含环氧基团的聚合物载体高分子磁性多孔微球(GHD),用TEM、 SEM和Micromeritics ASAP 2010等对聚合物载体进行了表征。考察了载体中交联剂含量、固定化时间、给酶量等因素对固定化脂肪酶催化活性的影响。结果表明,Fe3O4纳米粒子粒径20 nm,分布均匀,磁性多孔微球粒径从几十微米到一百多微米,粒子大小大体呈正态分布且分布较窄,平均粒径为110 μm,直径在区间80μm~150μm范围内的粒子占90%以上。微球表面呈皱褶态且呈现多孔性,孔径从几个纳米到几十纳米,为闭孔,且孔间互相贯穿。固定化酶最适条件为给酶量125 mg/g,固定化时间7 h,此时酶的吸附量为118 .5mg/g,比酶活7.56×105 U/g,酶的活力回收率0.95。以GHD为载体制备的固定化脂肪酶最佳反应温度从37 ℃上升到42 ℃,最适反应pH从7.2提高到7.5,固定化后酶对温度和pH的敏感性降低,重复使用12次,固定化酶的活力都能保持在92 %以上。     

菊芋提取液的皮状丝孢酵母发酵产油脂试验研究

以皮状丝孢酵母为产油脂菌种,研究其发酵菊糖提取液产油脂情况。首先研究了从菊芋中提取菊糖的条件,获得最适提取条件为:温度85℃,时间80 min,菊芋粉质量浓度70 g/L,在此最优提取条件下,菊糖提取率达95%;然后考察了pH值、接种量、培养温度和氮源对皮状丝孢酵母发酵菊糖提取液产油脂的影响,获得最优条件为:初始pH值5.5、培养温度30℃、接种量10%。在此优化条件下,5 L发酵罐分批扩大培养,其生物量、出油率和油脂得率分别达到13.93 g/L、34.73%和4.89 g/L。补充添加氮源对生物量、出油率和油脂得率的提高不显著。气相色谱法测定脂肪酸成分主要是C16和C18系列,其中80.2%以上是C16:0、C18:1和C18:2,尤其是C18:1(43%),其油酸、棕榈酸和亚油酸占总脂肪酸的比例和植物油脂非常接近。     

褶皱假丝酵母产脂肪酶条件及酶学性质研究

对一株来源于海洋有产脂肪酶能力的褶皱假丝酵母产酶条件进行研究,探讨了碳源、氮源、pH、培养温度对该菌产脂肪酶的影响。结果显示:在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:蔗糖5 g/L,橄榄油5 g/L,MgSO4·7H2O1 g/L,K2HPO41 g/L,(NH4)2SO410 g/L,起始pH为7.0,接种量10%,在30℃、200 r/min下培养36 h,产酶能力达到4 351.6 U/mL。该菌所产脂肪酶的最适反应pH为7.0,最适反应温度为37℃,Ca2+、Mg2+对酶活有一定的促进作用。     

固定化酵母酒精发酵研究

一引言固定化技术是生物工程的重要内容,国外对固定化技术非常重视,我国的一些大专院校、研究所近年来也开展了这方面的研究。1986年,我所先后受省轻工业厅和省科委的多委托、进行了固定化酵母以糖蜜、淀粉质、葡萄糖母液为原料酒精发酵研究。经过4年研究,在一些关键技术方面取得了较大进展,在载体使用寿命、固定化形式和生物反应器设计等方面取得了突破性进展。现在,大多采用海藻酸钙的胶球,他用寿命一般在3个多月;我们采用PVA(聚乙烯醇)幅膜成型技术,使用寿命可达2年以上,且具有成型容易、操作简便、成本低廉、适于老厂应用等优点。通过长期实验室试验,酒精最高     

皮状丝孢酵母菌发酵菊粉产油脂的研究

因皮状丝孢酵母是一株高产油脂酵母,对皮状丝孢酵母发酵菊粉产油脂进行了研究。考察了盐酸水解、菊粉酶水解及菊粉酶添加量对皮状丝孢酵母发酵菊粉产油脂的影响,实验结果表明:酶解菊粉的方法优于酸解,当菊粉酶添加量为80U/50mL发酵液时,皮状丝孢酵母生物量和油脂含量最高,分别达到13.49g/L和5.26g/L,油脂得率达到39%。皮状丝孢酵母发酵菊粉产的油脂中脂肪酸成分以含16和18个碳原子的长链脂肪酸为主,其中80.5%以上是C16:0、C18:1和C18:2,尤其是C18:1(53.1%)。因此,皮状丝孢酵母发酵菊粉生产的油脂可作制备生物柴油的替代原料。      

硫元素限制对粘性丝孢酵母油脂积累的影响

本论文研究粘性丝孢酵母(CICC 1368)在硫元素限制情况下的油脂积累。通过采用低场核磁共振技术监测菌体终点油脂含量;对其生物量、油脂量及脂肪酸组成进行测定;最后,观察了最适碳硫比[n(C)/n(S)]下油脂积累规律。结果显示,低场核磁共振是一种可快速分析微生物中油脂含量的手段。随着碳硫比的改变,可有效调控粘性丝孢酵母中油脂积累,油脂量及油脂得率呈先上升后下降的趋势,因此可将硫元素限制控制在一个合适范围内。适当硫元素限制有利于总不饱和脂肪酸积累,在最适碳硫比为3 310时,油酸含量最高可达54.9%,且生物量、油脂产量、干菌体油脂含量可高达21.1 g/L,9.0 g/L,42.3%。     

脂肪酶在磁性纳米粒子上固定化及其酶学性质研究

以Fe_3O_4纳米粒子为载体,碳化二亚胺为交联剂,共价结合制备固定化脂肪酶,探讨脂肪酶固定化影响因素,并对固定化脂肪酶性质进行研究;运用TEM测定其粒径,用FTIR检测脂肪酶—Fe_3O_4磁性纳米粒子耦联。结果表明,脂肪酶固定化适宜条件为:200 mg磁性纳米粒子,加入2 ml 2.5mg/mL脂肪酶磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH7.5),在4℃超声分散45 min,固定化酶最适pH为7.0,最适温度为45℃,均与游离酶相似;与游离酶相比,该固定化脂肪酶热稳定性明显提高,并具有良好操作和存储稳定性。     

ZIF-8原位合成法固定化脂肪酶CRL

以ZIF-8为固定化载体,通过原位合成法固定褶皱假丝酵母脂肪酶(CRL),研究了不同固定化条件对固定化酶活力的影响以及固定化酶的稳定性,并对固定化酶进行了结构表征。结果表明:在10 m L 40 mmol/L硝酸锌溶液、10 m L 160 mmol/L 2-甲基咪唑溶液、2-甲基咪唑溶液初始p H8、酶添加量2.75 mg、-48℃冷冻干燥条件下,获得的固定化酶CRL@ZIF-8蛋白回收率为93%,比活力为1.08 U/mg;底物的分子大小对固定化酶的催化性能有明显影响,在以相对小分子的乙酸对硝基苯酯为底物时,重复使用9次后固定化酶仍保持72.8%的相对活力;通过对固定化酶进行场发射扫描电镜和氮气吸附脱附表征,表明脂肪酶CRL在载体表面和内部均有分布,固定化酶颗粒粒径约400 nm。     

玉米朊的活性炭脱色工艺研究

系统研究了玉米朊的活性炭脱色工艺。以活性炭为脱色剂,对玉米朊的乙醇溶液进行脱色,并对影响活性炭脱色效果的因素进行了考察,对脱色的工艺条件进行了优化。结果表明:脱色的最佳工艺条件是温度50℃、活性炭与玉米朊的乙醇溶液的固液比2.5%(g/mL)、脱色时间为2h、乙醇浓度为90%、pH值为7,此时玉米朊乙醇溶液的吸光度为0.460;影响脱色效果的因素的主次顺序为乙醇溶液浓度>料液比>pH值>脱色时间。活性炭可用于玉米朊的脱色。     

催化大豆油脱臭馏出物甲酯化的脂肪酶固定化研究

大豆油脱臭馏出物酶法酯化提取天然VE 技术绿色经济,具有理想应用前景.为此,开展了针对催化脱臭馏出物脂肪酸酯化的国产树脂吸附固定化脂肪酶的研究.选用弱极性大孔树脂AB-8 作为载体,固定的脂肪酶具有较强的酯化活性与较低的水解活性.在固定化条件单因素实验的基础上,应用Plackett-Bur-man 实验筛选出缓冲液pH...     

Immobilization of lysozyme on polyvinylalcohol films for active packaging applications

A new technique for the immobilization of lysozyme onto the surface of polyvinylalcohol films is presented. The active compound was sprayed along with a suitable bonding agent onto the surface of the cross-linked polymeric matrix. Active compound release tests determined the amount of lysozyme immobilized on the film surface. With the use of Micrococcus lysodeikticus, the antimicrobial activity of the films was determined and the results correlated with the amount of immobilized lysozyme. This new technique was effective for immobilizing the enzyme, and the developed films were active against the test microorganism. Results were compared with those obtained with a different immobilizing technique, in which the active compound was bound into the bulk of the polymeric film. As expected, the surface-immobilized lysozyme films have a higher antimicrobial activity than bulk-bound films.     

海藻酸钠与羧甲基纤维素钠固定化高温碱性脂肪酶

以海藻酸钠和羧甲基纤维素钠为复合载体,研究包埋法固定化毕赤酵母高温碱性脂肪酶。通过单因素试验考察了不同载体、载体浓度、酶与载体配比等因子对脂肪酶固定化的影响,并采用正交试验对脂肪酶固定化条件进行了优化。结果表明,包埋法固定化脂肪酶的最优条件为海藻酸钠含量1.0%、羧甲基纤维素钠含量0.25%、加酶量50 U/(g载体)、CaCl2浓度0.4 mol/L,固定化时间40 min。在最优固定化条件下,固定化脂肪酶酶活收率达99.50%。     

Debittering of corn gluten hydrolysate with active carbon

Corn gluten hydrolysates were treated with active carbons to remove the bitterness. After treatment with active carbons, the ACE (angiotensin‐converting enzyme) inhibitory activity decreased in the order of active clay, Junsei (fine and granule) and Koent CPG (67.2, 65.4 and 64.9% respectively) in TP 10K. In addition, that of PP 10K treated with Junsei (fine and granule) and active clay decreased to 75.6, 72.2 and 74.7% respectively. In PP 10K, Koent PWA and active clay effectively reduced the bitterness. PP 10K treated with Koent PWA and active clay was reported to taste as trace of bitterness to slightly bitter. TP 10K treated with Koent RC and CPG tasted as trace of bitterness to slightly bitter, and that treated with Koent PWA and Junsei (granule) tasted as slightly bitter to bitter. After treatment with active carbons, the amounts of T‐N (total nitrogen) in PP 10K and TP 10K reduced from 148 and 135 mg to 136–42 and 134–108 mg respectively. Before treatment with active carbons, PP 10K and TP 10K consisted of peptides with APLs (average peptide lengths) 14.4 and 12.8 respectively. After Junsei (fine) treatment, the APLs of PP 10K and TP 10K were 16.9 and 16.2 respectively. After treatment with the other active carbons, the APLs of PP 10K and TP 10K were 14.4–2.78 and 14.4–3.5 respectively. Before treatment with active carbons, the surface hydrophobicities of PP 10K and TP 10K were 38 and 29.9 respectively. However, after treatment with active carbons, the surface hydrophobicities of PP 10K and TP 10K were reduced, except for PP 10K treated with active clay. In PP 10K, treatments with Koent PWA and active clay markedly reduced the surface hydrophobicity from 38 to 13.3 and 14.2 respectively. The surface hydrophobicity of TP 10K treated with Koent RC and CPG was markedly reduced from 29.9 to 9.9 and 11.1 respectively. © 2000 Society of Chemical Industry