菠萝蛋白酶应用的性质研究

本文研究了pH、温度、金属离子、EDTA、还原剂对菠萝蛋白酶单宁复合物酶促反应速度的影响 ,结果表明 ,该酶的最适pH为 7.1,最稳定的pH范围为 3.9～ 4 .2 ,最适反应温度为 5 5℃ ,一般的金属盐NaCl、kCl对酶反应影响不大 ,MgCl2 、CaCl2 在高浓度下对酶有一定程度的抑制作用 ,在低浓度下影响不显著 ,半胱氨酸在一定浓度的范围内 ,对酶反应速度有促进作用。EDTA本身对菠萝蛋白酶没有激活作用 ,它能鳌合酶反应所需的金属离子 ,使酶活降低。     

枯草芽孢杆菌B.SUBT12酶学性质研究

考察分离得到的一株产中性蛋白酶枯草芽孢杆菌B.SUBT12最适作用温度、pH值以及温度、pH值、金属离子和表面活性剂对酶稳定性的影响。试验研究表明:该酶最适作用温度为55℃,最适作用pH为7.5,酶在55℃反应45min仍有50%的酶活力,热稳定性较好。金属Ca2+和表面活性剂Tween-80对酶有一定的激活作用,但激活作用不显著。     

菠萝蛋白酶水解大豆分离蛋白工艺优化研究

以水解度为指标，研究了温度、pH、底物浓度、酶浓度等因素对菠萝蛋白酶水解大豆分离蛋白的影响。影响菠萝蛋白酶水解大豆蛋白的影响因素顺次为酶浓度、温度、底物浓度、pH。最佳参数组合是酶浓度为6％、温度为65℃、底物浓度为5％、pH为8．0。在此条件下，菠萝蛋白酶水解大豆分离蛋白的水解度在半小时内可以达到8．18％。     

纺织用酸性蛋白酶的性质及其在羊毛处理中的应用

以蛋白酶水解羊毛的能力来衡量自制酸性蛋白酶的活力，对自制酸性蛋白酶的性质及其在羊毛细化处理中的应用进行研究。发现所用酸性蛋白酶最适作用温度为40℃，最适作用pH值为3．0；一些金属离子在一定条件下可提高蛋白酶的活力，促进蛋白酶对羊毛纤维的减量细化．除温度、pH值外，酶用量、浴比、表面活性剂JFC的用量对蛋白酶水解羊毛的效果也有一定的影响。用所制得的酸性蛋白酶处理64支内蒙古羊毛的最佳条件为温度40℃，pH值3．0，酶用量4％，浴比1：25．JFC0．9％。     

青霉P-1007酸性蛋白酶酶学性质及其固体发酵条件的初步研究

青霉P-1007产胞外酸性蛋白酶，其酶活可达1500u／g。该酶的最适温度为50℃，最适pH值为5．5；酶的pH稳定性和耐温性较好，在pH5．5，：50℃条件下保温8h，其相对酶活仍在83％以上；在pH值为5．5，60℃条件下水浴2h后，相对酶活为60％。不同金属盐对该酶酶活及不同氮源、碳源、温度、pH、含水量以及发酵时间对菌株产酶的影响试验结果表明：MnCl2，CuSO4均对该酶有激活作用，其他金属盐类对该酶有不同程度的抑制作用；添加黄豆粉（1％）和葡萄糖（1％）可使菌株产酶酶活分别提高71％和31％；培养温度为40℃以及培养基起始pH为7．0时产酶最高；含水量和发酵时间对产酶也有不同程度的影响。     

鱿鱼肝脏自水解过程中内源蛋白酶的作用研究

对鱿鱼肝脏蛋白酶的酶学性质及其在鱿鱼肝脏自水解过程中的作用进行研究。结果表明：以偶氮酪蛋白为底物,TCA可溶性肽为评价指标,测得鱿鱼肝脏蛋白酶粗酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为5.0;该粗酶在pH3.0～8.0较为稳定。在鱿鱼肝脏自水解过程中,内源性半胱氨酸蛋白酶发挥主要作用。此外,丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶也有一定作用。     

茶多酚对菠萝蛋白酶的回收及其特性的影响

研究了茶多酚对菠萝蛋白酶特性的影响。采用不同茶多酚浓度、温度、pH、保温时间及冷存时间对菠萝蛋白酶进行络合、沉淀及回收,并研究其对络合效果的影响。结果表明,茶多酚对菠萝蛋白酶无抑制作用,两者具有起混活性;最佳络合条件为:茶多酚浓度0.8%,温浴温度30℃,pH5,温浴时间0.5h,冷存时间0.5h,此时获得最大的菠萝蛋白酶活性回收率(约82.1%);菠萝蛋白酶与TP络合后,最适反应温度及最适pH无明显改变但范围变窄,均为55℃与pH7左右;Lineweaver-Burk图表明,络合后的菠萝蛋白酶Km值由0.06%变为0.14%。     

海参体壁粗蛋白酶的提取及酶学性质研究

研究了海参体壁粗蛋白酶的提取方法和酶学性质，最佳提取条件为紫外线下照射30min，硫酸铵饱和度梯度为40％～60％。粗蛋白酶的最适pH值为5．0，最适反应温度为50℃，酶在50℃以下稳定性良好。在pH1．0-7．0范围内，Ca^2＋对酶有激活作用，Mn^2＋、Cu^2＋对酶有抑制作用。提取的海参体壁蛋白酶是一种含有巯基的，类似胰蛋白酶的酶类。     

罗非鱼鱼皮胶原蛋白降血压酶解液的制备与活性研究

本文研究了单酶和复合酶水解罗非鱼鱼皮胶原蛋白制备抑制帆管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）的工厂艺条件。通过正交试验确定了菠萝蛋白酶和Alcalase 2．4L蛋白酶单独水解鱼皮胶原蛋白的最适酶解条件。菠萝蛋白酶和Alcalase 2．4L蛋白酶的最适酶解温度，pH，酶，底物，时间，底物浓度分别为45℃，pH4．5，4000U／g，4h，6％和55℃，pH7．5，6000μ／g，2h，4％。在甲．酶水解的基础上，进行复合酶水解实验，结果表明：先采用菠萝蛋白酶水解，再用Alcalase2．4L蛋白酶水解，效果更佳。采用该双酶复合水解工艺，所得水解产物的水解度为30．43％，体外对ACE的抑制率达68．6％。采用Sephadex G-25，HPLC的分离方法对酶解液进行分离纯化，得到了高抑制活力的组分。所得水解原液，Sephadex G-25过柱所得高活力组分的IC50分别为2．82mg／ml利0．65mg／ml。     

苹果中正己醇转化酶的提取及其特性研究

采用丙酮粉法提取苹果中的正己醇转化酶,研究其在粉剂和溶液状态下的低温贮藏稳定性以及温度和pH对粗酶液正己醇转化能力和稳定性的影响,绘制最适作用条件下粗酶液的反应曲线,考察正己醇初始浓度对反应速度的影响。试验结果表明,正己醇转化酶粉剂在贮存过程中能够很好地保持酶的活性;当正己醇质量浓度为1.3g/L时,酶的最适反应温度和稳定温度均为37℃,最适反应pH4.6,最适稳定pH5.4,最适反应时间2h;正己醇的最适底物质量浓度为0.7g正己醇/L;Fe2+、K+和Zn2+对酶的催化活性有促进作用,在较适浓度(分别为0.1、0.05、0.5mol/L)条件下,酶对正己醇的转化率分别提高1.48、1.10、1.08倍。     

菌源性弹性蛋白酶特性的研究

试验通过硫酸铵对发酵液的分段盐析得到粗酶，并对粗酶的基本性质进行了一定的研究。结果表明：酶反应的最适温度为50℃，最适pH为7．4；酶在37℃以下热稳定性良好；重金属对酶活性有不同程度的抑制作用；弹性蛋白对弹性蛋白酶具有较强的亲和吸附作用，弹性蛋白酶有优先水解弹性蛋白的能力。     

中国对虾蛋白酶性质的研究

采用酶学分析方法研究了中国对虾蛋白酶的性质。结果表明,该酶最适温度为60℃,最适pH为9.0,是一种碱性蛋白酶。此酶在50℃以下及pH 7.0~10.0稳定性较好。以酪蛋白为底物,蛋白酶的最适底物浓度为2%。60℃时,该酶的半衰期为22 min,70℃时则为7 min。低浓度的EDTA对酶活有抑制作用,Mn2+、Ca2+、Mg2+对蛋白酶有一定的激活作用,而Cu2+、Zn2+、Fe2+、Pb2+对酶活有不同程度的抑制作用,可推断该酶是一种金属蛋白酶。     

动态高压微射流对茎菠萝蛋白酶性质和构象的影响

以茎菠萝蛋白酶为原料,研究动态高压微射流(DHPM)对其活性、稳定性和构象的影响。结果显示：DHPM 对茎菠萝蛋白酶具有钝化作用,但活力并不随着压力的升高而降低。压力为60、80、100、120MPa 时,茎菠萝蛋白酶的相对酶活力分别是94%、93%、98% 及92%。DHPM 不同压力对茎菠萝蛋白酶的最适反应温度的影响不同,但对最适pH 值几乎没有影响。然而经DHPM 60、120MPa 处理后,茎菠萝蛋白酶在pH8.0 的稳定性显著增强。在pH8.0 保温40min 后,60、120MPa 处理的茎菠萝蛋白酶相对酶活力分别为85% 和82%,分别比未经处理的高14% 和11%。可见,DHPM 60、120MPa 处理极大地提高了茎菠萝蛋白酶在pH8.0 时的稳定性。此外,紫外光谱和荧光光谱的结果表明：DHPM 导致茎菠萝蛋白酶部分去折叠,分子中赖氨酸和色氨酸残基所处的微环境发生了变化;红外光谱结果显示：DHPM 处理后茎菠萝蛋白酶二级或三级结构发生了变化。     

中性蛋白酶芽孢杆菌BX-4产酶条件及部分酶学性质

采用稀释平板分离法从土壤中分离到一株产中性蛋白酶芽孢杆菌BX-4．通过单因素碳、氮源以及正交试验确定了最佳产酶培养基配方，同时还研究了起始pH值、金属离子、接种量对产酶的影响以及温度、pH值、金属离子以及表面活性剂对酶稳定性的影响；以最佳培养基为发酵培养基，于37℃、160r／min振荡培养48h，酶活达2519．35U／mL；该酶最适作用温度为55℃，最适作用PH值为7．5，在pH7．5缓冲体系中，55℃反应60min后仍有50％的酶活力，Ca^2＋和表面活性剂对酶有一定的激活作用，但激活作用不明显。     

菠萝蛋白酶工业化提取工艺的改良及酶学性质研究

以菠萝茎为原料,利用微滤除杂、超滤浓缩分离得菠萝蛋白酶浓缩液,再通过硫酸铵法进行沉淀,最后进行真空冷冻干燥制取菠萝蛋白粗酶：而为了验证其酶学性质,采用SephadexG-100柱层析和DEAE-52离子交换层析制得纯度较高的菠萝蛋白酶。结果表明：菠萝茎打浆后原液通过微滤除杂、超滤浓缩,再采用90％硫酸铵沉淀等工序后,纯化倍数达1．44,是目前工厂制酶的1．19倍．酶活收率与原液相比只降低9％,具有工业化生产的优越性;经SephadexG-100柱层祈和DEAE-52柱层析后．达到电泳纯,可满足医药用酶所需,存在很好的市场应用价值;且该菠萝蛋白酶的酶学性质与有关报道基本一致,最适反应pH在5～6之间,最适温度60℃,重金属离子如Cu^2＋、Fe^2＋、Pb^2＋等对菠萝茎蛋白酶活抑制较大,而Na^＋、K^＋、Ca^2＋则表现出不同程度的激活作用。     

两种脱毛蛋白酶活力的研究

本文对两种常用的脱毛蛋白酶（2709碱性蛋白酶与A．S1398蛋白酶）在不同pH值、温度等条件下的活力变化情况进行了研究。结果表明：2709蛋白酶的活力最适pH值为9．5～10，A．S1398蛋白酶为7．5～8．0且2709酶的pH值适应范围更广，对pH值的敏感度更低；两种酶活力的温度变化曲线具有相似性，温度越高，它们的活力衰减得也越快；两种蛋白酶受Mn抖强激活，Cu^2＋、Cr^3＋、Fe^2＋、Zn^2＋等离子则对其有抑制作用；表面活性剂如洗衣粉、平平加和JFC等对两种酶具有一定的激活作用。     

由淀粉生物合成海藻糖途径的初步验证和环境条件影响的研究

由温泉分离得一株茵WX-10．初步验证含有直接催比淀粉生成海藻糖的酶系。酶的作用受多种条件影响。包括反应时间、温度、pH等。最适反应条件为pH65～7.0，温度35C。反应液中有较高浓度缓冲液存在时，反应速度增快。DE为20浓度为10％的淀粉液化液是酶合适的底物。     

生物技术产物(HFS)对酸性蛋白酶酶活的影响

探讨生物技术产物HFS对537酸性蛋白酶活力的影响,测定了该酶的最适反应条件(最适温度为55℃,最适pH3),较系统考察了HFS对537酸性蛋白酶温度作用曲线和pH作用曲线的影响。试验结果表明,生物技术产物HFS对537酸性蛋白酶具有较好的激活作用,且不改变酶的最适反应条件。     

鲶鱼鱼鳃中血管紧张素转换酶类似酶的性质研究

以鲶鱼的鱼鳃为原料,用硫酸铵盐析法提取一种血管紧张素转换类似酶,采用反相高效液相色谱法对温度、pH、金属离子、抑制剂和米氏常数等酶学性质进行了研究。结果显示:温度对蛋白酶活性的影响非常明显,最适反应温度是40℃,在20~40℃之间稳定性较好;最适pH为9、pH8~11之间有较好的稳定性。Na+对蛋白酶有一定促进作用,Cu2+和K+对蛋白酶有强烈抑制作用。卡托普利对蛋白酶活性有强烈抑制作用。以马尿酸-组氨酰-亮氨酸为底物,在pH9,40℃时测得Km值为0.18 mmol/L,Vmax是1.57 mmol/min。     

酿造酱油米曲霉产中性蛋白酶提取与酶学性质研究

对米曲霉菌种F-81所产中性蛋白酶的提取及部分性质进行了研究.结果表明硫酸铵分级沉淀的饱和浓度范围为40%～80%;该中性蛋白酶的最适作用温度为 60 ℃,最适pH 值为 7.0.40 ℃下酶稳定性较好,60℃下处理 20 min,粗酶中几乎检测不到酶活力;中性蛋白酶pH 稳定范围为 6.0～8.0.Km值为2.84 mg/mL;最大反应速度Vmax为0.32 mg/(min·mL).Mg2 对酶活有激活作用,Cu2 、Fe3 、Zn2 、Mn2 不同程度抑制酶活性,其中Cu2 、Fe3 强烈抑制酶活性.