肝脏神经内分泌肿瘤血管造影表现与生存分析

【摘要】 目的 探讨肝脏神经内分泌肿瘤（NEN）的血管造影特点并行生存分析。方法 回顾性分析60例肝脏NEN资料。17例行TACE为主治疗,22例未行TACE治疗,21例未行相关治疗。分析肝脏NEN血管造影表现特点,采用Kaplan- Meier法计算生存率,Cox多因素分析生存预后因素。结果 血管造影示神经内分泌瘤（NET）多表现为乏血供染色,而神经内分泌癌（NEC）多表现为富血供染色。60例患者的中位生存期为13.8个月;6个月、1年、2年和3年累计生存率分别为85.0%、52.0%、40.0%及33.8%。Cox回归分析显示肿瘤病理分级（P=0.001）与治疗模式（P＜0.001）为独立预后影响因素。结论 肝脏NEN血供丰富与否有助于评判肿瘤级别。病理高级别（G3）的患者预后不良,TACE是治疗肝脏NEN有效方法。

     

不同浓度乙醇消融VX2兔移植性肝肿瘤的实验研究

目的探讨不同浓度乙醇经皮瘤内注射(PEI)疗法对兔移植型肝癌的治疗效果.方法31只新西兰兔肝内植入VX2瘤块(1 mm3),移植后14 d行CT扫描,测量肿瘤体积.然后采取以下治疗:A组经皮瘤内注射无水乙醇(9只)、B组注射75%乙醇(9只)、C组注射50%乙醇(9只)、D组未予任何处理(对照组,4只).治疗后7、14、21 d分别行CT、MRI扫描,观察病灶的变化并测量大小,每组处死2只取病理观察肿瘤大小、光镜下观察肿瘤的凝固性坏死与对照组比较,治疗后60d内观察各组生存期的长短.结果PEI治疗前和治疗     

兔肝脏、肌肉、皮下VX2肿瘤模型的建立和对比研究

【摘要】 目的 通过对肝脏、肌肉及皮下不同部位兔VX2肿瘤模型的建立和比较,寻求更适合于肿瘤经皮介入治疗的荷瘤动物模型。方法 将54只新西兰白兔按VX2肿瘤接种部位不同随机分为肝脏组、肌肉组和皮下组,每组18只。三组动物术后12、16、20 d均进行CT灌注扫描,测量肿瘤大小,每次各组分别处死6只兔进行病理观察,并对三组模型的建模手术时间、肿瘤体积及并发症等情况进行比较。结果 皮下组肿瘤生长最慢,肌肉组其次,肝脏组生长最快,组间差异有统计学意义（P < 0.05）。接种第12天,肝脏组肿块长径已约1 cm,而皮下组则需20 d肿块长径才达1 cm左右,肌肉组肿块生长速度介于二者之间。三组建模所用时间分别为肝脏组（5.54 ± 0.51）min,肌肉组（1.02 ± 0.20）min,皮下组（0.98 ±0.21）min,肝脏组明显较长。除了肝脏组出现腹水、肝内转移及腹壁种植外,皮下组、肌肉组均无明显影响模型的情况。结论 与肝脏和皮下建模相比,兔肌肉内VX2肿瘤模型具有操作简单,成瘤稳定,肿瘤生长速度适中的优点,更适合作为兔VX2瘤的经皮介入治疗模型。

     

骨水泥对兔脊柱VX2肿瘤转移模型的作用研究

【摘要】 目的 探讨聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）骨水泥对兔脊柱VX2肿瘤的杀伤作用。方法 成功建立兔VX2脊柱转移肿瘤模型18只,随机分为A、B、C组,每组各6只,在CT导下向VX2肿瘤中心分别注入PMMA 或生理盐水,其中A组注入PMMA 0.3 ml、B组注入PMMA 0.1 ml、C组注入生理盐水0.3 ml。术后24 h处死模型兔,A、B组分别于距离PMMA团块边缘1、5、10、15 mm处不同方向各取4个肿瘤组织块,C组于瘤体中心至表面不同的4个位置各取1块肿瘤组织,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）法检测肿瘤细胞凋亡率。结果 16只模型兔成功注入PMMA骨水泥,A、B组手术成功率均为5/6,C组为6/6,无显著性差异。A组距PMMA边缘1、5、10 mm处肿瘤细胞平均凋亡率分别为（65.75±18.81）%、（50.00±14.24）%、（14.95±8.98）%,与对照组（9.79±5.24）%相比差异均有统计学意义（P＜0.05）;15 mm处肿瘤细胞平均凋亡率为（10.30±8.13）%,与对照组相比差异无统计学意义。B组距PMMA边缘1、5 mm处肿瘤细胞平均凋亡率分别为（49.20±15.57）%、（17.75±9.28）%,与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）,其余观测点无显著性差异。A、B两组距PMMA边缘1、5、10 mm处肿瘤细胞平均凋亡率比较,差异均有统计学意义（P＜0.001）。结论 PMMA可促进肿瘤细胞凋亡,适量增加PMMA注入量可增加肿瘤细胞凋亡范围。     

CT引导建立兔肺VX2肿瘤模型的实验研究

目的 建立适合微波消融的兔肺肿瘤模型.方法 新西兰大白兔36只,CT引导下穿刺,将载有VX2肿瘤组织悬液的亲水凝胶接种于右肺内.结果 接种后14～26 d,CT检查证实34只新西兰大白兔肺内有肿瘤生长,其中26只呈单发结节,直径0.5～0.8 cm,兔肺VX2肿瘤模型成功率为72.2%(26/36);另有2只肺内呈多发结节生长,并出现胸腔积液;4只累及纵隔;2只出现胸壁种植转移.接种过程未出现气胸、出血等并发症.结论 本实验建模方法安全、有效,并可在肺内局部形成较大体积的实体瘤,能满足微波消融治疗肺癌的研究需要,因此所建兔肺VX2肿瘤模型是成功的.     

射频消融联合无水乙醇注射在兔肝脏中的实验研究

【摘要】 目的 研究不同方式的射频消融（RFA）与无水乙醇注射（PEI）联合应用对正常兔肝脏的消融效果,并评价其安全性和实用性。方法 采用32只活体新西兰大白兔正常肝脏进行研究,分为4组,各组分别采用RFA?蛳 PEI（A组）、PEI?蛳 RFA（B组）、RFA（C组）和PEI（D组）处理,并于术前,术后1、3、7 d抽血检查丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、血清肌酐（Cr）水平的变化情况。术后各组行肝脏增强CT扫描,计算各组消融灶体积。结果 术前各组血清ALT、AST、Cr水平差异无统计学意义（P ＞ 0.05）;术后1 d各组血清ALT、AST与术前差异有统计学意义（P ＜ 0.05）;术后3 d各组血清ALT、AST水平开始下降,术后7 d各组ALT、AST与术前差异无统计学意义（P ＞ 0.05）,术后1、3、7 d各组血清Cr与术前比较均差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。A、B、C和D组的消融体积分别为（3.10 ± 1.10）mm3、（5.99 ± 2.23）mm3、（0.77 ± 0.15）mm3和（0.15 ± 0.07）mm3,B组显著大于A、C和D组（P ＜ 0.05）。结论 PEI后RFA对于兔肝、肾功能影响小、并发症少,PEI?蛳 RFA治疗安全、有效;PEI?蛳 RFA组产生的消融体积明显大于RFA后PEI组、RFA组、PEI组的消融体积。
     

动脉灌注3-溴丙酮酸对兔移植性直肠肿瘤的作用

【摘要】 目的 观察动脉灌注3-溴丙酮酸（3-BrPA）对兔移植性直肠肿瘤的作用效果。方法 将60只移植有直肠肿瘤的新西兰大白兔随机分为低、中、高剂量治疗组及生理盐水对照组,每组各15只。对低、中、高剂量组实验兔分别经导管于肠系膜后动脉灌注0.5 mmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L浓度的3-BrPA各10 ml;对照组灌注等量生理盐水。4 d后活体解剖取出直肠肿瘤,镜下观察肿瘤细胞坏死程度并计算坏死率,评估各浓度3-BrPA对肿瘤的作用效果。结果 60只实验兔完成直肠肿瘤移植、动脉灌注实验,镜下实验兔肿瘤细胞均有不同程度损坏。低剂量组Ⅰ级坏死3只,Ⅱ级坏死11只,Ⅲ级坏死1只,治疗有效率为6.7％;中剂量组Ⅱ级坏死2只,Ⅲ级坏死10只,Ⅳ级坏死3只,治疗有效率为86.6％;高剂量组Ⅲ级坏死2只,Ⅳ级坏死13只,治疗有效率为100％;对照组Ⅰ级坏死15只。中、高剂量组Ⅲ、Ⅳ级肿瘤坏死率、治疗有效率、4级肿瘤坏死水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）,3-BrPA治疗作用明显,而正常肠组织无损伤。结论 动脉灌注3-BrPA治疗兔移植性直肠肿瘤有一定疗效,高浓度剂量组肿瘤坏死率和治疗有效率最高,疗效显著。     

介入导入三氧化二砷微球对 VX２ 兔肝肿瘤模型的治疗作用

目的观察介入导入三氧化二砷（As ２ O ３ ）微球对VX２兔肝肿瘤模型的治疗作用。方法新西兰大白兔３２只，体重２．３～２．８kg，制作VX２兔肝肿瘤模型并随机分成４组，每组８只，均经右侧股动脉插管至肝动脉，向肿瘤供血动脉给药:a组动脉灌注组:As ２ O ３ ３mg／kg＋生理盐水１０ml；b组As ２ O ３ 微球栓塞组:注入As ２ O ３ PLGA微球３mg／kg；c组空白微球栓塞组:注入PLGA微球３mg／kg；d组为对照组:经肝动脉注入生理盐水１０ml。兔肝肿瘤模型制作后１４d行肝螺旋CT双期动态扫描，根据螺旋CT扫描获得肝内肿瘤影像，测量肿瘤大小，次日行介入治疗，术后第２１天处死实验兔后，取出肝脏，测量瘤体大小；肿瘤组织４％甲醛固定，多点取材，HE染色，显微镜检。结果实验兔介入操作均获成功，且均存活。肿瘤平扫呈低密度，与周围正常肝实质分界欠清。增强后动脉期肿瘤强化明显，坏死组织无强化，呈不均匀高密度，肿瘤与周围肝实质分界清楚。门脉期肿瘤呈不均匀低密度，而周围正常肝实质强化明显，术后CT随访d组和a组肿瘤明显增大，中央呈低密度；c组肿瘤有轻度强化，b组肿瘤体积小，呈低密度，边界清楚，强化不明显。各组肿瘤体积术前无统计学差异，术后标本体积测量显示As ２ O ３ 微球栓塞组瘤体最小，a、b、c组与d组间有显著统计学差异（P＜０．０５）；b组与c组、a组间有显著统计学差异（P＜０．０５）。病理检查显示a组和d组肿瘤体积大，呈鱼肉样，质地脆，坏死区位于肿瘤中心区域，白色豆渣样，肿瘤血管丰富；显微镜下肿瘤细胞丰富，巢团状排列，纤维样组织少与正常肝组织分界不清，呈浸润性生长。b组肿瘤体积小，坏死明显，坏死区边缘纤维组织丰富，在纤维组织内可见残存瘤巢。在纤维组织外围见到肝细胞空泡变性，呈片状分布。结论As ２ O ３ PLGA微球对VX２兔肝肿瘤有良好的化疗栓塞效果，使用安全。     

兔VX2膀胱癌移植瘤模型实验研究

【摘要】 目的 通过模拟原位膀胱癌发生机制构建兔VX2膀胱癌移植瘤动物模型,研究其生物学特性及影像学表现。方法 采用同轴法穿刺接种VX2细胞株于25只新西兰大白兔膀胱,接种术后14、21、28 d分别作CT平扫及增强扫描,评估肿瘤种植及生长情况。取兔膀胱组织标本作大体解剖学及组织病理学检查,同时观察腹腔淋巴结及肝肺转移情况。结果 22只实验兔建模成功,植瘤成瘤率为88.0%（22/25）。植瘤后14、21、28 d瘤体平均长径分别为（1.38±0.20） mm、（2.30±0.08） mm、（3.22±0.24） mm,且瘤体变化差异有显著统计学意义（P＜0.01）。VX2移植瘤CT表现为膀胱壁局部不规则增厚或肿块突起,呈均匀强化（14 d）或环型强化（21、28 d）,肿瘤腔内呈不同程度充盈缺损。种植瘤大体形态及其影像学特征基本相符,组织病理学表现为血管丰富的低分化鳞状细胞癌,呈浸润性生长,21 d后瘤体中心出现坏死,21、28 d出现肝、肺及腹腔淋巴结转移。结论 本研究成功构建兔VX2膀胱移植瘤模型,基本反映了膀胱癌发生与发展过程,适合CT动态观察及实验研究。
     

兔肺VX2肿瘤微波消融多模态成像实验研究

【摘要】 目的 分析兔肺肿瘤微波消融（MWA）灶红外热成像- MR- CT- 病理表现及相关性。方法 对10只兔肺VX2孤立肿瘤行CT导引下MWA。观察术前、术后CT/MR及术中红外热成像表现。检测术后CT上瘤灶最大径、T1- Vibe高信号瘤灶最大径、病理上肺组织凝固坏死区最大径、CT上磨玻璃影最大径、TSE- T2WI- FS高信号最大径、红外热成像41℃等温区最大径、病理上热损伤区最大径,并进行对比分析。结果 MWA术后MR显示T1- Vibe序列上消融灶信号较术前增高,TSE- T2WI- FS上消融灶信号减低,外周可见斑片状高信号覆盖; T1- Vibe高信号瘤灶最大径与病理上肺组织凝固坏死区最大径比较,红外热成像41℃等温区最大径与病理上热损伤区最大径比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 多模态成像有助于评估肺肿瘤MWA疗效和监测消融范围。
     

经胆管 192Ir 内照射对胆管 、 肝脏放射损伤的实验研究

目的探讨经胆管 ¹⁹²Ir内照射的安全性、可行性以及有效治疗范围，为肝门部胆管癌经胆管 ¹⁹²Ir内照射提供理论依据。方法取雄性健康杂种犬１６只，据照射剂量随机分成４组，每组４只。内照射前从犬肝边缘切取１cm ３ 大小肝组织作对照研究。术中将近距离治疗施源器经胆囊送入胆囊管与肝总管汇合处并用金属夹固定，根据预先设定的剂量进行胆管内照射。１０d后处死动物，取被照射胆管中央部分长约５mm胆管，及距离胆管壁由近及远按设计距离分别取１mm ３ 大小肝组织，制备光镜切片，作HE染色；同时用２．５％戊二醛固定后常规制备电镜切片。光镜下观察胆管及周围肝组织的放射损伤并对损伤程度评分。电镜下观察肝组织超微结构损伤变化并计数凋亡肝细胞。结果经胆管¹⁹²Ir内照射３０Gy时，胆管损伤达部分肌层；５０Gy时，胆管仅存外膜；６０Gy时，胆管出现全层坏死。胆管周围肝组织放射损伤随剂量增加而加重。在胆管最大安全耐受剂量５０Gy时，距胆管０～１５mm处肝细胞核出现不可逆性改变。结论正常胆管对 ¹⁹²Ir内照射有良好的耐受性。在胆管最大安全耐受剂量５０Gy时，经胆管 ¹⁹²Ir内照射有效的治疗范围可达１５mm。     

射频消融联合骨水泥对兔VX2椎旁肿瘤的杀伤作用

【摘要】目的探讨射频消融（RFA）联合聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥对兔VX2腰椎旁肿瘤的杀伤作用。 方法CT导引下经皮穿刺成功构建兔VX2腰椎旁移植瘤模型48只,随机分为4组,每组12只。A组兔模型瘤灶中心先行RFA,后注入骨水泥0.5 ml;B组单纯注入骨水泥 0.5 ml;C组单纯RFA;D组注入生理盐水0.5 ml,作为对照组。术后24 h处死全部4组模型兔,分别在瘤灶中心或距骨水泥边缘5、10、15、20 mm处不同方向各取2 mm大小组织块4块,检测肿瘤细胞凋亡指数。 结果A、B、C组手术成功率均为91.7%(11/12),D组为100%(12/12)。A、C组瘤灶中心半径10 mm范围内肿瘤细胞呈大片状凝固性坏死,细胞形态消失,几乎检测不出凋亡存在。A组距骨水泥边缘10、15、20 mm处平均肿瘤细胞凋亡率分别为(69.48±1.27)%、(59.05±3.02)%、(21.03±2.20)%,与对照组(10.25±0.79)%相比差异均有统计学意义(P＜0.01);B组距骨水泥边缘5、10、15 mm处平均肿瘤细胞凋亡率分别为(62.52±2.07)%、(45.07±3.14)%、(17.41±1.12)%,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01),而20 mm处平均肿瘤细胞凋亡率为(11.15±0.97)%,与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.01);C组距瘤灶中心10、15、20 mm处平均肿瘤细胞凋亡率分别为(67.74±3.33)%、(56.36±3.63)%、(20.71±1.11)%,与B组、D组相比差异有统计学意义(P＜0.01),与A组相比差异无统计学意义(P＞0.01)。 结论RFA和骨水泥均可促进肿瘤细胞凋亡,RFA杀伤肿瘤范围更大,RFA联合骨水泥对肿瘤杀伤作用无明显增强。

     

肝脏肿瘤的经皮穿刺治疗:技术现状

介绍了脉冲燃烧新技术及在工业炉上的应用情况，分析了脉冲燃烧的优缺点，指出了该技术在国内应用上与国外的差距。     

高渗盐水、冰醋酸及其混合物对肝脏射频消融增效作用的实验研究

目的比较在体兔肝脏对高渗盐水、冰醋酸以及冰醋酸高渗盐水（AAHS）混合溶液对于增大射频消融（RFA）毁损区范围的效果，选择出最佳的消融增效剂。方法３０只大耳白兔分为６组，每组５只，A组单纯RFA；B组注射３６％NaCl＋RFA；C组注射５０％冰醋酸溶液＋RFA；D组注射５０％AAHS溶液＋RFA；E组单纯注射５０％冰醋酸溶液；F组单纯注射３６％氯化钠溶液。将兔分期处死后取出肝脏、固定，并对上述各种溶液对RFA的增效作用进行综合评价。结果同其他各组相比，A组最低阻抗值最大（P＜０．０５），B、D组同C组最低阻抗间的差异有统计学意义（P＜０．０５），而B组与D组最低阻抗间差异无统计学意义（P＝０．９９７）。A组持续时间明显小于B、D组（P＜０．０５）。而B组与D组持续时间之间的差异无统计学意义（P＞０．０５）。C组与B、D组在射频持续时间上差异有统计学意义（P＜０．０５）。B、C、D组较A组能产生更大的凝固坏死区（P＜０．０５）。其中，D组凝固坏死区最大切面面积最大，与其他各组相比差异有统计学意义（P＜０．０５）。而B组与A、C、E组比较其消融最大切面面积的差异也有统计学意义（P＜０．０５）。在观察组兔术后１周CT扫描可见消融灶周边明显强化；术后３周CT扫描可见消融灶明显减小。观察组兔中共有６只发生了与手术相关的并发症（６／１２；占５０％）:使用冰醋酸组的兔有４只（４／６）出现腹腔粘连和腹水，，而未使用冰醋酸组只有２例（２／６）。结论５０％AAHS溶液注射同RFA联合比单纯RFA能获得更大的凝固坏死区范围，其对肝脏RFA的增效作用大于单一溶液的作用。     

CT导引下 １２５ Ⅰ粒子植入治疗兔VX２肿瘤的实验研究

目的探讨CT导引下 １２５ I粒子组织间植入兔VX２肿瘤模型对细胞凋亡率的影响。方法在２０只兔两侧大腿肌肉内建立VX２肿瘤模型,３周后待肿瘤灶长至直径约２cm备用,每只兔随机选择一侧肿瘤灶作为治疗侧,另一侧作为对照侧,治疗侧在CT导引下经皮穿刺将活度为０．９mCi 的 １２５ Ⅰ粒子植入肿瘤组织内,对照侧肿瘤灶内植入无活性的空心粒子,于术后即刻、７２h、１、２、３周在CT导引下分别穿刺距粒子０．５～１cm、１．０～１．５cm处组织检测细胞凋亡率。结果 １２５ Ⅰ粒子植入后即刻、７２h、１、２、３周距粒子０．５～１．０cm处对照侧和治疗侧细胞凋亡率分别为（５．４３±０．６７）％和（５．４８±０．６６）％（P＞０．０５）,（５．４５±０．５８）％和（１１．６０±０．８７）％（P＜０．０５）,（６．０７±０．６９）％和（１８．８±０．６４）％（P＜０．０５）,（５．９４±０．４３）％和（３７．２０±０．３９）％（P＜０．０１）,（６．３０±０．５８）％和（３６．５６±０．６７）％（P＜０．０１）。距 １２５ Ⅰ粒子１．０～１．５cm处各个时间点对照侧与实验侧细胞凋亡率差别均无统计学意义（P＞０．０５）。结论 １２５ Ⅰ粒子组织间植入可诱导肿瘤细胞凋亡,植入后７２h细胞凋亡率开始增加,术后２周达高峰并维持在高水平,且随距 １２５ Ⅰ粒子的距离增加,细胞凋亡率迅速下降。     

兔 VX２ 肝种植肿瘤模型制作的完善及综合影像学评价

目的进一步完善兔VX２肝种植肿瘤模型的制作，比较种植肿瘤的CT、MRI及DSA影像表现，评价各影像检查对瘤体显示的优越性。方法实验动物为新西兰大白兔（前期实验１２只，后期实验２４只），采用动物后肢皮下注射接种传代保存瘤种。模型前期制作采用包埋法接种，后期采用针头注入法接种于兔肝左叶，并于术前１d及术后１、３d、１、２周检查肝肾功能的动态变化情况。接种２周后行CT、MR成像，随后行经股动脉肝动脉超选择DSA及纳米磁性粒子介入治疗。结果前期实验肿瘤种植成功率６６．７％，后期实验种植成功率１００％。术后ALT、AST有一过性增高，无统计学意义；BUN、Cr无明显变化。术后CT平扫肿瘤为略低密度病灶，强化不明显，境界清晰；MR平扫呈长T１、长T２信号；EPI序列T２WI呈略高信号影；DWI成像见高亮信号影，显示清晰；介入术中DSA造影可见肝左叶孤立的丰富血管肿瘤，供血动脉增粗，经超选择注入纳米磁性粒子，肿瘤内密度明显增高。结论兔VX２肝种植肿瘤模型是介入治疗实验研究理想的动物模型。VX２瘤粒针头注入法较包埋法成功率更高，其建立过程对兔肝肾功能无明显影响。CT平扫增强，MR平扫，EPI序列及DWI成像对于肿瘤的影像评价互有优势，EPI及DWI成像可更灵敏地显示肿瘤，DSA可清晰地显示肿瘤的供血及肝内有无转移。     

CT引导下双针共轴穿刺法建立兔肺孤立VX2移植瘤模型的实验研究

【摘要】 目的 尝试用双针共轴穿刺法进一步提高兔肺孤立VX2移植瘤成瘤率。方法 将30只新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,每组15只。实验组采用CT引导下双针共轴穿刺VX2瘤块植入法建立兔肺孤立移植瘤模型,对照组采用单针瘤块植入法,以大体标本及病理结果作为金标准。结果 实验组兔肺内孤立VX2肿瘤成瘤率为80％,胸膜种植率为20％,平均生存时间为（67.0 ± 7.0）d,对照组兔肺孤立肿瘤结节成瘤率为40％,胸膜种植率为53.3％,平均生存时间（53.3 ± 10.6）d,组间差异有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论 CT引导下双针共轴穿刺VX2瘤块植入法建立兔肺孤立移植瘤模型,较单针穿刺法明显降低了胸膜种植转移瘤,提高了肺孤立VX2肿瘤成瘤率,且实验兔生存期更长,更适于制作肺癌影像学研究的动物模型。
     

重组人血管内皮抑制素注射液联合冷冻消融治疗肺腺癌A549移植瘤的实验研究

【摘要】 目的 探讨重组人血管内皮抑素注射液（商品名:恩度）联合冷冻消融对肺腺癌A549移植瘤的抑制作用及机制。方法 建立肺腺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型24只,待肿瘤最大直径达1 cm时,随机分为对照组、血管内皮抑素组、冷冻消融组和血管内皮抑素联合冷冻消融组（联合治疗组）。治疗后第21天处死裸鼠,取肿瘤组织,测量肿瘤体积,采用末端标记法（TUNEL）原位检测周边冷冻损伤区带细胞凋亡,免疫组化SP法检测肿瘤组织微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）表达水平。结果 治疗后第21天,对照组、血管内皮抑素组、冷冻消融组和联合治疗组的肿瘤生长速率分别为236.68% ± 51.23%、220.02% ± 30.61%、159.46% ± 29.33%和103.34% ± 25.50%,组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）;肿瘤细胞凋亡率分别为21.67% ± 2.34%、22.17% ± 1.47%、38.33% ± 1.37%和49.17% ± 1.72%,组间差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。联合治疗组的MVD、VEGF表达水平均明显低于其他各组（P ＜ 0.01）。MVD与VEGF之间呈正相关关系（r = 0.925,P < 0.01）。结论 血管内皮抑素可明显提高冷冻消融对肺腺癌A549移植瘤的抑制效果,其机制可能与血管内皮抑素通过下调VEGF 表达水平,从而抑制肿瘤新生血管形成,协同冷冻消融促进肿瘤细胞凋亡有关。     

血管内皮细胞凋亡在兔脑血管痉挛模型的初步研究

【摘要】 目的 采用兔脑血管痉挛模型研究脑血管内皮细胞（vascular endothelial cell,VEC）凋亡的表达及时间窗,初步探讨VEC凋亡在脑血管痉挛中的作用。方法 35只健康清洁级新西兰大白兔经血管内穿刺产生蛛网膜下腔出血（SAH）,制作脑血管痉挛模型,按处死时间将实验动物分为12 h、1、2、3、7 d共5组,每组7只。每组又分为SAH亚组5只及对照亚组2只（即导丝仅进入但未刺破颈内动脉）。动物处死后,选取后交通动脉及基底动脉上段血管制成石蜡切片,采用三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法（TUNEL法）观察VEC凋亡情况并计数。每组取动物2只,对照动物2只,共12只右颈内动脉行电镜检查,了解血管内皮病理改变及VEC凋亡情况。结果 TUNEL法显示,TUNEL阳性细胞出现在SAH 1 d后,在2 ～ 7 d高表达,3 d组TUNEL阳性细胞数量最多（凋亡率为39%）。电镜显示,SAH亚组VEC出现空泡化、胞质浓缩及弹力膜扭曲等改变,1 d组出现VEC核固缩改变,2、3 d组VEC核固缩现象出现概率较高,7 d组VEC未见核固缩改变。结论 研究证实VEC凋亡峰值略早于迟发性痉挛高峰期,表明内皮细胞凋亡在脑血管痉挛中起重要作用。     

人血栓调节蛋白基因转染兔内皮祖细胞的体外实验研究

【摘要】 目的 探讨人血栓调节蛋白（hTM）基因转染兔内皮祖细胞（EPCs）的可行性及效率,为hTM修饰的EPCs活体移植预防经皮腔内血管成形术术后血管内再狭窄提供实验依据。方法 采用基因工程方法构建重组质粒pcDNA3.1?蛳 hTM。梯度离心法分离兔外周血单个核细胞（MNCs）,贴壁筛选出EPCs,通过免疫组化检测其CD34、vWF、KDR 等内皮系抗原,通过Dil?蛳 ac?蛳 LDL及FITC?蛳 UEA?蛳 1荧光染料双吞实验进一步表征EPCs pcDNA3.1?蛳 hTM转染EPCs,转染48 h后行细胞免疫荧光染色,72 h后行Western印迹检测比较重组质粒转染组、空载质粒转染组和对照组hTM表达水平。转染后分别于第3、4、5天采用四氮噻唑蓝法（MTT）比较各组细胞增殖活性。结果 双酶切及基因测序鉴定均证实pcDNA3.1?蛳 hTM重组质粒构建成功;细胞表面抗原及免疫荧光双标实验表明所培养细胞为EPCs。转染后的直接免疫荧光实验及Western印迹检测证实hTM在重组质粒转染组的表达高于对照组;MTT比色实验示重组质粒转染组、空载质粒组、空白对照组在第3、4、5天吸光度值差异无统计学意义（P > 0.05）。结论 成功构建pcDNA3.1?蛳 hTM重组质粒,转染兔外周血EPCs后可使EPCs成功表达TM,且对EPCs的活力、增殖等生物学性质无明显影响。